Manual Lab Hematología

MEDIDAS ESPECÍFICAS DURANTE LA FLEBOTOMÍA O TOMA DE MUESTRA

❖ El área de trabajo debe estar limpia y organizada antes de iniciar el trabajo.

❖ Organizar los materiales a utilizar.
❖ Verificar si el paciente está en condiciones necesarias antes de realizar la toma de
muestra.
❖ Toda muestra debe ser considerada potencialmente infecciosa y se deben tomar las
precauciones que garanticen la seguridad del flebotomista y de los pacientes.
❖ Usar mascarilla al momento de realizar una toma de muestra.
❖ Evitar tocar áreas visiblemente infectadas del paciente.
❖ Las agujas y lancetas deben ser desechadas en los guardianes de seguridad o
incineradas o colocarlas en una solución de Hipoclorito de sodio al 10%.
❖ En caso de derrame de sangre, limpie con cloro al 10%. (Hipoclorito de sodio al
10%).
❖ Cambie los guantes si se han manchado de sangre u otros fluidos corporales.
❖ Al terminar su labor, quítese los guantes y lávese bien las manos.
❖ Evitar accidentes con objetos corto punzantes.

TOMA DE MUESTRA
La sangre es un tejido constituido por elementos formes (eritrocitos, leucocitos y plaquetas)
suspendidos en un medio líquido que es el plasma.

La muestra de sangre se obtiene a través de 3 vías:

A. Vía venosa
B. Vía capilar
C. Vía arterial

La vía venosa: es la de mayor aplicación ya que la capilar solo se usa en:

Determinaciones seriadas como por ejemplo microhematocrito en pacientes

politraumatizados, glucosa en pacientes diabéticos y para realizar microtécnicas en recién
nacidos, pacientes obesos, y pacientes con quemaduras extensas.

La vía arterial: se reserva para punciones especializadas como dosificación de gases

arteriales.
Obtención de sangre venosa
Equipo:
● Guantes
● Torniquete
● Torundas de algodón
● Solución desinfectante : a) Alcohol isopropílico al 70%
b) Tintura de yodo

● Jeringuillas Diferente capacidad (2,3,5, 10 o 20 mls)

Agujas de diferentes calibres: 21.22 23

● Tubos de ensayo Con anticoagulante

Sin anticoagulante

Con los tubos de ensayo con anticoagulante se obtiene una muestra de sangre total, que al
centrifugarse se separa en plasma, que es el sobrenadante de color amarillo y paquete
globular constituido por los elementos formes de la sangre (Eritrocitos, Leucocitos y
Trombocitos o у Plaquetas). El plasma contiene fibrinógeno y heparina.

Con los tubos de ensayo sin anticoagulante se obtiene una muestra que al cabo de 8 a 15
minutos se coagula y al centrifugar obtenemos el suero, sobrenadante amarillo que no
contiene fibrinógeno porque se consume en el proceso de la coagulación.

ANTICOAGULANTES

Son soluciones de sales que impiden la coagulación de la sangre.

Existen varios tipos de anticoagulantes y su uso varía de acuerdo al tipo de muestra
requerida para los distintos analitos a examinar.

Entre los anticoagulantes podemos citar los siguientes:

A. Heparina: anticoagulante por excelencia, único que se obtiene en forma natural,

poco utilizado en el laboratorio por su alto costo. Su mayor utilización es en clínica
para la terapia de pacientes con problemas trombóticos.
B. EDTA: sal disodica o dipotásica de ácido etilendiaminotetracético, se utiliza una gota
de anticoagulante para 3 a 5 mls. de sangre (leer instrucciones casa comercial), Es
utilizado en hematología, no produce distorsión celular. MÁS utilizado en el lab.
C. Solución de Héller y Paúl: es una mezcla de oxalato de amonio y potasio utilizado
para obtener muestras para hemograma.
D. Citrato de sodio al 3.2 o al 3.8%:utilizado para la determinación de
eritrosedimentación por el método de Westergreen y en las pruebas de coagulación.

Uso del tomiquete: sirve para impedir la circulación de retorno, haciendo las venas más
turgentes y visibles, facilitando de esa manera la venopunción. El torniquete se coloca a
7cms por encima del área de sangría, sin apretar mucho y en una media lazada.
Lugares de obtención de sangre venosa en adultos

● Venas del pliegue del codo (mediana cefálica y basílica).

● Venas del antebrazo.
● Venas de la muñeca.
● Vena yugular externa.
● Vena dorsal del pie (Safena).

Lugares de obtención de sangre niños recién nacidos (venosa)

● Vena yugular externa.

● Seno longitudinal o Fontanela.
● Vena femoral.

Ventajas de las muestra de sangre venosa

● Realización de múltiples y repetidos exámenes con la misma muestra.

● No hay variación significativa en los valores sanguíneos, si las muestras se obtienen
en venas diferentes.
● Las alícuotas de plasma y suero pueden congelarse para futuras referencias.

Desventajas de las muestras de sangre venosa

● La estasis, producida por el torniquete, si es prolongada hace a la muestra

inapropiada para pruebas hematológicas exactas porque provoca
hemoconcentración.
● La punción venosa es un procedimiento un poco largo y puede ser dificilen niños,
obesos y pacientes en estado de shock.

Obtención de sangre capilar

Equipo:
● Guantes
● Algodón
● Solución desinfectante (alcohol isopropílico al 70% o tintura de yodo)
● Lanceta estéril
● Recolectores de muestras.

Lugares de obtención de sangre capilar en adulto

● Pulpejo de los dedos (lado externo por tener menos sensibilidad).

● Lóbulo de la oreja.

Lugares de obtención de sangre capilar en niños recién nacidos

● Talón del pie.

● Dedo gordo del pie.
.
Ventajas de las muestras de sangre capilar

● Facilidad de obtención de la muestra.

● Forma preferida de sangre para frotis sanguíneo.

Desventajas de las muestras de sangre capilar

● Solo se obtienen pequeñas cantidades de muestras, lo que imposibilita repetir

determinaciones sin volver a puncionar al paciente.
● La sangre capilar en microtubos tiende a hemolizarse, (se recomienda tomar la
muestra por duplicado).

Ventajas de la toma de muestra de sangre con tubos al vacío

.
● Se puede recolectar toda la muestra que se necesite con una sola punción venosa.
● Los tubos vienen etiquetados y es de fácil transporte de un laboratorio a otro.
● Estos tubos tienen tapones de diferentes colores de acuerdo al tipo de muestra.

PRUEBAS QUE SE PUEDEN REALIZAR DE ACUERDO AL TIPO DE MUESTRA

USO DE LA JERINGA

Apretar la aguja, cerciorarse de que el embolo funcione adecuadamente y la jeringuilla no

contenga aire.

TUBOS AL VACÍO:

Los tubos pueden contener o no anticoagulante y están predeterminados para llenarse con
un y determinado volumen de sangre por vacío. El tapón de caucho está codificado por
color, de acuerdo a su uso o sus aditivos.

TUBOS CON TAPÓN MORADO

● USO:Hematología
● ADITIVO:Anticoagulante EDTA

TUBOS CON TAPÓN CELESTE

● USO: Pruebas de Coagulación
● ADITIVO: Anticoagulante Citrato de sodio

TUBO CON TAPÓN ROJO

● USO: Química, Inmunología, Banco de sangre.
● ADITIVO: Ninguno

TUBO CON TAPON ROJO Y/O AMARILLO

● USO: Química
● ADITIVO: Gel --Separador

MÉTODO
Leer cuidadosamente la indicación o solicitud de pruebas del paciente.
Decida la cantidad de sangre necesaria.
Elegir los tubos adecuados.

➢ Paciente ambulatorio.
Sentarlo en la silla de toma de muestra y apoyar su brazo con la palma de la mano
vuelta hacia arriba.
➢ Puntos para la extracción de sangre. El sitio más adecuado son las venas que se
encuentran en el pliegue anterior del codo, en el punto donde sean más visibles y
palpables.

USO DEL TORNIQUETE:

Colocar firmemente el torniquete alrededor del brazo y sujete los extremos.
1. Con la mano izquierda tire de un extremo cruzándolo.
2. A continuación introduzca este extremo por debajo de la parte principal del
torniquete. El torniquete se deberá ajustarlo suficiente para aminorar la corriente
sanguínea y dilatar las venas, sin apretarlo tanto que reduzca el paso de sangre por
las arterias.
 HEMOGLOBINA

La hemoglobina es una proteína líquida altamente especializada de los eritrocitos, que es

responsable directa del transporte gaseoso (función de los eritrocitos; transportar oxígeno
de los pulmones a los tejidos y retirar el bióxido de carbono de estos últimos a los primeros).

Una molécula de hemoglobina está formada de cuatro subunidades, conteniendo cada uno
un grupo Hem, anidado en una grieta hidrófoba de una cadena proteínica, la globina.

El Hem es un anillo tetrapirrólico con un ion de hierro ferroso próximo al exterior del anillo,
uniéndose de manera covalente el hierro a la histidina de la cadena globina anexa.

Las cadenas de globina son dos pares idénticos, enrollados en segmentos espirales o
helicoidales de diferentes longitudes. El plegamiento de las cadenas coloca al Hem cerca
del exterior de la molécula donde fácilmente se puede combinar con el oxígeno.

La síntesis de las cadenas polipeptídicas de globina se realiza en los polirribosomas libres

del citoplasma y está bajo control genético. Las anomalías de la porción metálica o Hem se
conocen como Porfirias, las cuales pueden ser hereditarias o adquiridas.

Hemoglobinopatías: son las alteraciones de la parte proteica o globina. Las más

frecuentes son hemoglobinas S, C, D, E, y talasemias. La hemoglobina adulta posee dos
fracciones o componentes que reciben los nombres de componentes mayor, A1 que se
encuentra en una proporción de 94-96% y el componente menor A2 que está en una
proporción de 4-6%.

El componente mayor está constituido por dos cadenas alfa y dos cadenas beta, el
componente menor está constituido por dos cadenas alfa y dos cadenas delta. Existen otras
hemoglobinas que son normales en su tiempo, cuya persistencia en el adulto se considera
patológica y se han detectado en asociación a otras hemoglobinas anormales. Estas son:
hemoglobina embrionaria en el embrión y hemoglobina fetal en el feto.

Funciones de la hemoglobina
● Transporte de oxígeno de los pulmones a los tejidos y toma de bióxido de carbono
de los tejidos a los pulmones.
● Participación en la regulación acido-básica, eliminando CO, de los pulmones y
amortiguando los cambios de pH.

Compuestos derivados de la hemoglobina:

Oxihemoglobina: La mayor cantidad de hemoglobina total se encuentra en esta forma. La

función principal de la hemoglobina en el metabolismo corporal es la de pigmento
respiratorio en forma de oxihemoglobina (rojo escarlata). Es el compuesto funcional.

Carboxihemoglobina: Se origina cuando la hemoglobina está en contacto con el monóxido

de carbono.
Metahemoglobina: Es un derivado de la hemoglobina en la cual el hierro ferroso (Fe) del
grupo Hem se convierte en hierro férrico (Fe), esta constituye el 1.7% del pigmento
hemoglobínico normal. No es funcional. Existe un proceso reductor permanente que
convierte al hierro en su forma ferrosa. (Funcional).

Sulfahemoglobina: Es un derivado de la hemoglobina que se forma al combinarse la

hemoglobina con sulfitos provenientes de la combustión incompleta de los sulfatos. Este
compuesto produce anoxia tisular.

La presencia de derivados de la hemoglobina produce cianosis. La cantidad de pigmento

anormal necesario para que se produzca cianosis debe ser más de 5% de
carboxihemoglobina, más de 1.7% de metahemoglobina y más de 0.5% de
sulfahemoglobina. La capacidad de combinación de oxígeno de la sangre es directamente
proporcional a la concentración de la hemoglobina más que al número de eritrocitos. Por
eso la hemoglobinometría es una de las determinaciones del laboratorio más frecuente e
importante como prueba para descartar las enfermedades asociadas con anemia y para
seguir la respuesta de estas enfermedades al tratamiento.

Método:
Existen varias técnicas para determinar la concentración de hemoglobina. Muchos métodos
han caído en desuso por ser imprecisos. Los métodos que usamos actualmente son los
fotométricos y los electrónicos o automatizados, estos últimos requieren equipos especiales
que mediante calculadores electrónicos determinan la concentración de hemoglobina. Son
muy exactos y rápidos, su desventaja es el alto costo inicial.

Los métodos fotométricos utilizan aparatos fundamentados en la ley de Lambert - Beer,

miden la luz que pasa a través de una solución coloreada. Ej. Método de Cianuro de
hemiglobina, que es el más utilizado porque mide todas las formas de hemoglobina excepto
la sulfahemoglobina.

Fundamento

La hemoglobina presente en la muestra al combinarse con ferricianuro de potasio, se oxida

a hemiglobina (Hi, también llamada metahemoglobina) que a su vez se combina con iones
cianuro convirtiéndose en cianuro de hemiglobina (Hi CN o Cianometahemoglobina) que es
un pigmento que puede ser leído colorimétricamente.

Luego procedemos a leer en el espectrofotómetro en Absorbancia o % T de transmitancia a

540nm. Convirtiendo esta lectura en un resultado que se expresa en gr/dl. Para ello es
necesario usar la curva de calibración de hemoglobina o realizar los cálculos con la
siguiente fórmula.

Intervalo de referencia
Unidades tradicionales Unidades SI Factor de conversión
Hombre 16 + 2 gr/dl (14-18 gr/dl) 9,8 1,2 mmol/l (8,6-11,0 mmol/l) 0,62006
Mujer 14 + 2 gr/dl (12-16 gr/dl) 8.7 1,2 mm/117,5-9,9mmol/l)
Los resultados obtenidos en gr/dl (UT) son convertidos a unidades SI multiplicando los gr/dL
de hemoglobina por el factor de conversión (0,62006) y el resultado obtenido se reporta en
mmol/I.

Ejemplo: 14 gr/dl x 0, 62006 = 8,7 mmol/l

Interpretación clínica
La hemoglobina se encuentra disminuida en anemia, en muchos casos, como signos o
complicación de otra patología.
Cuando la hemoglobina está por encima del intervalo de referencia se dice que tiene
poliglobulia que puede ser policitemia vera, policitemia secundaria o policitemia relativa.

Existen variaciones en la concentración de hemoglobina, por causas fisiológicas: edad,

sexo, constitución física del paciente, son variables determinantes. En individuos que
habitan elevadas altitudes sobre el nivel del mar presentan elevadas concentraciones de
hemoglobina.

Para obtener mayor exactitud

● Uso adecuado de materiales e instrumentos.
● Buena calidad de las pipetas.
● En toma de muestra de sangre capilar tomar la muestra que fluya normalmente, sin
apretar en exceso el dedo.
● Mezclar bien la sangre con anticoagulante antes de llenar la pipeta.
● Equipo limpio y seco.
● Hemoglobina de menos de 6 g/dl debe duplicarse el volumen de sangre y dividir el
resultado entre dos.
● Usar muestras controles cada día.
● Si es posible hacer algunas muestras en duplicado.
 HEMATOCRITO
Principio:
Hematocrito es la medición del volumen del paquete globular (eritrocitos), después de
centrifugado, con relación al volumen sanguíneo total expresado en litros / litros (L/L).

La unidad tradicional para expresarlo es porcentaje (%). La aplicación clínica de la

determinación de hematocrito es investigar anemia y poliglobulia.

Es uno de los valores básicos para calcular los indices absolutos del eritrocito o medidas
hematimetricas.

El hematocrito se puede determinar por método manual o método automatizado. Por el

método manual durante la centrifugación es atrapada entre los eritrocitos, una pequeña
cantidad de plasma causando un error positivo falso, pero insignificante. En los contadores
electrónicos de células no existe ese error.

El método manual puede ser de dos tipos:

A. Macrohematocrito de Wintrobe
B. Microhematocrito de Clay Adams

El tiempo y la velocidad de centrifugación varían para cada método. Para el método de

Wintrob se centrifuga 30 minutos a 3,000 RPM; para el método de Clay Adams se centrifuga
5 minutos a 8,000 RPM.

El macrohematocrito con sangre venosa es 1 a 2% mayor que el microhematocrito.

La muestra utilizada para la determinación del hematocrito puede ser sangre venosa con
anticoagulante (EDTA) para Wintrobe; sangre capilar o venosa con o sin anticoagulante
para el microhematocrito de Clay Adams. Si la sangre es capilar se usan tubos capilares
heparinizados y si es sangre venosa los capilares deben ser libres de anticoagulante.

Método de Wintrobe
Equipo
● Tubos de Wintrobe
● Pipetas de Wintrobe
● Centrifuga

El tubo de Wintrobe tiene dos escalas de 0-10 cm (ascendente y descendente). Para la y

lectura del hematocrito se usa la escala ascendente.

Por la centrifugación la sangre se separa en tres capas que debemos explorar:

1. CAPA O MASA ROJA:constituida por eritrocitos, representa el hematocrito, su lectura se
realiza midiendo los centímetros alcanzados por la masa roja y multiplicada por 10,
expresada en %o en L/L.
Intervalo de referencia
UNIDAD TRADICIONAL (UT) UNIDAD SISTEMA FACTOR
INTERNACIONAL (SI) DE CONVERSIÓN

Hombre 47 + 5% (42 a 52%); 0,47 +0,05 L/L (0,42 a 0,520/L) 10-2 UDS. S.I.
Mujer 42 + 5% (37 a 47%); 0,42 + 0,05 UL (0,37 a 0,470/L)

[Link]. CAPA: CAPA BLANCA O CREMA LEUCOCITARIA: representada por leucocitos y

plaquetas.

Intervalo de referencia: 0.5-1 mm. Valores por encima de 1 mm sugieren aumento de

leucocitos (leucocitosis), aumento de plaquetas (trombocitosis) o ambas cosas a la vez.

Valores por debajo de 0.5 mm sugieren disminución de leucocitos (leucopenia), disminución

de plaquetas (trombocitopenia) o ambas cosas a la vez. Para esclarecer estas variaciones
sería recomendable indicar al paciente recuentos de leucocitos y plaquetas.

3RA. CAPA: REPRESENTADA POR EL PLASMA: De él solo se reporta su color y

aspecto. Normalmente este líquido tiene color ámbar o amarillo y su aspecto es claro y
transparente.

El plasma puede presentar variaciones debido a algunas patologías específicas:

● Color amarillo verdoso o plasma ictérico, debido a problemas hepáticos o hemolisis
intravascular.
● Color blanquecino con aspecto turbio, ocurre cuando hay trastornos en el
metabolismo de las proteínas.
● Color blanco cremoso opalescente, llamado quiloso, debido a ingestión reciente de
alimentos ricos en grasas (fisiológico) o a problemas en el metabolismo de las
grasas (patológico).

Por efecto mecánico y manejo inadecuado de la muestra, se puede producir hemolisis, con
lo que el plasma presentará su color rosado a rojo intenso, valoración que depende del
grado de hemolisis provocado a la muestra.

El micrométodo se prefiere al macrométodo por tener un tiempo de determinación más

corto, requiere menor cantidad de muestra, utiliza sangre venosa y capilar y es más real, ya
que tiene menor cantidad de plasma atrapado entre las células, porque la velocidad de
centrifugación es mayor. Sin embargo, hemos visto ventajas del macrométodo de Wintrobe
que se constituyen en desventajas para Clay Adams.

Factores que afectan el hematocrito

● Tubos de ensayo húmedos.
● Tubo de ensayo con exceso de anticoagulante.
● Tubos de ensayos sucios de detergentes.
● Agitación violenta de la muestra.
● Exposición de la muestra a la luz solar o temperatura elevada.
Interpretación clínica
El hematocrito está disminuido en todo tipo de anemia.
Está aumentado en hemoconcentración, policitemia vera, (enfermedad de etiología
desconocida), policitemia relativa y secundaria que se presenta en individuos que llegan a
una ciudad con gran altura sobre el nivel del mar, individuos con deshidratación.

RECUENTO DE ERITROCITOS
Principio
Consiste en determinar el número de eritrocitos por mm de sangre, contando lo que se
encuentre dentro 80 cuadritos pequeños del gran cuadro central de la retícula de Newbauer
(método manual).

Equipo
● Pipeta de dilución
● Cámara de Neubauer, hematimetro o retícula.
● Cubrecamara, cubrehematimetro.
● Agitador de pipetas
● Contador manual
● Microscopio

Reactivo
Solución diluyente:destruye los leucocitos, no así los eritrocitos. Puede ser solución de
Hayen, de Toissson solución salina fisiológica normal.

Muestra: sangre venosa con EDTA o sangre capilar.

Llenar la pipeta, según indica la técnica. Contar en el gran cuadro central en 5 cuadros
medianos equivalente a 80 cuadritos pequeños.

Los eritrocitos contados se multiplican por 10,000 factor de dilución del recuento, número
que se obtiene por cálculos matemáticos a partir de los siguientes datos:
1. Título de dilución de la pipeta (1:200).
2. Diferencia de altitud entre cámara y cubrecámara (0.1mm).
3. Número de cuadros contados (5 cuadros medianos = 80 cuadros pequeños)

Con los avances de la Biotecnología, hoy disponemos de métodos automatizados que

conducen a una determinación rápida y reproducible del número de eritrocitos.

Algunos de estos instrumentos son capaces de realizar con rapidez, exactitud y precisión
desde dieciocho hasta treinta o más parámetros hematimétricos dependiendo de la
complejidad del equipo, con 100 microlitros de sangre total.

El primer contador automático fue diseñado por Coulter en 1956 y el método se

fundamentaba (abertura impedancia) en el paso a través de un pequeño orificio, de las
células sanguíneas suspendidas en el diluyente de una conductibilidad fijada, provocando
un cambio en la impedancia de una corriente eléctrica que atraviesa la misma abertura.
El número de impulsos eléctricos es una indicación directa del contaje celular y su amplitud
es proporcional al volumen celular. En este aparato estábasado la mayor parte de aparatos
semiautomáticos o completamente automáticos.

El segundo método fue el de flujo, basado en la dispersión de la luz. Cada célula sanguínea
que pasa a través del flujo celular interrumpe el haz de luz, contándola así el detector. El
haz de luz en aparatos más modernos se sustituye por un rayo láser.

Los recuentos celulares son más exactos mediante estos métodos automatizados siempre
que la sangre se manipule correctamente. Su margen de error es inferior al 1%. Deben ser
calibrados diariamente.

Muestras hiperlipémicas o con leucocitosis, obstrucciones en los capilares y orificios de

recuento, agitación incorrecta de la muestra, son casos frecuentes de error con alteración
de los resultados.

Los valores varían sujetos a variables como sexo, edad y la altitud sobre el nivel del mar.
Interpretación clínica
● Aumentado: en casos de poliglobulia
● Disminuido: en casos de anemias

Intervalo de referencia
Unidades tradicionales Unidades S.I.
Hombre 5.4 0.8 X 10 6 mm'de sangre (4.6 a 6.2 X 100mm) 5,4 +0,8 x 1092/L
Mujer 4.8 :0.6 X 10 6 mm'de sange (4.2 a 5.4 x 10mm) 4,8 30,6 x 102/L

Factor de conversión: 10 -6
 ÍNDICES ERITROCITARIOS O MEDIDAS HEMATIMÉTRICAS

Determinar el tamaño y contenido de hemoglobina de los eritrocitos, permitiendo la

clasificación morfológica de las anemias.

Los índices recurren al resultado de laboratorio de hemoglobina, cuenta de eritrocitos y

hematocrito, para calcular tres parámetros:
1. Volumen corpuscular medio (VCM)
2. Hemoglobina corpuscular media (HCM)
3. Concentración corpuscular media de hemoglobina (CHCM)

El volumen corpuscular medio (VCM): indica el volumen promedio de eritrocitos

individuales en femtolitros. Puede medirse en forma directa con citometría de flujo (aparato
automatizado) o calcularse por métodos manuales a partir de hematocrito y la cuenta de
eritrocitos.

Intervalo de referencia = 90 + 10 fl (80 a 100 fl).

Se emplea el VCM para clasificar el eritrocito como normocito, microcito o macrocito.

● Normocito: con VCM aproximado de 80 a 100 fl.
● Microcito: con VCM menor de 80 fl.
● Macrocito: con VCM mayor de 100 fl.

Factor conversión SI = 1f1

Unidad tradicional

Las anormalidades del VCM pueden significar procesos patológicos del sistema
hematopoyético, de utilidad para la valoración preliminar de la fisiopatología de la anemia.
Este índice correlaciona con el tamaño de los eritrocitos en el frotis sanguíneo.

2 P. [Link] los eritrocitos = dos primeras cifras del recuento de eritrocitos.

Hemoglobina corpuscular media (HCM): Es la medición del peso promedio de
hemoglobina en cada eritrocito. Se requiere para calcular este parámetro el valor de la
hemoglobina en gramos/dl y la cuenta de eritrocitos, se expresa en picogramos (Pg) en
unidad tradicional (UT) y en fentomol (fmol) en unidad Si.

Ej: Paciente con 11.8 gr/dl de Hb y cuenta eritrocitaria de 3,900,000 / mm de sangre.

HCM = 30.2 x 0,062606 = 1,89 fmol.

Para eritrocitos normales (normocrómicos) la HCM = 29 + 2pg (27 a 31 Pg).

Por los valores obtenidos el eritrocito se clasifica en: normocrómico e hipocrómico según
esté normal o disminuido.

Cuando valoramos los eritrocitos por su contenido de hemoglobina usando HCM, es

importante tener en cuenta el tamaño de los eritrocitos (VCM) y debe correlacionar con
VCM y CHCM. La hemoglobina corpuscular media (HCM) aumentada, se asocia a
megaloblastosis.

Concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM)

Es la concentración media de hemoglobina en gr / 100 mls de eritrocitos. Se calcula a partir
del hematocrito y la hemoglobina.

Factor de conversión = 0,09184

CHCM = 33.7 x 0,09184 = 3,10 mmol/l

Intervalo de referencia
34 + 2% (32 a 36%) en Ud. UT
3,12 +0,18 mmol/l en Ud. SI.
Este índice compara la concentración promedio de hemoglobina dentro de cada eritrocito
con el volumen promedio (VCM) del mismo e indica si la población celulares normocrómica,
hipocrómica o hipercrómica. El término hipercrómico solo se deberá usar para el esferocito
(en esferocitosis hereditaria). Porque los eritrocitos no pueden contener más hemoglobina
de la que su tamañole permite. Estos dos últimos parámetros también se pueden calcular
por citometría de flujo.

De acuerdo a los resultados de estos parámetros, las anemias se pueden clasificar en tres
tipos morfológicamente.
1. Anemia normocítica normocromica
2. Anemia macrocítica normocromica
3. Anemia microcítica hipocromica

Anemia normocítica normocrómica

En este tipo de categoría de clasificación morfológica de anemia los índices están dentro de
los intervalos de referencia, es decir, son eritrocitos de tamaño y contenido de hemoglobina
normal.

La anemia se produce por pérdida masiva de sangre (hemorragia), por proliferación

disminuida en médula ósea de la línea eritroide (anemia hipoplasica) o por hiperhe molisis
(Anemia Felsemi drepanocítica).

Tratamiento: transfusión de sangre total en hemorragias masivas, En otros casos se utiliza

componentes ponentes sanguíneos. En anemia hipoplásica se puede utilizar factores
estimulantesde colonia; el tratamiento ideal sería trasplante de médula ósea (TMO).

Anemia macrocítica Normocrómica

Se caracteriza por trastornos en la maduración del núcleo de las células eritroides

(eritrocitos grandes, VCM aumentado con un contenido normal de hemoglobina). Se
clasifican como anemias megaloblástica o no megaloblástica, dependiendo de las
características morfológicas de sus precursores en médula ósea.

La causa principal de producción es deficiencia de vitamina B12 y/o ácido fólico en un alto
porcentaje, vitaminas necesarias como coenzimas para la síntesis de ácidos nucleicos. Este
tipo de anemia se asocia a: anemia perniciosa, alcoholismo, enfermedades hepáticas, sprue
tropical y no tropical, síndrome de asa ciega, hemoglobinopatía S.

Tratamiento: proporcionar la vitamina deficiente B12y/o ácido fólico.

Anemia microcítica hipocrómica

Se caracteriza por una maduración citoplasmática deficiente por síntesis anormal de

hemoglobina (alteraciones en la síntesis del Hem como anemia Sideroblásticas y Porfiria; o
de las globinas como las talasemias).

Hay varias causas: déficit de hierro, utilización inadecuada del hierro, aumento de las
necesidades de hierro (crecimiento y embarazo), anormalidades en el metabolismo de las
porfirinas y defectos cuantitativos de la síntesis de las globinas.

En este tipo de anemia los indices hematimétricos estarán: VCM disminuidos, HCM y
CHCM normales o disminuidos.

Cursan con este tipo de anemia patologías como anemia ferropénica, anemia
Sideroblástica, Porfirias, anemias de enfermedades crónicas, talasemias,
hemoglobinopatías C, D, E, deficiencia de Vit B6, deficiencia de cobre.

Tratamiento: Buscar primero la causa para aplicar tratamiento correcto. Proporcionar hierro
oralo intramuscular (en caso que sea necesario).
 PRÁCTICA VI.
ORDEN DE MADURACIÓN DE LA SERIE ERITROCÍTICA

Pro. Normoblasto - Pro. eritroblasto

Normoblasto basofilico - Eritroblasto basofilico

Normoblasto policromatofilico - Eritroblasto policromatofilico

Normoblasto ortocromático - Eritroblasto ortocromático

Reticulocito

Eritrocito o hematie adulto

Anormalidades morfológicas de la serie eritrocitica

1- Anisocitosis

● Microcitos
● Macrocitos
● Megalocitos
2- Perfil

● Esferocitos
3- Poiquilocitosis

● Esquisocitos
● Ovalocitos
● Drepanocitos
● Eliptocitos
● Dacriocitos
● Acantocitos
● Equinocitos o células crenadas
● Células de burr

4- Formación de Rouleaux

5- a) Alteración en el contenido de Hb O Alteraciones en el color

● Hipocromía
● Policromatofilia
● Anulocitos
● Anisocromia
5- b) Alteración en la distribución de la Hb o Alteraciones de membrana
● Leptocitos
● Estomatocitos

6-Inclusiones eritrociticas
● Anillo de Cabot
● Howell Jolly
● Punteado basofilico
● Siderocitos
● Eritroconto

7- Inclusiones parasitarias: plasmodium - Microfilarias - tripanosomas

Etapa de desarrollo de la serie eritroide eritropoyesis

La estimulación hormonal(eritropoyetina) de la célula madre eritroide restringida (UFC-E)
conduce a la proliferación, diferenciación y maduración de las células precursoras en la
médula ósea. La eritropoyesis es en condiciones normales un proceso por el que la
concentración periférica de eritrocitos se mantiene en equilibrio.

La etapa que se reconocen desde las células mas inmaduras al eritrocito son:
1. Pro. normablasto-Proeritroblasto
2. Normoblasto basofilico - Eritroblasto basofilico
3. Normoblasto policromatofilico - Eritroblasto policromatofilico
4. Normoblasto ortocromático - Eritroblasto ortocromático
5. Reticulocito
6. Eritrocito - Hematie adulto

1. Pro-normoblasto - Pro-eritroblasto
Es el precursoreritroide más primitivo reconocible, es una célula unipotente que se origina
de la célula madre pluripotencial. Esta restringido a la serie eritrocitica. Cada pro eritroblasto
produce de 8-16 eritrocitos maduros y es una célula esférica y oval de tamaño moderado
(12-15 micras) o más grande (14-19 micras) y una proporción núcleo citoplasma elevada.

El núcleo grande purpúreo ocupa la mayor parte del volumen celular. Esta circulando por
una cantidad pequeña o moderada de citoplasma basofilico intenso. El núcleo está formado
por filamentos de cromatina que tiende a aglutinarse. Se observa con facilidad uno o más
nucléolos teñidos más claros. Con frecuencia se ve el aparato de golgi como un área
grande sin teñir adyacente al núcleo.

Una zona sin teñir que circunda al núcleo, el halo perinuclear representa las mitocondrias.
El citoplasma se tiñe de azul oscuro. Por estimulación específica, el pro eritroblasto se
divide y madura a eritroblasto basofilico.
 2. Normoblasto basofilico-Eritroblasto Basofilico
Este es más pequeño que el pro normoblasto. Oscilando de 10-16 micras. Su proporción
núcleo citoplasma es menor. El citoplasma más abundante, es basofilico intenso, a menudo
más pronunciado que el pro normoblasto. Cantidades variables de hemoglobina pueden
sombrear al citoplasma de rosa. La cromatina en el núcleo adquiere un patrón más tosco.
En este estadio los nucléolos han desaparecido. También se puede observar algunas
masas pequeñas de cromatina aglutinada en la proximidad de la membrana nuclear.

3. Normoblasto policromatofilico - Eritroblasto policromatofilico

Su tamaño se reduce de 10-12 micras. La proporción núcleo citoplasma es menor. La
cromatina es más gruesa, irregular en forma tosca, se tiñe de color púrpura oscuro. En esta
etapa el cambio más característico de la célula es la presencia de abundante citoplasma
que adquiere una coloración entre azul basofilico y la acidofilia de la hemoglobina por la
síntesis abundante de esta y la disminución delnúmero de ribosomas, derivado de aquísu
nombre descriptivo policromatofilico. Esta es la última etapa capaz de mitosis.

4. Normoblasto ortocromático o eritroblasto ortocromático

Es una célula inmadura nucleada que tiene de 8-10 micras de diámetro. El núcleo que
ocupa solo una cuarta parte de la célula, contiene cromatina muy condensada. Al final de
esta etapa se observan núcleos fragmentados sin estructura (pignocitos) a menudo
colocados en posición excéntrica. La tinción de citoplasma es predominantemente rosa
pastel.

5. Reticulocito
Es un eritrocito joven, anucleado: pero contiene ARN residual y mitocondrias en el
citoplasma. El ARN residual le da un tinte con la tinción de Wright. La célula puede
describirse de forma más apropiada como un eritrocito policromatofilico. Son los
reticulocitos más grandes 8-10 micras que el eritrocito maduro y constituyen alrededor del
1% de los eritrocitos circulantes. 35 - 75 x 10°/L Estas células pueden ser identificadas in
vitro por su reacción con los colorantes supravitales, nuevo azul de metileno o azul cresil
brillante que precipitan el ARN. Con este método los reticulocitos son identificados por la
presencia de inclusión azul púrpura en puntos o malla.

6. Eritrocito o hematíe adulto

Es la célula madura de la serie eritrocitica, llamado también glóbulo rojo o célula roja, es un
disco bicóncavo, anucleado con un diámetro de 7.5 micras y un promedio de 7.2 - 7.9
micras y un espesor de 80-100 micras cúbica o fentolitro (fl). Con los colorantes derivados
de Romanowsky se tiñe de color rosa pastel a causa de la proteína acidofila hemoglobina.
El área central pálida ocupa menos de la tercera parte del diámetro normal del eritrocito. La
célula ha perdido sus mitocondrias y ARN residuales y también algunas enzimas
importantes: por ende, es incapaz de sintetizar proteínas o lípidos nuevos. La vida media
del eritrocito es de 100 + 20 días.

La función de los eritrocitos es transportar oxígeno de los pulmones a los tejidos y retirar el
bióxido de carbono (CO2) de los tejidos y llevarlos a los pulmones.
 ANORMALIDADES MORFOLÓGICAS DE LA SERIE ERITROCÍTICA
Anisocitosis:Desigualdad en el diámetro de los eritrocitos. Describe la diferencia de
tamaño de los eritrocitos, en frotis sanguíneos teñidos se observan eritrocitos presentando
una gran
irregularidad en el tamaño.

Macrocito: Eritrocito que mide 9 micras o más de diámetro y un volumen corpuscular medio
superior a 100 fl. Patologías asociadas: anemias perniciosa, deficiencia de vitamina B12,
deficiencia de acido fólico, deficiencia de vitamina B5, mixedema, hepatopatías crónicas,
eritroleucemias, alcohólicos, carcinoma, síndrome diarreicos, Eritroblastosis fetal,
divertículos intestinales.

Microcitos:Eritrocito que mide menos de 6 micras de diámetro y su volumen corpuscular

medio inferior a 80 fl. Su citoplasma se tiñe de color rosa pastel presentando su área central
claro.

Patologías asociadas: deficiencia de hierro (anemia ferropénica), talasemia mayor,

talasemia menor, deficiencia de vitamina B6 (piridoxina), deficiencia de cobre, anemia
Sideroblàstica, anemias por enfermedades crónica.

Megalocitos:Eritrocito de tamaño igual o superior a 12 micras, de forma habitualmente

ovalada, con un elevado contenido hemoglobinico, no se observa aclaramiento
hemoglobínico existente en los Macrocitos.

Patologías asociadas: anemia megaloblastica, anemia perniciosa, deficiencia de vitamina

B12 y fisiológicamente en la época embrionaria.

Perfil
Esferocitos:Eritrocito redondeado, mide menos de 6 micras de diámetro, por lo que se le
llama seudomicrocitos, su espesor esta aumentado, su volumen es normal. Se tiñe
intensamente, carece de la zona o halo central, son osmóticamente muy frágiles.

Patologías asociadas: anemia esferocitica hereditaria y adquirida, anemia hemolitica

inmune, esplenectomia, ictericia hemolitica constitucional.

Poiquilocitosis: Presencia en un frotis sanguíneo de eritrocitos con forma diferente a la del

eritrocito normal.

Esquisocitos: Son fragmentos de eritrocitos de 1/3 - 1/5 del tamaño del eritrocito normal de
2-3 micras diámetro. Tiene formas geométricas, cascos de soldados, bordes angulares,
alargados etc. Se forma por estrangulaciones de filamentos de fibrina o por fragmentación
mecánica de los mismos.

Patologías asociadas: anemias hemolſtica activa, púrpura trombocitopénica trombótica,

carcinomas, anemia hemolitica microangiopatica, coagulación intravascular diseminada,
vasculitis, uremia, glomerulonefritis, quemaduras severas, hemoglobinuria de la marcha.
Ovalocitos: Eritrocito en forma de ovalo o huevo, con uno de sus extremos mas
ensanchados que el otro, con un tamaño normal.

Patologías asociadas: ovalocitosis hereditaria, anemias megaloblastica, anemia

perniciosa, talasemias, anemias hemolíticas congénitas, hemoglobinopatía S.

Acromocito: Eritrocitos incoloros o corpúsculos fantasmas en forma alargada y extremos

en punta.

Patologías asociadas: anemias hemoliticas de origen desconocido.

Dacriocito:Célula redondeada con una única extremidad puntiformes o elongada.

Patologías asociadas: anemia megaloblástica, anemias con cuerpos de Heinz, talasemias,

anemias mieloptisicas.

Drepanocitos:Células con Hb S polimerizada, con varias formas, extremos espiculados,

llamado célula en hoz, célula falciforme.

Patologías asociadas: síndrome drepanocíticos (SS, SC, SD, S/Beta talasemia, C-

Harlem, Memphis /S.

Eliptocito:Célula oval o elipsoide alargada con un área pálida central y hemoglobina en los
extremos redondeados, formas de cigarro o tabaco.

Patologías asociadas: Eliptocitosis hereditaria, anemia por deficiencia de hierro,

talasemias,
anemia que acompaña a las leucemias.

Equinocito o célula crenada: Eritrocitos espiculados con proyecciones cortas espaciadas

en forma regular en toda la superficie.

Patologías asociadas: enfermedades hepáticas, uremia, deficiencia de Piruvato Kinasa,

úlceras pépticas, carcinomas de estómago.

Acantocito o células en espuelas: Eritrocitos con espículas de longitud variable

distribuidas de manera irregular en toda la superficie.

Patologías asociadas: Abetalipoproteinemia: enfermedad hepática por alcoholismo,

trastornos metabólicos de lípidos, mala absorción de grasa, post esplenectomía.

Formación Rouleaux: No es una alteración eritrocitica de tamaño ni de forma, los

eritrocitos se alinean en agregados formados o simulados pilas de moneda.

Patologías asociadas: Macroglobulinemia de Waldestrom, mieloma múltiple.

ALTERACIONES EN LA HEMOGLOBINA
Alteración por su contenido: el color del eritrocito depende de la concentración de la
hemoglobina y el espesor globular.

Hipocromía:Se refiere a la saturación de hemoglobina por debajo de lo normal. El eritrocito

presenta un aumento del tamaño de halo o zona central pálida debido a una disminución en
la concentración de la hemoglobina.

Patologías asociadas: Anemia ferropenica, talasemia, hemoglobinopatías, infecciones

crónicas, anemias Sideroblàsticas.

Policromatofilia:Eritrocitos jóvenes que conservan parte del material basofilico del

eritroblasto, que se observa con una coloración morado grisáceo, mezcla del azul basofilico
y el color rosa normal del eritrocito. Son de mayor tamaño que el eritrocito normal.

Patologías asociadas: proceso regenerativo de la eritropoyesis, osteomieloesclerosis,

talasernias, HbS, C, D, H.

Anulocitos:Eritrocitos en los cuales la disminución del contenido de hemoglobina se

encuentra en condiciones extremas. Se observa el eritrocito con un ribete periférico de
hemoglobina.

Anisocromia:Eritrocitos con diferentes concentraciones de hemoglobina en un mismo frotis

sanguíneo. Indica que hay trastorno profundo de la eritropoyesis con una doble población
eritrocitica.

Patologías asociadas: Anemias refractarias.

ANORMALIDADES EN LA DISTRIBUCIÓN DE LA HEMOGLOBINA

Leptocitos: Células en diana, tiro al blanco, codocito, sombrero mejicano, Target Cell.
Eritrocito que presentan una distribución anormal de la hemoglobina, depositándose
hemoglobina en el centro y en la periferia del eritrocito quedando entre ambos un anillo
incoloro.

Patologías asociadas: talasemias mayor y menor, hemoglobinopatías SC, C, D, E,

deficiencia de hierro, hepatopatías obstructivas, post esplenectomía, anemias hemolíticas,
cirrosis hepáticas.

Estomatocitos: Eritrocito con una invaginación, halo central o zona central en forma de
boca entre abierta u ojal.

Patología asociada: Estomatocitosis hereditaria, alcoholismo, tabaquismo, anemia

hemolitica inmune, cirrosis hepática obstructiva, anemia hemolitica por aumento en la
permeabilidad de sodio.
INCLUSIONES ERITROCITICAS
Anillo de Cabot: Se trata de restos de la membrana nucleareritroblastica que se dispone en
forma de anillo, asa No. 8 de color rosado intenso al rojo.

Patología asociada: Anemias severas, anemia megaloblastica, intoxicación con metales

pesados (plomo), hemoglobinopatías S, C, D, I, H.

Corpúsculo de Howell Jolly: Inclusiones o corpúsculos únicos o múltiples pequeños

redondos. Bien definidos, miden aproximadamente una micra de diámetro. Formados por
cromosomas aberrantes por divisiones mitóticas anormales o por fragmentación patológicas
del núcleo. Se tiñen densamente tomando coloración basofilica en el eritrocito.

Patologías asociadas: Hemoglobinopatías S - H, anemias hemolíticas, megaloblástica,

Sideroblàsticas. Eritroleucemias, pacientes esplenectomizados, talasemias, saturnismo.
Atrofia esplénica, Sprue tropical.

Punteado basofílico: Inclusiones en el eritrocito en forma de puntos basofilicos finos o

gruesos. Pueden varias de tamaño, forma y distribución. Se trata de ribosomas
parcialmente degradados o sin degradar. Indican eritropoyesis acelerada.

Patologías asociadas: Talasemias, leucemias, saturnismo, anemia hemolitica, carcinomas,

intoxicación con metales pesados (plomo), anemias regenerativas.

Cuerpo de Heinz:Inclusiones únicas o múltiples muy refringentes. De color azul oscuro, son
partículas de hemoglobina desnaturalizada que se adhieren a la membrana eritrocitica.
Precipitadas por sustancias como sulfas, anilinas, antipalúdicos, nitrobenceno y otros. Para
poderlos observar se requiere de colorantes supravitales.

Patologías asociadas: Talasemias, hemoglobinas inestables, HbH, Hb sidney,

degeneración de la médula ósea, anemia hemolitica por deficiencia G6PD, Intoxicación con
drogas o fármacos como la primaquina, fenilhidracina, anilina, insuficiencia renal,
esplenectomía y recién nacidos medicados con altas dosis de vitamina K.

Siderocitos: Eritrocitos que contienen gránulos de hemosiderina los cuales son estructuras
que contienen hierro libre. Con azul de Prusia adquieren un color verdoso llamativo. En la
médula ósea los eritroblastos que contienen granulaciones férricas reciben el nombre de
sideroblastos. Sideroblastos en anillos.

Patología asociada: Anemias hemolíticas, Anemia aplastica, esplenectomizados, abuso de

alcohol y cloranfenicol.

Eritroconto: Corpúsculo en forma de bastoncito dentro del eritrocito.

PARÁSITOS EN LOS ERITROCITOS
Pueden ser intra o extracelulares Ejs. Plasmodium, Microfilarias, tripanosomas, Bartonellas
y babesia.

Granulaciones de schuffner: finisimas granulaciones azurófilas asociadas con

plasmodium vivax.

Manchas de Maurer: Puenteado grisáceo. Grosero e irregular observado en parasitación

por
plasmodium falciparum.

DETERMINACIÓN DE ERITROSEDIMENTACIÓN O VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN

GLOBULAR

Es una prueba sencilla de laboratorio muy útil. La velocidad de sedimentación de los

eritrocitos es relativamente constante en personas normales y cuando está elevada indica
un proceso patológico o una condición fisiológica especial, no siendo específica para
ninguna enfermedad en particular y es utilizada para seguir la evolución de una enfermedad
ya diagnosticada. Se recomienda en todos los procesos activos.

La velocidad de sedimentación globular está condicionada por tres etapas o fases:

● Fase de agregación: que dura unos minutos,en la cual ocurre la formación de
Rouleaux.
● Fase de sedimentación: durante la cual ocurre la sedimentación a una velocidad
constante.
● Fase de empaquetamiento: tanto los agregados como los eritrocitos que se han
sedimentado individualmente se empaquetan y cesa el movimiento de
sedimentación.

De estas tres fases la más importante es la primera, porque de ella dependerá la velocidad
de todo el proceso.

Los métodos más utilizados para su determinación son:

● Wintrobe
● Westergreen
● Landau Adams

Los primeros son macrométodos y el último es un micrométodo utilizado en recién nacido.

Fundamento:
Consiste en medir el espacio recorrido por una columna de eritrocitos en una muestra de
sangre total anticoagulada en un tiempo determinado, el cual varía según el método y
expresa la lectura en milímetros por segundo.

El tiempo de sedimentación varía según el método:

Wintrobe una hora
Westergreen dos horas
Landau Adams una hora
En la determinación de la eritrosedimentación intervienen factores biológicos, fisiológicos y
físicos.

Factores biológicos:
● Formación de Rouleaux
● Concentración de fibrinógeno plasmático
● Concentración de globulinas plasmáticas.

Factores fisiológicos: que determinan aumento de la eritrosedimentación:

● Menstruación
● Embarazo (después del tercer mes)
● Ancianidad o vejez

Factores físicos
● Temperatura: la recomendada es de 22°C -27°C, el calor aumenta la velocidad de
sedimentación, por lo que se recomienda no colocar esta prueba cerca de estufas,
baños de maría, hornos o mecheros.
● Movimiento: aumenta la velocidad de sedimentación, no debe estar cerca de
agitadores, centrífugas, rotadores.
● Tiempo: la prueba debe realizarse antes de las dos horas de extraída la muestra y la
lectura de la técnica debe hacerse en el tiempo exacto.

Las variables que influyen en los intervalos de referencia son: sexo, edad y método.

Patologías asociadas a aumento de la eritrosedimentación

En enfermedades crónicas y enfermedades inflamatorias localizadas tales como:
tuberculosis pulmonar, fiebre reumática, artritis reumatoidea, endocarditis bacteriana,
espondilitis anquilosante, lupus eritematoso, amigdalitis, lepra, mononucleosis infecciosa,
mieloma múltiple, enfermedad de Hodgkin. En todas las anemias la VSG, aumenta excepto
en la anemia drepanocitica, debido a la forma de media luna, los eritrocitos no se apilan en
forma de pilas de moneda formando el factor Rouleaux.

Patologías asociadas a disminución de la eritrosedimentación

Hipofibrinogenemia hereditaria o adquirida, hipogammaglobulinemia, policitemias,
drepanocitosis.

Método de Wintrobe
La muestra es sangre venosa con anticoagulante de EDTA o Hellery Paul. La lectura se
hace en la escala descendente del tubo de Wintrobe, después de una hora de reposo..

Intervalo de referencia:
Unidades tradicionales Unidades SI Factor de conversión
Hombre 0-7 mm/h 0-0,42 mm/s 0,06
Mujer 0-15 mm/h 0-0,9 mm/s
Niños 1-15 mm/h 0,06-0,9 mm/s
Método de Westergreen
La muestra es sangre venosa en la proporción de:
● 1.6 mls. De sangre venosa
● 0.4 mls. De anticoagulante de citrato de sodio al 3.8%.

Este método utiliza la pipeta de Westergreen que tiene una capacidad de 300 mm de
longitud y 2.5 mm de diámetro interno. Está graduada de 0-200 mm. La lectura de los mm.
Descendido se hace a la hora y a la 2da. Hora.

Intervalo de referencia
Unidades tradicionales Unidades SI Factor de conversión
Hombre 1ra. Hora 3-5 mm/h 1ra. Hora 0,18 -0,3 mm/s 0,06mm/s
2da. Hora 7-15 mm/h 2da. Hora 0,42 -0,9 mm/s
Mujer 1ra. Hora 4 - 7 mm/h 1ra. Hora 0,24 -0,42 mm/s
2da. Hora 12-17 mm/h 2da. Hora 0,72 -1,02 mm/s

Ventajas y desventajas del método de Wintrobe

● Ventajas: con la muestra puede hacerse otras determinaciones de laboratorio, el

tiempo de reposo es menor.
● Desventajas: no podemos determinar valores disminuidos. El Intervalo de
Referencia, es a partir de cero.

Ventajas y desventajas del método de Westergreen

● Ventajas: es un método más sensible.

● Desventajas: el tiempo de reposo es de dos horas. La muestra no se puede usar
para otras determinaciones de laboratorio. Pues usa anticoagulante de citrato de
sodio en una proporción determinada.
 RECUENTO DE LEUCOCITOS
Principio
La sangre se diluye en una solución ácida que lisa los eritrocitos, pero no los leucocitos o
los eritrocitos nucleados. El líquido diluyente tiene un colorante que tiñe los núcleos.
Cuando en el frotis sanguíneo aparecen eritrocitos nucleados, el recuento de leucocitos
debe ser corregido.

El recuento consiste en determinar el número de leucocitos por mm de sangre. Se utilizan

tanto métodos manuales como automatizados (estos últimos ya fueron explicados
brevemente en el recuento de eritrocitos).

Esta prueba tiene aplicación clínica en la investigación de procesos infecciosos e

inflamatorios.

Muestra: sangre venosa con EDTA o sangre capilar.

Material y reactivos (método manual)

● Cámara de Neubauer
● Cubrecámara
● Agitador de pipetas
● Microscopio
● Contador manual
● Solución diluyente

La solución diluyente es un ácido diluido como por ejemplo: ácido acético al 1%, al 3% o al
5%, al cual se le agrega violeta de genciana al 1% (3 gotas) o azul de metileno al 1% para
colorearlos núcleos.

El recuento se hace en los 4 cuadros grandes de las esquinas de la retícula de Neubauer =

64 cuadros medianos.

El número de leucocitos se multiplica por 50 (factor de dilución), este se obtiene de:

1. Título de dilución de la pipeta
2. Diferencia de altitud entre cámara y cubrecámara (0.1mm).
3. Número de cuadros contados (4 grandes cuadros = 64 cuadros medianos).

Se llama leucocitosis al aumento de número de leucocitos, suele registrarse en las

infecciones bacterianas, intoxicación y leucemias entre muchas otras patologías.
Fisiológicamente encontramos leucocitosis en el embarazo, en los recién nacidos y después
de ejercicios físicos intensos, entre otros.

Se denomina leucopenia a la reducción del número de leucocitos, se encuentra en

múltiples condiciones como aplasia o hipoplasia, en infecciones víricas (influencia, hepatitis,
rubéola, mononucleosis etc.)y en algunas infecciones bacterianas como la brucelosis y
salmonellosis.

En los valores de leucocitos influye la edad como variable.

Intervalo de referencia
Unidad tradicional Unidad SI Factor de conversión
Adultos 5,000 - 10,000 / mm sangre 5,0 - 10,0x10° /L 103
Neonatos:10,000-25,000 / mm de sangre 10,0-25,0 x 10°/
1 Año: 8,000-15,000 /mm3 de sangre 8,0-15,0 x 10°/L

PRÁCTICA IX.
Serie Leucocitaria

Etapas de maduración de:

Serie Mieloide o Granulocítica
1- Mieloblasto
2- Promielocito
3- Mielocito
4. Metamielocito
5. Célula en Banda, Baton o Stab
6- Polimorfo Nuclear Neutrófilo
7- Polimorfo Nuclear Eosinófilo
8- Polimorfo Nuclear Basófilo

Serie agranulocítica

Generalidades
Esta serie constituye uno de los elementos formes de la sangre que cumple la función de
defensa del organismo.

Se clasifican en dos series:

A. Serie granulocítica o mieloide.
B. Serie agranulocítica o linfoide.
Esta clasificación se basa en la creencia de que solo las células de la primera serie
contenían granulaciones en su citoplasma, mientras que las de la segunda serie no las
tenían; hoy sabemos que ambas serie poseen gránulos, la diferencia está en que los
granulocitos tienen granulaciones específicas, mientras que los agranulocitos tienen pocas
granulaciones inespecíficas.

Otras clasificaciones de los Leucocitos

A. Por la forma del núcleo
1. Segmentados o Polimorfonucleares (granulocitos)
2. Mononucleares (agranulocitos: Linfocitica y Monocítica)
B. Por el lugar de origen
1. Mieloide
2. Linfoide
C. Por el tipo de Función
1. Fagocitos (neutrófilos y monocitos)
2. Productores de anticuerpos (linfocitos y células plasmáticas)

Las cuatros primeras células de la serie granulocítica son habitantes normales de medula
ósea; bajo condiciones normales no deben aparecer en sangre periférica, si aparecen son
indicativos de malignidad como por ejemplo enfermedades mieloproliferativas como el
mieloma múltiples, enfermedad de Hodgkin, linfoma de Burkitt, estados leucémicos y pre
leucémicos, solo pasan a sangre periférica normalmente del bastón en adelante, el bastón o
banda es una célula no totalmente adulta, la cual dependiendo de las granulaciones pueden
ser tres tipos:
A. Neutrofílica
B. Eosinofílica
C. Basofílica

Las células adultas de esta serie son los Polimorfonucleares (neutrófilos, eosinofilos y
Basofilos).

La familia Linfocítica se origina en ganglios y tejidos linfoides y muy poca cantidad en

médula ósea.

Los pequeños linfocitos casi en su totalidad se originan en el Timo a partir de célula linfoides
mayores, por una serie de divisiones mitóticas, los grandes linfocitos provienen de los
tejidos linfoides del intestino, por división y maduración estos grandes linfocitos dan lugar a
las células plasmáticas.

La familia Monocítica se origina en la médula ósea, la célula adulta es el monocito.

Las dos primeras células en ambas familias son habitantes normales exclusivos de su lugar
de origen, no se observan en sangre periférica salvo en procesos malignos: Linfomas,
estados preleucémicos, mieloma múltiple, cierta afecciones virales (familia Linfocítica) y en
cierta enfermedades del sistema retículo endotelial, estado malignos y premalignos (familia
Monocítica).
De la serie leucocitaria solo pasan a sangre periférica las siguientes células:

Forma leucocitaria Relativa o Recuento Diferencial

Es una parte de la biometría hemática o hemograma y consiste en contar 100 células
blancas en orden de aparición, clasificándolas de acuerdo a su tipo y reportar en %.

Formula leucocitaria absoluta

Es la expresión por mm3 de sangre de las células blancas que aparecen en la fórmula
leucocitaria [Link] obtiene a través de cálculos matemáticos que requieren de dos
determinaciones hematologías: recuento leucocitario y la fórmula leucocitaria relativa.

Serie granulocítica
Mieloblasto: Presenta núcleo grande, abundante, redondeado o ligeramente oval, se tiñe
de color púrpura, cromatina finamente dividida, suelta con presencia de nucléolos en
número de 2-5, Citoplasma basofilico, reticulado y esponjoso, apenas se ve un halo
alrededor del núcleo.

Promielocito: Núcleo suele tener cromatina un poco más gruesa que el mieloblasto, los
nucléolos pueden ser o no visibles, núcleo a veces presenta una ligera escotadura en uno
de sus lados. Se tiñe de color púrpura oscuro. Citoplasma: más abundante, basofilico, suele
contener gran número de granulaciones que incluso puede cubrir el núcleo.
Mielocito: Es la primera célula de la serie que presenta gránulos específicos demostrando
la célula que dará origen, es decir, neutrofilo, eosinofilo o Basofilo. Núcleo con cromatina
más compacta que la célula anterior, núcleo más pequeño y escotadura más profunda, se
tiñe de azul púrpura. Citoplasma va desde el basofilico pálido al policromatofilico con
presencia de gránulos específicos en él.

Metamielocito: Núcleo con escotadura más pronunciada que la anterior, se tiñe de azul
púrpura. Citoplasma más abundante que la célula anterior, masacidofilico que basofilico con
gránulos específicos en él.

Bandas: Núcleo en forma de bastón, lazo, número ocho, letra griega, cromatina gruesa
color púrpura violeta. Citoplasma abundante, de color rosa pastel y gránulos específicos.

Polimorfonuclear neutrofilo: Núcleo formado por lóbulos que oscilan de 2 a 5, unidos

entre sí por finos hilos de cromatina, se tiñe de color púrpura violeta. Citoplasma abundante
color rosa pastel, cubierto de granulos abundantes y finos de color rosado intenso.

Polimorfonuclear eosinófilo: Núcleo muestra lobulaciones tinción igual que el neutrofilo,

pero generalmente son en número de dos. Citoplasma abundante color rosa pastel, con
granulaciones especificas más gruesas que las del neutrófilos teñidos de color naranja.

Polimorfonuclear Basófilo: Núcleo presenta lobulaciones de 2-3 pero la cromatina es más

fina que las células anteriores que se tiñe de un color púrpura azulado. Citoplasma de color
rosa pastel con la presencia de grueso gránulos que se disponen en toda la célula, se tiñen
estos gránulos de azul marino casi negro y son solubles en agua.

Serie agranulocítica
Familia Linfocítica
Linfoblasto: Núcleo redondo, grande con cromatina muy fina de color púrpura oscuro
donde se observandos nucléolos. Citoplasma redondeado, Basofilo, no tiene gránulos.

Pro-linfocito: Núcleo similaral anterior pero con una cromatina más compacta, puede tener
nucléolos. Citoplasma similaral anterior.

Linfocito: Núcleo redondo u oval, generalmente excéntrico, con una cromatina nuclear bien
gruesa apretada, se tiñe de color púrpura violeta intenso. Citoplasma: en el pequeño
linfocito se observa un fino anillo bordeando el núcleo de color azul cielo, en los linfocitos
medianos y grandes se observa un citoplasma más abundante a veces con algunos
gránulos azurofilos.

Familia Monocítica
Monoblasto: Núcleo grande, redondeado, posee una fina estructura de cromatina por lo
que se colorea de un púrpura claro, presenta de 1 a 2 nucléolos. Citoplasma redondeado
con leve basofilia.

Pro monocito: Núcleo presenta escotadura, cromatina un poco más gruesa que la célula
anterior. Citoplasma más abundante que la célula anteriory se tiñe de azul grisáceo.
Monocito: Núcleo central, con mucho polimorfismo, sin llegar a lobularse, da el aspecto de
estar replegado sobre sí mismo, se tiñe de un púrpura claro. Citoplasma abundante, de
color azul grisáceo con la presencia de gránulos azurofilos.

De todas las células que aparecen normalmente en sangre periférica el monocito es el de

mayor tamaño.

Anomalías Hereditarias de los Granulocitos

Anomalías de Pelgert -Huet: Se caracteriza por la imposibilidad del núcleo de

segmentarse en el neutrófilo y con cromatina más condensada. Aparecen en pacientes con
quemaduras.

Anomalías de Alder-Reilly: Se caracteriza por la presencia de muchas granulaciones

azurofilas voluminosas que pueden tapar los núcleos de las células.

Síndrome de Chediak-Higashi: Trastorno sistémico letal, raro asociado con gránulos

gigantes en todas las células mieloides, mieloblastos y promielocitos y células maduras con
gránulos voluminosos que se tiñen normal.

Anomalías de May - Hegglin: Se caracteriza por plaquetas gigantes y cuerpos de Dohle

grandes azulados o rosado azulados distorsionando el citoplasma de granulocitos y
monocitos.

Anomalías adquiridas de los granulocitos

Cuerpo de Dohle:Son inclusiones citoplasmáticas de color azul grisáceo, únicas o múltiples
de los neutrófilos.

Granulaciones Tóxicas: Gránulos citoplasmáticos grandes y fuertemente teñidos en los

neutrófilos, estos gránulos se tiñen de un color oscuro. Se observa en infecciones severas,
estados tóxicos, envenenamiento químico.

Macropolicito o neutrófilo hiperlobulado: Son neutrófilos extraordinariamente grandes y

con núcleo con más de 5 lóbulos (6-20). Se observan en pacientes con anemia
megaloblástica.

Cuerpo de Auer: Son estructuras bacilaresque se colorean de color rojo con colorante
Wright, aparecen en los citoplasmas de mieloblasto y Monoblasto, no aparecen en el
citoplasma de linfoblastos.

Funciones de los Leucocitos:

En términos generales sirven de defensores del organismo. Los granulocitos tienen varias
funciones, siendo la principal la defensa del organismo frente a varios agentes nocivos, sus
funciones principales son: fagocitosis, quimiotaxis y diapédesis.

Neutrófilo: Son los granulocitos que tienen mayor poder de fagocitar sustancias nocivas y
se les llama micrófagos (para separarlos de los monocitos o macrófagos); tienen mayor
capacidad de emitir pseudópodos, permitiendo trasladarse de un tejido a otro.
Eosinófilos: En los procesos alérgicos liberan una exotoxina, en la defensa de estos
procesos. Otra característica es la de perder sus granulaciones específicas en lugares
donde existen procesos inflamatorios.

Basofilos: Intervienen evitando a nivel de los capilares las pequeñas hemorragias en base
a la cantidad de histamina que liberan.

Monocito: Es capaz de transformarse en macrófagos lo que indica que tiene posibilidades

de crecer y desarrollar sistemas enzimáticos, fagocitosis y digestión, su principal función es
la de fagocitar.

Linfocito: Interviene en el mecanismo inmunitario del organismo, produciendo cuerpos

inmunes (anticuerpos) y transmitiendo la memoria inmunológica.

Los linfocitos junto a las células plasmáticas son las células encargadas de la producción de
anticuerpos. Además los linfocitos pueden originar o transformarse en otras células y
transportar sustancias nutritivas.

Patologías asociadas a Leucocitos

Neutrofilias: aumento de neutrófilos. Infecciones bacterianas, afección de hongos,
procesos metabólicos como acidosis diabética, uremia, intoxicación con plomo y mercurio,
intoxicación con drogas como epinefrina y adrenalina, leucemia mielógena agudas y
crónicas.

Linfocitosis: aumento de linfocitos. Mononucleosis infecciosa, tos ferina, viruela, papera,

sífilis secundaria, lepra, lupus eritematoso, leucemia Linfocitica aguda y crónica,
enfermedad de Hodgkin, mieloma múltiple, linfoma de Burkitt, toxoplasmosis, infecciones
con citomegalovirus.

Eosinofilia: aumento de eosinofilos. Infestaciones parasitarias como necátor americano,

ancilostomas duodenales, trichuris trichuras. Afecciones alérgica como asma bronquial,
fiebre de heno, síndrome de Loefler, granuloma eosinofilico. Afecciones de la piel como
dermatitis seborreica. Leucemia mieloide aguda y crónica. Lupus eritematoso, Hodgkin y
policitemia.

Monocitosis: aumento de monocitos. tuberculosis, enfermedad del sistema retículo

endotelial que afecta el bazo, fiebre reumática, tripanosomiasis, paludismo, leucemia
monocítica aguda y crónica, Hodgkin, sífilis policitemia vera.

Basofilia: aumento de Basofilos. mixedema, afecciones crónicas de los senos nasales,

colitis ulcerativa, policitemia, Hodgkin, ciertas anemias hemolíticas, leucemia mieloide.

Neutrófilos

Neutropenia:Cuando la cifřa de neutrófilos absolutos es de 1,5 X 10/L

Neutrofilia:Cifia mayor de 7,0 X 10L de neutrófilos absolutos

Causas de neutropenia y neutrofilia:Son las mismas que para leucopenia y leucocitosis.
En las neutrofilias secundarias o procesos infecciososo inflamatorios, aumenta el # de
banda

Bandemia:Cifra absoluta de más de 800 (0,8 X 10 L) neutrófilos en "banda".

Reacción leucemoide:Término utilizado para describir leucocitosis graves con formas

jóvenes o inmaduras de elementos de serie granulocítica (bandas, metamielocitos,
mielocitos etc.), en ausencia de leucemia. El término correcto es leucoblastosis, que si se
acompaña de elementos jóvenes de serie roja (eritroblastos) en S.P. sería
leucoeritroblastosis.

Las leucoblasto sis pueden ser a expensas de granulocitos (mielocíticas), de de

leucoblastosis o linfocitos de monocitos. Las causas infecciosa, eclampsia, Comprenden:
leptospirosis, envenenamientos, carcinomas metastásicos a MO., hemorragia aguda,
hemólisis aguda, recuperación de anemia megaloblástica o de granulocitosis, y
leucoeritroblastosis mielocíticas Endocarditis neumonía, septicemia, quemaduras, otras.

Las linfocitosis (más de 5 X 10 /L en valor absoluto) no leucémicas constituyen parte de las

reacciones leucoblásticas/ leucoeritro blásticas linfoides.

Algunas linfocitosis por infecciones virales pueden hacer aparecer en la S.P. linfocitos
atípicos, imitativos, virocitos.

La mayoría de los linfocitos atípicos o virocitos son linfocitos B, estimulados por el proceso
viral o por la respuesta inmunitaria secundaria.

La tuberculosis es probablemente la única causa de leucoblastosis/ leucoeritroblastosis

monocítica.

Otras células en Sangre periférica

Plasmocitos e células plasmáticas:Normalmente no aparecen en S.P. Excepcionalmente,
se encuentran en S.P. en algunas virosis, como Mononucleosis infecciosa, rubéola, varicela,
sarampión, y meningitis linfocítica benigna.

Pueden también aparecer plasmocitos en sangre periférica en mieloma múltiple y en

leucemia de células plasmáticas.

Blastos:La presencia de blastos, de serie mieloide o linfoide, es altamente sugestivo de

leucemia aguda. La presencia de blastos con cuerpo o bastón de Aüeres diagnóstico de
leucemia aguda de estirpe mieloide.

Desviación hacia la izquierda:Cuando en la FLR aparecen células jóvenes e inmaduras

(bandas, metamielocitos y mielocitos).

Desviación hacia la derecha: Abundan en la FLR células maduras o adultas de serie

leucocitaria.