Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Valoración microbiológica de
desinfectantes
Profesor: Ivonne Gutiérrez Rojas - 2023
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Desinfección
Es el proceso de eliminación de la mayoría de
organismos patógenos, excluyendo esporas
bacterianas, de objetos inanimados.
Se suele admitir como desinfección la destrucción del
99.999% de los microorganismos presentes o una
reducción de 5 logaritmos del número inicial de ellos.
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Antisepsia
Asepsia
Esterilización
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Antisepsia: Es un proceso de desinfección aplicado a
un ser vivo.
Asepsia: Utilización de procedimientos que impidan
el acceso de microorganismos patógenos a un medio
libre de ellos.
Esterilización: Es la destrucción de todos los
microorganismos presentes en una superficie,
incluidas las esporas.
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Limpieza
Es la acción y efecto de
eliminar la suciedad de
una superficie
mediante métodos
físicos o químicos.
Tomada de: [Link]
content/uploads/2018/11/shutterstock_500096938FILEminimizer.jpg
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Limpieza
• Reducir los residuos de suciedad o
contaminantes por debajo de los límites
establecidos de forma que no afecte la
calidad y seguridad de cualquier producto
fabricado en un equipo.
• No alterar la superficie.
• No debe ser un vector de contaminación
química.
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Limpieza
1. ¿Qué se va a limpiar?
2. ¿De qué material está hecho lo
que se va a limpiar?
3. ¿Qué sustancias debe eliminar la
limpieza?
Círculo de Sinner
Tomada de: [Link]
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Círculo de Sinner
Tomada de: [Link]
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Tipos de agentes químicos
antimicrobianos
• Antisépticos
• Desinfectantes
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Tipos de agentes químicos
antimicrobianos
• Antisépticos: Agentes microbicidas que pueden aplicarse sobre la
piel y mucosas pero no pueden ser utilizados internamente.
Ejemplos: mercuriales, nitrato de plata, solución de yodo, alcoholes,
detergentes.
• Desinfectantes: Agentes que matan microorganismos pero no
necesariamente sus esporas y no deben aplicarse sobre tejidos sino
sobre objetos inanimados como mesas, pisos, utensilios, etc.
Ejemplos: cloro, hipoclorito, compuestos clorados, soda, sulfato de
cobre, compuestos de amonio cuaternario, etc.
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Biocidas
Son aquellas sustancias que por medios bien
químicos o bien biológicos pueden destruir,
contrarrestar, neutralizar, impedir la acción o
ejercer un efecto de control sobre cualquier
organismo nocivo.
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Hernández-Navarrete. Enfermedades infecciosas y Microbiología Clínica. 2014; 32(10):681-688
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Características de los biocidas
frecuentemente usados
Hernández-Navarrete. Enfermedades infecciosas y Microbiología Clínica. 2014; 32(10):681-688
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Características de los biocidas
frecuentemente usados
CAC: Compuestos de amonio cuaternario Hernández-Navarrete. Enfermedades infecciosas y Microbiología Clínica. 2014; 32(10):681-688
Mecanismo de
acción
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Resistencia a desinfectantes
La resistencia puede ser consecuencia de diferentes ”estrategias” microbianas,
que pueden darse en forma inducible o permanente:
1. Alteración de los blancos moleculares (modificaciones de las moléculas
blanco)
2. Inactivación de agentes por reacciones covalentes o enzimáticas
3. Formación de biopelículas
4. Disminución del agente en el sitio de acción ya sea por expresión de bombas
de eflujo, o alteración de estructuras de la membrana externa como la
disminución de porinas.
Cualquiera que sea el mecanismo se observa un aumento de la Concentración
Inhibitoria Mínima (CIM).
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Características de un buen
desinfectante
Alta actividad germicida
Espectro de acción amplio
Que sea bactericida mejor que bacteriostático
Que sea estable ya preparado durante varios meses
Que se homogenice uniformemente en el diluyente
Que no sea tóxico para los tejidos humanos
Que sea compatible con otros productos que puedan usarse antes
o simultáneamente, como sucede con el jabón
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Características de un buen
desinfectante
Que no sea corrosivo, ni irritante
Que no destiña paredes, ropas, objetos , etc
Que reduzca la cantidad de microorganismos patógenos y en el
menor tiempo posible
Que sea activo en presencia de materia orgánica
Qué sea eficaz en una dilución “razonable”
Que sea activo a cualquier pH
Que no tenga mal olor
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Proceso de desinfección
1. La superficie a desinfectar debe estar
limpia
2. Antes de desinfectar se debe tener
lista la solución desinfectante
3. La solución desinfectante se deja sobre
el lugar por el tiempo mínimo
requerido para ejercer la acción, en el
caso del cloro no es necesario
enjuagar.
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Fallas en la desinfección
1. Sobredilución del desinfectante durante la premezcla o en la aplicación
2. Limpieza incompleta o inadecuada
3. Penetración o espectro insuficiente del desinfectante
4. Temperatura inadecuada y humedad mientras están aplicándose los
desinfectantes
5. Los fallos también pueden derivarse de la inactivación o neutralización
del desinfectante debido a la presencia de líquidos residuales de la
limpieza que no han sido adecuadamente eliminados antes de la
aplicación del desinfectante
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Eficiencia de la desinfección
Debe tener en cuenta:
Concentración del desinfectante
Tiempo de contacto
Número de microorganismos presentes
Dureza del agua
Condiciones de ambiente (por ejemplo el pH)
Capacidad de eliminación de materia orgánica con anterioridad a la
desinfección, en función de las características del material a desinfectar
(por ejemplo en el caso de suelos o paredes)
Temperatura a la que se debe aplicar
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Cinética de muerte y tiempo de
reducción decimal
Los microorganismos se inactivan o destruyen de forma exponencial respecto al
tiempo. k es la velocidad específica de muerte y corresponde a la pendiente de la
recta resultante del gráfico que se obtiene a partir de la siguiente expresión:
Dónde:
No = número de microorganismos iniciales
Nt = número de microorganismos sobrevivientes al tiempo t
T = tiempo de contacto entre el desinfectante y el microorganismo
k = velocidad específica de muerte
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Ejemplo
Determinar el valor del tiempo de reducción decimal de un
microorganismo expuesto a un desinfectante X, a partir de los
siguientes datos de supervivencia.
Duración del tratamiento Número de microorganismos viables
0 1 x 106
5 1,2 x 105
10 1,1 x 104
15 1,3 x 103
20 1,1 x 102
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Ejemplo
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Eficiencia microbicida
El valor de la eficiencia microbicida E(%) corresponde al porcentaje
de microorganismos que son destruidos por la acción del
desinfectante:
Dónde:
No = número de microorganismos iniciales
Nt = número de microorganismos sobrevivientes al tiempo t
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
¿Por qué probar los
desinfectantes?
Un desinfectante debe ser probado para conocer:
1. La dilución efectiva requerida
2. El tiempo requerido para ejercer la acción.
Esta actividad debe ser monitoreada periódicamente.
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Métodos para probar
desinfectantes
Se utilizan varios métodos para probar la eficacia de un
desinfectante, pero todos tienen el mismo principio:
Después de que un microorganismo indicador ha sido puesto
en contacto con el desinfectante por un tiempo dado, se
prueba su viabilidad por subcultivo en un medio sin
desinfectante.
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Concentración Mínima
Inhibitoria
Se determina mediante una serie de diluciones decrecientes
del desinfectante en caldo nutritivo, e inoculando los tubos
con una suspensión bacteriana. Tras la incubación a 37°C
durante 24 horas se observa cuál es la mínima
concentración del producto que inhibe el crecimiento.
Menor concentración de desinfectante Mayor concentración de desinfectante
Tomada de: [Link]
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Método de Rideal Walker
El método de Rideal-Walker compara la eficacia del
desinfectante con la del fenol, mediante diluciones en tubo
de ambos y determinando la dilución que es capaz de
matar una cepa bacteriana en un tiempo de máximo 10
min, tras el cultivo a 37°C durante 48 horas.
Tomada de: [Link]
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Método de Chick - Martin
• Modificación del método de Rideal Walker
• Es hecho en presencia de materia orgánica: 3% de
heces humanas
• El tiempo de contacto se incrementa a 30 minutos
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Método de Garrod
• Modificación del método de Chick Martin
• Contiene levadura en vez de heces
• 5 g de levadura seca en 100 mL de agua destilada
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Método de Kelsey Maurer
Este método se basa en la evaluación de la
concentración mínima inhibitoria (CMI) y la
concentración mínima bactericida (CMB) del
desinfectante en estudio.
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Recomendaciones generales
• Realizar periódicamente inspecciones de los
procedimientos de limpieza y sanitización en todas las
áreas.
• Delimitar correctamente las zonas de recepción y
despacho de utensilios limpios y sucios en el área de
fraccionamiento de la materia prima.
• En el área de lavado utilizar sistemas de medida más
fáciles de realizar.
Facultad de Ciencias
Departamento de Microbiología
Recomendaciones generales
• Verificar constantemente el estado de las canastas de
utensilios limpios en el área de lavado
• Realizar una validación microbiológica en el área de
lavado
• Capacitación de la importancia y los principios básicos
de los procedimientos de limpieza y sanitización
• Realizar verificaciones diarias de la limpieza, así no se
realicen pruebas microbiológicas