ESCUELA NACIONAL PREPARATORIA
COLEGIO DE BIOLOGÍA
BIOLOGÍA V
PRÁCTICA NÚMERO: ____________
FOTOSÍNTESIS
FECHA: _____________ GRUPO: ___________. CALIFICACIÓN: ____________
NOMBRE DE LOS INTEGRANTES
(ORDEN ALFABÉTICO Y APELLIDO PATERNO)
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OBJETIVO:
Extraer, separar e identificar los diferentes tipos de pigmentos clorofílicos y accesorios
obtenidos a partir de una cromatografía en papel, para comprobar la presencia de estas
sustancias en las plantas.
Observar la fluorescencia a partir de un extracto vegetal para comprobar una de las
propiedades más notables de este pigmento fotosintético.
INTRODUCCIÓN
Investigación por parte de alumno con las siguientes preguntas guías, de forma clara y
concreta:
1.- Investigar qué son los pigmentos fotosintetizadores: clorofílicos y accesorios.
2.- Análisis de la captación de energía luminosa y su transformación a energía química.
3.- Importancia de la cadena transportadora de electrones en la transformación de energía.
4.-Transporte de electrones desde el agua hasta el NADP.
5.- Importancia del NADPH2 y del ATP en la formación de compuestos orgánicos.
MATERIAL
Material Reactivo y sustancias
5 Tubos de ensayo 10 ml de alcohol de 96°
1 Vaso de precipitado de 250 ml (pp) 5 ml de solvente: acetona o
4 Tapones de corcho o plástico para los bencina o gasolina.
tubos de ensayo 2 ml de solvente para la fase
1 Gradilla móvil: acetona o gasolina o
1 Mortero con pistilo alcohol (se recomienda una
1 Embudo chico disolución de acetona:éter de
2 Pipetas de 5 ml petróleo, 1:9 en volumen).
1 pipeta de 10 ml
2 Pipetas Pasteur finas
4 Tiras de papel filtro de tamaño
apropiado a los tubos de ensayo.
1 Papel filtro en disco de 20 cm de
diámetro
1 Lámpara eléctrica o de UV
5 hojas muy verdes de espinaca
MÉTODO O DESARROLLO
PRIMERA PARTE: EXTRACCIÓN DE PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS
1. Verter en un tubo de ensayo 1 ml de solvente, para pigmentos y taparlo con un tapón
de corcho.
2. Machacar en un mortero 1 o 2 hojas de espinaca en 5 ml de acetona. Macerar
totalmente hasta que el solvente tenga un color verde.
3. Colocar un disco de papel filtro en un embudo y verter en el contenido del mortero
recogiendo el filtrado en el vaso de pp (este paso puede omitirse, si se toma de manera
directa el contenido del mortero con una pipeta Pasteur).
4. En una tira de papel marcar con lápiz una cruz a 1.5 cm. de uno de los extremos. Sobre
esta marca y utilizando una pipeta Pasteur, dejar caer una gota del filtrado y esperar a
que seque. Repetir esta operación colocando en el mismo punto de 5 a 7 gotas más.
5. Una vez que haya secado la última aplicación introducir la tira de papel en un tubo de
ensayo que contiene 2 ml del solvente para pigmentos (se recomienda utilizar como
fase móvil acetona:éter de petróleo, 1:9 en volumen), cuidando que éste no toque la
mancha y que no se mueva el tubo; enseguida tapar el tubo con el tapón de corcho y
observar el proceso de separación.
6. Cuando el solvente se acerque al extremo superior del papel, sacarlo del tubo, esperar
a que seque e identificar los pigmentos separados de acuerdo con sus coloraciones.
SEGUNDA PARTE: OBSERVACIÓN DE LA FLUORESCENCIA DE LA CLOROFILA
7. En un mortero, machacar hojas de espinacas (2 a 4) en 10 ml de alcohol de 96°; una
vez perfectamente maceradas filtrar en un recipiente.
8. Colocar el filtrado en un tubo de ensayo.
9. Iluminar el contenido del tubo (extracto de pigmentos de las hojas) mediante una
lámpara eléctrica y/o de UV y observar el fenómeno de fluorescencia.
10. Realizar anotaciones y esquemas.
RESULTADOS
Realizar anotaciones y esquemas de lo visto.
Incluir cada uno de los cromatogramas en el reporte, pegarlos e identificar los distintos
pigmentos presentes en ellos.
Elaborar un esquema donde se muestre y describa lo que ocurrió con la fluorescencia en el
extracto de espinaca.
ANÁLISIS DE RESULTADOS
En tu cromatograma los pigmentos obtenidos ¿ocupan la misma posición o se separan? ¿Por
qué?
¿Cuántos tipos de clorofilas y pigmentos accesorios identificas? ¿Cuáles son?
Observando cuidadosamente ¿cuáles pigmentos se ven más concentrados y cuáles no: las
clorofilas o los accesorios? ¿A qué se debe?
¿Cuál es la función de cada uno de estos pigmentos en la planta de espinaca?
¿Se espera encontrar el mismo número y tipo de pigmentos en todas las plantas?
Al iluminar el extracto ¿por qué fluoresce?
CONCLUSIONES
FUENTES DE CONSULTA (EN FORMATO APA)