UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE QUERÉTARO
FACULTAD DE MEDICINA
Licenciatura en Medicina general
Segundo semestre
Práctica 5: “Agentes Químicos sobre el crecimiento microbiano”
Laboratorio de Microbiología y virología
Equipo 3 / Viernes
Dra. Angélica Godínez Oviedo
Gallegos Mejía Carlos Alonso
Guevara Guerrero Isaura
Rodríguez Ríos Félix Roberto
I. INTRODUCCIÓN:
La esterilización es la destrucción total de todos los microorganismos, incluyendo
las formas más resistentes, como las esporas bacterianas, las microbacterias, los
virus sin envoltura (no lipídicos) y los hongos. Esto se puede conseguir utilizando
esterilizantes físicos, vapor de gas o esterilizantes químicos.
Habitualmente los métodos de esterilización más usados son:
1. Calor seco: el material a esterilizar debe sufrir una temperatura de 180º C.
durante 30 min., con lo que sale «quemado». A este tiempo de «exposición
al calor», hay que sumar el tiempo que tarda en llegar a 180º C. y el tiempo
que tarda en enfriarse para poder manipularlo.
2. Calor húmedo (Vapor de agua): el agente esterilizante es el vapor de agua.
La esterilización se producirá teniendo en cuenta tres parámetros,
temperatura, presión y tiempo. Es el método de elección por excelencia para
la esterilización hospitalaria debido a la gran cantidad de ventajas que
presenta.
3. Métodos físico-químicos: El agente esterilizante es un gas. Se utilizan para
aquellos materiales termosensibles, ya que el proceso de esterilización se
realiza a baja temperatura (unos 50º C.)
Los más utilizados son:
- El óxido de etileno: es un gas que tiene la propiedad de destruir los
gérmenes. Se va utilizando menos, ya que es explosivo, muy tóxico
para el hombre y cancerígeno. Se puede utilizar a 37º C y a 50º C.,
lógicamente, variando los tiempos de exposición. Es imprescindible,
airear el material después de la esterilización con dicho gas, a fin de
eliminar los restos de óxido de etileno. Actualmente se suele utilizar en
cámaras con proceso de presión negativa. Los ciclos son muy largos
(unas 10-12 horas) debido al proceso de aireación.
- El formaldehído: es un gas que también se utiliza a baja temperatura.
También es tóxico y cancerígeno. También precisa aireación después
de la esterilización y se utiliza en cámaras con presión negativa. Los
ciclos también son muy largos (unas 3-5 horas).
- Gas plasma (peróxido de hidrógeno): es el sistema de baja
temperatura que utilizamos en MUTUA BALEAR.
- El agente esterilizante es el peróxido de hidrógeno en forma de plasma
(agua oxigenada, H2O2). Es irritante, pero de baja toxicidad y no es
cancerígeno. La cámara, además, funciona con presión negativa
(entre 0,133322 y 0,933254 mbar.), a una temperatura de unos 50ºC.
El tiempo de esterilización es de una hora aproximadamente. Al utilizar
hidrógeno y oxígeno, no necesita aireación. Es un sistema muy
cómodo y práctico. (Lab, 2019)
4. Radiaciones: es un agente esterilizante muy importante, se reserva para la
esterilización industrial, sobre todo del material de un solo uso. Ideal para
esterilizar material termolábil, ya que no precisa temperatura especial
(plásticos, líquidos, grasas, medicamentos, maderas, etc.). Simplemente, la
esterilización se produce por exposición a la radiación a unas dosis
predeterminadas, durante un tiempo determinado. Se utiliza habitualmente la
radiación gamma (Cobalto 60), a unas dosis determinadas, en un tiempo
determinado. Tiene la gran ventaja de que no deja residuos. Es fácil de
controlar. Tiene un alto poder de penetración. El principal inconveniente es la
complejidad de las instalaciones, lo cual supone un gran gasto. Por esto se
reserva a la esterilización industrial.
Los microorganismos se destruyen mediante procedimientos de desinfección,
aunque pueden sobrevivir los microorganismos más resistentes, formas de esporas
pueden sobrevivir a la desinfección de nivel intermedio, y muchos microorganismos
pueden seguir siendo viables cuando se los expone a una desinfección de bajo
nivel.
Hay 3 niveles de desinfección:
- Bajo.
- Medio.
- Alto.
Agentes de limpieza y desinfección:
- Clorógeno.
- Alcoholes.
- Yodóforos.
- Detergentes catiónicos.
- Peróxido de hidrógeno.
- Fenoles.
- Biguanidas.
- Derivados metálicos.
- Colorantes.
En esta práctica hicimos uso del lavado de manos y los siguientes desinfectantes,
donde también se explicará su mecanismo de acción.
Agua oxigenada: Esta sustancia actúa liberando lentamente el oxígeno de la herida,
matando bacterias y otros microorganismos que se presenten en la zona. Su acción
es rápida, y si es utilizada correctamente, no es corrosiva ni tóxica. (Costa, 2022)
Alcohol al 70%; actúa destruyendo la membrana celular, por reducción de su
tensión superficial, y desnaturalizando las proteínas 4. Su acción es rápida, incluso
desde los 15 segundos, principalmente en concentraciones de 70% que permite su
mejor penetración en el protoplasma bacteriano. Sus efectos biológicos de daño
microbiano son mayormente breves, pero pueden permanecer por varias horas.
(Alcohol Neutro 70%, s/f).
Cloro al 6%: A pH 5 todo el cloro está en forma de Acido Hipocloroso, pero a
medida que el pH aumenta éste ácido se disocia en: ClO- + H+.
A pH> 7,5 y a una temperatura de 20ºC (o pH>7,8 a 0ªC de temperatura) empiezan
a predominar los iones hipoclorito y éstos existen casi exclusivamente a partir de pH
9,5.
II. OBJETIVO:
Comprender la diferencia entre esterilización y desinfección y adquirir el
criterio para probar la sensibilidad bacteriana a diferentes agentes químicos.
III. MATERIALES Y MÉTODO:
Materiales:
- Mechero de Bunsen.
- Asa de siembra.
- Gradilla.
- Hisopos estériles.
- Pinza.
Equipos:
- Incubadora.
Cultivos:
- Placa de Salmonela entérica
- Placa de Escherichia coli
Reactivos y medio de cultivo:
- Alcohol etílico al 70%
- Hipoclorito al 10%
- Otros agentes desinfectantes.
- Agua estéril.
- Agar nutritivo.
Diagrama de flujo.
Tabla 1.
Resultados
Imagen Resultado
En esta foto observamos un agar
nutritivo, dividido en 4 segmentos, el
espacio 1 se colocó el dedo con tierra,
en el espacio 2 se colocó el dedo con
tierra enjuagado con agua, en el 3 el
dedo después del lavado de manos y el
4 después del lavado de manos y
desinfectar con alcohol.
Se esperaba que solo la zona 1 y 2
estuviera colonizado, la 3 y
especialmente la 4 no deberían de
haber tenido crecimiento bacteriano, el
hecho de que se observe mínimo
crecimiento bacteriano es debido a una
inadecuada desinfección, ya que no se
debería observar nada, aún así se
lograron disminuir las dimensiones de
las colonias 3 y 4.
En esta foto observamos un agar con
Salmonella entérica, las muestras en el
centro son discos de papel impregnados
con distintos desinfectantes, en el
espacio superomedial (c) es jugo de
cítricos, el cual debido al alo casi
inexistente no sirve como desinfectante,
el espacio superolateral (AO) es agua
oxigenada el cual demostró ser el más
efectivo debido a que contiene el alo
mas grande, en el espacio inferomedial
(AL) es alcohol el cual demostró ser
inefectivo debido al escaso alo, el
espacio inferolateral (E) es cloro ,
demostró ser medianamente efectivo
debido a que contiene un alo menor que
el superolateral pero mayor al resto
Tabla 2. Resultados del cultivo en agar nutritivo y los alos en
Discusiones
En esta foto observamos un agar nutritivo, este es un medio de cultivo usado
normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es muy útil porque permanece
sólido incluso a relativamente altas temperaturas. Además, el crecimiento bacteriano
en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias
pequeñas.
En un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el líquido, y aparece como una
sustancia espesa, con colonias difícilmente observables.
El agar nutritivo contiene normalmente (p/v):
● 0,5% de peptona.
● 0,3% de extracto de carne/extracto de levadura.
● 1,5% de agar.
● 0,5% de cloruro de sodio.
● agua destilada.
● pH casi neutro (6,8) a 25 °C.
Este lo dividimos en 4 segmentos, el espacio 1 se colocó el dedo con tierra, en el
espacio 2 se colocó el dedo con tierra enjuagado con agua, el agua es una
sustancia cuya molécula está compuesta por dos átomos de hidrógeno y uno de
oxígeno (H2O) unidos por un enlace covalente, en el 3 el dedo después del lavado
de manos y el 4 después del lavado de manos y desinfectar con alcohol.
Se esperaba que solo la zona 1 y 2 estuviera colonizado, en teoría la 3 y
especialmente la 4 no deberían de haber tenido crecimiento bacteriano, el hecho de
que se observe mínimo crecimiento bacteriano es debido a una inadecuada
desinfección, ya que no se debería observar nada, aún así se lograron disminuir las
dimensiones de las colonias 3 y 4.
Conclusiones
En conclusión, los resultados obtenidos en este proyecto de laboratorio indican que
el uso de diferentes agentes químicos para el lavado de manos tiene un impacto en
el crecimiento microbiano. En particular, se encontró que el uso de cloro y agua
oxigenada resultó en una reducción significativa en la cantidad de microorganismos
presentes en las manos.
Por otro lado, el uso de alcohol y solución de ácido cítrico no mostró una reducción
significativa en la cantidad de microorganismos presentes en las manos. Es
importante destacar que estos resultados pueden variar según las condiciones
específicas de la muestra, el tiempo de exposición y otros factores ambientales.
En general, se recomienda el uso de soluciones de cloro y agua oxigenada para el
lavado de manos en entornos donde la higiene es crítica, como en entornos
médicos o de manipulación de alimentos. Sin embargo, se debe tener en cuenta que
el uso excesivo de estos productos puede tener efectos negativos en la salud y el
medio ambiente, por lo que se debe seguir las instrucciones del fabricante y
utilizarlos de manera responsable.
Referencias:
MICROB: Esterilización. (s/f). [Link]. Recuperado el 1 de abril de 2023, de
[Link]
html
Lab, G. (2019, septiembre 12). Tipos de Esterilización. GSOE LAB; GSOE LAB
S.A.C. [Link]
Ocronos, R. (2023). Niveles de desinfección y tipos de desinfectantes de uso más
común. Ocronos - Editorial Científico-Técnica. [Link]
desinfeccion-tipos-desinfectantes/
Costa, F. (2022, noviembre 25). Para qué sirve el agua oxigenada (peróxido de
hidrógeno). Tua Saúde. [Link]
Alcohol Neutro 70%. (s/f). Medwel. Recuperado el 1 de abril de 2023, de
[Link]
(S/f). [Link]. Recuperado el 1 de abril de 2023, de
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