HEMATOPOYESIS
Asignatura:Hematología I
Msc. Mercedes Tapia.
Carrera de Laboratorio Clínico
OBJETIVOS
Comprender el proceso de formación de
las células sanguíneas
Identificar el proceso de especificación del
linaje de las células sanguíneas
Reconocer los diferentes tipos de células
sanguíneas maduras.
HEMATOPOYESIS
Es el mecanismo fisiológico responsable
de la formación continua de los distintos
tipos de células sanguíneas, de forma que
los mantiene dentro de los límites de la
normalidad en la sangre periférica.
HEMATOPOYESIS
Proliferación
Maduración Tejido hematopoyético
Diferenciación
A partir CMHP indiferenciada.
En el adulto en la MO todas las
células (leucocitos, hematíes, plaquetas)
Cálculos basados en el volumen sanguíneo, en
el nivel y vida media de cada tipo celular en la
circulación, indican que cada día un adulto
produce aproximadamente:
200 billones de eritrocitos
100 billones de leucocitos
100 billones de plaquetas
Fuente: NEJM 2006; 354:2034-2045
Sistema Hematopoyético
Conjunto de órganos y tejidos encargados
de destruir y formar las diferentes células
sanguíneas.
Médula ósea , Hígado, Bazo , Timo,
Ganglios linfáticos, Sistema mononuclear
fagocítico.
El grado de importancia varía en el
tiempo.
Sitios hematopoyéticos
Adultos:
Vértebras
Esternón
Cadera ,
cráneo
costillas
pelvis,
extremos proximales del fémur
Omóplato
Hematopoyesis Intramedular: dentro MO
Hematopoyesis Extramedular :Hígado
bazo puede formarse tejido
hematopoyético. Tienen memoria y
habilidad hematopoyética.
Ejem, (Anemias , trastornos
mieloproliferativos crónicos, infiltración de
células leucémicas, tumores)
Hepatoesplenomegalia
MEDULA OSEA
Es un tejido Conjuntivo especializado.
Constituida por un tejido blando,
esponjoso, que contiene sangre, grasa y
células hematopoyéticas, que existen en
una red vascular y de células
fibroblásticas ramificadas contenido en un
estuche óseo.
MEDULA OSEA
Es un tejido altamente vascularizado
Abarca 3-6% peso corporal
La masa total1600g. a 3600g
M Roja H .activa
M Amarilla H inactiva
El microambiente medular engloba un
conjunto de sustancias químicas
hormonales, neurotransmisoras y
diversas células, endoteliales,
reticulares, linfocitos T, macrófagos,
adipocitos , etc, que son esenciales para
el normal desarrollo de la célula
germinal.
DIFERENCIACION
HEMATOPOYETICA
Célula madre Autorreplicarse: regenerar
Hematopoyética Proliferar: incrementar
pluripotencial Diferenciarse: madurar en todos los
(steam cells) (CMHP) tipos de células.
Célula madre
Hematopoyética Capacidad limitada para Auto renovarse,
Multipotencial (CMHM) pero pueden diferenciarse
Célula Progenitora Comprometidas a diferenciarse en un tipo
celular
Comprometida
Células sanguíneas. No proliferantes
Célula Madura.
FACTORES DE CRECIMIENTO
Glucoproteínas: Citoquinas-Interleucinas
Estimulan la proliferación y diferenciación
de HScs y progenitores ,facilitan la función
de la maduración de las células
sanguíneas. (GB,GR, PQtas )
Actúan en bajas concentraciones
Aumentan la integridad de la membrana y
prevenir la apoptosis.
LISTA DE CITOQUINAS Y
FACTORES DE CRECIMIENTO
CITOQUINA CÉLULAS ESTIMULADAS
IL 2 Células T, Células B,Células NK
IL3 Factor estimulante de
multilinaje(granulocitos, cel
eritroides,[Link],
blastos leucémicos)
IL4 Cel. B, T , mastocitos
IL6 cel B,T, UFC-GEMM,UFB-E, macrófagos, cel
neurales, hepatocitos
IL7 Cel. B
IL11 Megacariocitos
FEC-GM Granulocitos,megacariocitos,eritrocitos
FACTORES DE CRECIMIENTO
La Eritropoyetina (EPO) riñón,
estimula la proliferación de eritrocitos.
Trombopoyetina (TPO) origen
desconocido estimula la proliferación de
plaquetas
El incremento de EPO producir policitemia
secundaria: es un trastorno caracterizado
por un aumento en el número total de
eritrocitos.
CMHP
Célula madre Hematopoyética Pluripotencial
Célula madre
Hematopoyéticas Multipotenciales
(CMHM)l
UFC-S. UFC-GEMM UCF-Lin.
BFU-E UFC-E
UFC-LT
UFC-Meg UFC-LB
UFC-Eos
UFC-Bas.
UFC-M
UFC-GM
UFC-G
Diferenciación Hematopoyética
ERITROPOYESIS
UFC-GEMM
BFU-E UFC-E
Características de las etapas de desarrollo del Eritrocito
Célula Tamaño Citoplasma Núcleo
Diámetro
Pronormoblasto 12-20μm Cantidad moderada, Grande:cromatinafina fina
basófilo Nucleolo presente
Normoblasto 10-16 μm Mas que en Engrosamiento de
Basófilo pronormoblasto cromatina;nucléolo ausente
Normoblasto 10-12 μm Abundante; azul-grisáceo Cromatina irregular
Policromatófilo
Normoblasto 8-10 μm Rosa a naranja puede tener Pequeño redondo denso
Ortocromático con un tinte azulado Crmatina fuertemente
condensada., se lo puede
ver expulsando el núcleo
Reticulocito 8-10 μm Rosa con um tinte azulado Ausente
Eritrocito policromatófilo
Eritrocito 7-μm Rosa a naranja Ausente
Eritrocitos
A)Proeritroblasto ,B) E. ortocromatico
C)Reticulocito D)[Link]ófilo E)[Link]ófilo F) eritrocito
Eritropoyesis
Disminución de tamaño
Condensación nuclear
Cae la relación núcleo/citoplasma
Desaparece el núcleolo
Pérdida de basofilia citoplasmática
UFC-GEMM
Granulopoyesis
UFC-Eo UFC-GM UFC-Baso
UFCG
Célula Tamaño Gránulos Citoplasma Núcleo Relación N:C
μm
Mieloblasto 14-20 Ausente Azul oscuro Redondo u Alta
oval:cromatina
densa. 3-5
nucleolos
Promielocito 15-21 Grandes. Azul-negros Azul Oscuro Redondo u Alta pero menos
azurófilos oval,cromatina que el
inespecíficos condensada que mieloblasto
en el blasto,
nucleolos
presentes
Mielocito 16-24 Pequeños específicos, Rosa claro, pero Redondo, Disminuida por
rojo rosado, algunos que ùede tener cromatina más progranulocito
gránulos azurófilos halos de azúl condensada que
le promielocito,
ausencia de
nucleolos
Metamielocito 12-18 Predominio de Rosado Cromatina Disminuida
gránulos pequeños condensada, se
específicos de color tiñe de morado
rosado, pocos gránulos oscuro , forma
azurófilos presentes de frijol
En banda 9-15 Específicos pequeños Rosado La cromatina es Disminuida
ocayado abundantes de color picnótica en los
rosa extremos del
núcleo en forma
de herradura , se
tiñe de morado
oscuro
Polimofonuclear 9-15 Específicos pequeños Rosado Segmentado de Disminuida
segmentado abundantes de color 3-4 lóbulos,
rosa cromatina
condensada se
tiñe de morado
oscuro
GRANULOPOYESIS
UFC-GEMM
Monopoyesis UFC-GM
Características de las células en la etapa de maduración del Monocito.
UFC-M UFC-G
Célula Tamaño μm Gránulos Citoplasma Núcleo
Monoblasto 18-22 Ausentes Azul gris Redondeado u
oval cromatina
de color azul,
morado claro,
finamente
dispersa, se
identifican
nucleolos
Promonocito 12-20 Finos se Abundante , azul Irregular con
denominan gris muescas
polvo azurófilo profundas , red
fina de
cromatina
Se perciben
nucleolos
Monocito 12-20 promedio Finos Azul gris Irregular, forma
de 18 de herradura o
frijol. A
Macrófagos Aumenta su Presencia de Azul Redondo ,
tamaño de 5 a 10 gránulos densos aparecen
veces pequeños nucleolos
Monocito
TROMBOPOYESIS
Características de las etapas de desarrollo de los Megacariocitos. UFC-GEMM
Célula Tamaño Gránulos Citoplasma Núcleo Nucleolos
μm
Megacarioblasto 4 a 24 No Basófilo Redondo Visible
visibles escaso Visible UFC-Meg
Promegacariocito 14 a 30 Pocos Mas de color Lobulado o
gránulos azul con
visibles muescas
Megacariocito 16-56 Más Abundante de Multilobulado Sin
gránulos color rosado nucleolos
en el visibles
citopl.
Megacariocito 20-60 Muy Abundante Multilobulado Sin
Maduro granuloso rosado , zonas nucleolos
de visibles
demarcación
presentes
indistintamente
Trombopoyesis
En la periferie de megacariocito
se identifican pequeños
fragmentos (Plaquetas) Megacaricito
CMHP
LINFOPOYESIS
UFC-Lin
CARACTERISTICAS DE DESARROLLLO DE LOS LINFOCITOS
Célula Tamaño μm Gránulos Citoplasma Núcleo
Linfoblasto 10-18 Agranular Escaso y basófilo Redondo
Oval,cromatina laxa
Se aprecian 1 o 2
nucleolos. De color
azul pálido, membrana
nuclear densa
Prolinfocito 9 Agranular Azul claro Relación N/C más baja,
difícil de la cromatina nuclear se
distinguir en la encuentra frmando
MO grumos.
Presencia de nucleolos
Linfocitos Variabilidad de Granulos Azul cielo Núcleo redondo
tamaño azurófilos
LINFOPOYESIS
Enfermedades Hematológicas
Afectan a la MO = Alteración en la
producción normal de [Link]íneas.
Falla Primaria de las células Madre.
Reemplazo del tejido medular por otro
anormal.
Insuficiencia de los Factores
estimuladores.
Alteraciones de la Médula ósea
M. Normal Hiperplasia Medular Hipoplasia Medular
Aplasia Medular
HIPERPLASIA MEDULAR
La Médula roja normal logra responder a
estímulos y aumentar su actividad varias veces
más de su ritmo normal. Como resultado la M
roja se vuelve hiperplásica y sustituye
porciones de la médula amarilla grasa.
La hiperplasia se acompaña por hematopoyesis
inefectiva o aumentada.
HIPOPLASIA MEDULAR
Al contrario el tejido hematopoyético
puede ser inactivo o hipoplásico . Por
tanto las células grasas aumentan
proporcionando ablandamiento de la
médula.
APLASIA MEDULAR
La enfermedad mieloproliferativa , la cual
empieza como una enfermedad
hipercelular, frecuentemente degenera en
un estado de aplasia en la cual el tejido
hematopoyético es reemplazado por tejido
fibroso.
[Link]
[Link]
[Link]/atlas/doc/[Link]
EXAMEN DE MÉDULA ÓSEA
Dg. De Enfermedades
HEMATOLOGO
Cresta Iliaca
MÉTODOS AUTOMATIZADOS
CONTADORES HEMATOLÓGICOS
CONTADORES HEMATOLÓGICOS
• Contribuido de manera decisiva al
aumento de la rapidez y la fiabilidad del
recuento de las células sanguíneas.
• Los contadores hematológicos son equipos
de última tecnología que utilizan múltiples
aplicaciones físico químicas, que junto con
la informática nos permiten realizar los
análisis de los diferentes parámetros que
incluye el Hemograma.
• Todo análisis se realiza en cada muestra, sobre
la base de un análisis individual de 32.000
células, en un tiempo cercano al minuto, lo
que demuestra su alto grado de eficacia y
eficiencia, tanto la credibilidad del resultado
obtenido, como en la oportunidad del
resultado.
• semiautomatizados
• Totalmente
automatizados
• Se basan :la medida del tamaño u otras
propiedades físicas de las células
suspendidas en medio líquido
• Impedancia o resistencia eléctrica.
• Dispersión de luz o campo oscuro.
Entre los principios analíticos o tecnologías se
encuentran:
Citometría de flujo con tecnología dispersión de luz láser
polarizada en multiángulos, a través de un láser semiconductor
Detección por corriente directa o impedancia electrónica
Enfoque hidrodinámico de flujo laminar
Fotometría para hemoglobina.
IRF (Inmuno fluorescencia radial)
La utilización de estos principios analíticos
en los diferentes parámetros puede
resumirse así:
• La Impedancia Electrónica y Medición Volumétrica nos ayuda al análisis
de los glóbulos blancos, en el Análisis de los glóbulos rojos y plaquetas,
nos ayuda a calcular el Hematocrito.
La Espectrofotometría nos ayuda al análisis de la Hemoglobina
La Impedancia más la Citometría de flujo y más la Citoquímica nos ayuda
en la identificación de los leucocitos, y en la fórmula (5 diferenciales)
La Impedancia más la Citometría de Flujo más la Fluorescencia nos ayuda
en el análisis de reticulocitos con Inmunofluorescencia radial (IRF) y los
CD
• En el histograma
volúmenes celulares
representados en el
eje X graficado contra
un numero relativo
representado en el
eje Y
La intensidad de fluorescencia también puede ser medida. Esta
medida representa fluorescencia por célula en una población
seleccionada.
• Se deduce que: mientras mayor es la altitud alcanzada
por la curva en el eje de las abscisas, se grafica el
valor medio del volumen que se examina (VCM,
VPM) y que mientras más ancha sea la base de la
curva, se expresa la variación de distribución del
volumen de las partículas o anisocitosis (RDW,
PDW).
Causas de error en el recuento
automatizado de células
• Olvido : control periódico y el calibrado
diario de los instrumentos.
• En general, el error debido al propio
método de recuento electrónico, cuando
se realiza en óptimas condiciones, suele
ser inferior al 1%, pero puede
incrementarse por:
1.-Errores de extracción:
Dilución.
Hemoconcentración.
Coagulación parcial.
Hemólisis.
2-Mala homogeneización por agitación insuficiente
de la sangre.
3.-Uso de un diluyente incorrecto.
4.-Presencia de partículas extrañas en el diluyente
5.-Defectos en el sistema electrónico de recuento:
a) Lisis incompleta de los eritrocitos en el orificio de
leucocitos.
b) Presencia de agregados celulares a nivel del orificio de
recuento.
c) Obstrucción de los capilares u orificios de recuento.
d) Dilución incorrecta de la muestra por el líquido
diluyente.
e) Presencia de microburbujas, que son contadas como
células.
f) Contaminación por arrastre de un espécimen con el
siguiente.
g) Presencia de interferencias electrónicas y averías de
los componentes electrónicos del instrumento.
RECUENTO DE CÉLULAS EN CÁMARA DE
NEUBAUER
•. La concentración total de leucocitos
Ocasionalmente en el computo leucocitario, se debe
realizar también :
• Como comprobación / calibración.
• Comprobación de validez de cómputo electrónico
en pacientes con leucopenia profunda o
trombocitopenia.
• Para muestras con interferencias en computo de
plaquetas ( es decir eritrocitos muy microciticos)
• Como método de apoyo.
• Método para contar células en líquido
cerebroespinal
RECUENTO DE LEUCOCITOS
• Sangre con EDTA
• Dilución 1:20
• Reactivo solución de Türk (Acido acético
glacial al 3%). Homogeneizar la mezcla.
• Cargar la cámaras con un capilar o con
una micropipeta, evitar que queden
burbujas.
• Ubicar el reticulado de la cámara con
bajo aumento 10X
• Leucocitosis: Infecciones bacterianas,
Inflamación, intoxicación metabólica,
hemólisis, hemorragia, necrosis tisular,
ansiedad o estress, leucemia aguda,
después de un ejercicio extenuante, etc.
• Leucopenia: infecciones virales, anemia
aplásica, anemia megaloblástica,
leucopenia inducida por fármacos, SMD.
VALORES DE REFERENCIA
• Edad Recuento leucocitario/mm3
• Primera semana de vida 9000 – 34.000
• 1 semana a 2 meses 5000 - 20.000
• 2 a 12 meses 5000 – 17.000
• 12 meses a 3 años 5000 – 15.000
• 3 a 8 años 5000 – 13.000
• 8 a 15 años 5000 – 11.000
• 15 años a adulto 5000 –10.000
Contaje de leucocitos Corregido
• Los eritrocitos nucleados pueden contarse y no distinguirse
de los leucocitos.
• Detectan 5 o más eritrocitos nucleados / 100 leucocitos, en
la fórmula diferencial
Computo total x100
• . Computo de leucocitos verdaderos =
• 100 + Nº de NRBC
• Donde el Nº de NRBC= numero de eritrocitos nucleados
(eritroblastos)
• Informar el resultado como recuento leucocitario corregido
Eritroblastos
RECUENTO DE PLAQUETAS
• Sangre con EDTA.
• Diluyente Solución hipotónica de oxalato de
amonio en agua destilada induce hemólisis.
1:100
• Incubar 10-15 min. para permitir la hemólisis.
• Cargar la cámara de Neubauer con el
hemolizado y dejar que sedimenten las
plaquetas.
• Incubar 10-15 min en atmósfera húmeda.
• Efectuar el recuento en microscopio de fases
en el recuadro central
• Cálculo
Sumar las plaquetas contadas multiplicar
por 1000 mm3
• VALORES DE REFERENCIA
150 000-400 000 /mm3
• Comprobar plaquetas en
trombocitopenias muy graves ,plaquetas
gigantes , recuento automático no es
fiable.
Trastornos vinculados a cambios en las
concentraciones de las plaquetas
• Plaquetas Aumentadas (Trombocitosis)
Después de una esplenectomía, hemorrágia,
anemia por deficiencia de hierro, trastornos
mieloproliferativos.
• Plaquetas Disminuidas (Trombocitopenia)
Púrpura trombocitopénica inmunitaria, anemia
aplásica, anemia megaloblástica, SMD, leucemia
aguda
Plaquetas es SP.
Recuento de Glóbulos Rojos
• Sangre con EDTA
• Solución salina 0.85%
• Dilución 1:200
• Cuadro central
• Valores de referencia
• Hombres: 4.5 -5.9 /106μl
• Mujeres: 4.5 -5.1/106μl
Trastornos vinculados a cambios en las
concentraciones de Eritrocitos.
• Eritrocitos Aumentados:
Policitemia, trastornos mieloproliferativos,
deshidratación
• Eritrocitos Disminuidos.
Anemia, LA, SMD, hemorrágia, hemólisis.
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN
GLOBULAR O ERITROCITARIA (VSG o VSE)
• Mide la sedimentación de eritrocitos en su
plasma nativo.
VSG
• Un test no específico que es utilizado para
detectar un amplio rango de
enfermedades y monitorear el curso
evolutivo de enfermedades crónicas:
procesos inflamatorios crónicos (artritis
reumatoidea, polimialgia reumática y
tuberculosis) o la respuesta a la terapia:
• Desde el punto de vista físico, este
fenómeno depende:
• Tamaño de los GR
• Diferencia de densidad entre los GR y el
plasma
• Viscosidad del plasma.
• Temperatura.
Fases de la VSG
• 1) Formación del rouleux una fase donde
se produce la aglutinación de los GR,
caída en esta fase es lenta y corresponde
a los primeros 10 min.
• 2) fase de caída rápida los GR se
sedimentan a velocidad constante, 40 min.
• 3) Fase de compactación la VSG se
enlentece , los GR se acumulan en el
fondo del tubo. 10 min.
FASES DE LA VSG
Poco confiable en anemia falciforme o cuando hay
una marcada poiquilocitosis.
• Exceptuando los casos extremos ( poliglobulias o
anemias).
• VSG depende principalmente de las proteínas
plasmáticas, responsables de los cambios en la
membrana para que se produzca la adhesión
eritrocitaria.
• Las principales proteínas responsables de estas
alteraciones de los niveles de la VSG son el
fibrinógeno y las globulinas,( macroglubilinas).
Estas proteínas se encuentran muy elevadas en
casi todas las inflamaciones.
METODOLOGIA Wintrobe:
PROCEDIMIENTO.-
Extraer una muestra de sangre venosa con EDTA.
• Homogenizar
• Aspirar con la aguja de Wintrobe 2 ml de sangre.
• Llenar el tubo de Wintrobe hasta la marca 0.
• Colocar el tubo en la gradilla en forma vertical
durante una hora.
• Leer la longitud de la columna de plasma (mm)
situada por encima de los eritrocitos sedimentados.
El valor se expresa en milímetros durante la primera hora
(mm/h).
• Westergren: es menos sensible (ICSH).
• Sistemas semiautomáticos con soportes
especiales, pipetas de material plástico
desechable.
• Parecidos al sistema de Westergren, se
diferencian de éste por su carácter
cerrado (recogida de los especímenes en
tubos al vacío que incorporan una
cantidad precisa de anticoagulante).
METODOLOGIA WESTERGREN
Procedimiento
• Se extrae sangre directamente al tubo desechable con
anticoagulante que contiene un 3,8% de sodio
tamponada con solución de citrato (0.129mol / l) ,con la
proporción de mezcla de 1 parte de solución de citrato
de 4 partes de sangre.
• Homogenizar
• Colocar el tubo en la gradilla en posición vertical a ta
(18-25°C)
• Leer con una regla la longitud de la columna de plasma
(mm) situada por encima de los eritrocitos
sedimentados.
Materiales.
Wintrobe Westergreen Semiautomático
ta.(18-25º), sin exponer a la luz del sol directa, libre de vibraciones y
corrientes de aire, mantener exactamente 60 min.
• Ser realizado 2 hs a t a. , o dentro de las
6 hs si es mantenida a 4 C.
• Las determinaciones de VSG a 2 hs. o a
las 24 hs, demostró ser poco fiables y de
escasa significación clínica.
FACTORES QUE INFLUYEN EN LA
VSG Aumento Disminución
Hematológicos Anemia Policitemia
Macrocitosis Drepanocitosis
Aglutininas frías Microcitosis
Esferocitosis
Acantocitosis
Aumento de sales biliares
Leucocitosis
Proteínas Hiperfibrinogemia Hipofibrinogenemia
Disfibrinogenemia
Aumento globulinas (alfa, beta y gama)
Hipogammglobulinemia
Proteínas monoclonales
Heparina
Hipoalbubinemia
Otros factores Fiebre Hipotermia
Obesidad extrema Caquexia
Aumento de colesterol Ingestión reciente
Fallo renal Congestión cardíaca
Embarazo Aspirina
Edad avanzada Antiinflamatorios no
Infección esteorideos
Inflamación
Neoplasia
Factores técnicos Inclinación del tubo Vibraciones durante la
Heparina prueba
Coágulo total o parcial
Incorrecta dilución Proceso después de
4 horas
Aumento de la temperatura
de la muestra
Valores de Referencia :
Westergreen Wintrobe
Hombres 0-15 mm/h 0-8 mm/h
Mujeres 0-20 mm/h 0-15mm/h
Niños 0-10 mm/h 0-15mm/h
• Edad de 50 o más años
Hombres 1-20 mm/h
Mujeres 1-30 mm/h
ÍNDICES HEMATIMÉTRICOS
O ERITROCITARIOS
Facultad de Ciencias Médicas
Carrera de Laboratorio Clínico
MSc. Mercedes Tapia Cadena
Hematología I
Wintrobe 1929, para determinar, el
tamaño, contenido y concentración media
de hemoglobina de GR.
Útiles en la caracterización morfológica de
las anemias.
Computo de GR, Hb, Hto.
Volumen Corpuscular Medio (VCM)
Es el volumen medio de los GR .
HCT
VCM fl= -------- x 10
RBC
Normocitos Microcitos Macrocitos
Hemoglobina Corpuscular Media
(HCM)
Es el contenido medio de Hb por cada
eritrocito.
Hb
HCM (pg) = --------- x 10
RBC
Concentración de Hemoglobina
Corpuscular Media (CHCM)
Es la concentración media de Hb en un
volumen determinado de eritrocitos
concentrados. Hb
CHCM g/dl= ---------- x 100
HCT
CHCM : Normocrómica, Hipocrómica,
Hipercrómca .
Hipercrómica - esferocitos / disminuida de
superficie a volumen por pérdida de
membrana, pero no pierden cantidades
apreciables de Hb.
Ancho de distribución de glóbulos
rojos (RDW %) (ADE).
Amplitud de distribución de los hematíes.
Elevado / hematíes tamaño diferente (problemas
morfología).
Identificar Anisocitosis
homogéneo
Heterogéneo
VALORES DE REFERENCIA
Se indican los intervalos de referencia
para adultos.
VCM (FL) HCM(pg) CHCM(g/dl) ADE%
80-96 27-33 33-36 11.5-15
En una persona sana la variación es, no
mas de +- 1 unidad en cualquiera de los
índices.
Indices eritrocitarios y morfología
de los eritrocitos - enfermadades
relacionadas
RECUENTO DE RETICULOCITOS
Son eritrocitos inmaduros
Proporción de 5 a 10 por mil hematíes.
Su tamaño es el de los demás hematíes
Contiene ARN (ribosomas) formando un retículo
granulofilamentoso.
Colorantes vitales ( el azul brillante de cresilo o
el azul de metileno nuevo).
La cantidad de ARN es < cuanto más madura
es la célula.
Reticulocitos
Valora la actividad eritropoyética de la
médula ósea
Permanecen en la médula durante 2-3
días y terminan su maduración en 24 hs.
SP
Cuando una anemia se acompaña
(reticulocitosis) se considera regenerativa
Cuando el número es normal o disminuido
se denomina arregenerativa.
Interpretación de Resultados
El valor obtenido / válido concentración
normal de eritrocitos ST.
En una anemia / valor porcentual se
corrige.
Hto del
paciente
Reticulocitos corregidos (%) = reticulocitos observados (%) x
Hto
normal
(El hematocrito normal es el que le corresponde según edad y sexo)
Indice de producción Reticulocitaria
(IPR)
Respuesta MO / anema / Macrocitos
policromatófilos
La MO libera Retis antes del período de
maduración normal.
Mientras intensa la Anemia, mas temprana será
la liberación del Reticulocito.
IPR >3 aumento de actividad eritropoyética
medular (anemia regenerativa)
IPR <2 escasa actividad eritropoyética (anemia
arregenerativa)
Relación entre la respuesta
reticulocitaria y el grado de anemia
Hto Normal promedio
45%
Reticulocitos del paciente x Hto del paciente
IPR =
Período de maduración en días x Hto normal
Valor del Hematocrito Factor de corrección
(Maduración ) (días )
45 1
35 1.5
25 2
15 2.5
5 3
Metodología Reticulocitos
Tinción vital y microscopio óptico.
Recuento automatizado
Método de la tinción vital
Principio
Colorante Supravital tiñe los RNA residual,
Ribosomas y Mitocondrias precipitados en los
eritrocitos inmaduros.
Azul de metileno nuevo
Sangre total anticoagulada con EDTA
Mezclar en partes iguales,
incubar 5 min. a ta.
Hacer 2 extensiones y leer.
Tinción de los reticulocitos: Azul cresil Brillante
1. Es una tinción supravital, es decir, se hace mientras las células
aún están vivas.
Mezclar en partes iguales colocar 3 gotas de la solución colorante
en un tubo de hemólisis y otras 3 gotas de sangre total previamente
homogeneizda
2. Mezclamos suavemente .Introducir en el baño de agua a 37ºC
durante 5 minutos.
3. Pasado este tiempo volvemos a homogenizar y tomamos una
gota de la suspensión para depositarla en un porta.
4. Realizamos una extensión y dejamos secar al aire.
Recuento automatizado
Recuentos muy fiable de reticulocitos.
En los equipos semiautomáticos la sangre es
previamente incubada con el fluorocromo.
mientras que en los totalmente
automatizados no es necesaria la
incubación.
El fundamento de estos autoanalizadores
realiza un análisis cuantitativo del contenido
eritrocitario en ARN mediante citometría de
flujo y luz láser. fluorocromos : naranja de
tiazol o auramina.
Lectura de los Resultados
Observamos la extensión con el objetivo
de 100x.
Los hematíes se habrán teñido de color
verde amarillento y los reticulocitos se
diferencian porque presentan en su
interior unos hilos finos de color azul.
Se deben contar entre 500 a 1000
hematíes en total en una zona donde
éstos no se superpongan
El cálculo del porcentaje de reticulocitos
es el siguiente:
% reticulocitos = Nº de reticulocitos
contados / Nº de hematíes contados x 100
Se expresa en porcentaje (%)
Coloración supravital
Coloración MGG
Valores de Referencia
Valor relativo Valor absoluto
(%) (x109 /L)
Recién nacido 3,2-6,0 110-330
(sangre de cordón)
Niños y adultos jóvenes 0,2-2,2 25-89
(4 a 19 años)
Adultos (20-50 años)
Mujeres 0,2- 2,5 25-86
Hombres 0,5-2,8 32-97
Variaciones patológicas
Disminución de la cifra de reticulocitos (reticulocitopenia)
Aplasia medular
Anemias carenciales intensas (megaloblástica y
ferropénica)
Anemias inflamatorias
Aumento de la cifra de reticulocitos (reticulocitosis)
Período neonatal
Anemias hemolíticas
Anemias posthemorrágicas
Anemias carenciales en fase de tratamiento
Mieloptisis (infiltración neoplásica en la médula ósea)
Mielofibrosis idiopática
Limitaciones
1.- las transfusiones recientes de sangre,.
El mal manejo, la contaminación o la mala
refrigeración.
Las inclusiones en los G. rojos. Cuerpos
de Heinz, siderocitos, cuerpos de Howell –
Joly, se pueden confundir con
reticulocitos, e incrementar el resultado.
Confirmar con tinción Wrigth.
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL
ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLINICO
III Semestre
HEMATOLOGIA I
Lic. Mercedes Tapia .
MSc. en Ciencias de Laboratorio
Clínico.
Introducción
La sangre como la esencia de la vida.
Hipócrates 400 a.c 4 humores; bilis
negra , sangre , flema y bilis amarilla.
Fahraeus, siglo XX. 4 capas : coágulo
gelatinoso rojo oscuro, una capa delgada
de células rojas oxigenadas, una capa de
células blancas y plaquetas , suero
amarillento.
La composición de la sangre no se descubrió sino
hasta la invención del microscopio.
LeeuwenhoeK (1632-1723) descubrió y midió
minuciosamente los eritrocitos.
Los leucocitos y plaquetas cuando las lentes del
microscopio mejoraran.
Kira Vierordt 1852, Rtdos cuantitativos.
1920- Métodos Optimizados.
1930- Avances Fiosiológico. Órganos
hematopoyéticos - anemias y trastornos de la
sangre.
HEMATOLOGIA
SANGRE: fluido rojo, viscoso
bombeado corazón
recorre el organismo – [Link]
órganos y tejidos.
SANGRE
Plasma : 55% ST.
90% agua.
10 % proteínas,
enzimas, electrolitos.
Elementos Formes
GR, GB, PQts
GR: 45%.
GB y PQts : 1%.
HEMATOLOGIA
Estudio de las células sanguíneas y
coagulación.
FUNCIONES
Respiratoria: Transporte O2 de los pulmones y
recoge dióxido de Carbono.
Inmunológica: defensa.
Excretora: Recoge residuos, desechos y elimina
Transportadora: secreciones, hormonas.
Reguladora: Equilibrio, H2O, tº
Hemostática: preserva el Sist. Circulatorio, limita
la pérdida de sangre.
PROPIEDADES FISICAS
Color : rojo hemoglobina
Sangre arterial : con oxihemoglobina , rojo claro
Sangre venosa , con hemoglobina reducida,
(pierde oxigeno ) color rojo negruzco.
Color del plasma: Amarillento por bilirrubina.
Plasma Ictérico : aumentan pigmentos biliares
(ictericia).
Plasma opalescente o lechoso : quilomicrones
( lipoproteínas) , hiperlipemias (triglicéridos)
PROPIEDADES FISICAS
Opacidad. Los GR reflejan la luz, (hemólisis)
Densidad ST concentración - eritrocitos 1.050
Densidad Plasma concentración - proteínas
1.024
pH: 7.36 SV. - 7.42 SA.
Volumen: (peso, edad, sexo, estatura)
Mujeres: 4.5- 5.5 L. Hombres 5-6 L
Viscosidad : Número o tamaño celular con
relación al plasma.
DESCRIPCION DE LAS
CELULAS SANGUINEAS
Etritropoyesis
Eritrocito – GR- Hematíe
Células anucleadas
Mas numerosas
5 000 000 / mm3
Forma : Bicóncavo
Tamaño :7.5 μm
diámetro
Volumen: 80 - 100 fl.
Vida media: 100-120
días
Función: transportar O2
Granulopoyesis
GLOBULOS BLANCOS- LEUCOCITOS
Células nucleadas.
8-20 μm diámetro.
Mueven :seudópodos.
mecanismo
(diapédecis).
Función: Defensa del
organismo.
5000- 10000 / mm3
Trombopoyesis
PLAQUETAS O TROMBOCITOS
Fragmentos citoplasmáticos
anucleados.
Se desprenden membranas
externas de los
megacariocitos.
Forma : disco
Tamaño: 3 μm de diámetro,
Peso: 10 pg de peso.
Concentración de 150 000 a
450000 /mm3
Vida media 7 a 10 días
Función: Hemostasia
Obtención y
manipulación de una
muestra de sangre en el
laboratorio
de Hematología
Bioseguridad en el laboratorio
La sangre es un material potencialmente
patológico
Usar guantes y Mandil
Atención al manipular jeringa y aguja
Utilizar contenedores resistentes
Avisar inmediatamente al supervisor en caso de
accidentes
No utilizar sangre capilar en pacientes con enf.
infecciosas
No comer ni fumar en el lugar de trabajo
Evitar aerosoles
No pipetear sangre con la boca
Tener a mano Cloro al 1%
Factores preanalíticos
No biológicos
Biológicos
Factores no biológicos
Elección del anticoagulante
Identificación de la muestra
Condiciones de conservación
Factores biológicos
Edad Postura
Sexo Hábito de fumar
Raza Hora del día
Ingesta de Ciclo menstrual
alimentos Embarazo
Ingesta de Actividad previa
alcohol Estrés
Ingesta de
medicamentos
La estandarización del
procedimiento reducirá errores
debidos tanto a factores no
biológicos como biológicos
Preparación del paciente
El extraccionista debe ganarse la
confianza del paciente y crear
un entorno agradable que
reducirá la ansiedad del
paciente e incrementará su
eficiencia y precisión
Preparación de la muestra
Elección del tipo de muestra
adecuada
Selección y preparación del material
adecuado
Recolección
Manipulación (conservación:
tiempo y temperatura)
Transporte
Obtención de una muestra de
sangre para Hematología
Sangre venosa: es la muestra más usada
en hematología
Sangre capilar:
En casos en que no puede ser obtenida una
muestra de vena
No son recomendables cuando se trabaja con
portadores de enfermedades transmisibles
Obtención de una muestra de sangre
para Hematología
En pacientes obesos o en niños, la vena
yugular externa. (ocasionalmente).
En casos excepcionales, el médico puede
extraer sangre de la vena femoral, otras
venas profundas o de las arterias.
EXTRACCIÓN DE SANGRE EN
SITUACIONES ESPECIALES.
Evítar la extracción de sangre del brazo donde el paciente tenga colocada una vía
de perfusión, la muestra obtenida estará diluida.
Si no hubiera otra opción (vías en ambos brazos por ejemplo), y siempre que sea
posible, cierre la perfusión y espere al menos dos minutos para realizar la
extracción.
La extracción de sangre de un catéter debe asegurar que ni la solución perfundida ni
el uso de heparina van a interferir en el resultado del análisis.
Siempre debe desecharse un volumen de al menos dos o tres veces el de la luz del
catéter, si la extracción es para un estudio de coagulación no debe usarse este
método si no es en el momento de la implantación de la vía.
Se recomienda utilizar un adaptador de vacío para el llenado de los tubos.
La obtención de sangre arterial para estudios hematológicos no
está aconsejada.
Tener cuenta que la jeringas de extracción arterial, están
heparinizadas, por lo que no pueden usarse para estudios de
coagulación.
No obstante, si se dan situaciones, en estos casos debe
informarse al laboratorio de las características de la extracción
y de la imposibilidad de realizarla de otra forma.
Sangre venosa
Material Básico
Guantes
Agujas
Jeringas
Torniquetes
Antisépticos
algodón
Contenedor
Cinta adhesiva
Sangre venosa
Técnicas -Sangre venosa
Mariposa, Jeringuilla , Sistema al vacío.
Recursos, habilidad del manipulador, tipo de examen a realizar, edad del
paciente.
Procedimiento de venopunción
1.-Recepción de la orden 13.-Inspeccionar la aguja y demás
2.-Identificación del paciente equipo
3.-Verificación de las 14.-Llevar a cabo la punción
condiciones del paciente 15.-Liberar el torniquete
4.-Preparar material necesario 16.-Asegurar que la mano del
5.-Tranquilizar al paciente paciente esté abierta
6.-Posición del paciente 17.-Colocar gasa (algodón) sobre el
7.-Verificar el pedido y la sitio de punción
selección de tubos 18.-Remover la aguja
8.-Rotulado de los tubos 19.-Vendar el brazo del paciente
9.-Asegurar que la mano del 20.-Llenado de los tubos
paciente esté cerrada 21.-Descartar la jeringa (aguja)
10.-Seleccionar el sitio de 22.-Registrar el tiempo de recolección
punción
23.-Enviar tubos apropiadamente
11.-Limpiar el sitio rotulados al laboratorio apropiado
12.-Aplicar el torniquete por no
más de 1 min
Hematoma
Punzar sólo la pared superior de la vena
Remover el torniquete antes de quitar
la aguja
Usar las venas de mayor calibre
Asegurar que la aguja penetró
adecuadamente por la pared superior
de la vena
Aplicar una leve presión sobre el área
de punción
Hemólisis
No usar agujas muy pequeñas
No tomar sangre de los hematomas
Asegurarse que la aguja esté ajustada a la
jeringa
El émbolo no debe estar excesivamente
ajustado
Invertir la muestra junto a los aditivos
entre 5 y 10 veces
Sangre capilar
Lóbulo de la oreja o dedo / adultos
Talón en los recién nacidos
Muestra buena / sangre fluye libremente
Si dedo, oreja o talón - frío o cianótico:
recuentos de GR, GB y hemoglobina /
más altos que en sangre venosa
Valores comparables - zona irrigada y
tibia
En todos los casos / descartar primeras
gotas y recoger cuando la sangre fluya
libremente.
NIÑOS
1. En niños mayores de 6 meses, se recomienda
hacer la extracción del brazo como en adultos.
2. En el caso de niños menores de 6 meses, se
procederá a extraer la muestra del talón con una
lanceta descartable.
3. Desinfectar con un trozo de algodón con
alcohol, dejar evaporar y punzar con la lanceta.
4. Limpiar la primera gota y dejar gotear la sangre
en el tubo con anticoagulante.
5. Secar la zona con un trozo de algodón seco y
una vez que no haya sangrado, colocar una
curita o apósito.
Visor Infrarrojo
GRACIAS
FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS
CARRERA DE LABORATORIO
CLINICO E HISTOTECNOLOGICO
El Laboratorio en
Hematología
Mercedes Tapia Cadena
Lic. y MSc
HEMOGRAMA
Medición de los parámetros hematológicos
representado por:
» Hematocrito
» Hemoglobina
»Recuento de glóbulos rojos
»Índices hematimétricos
» Recuento total y diferencial de leucocitos
» Recuento de plaquetas
Hematocrito
Fundamento
HEMATOCRITO
»Relación entre el volumen ocupado por los glóbulos
rojos y el volumen sanguíneo total en una muestra de
sangre capilar o venosa.
» Se determina por microcentrifugación o, por cálculo en
Contadores automatizados.
» Se expresa como fracción o como porcentaje.
HEMATOCRITO
Diagnóstico de anemia.
Método de referencia para calibrar los sistemas
sanguíneos automatizados.
Indicativo de la exactitud de la medición de Hb.
Hematocrito
Descenso hto /Anemia
Aumento hto/ Policitemia
PROCEDIMIENTO
Microhematocrito
Se utilizan tubos capilares heparinizados o no,
(sangre entera anticoagulada o sangre capilar).
Llenar el tubo capilar hasta tres cuartas partes.
El llenado de los tubos se realiza por capilaridad
Sellar con plastilina.
Centrifugar 5 min. 12.000 rpm.
Leer el Hto.
Causas de error
Las fugas de muestra producen una disminución en el valor, al
perderse mayor proporción de células que de plasma.
El uso de anticoagulantes líquidos provoca un error por
dilución de la muestra
En muestras capilares, no descartar la primera gota produce
una mezcla con los líquidos tisulares que provoca
hemodilución.
En muestras de sangre venosa, el torniquete colocado durante
un cierto tiempo produce hemoconcentración.
La lectura no inmediata de los capilares, provoca que el
sedimento de hematíes vaya tomando forma de bisel si el
capilar permanece en posición horizontal.
Hematocrito
Desciende : anemias e hipovolemia
Estados fisiológicos : embarazo.
Elevado : Policitemias
Hemoconcentración de los estados de shock
Altura
Contaminación ambiental
Cigarrillo.
Hematocrito
Alteraciones Clínicas:
Hiperglucemia. Vol. eritrocito Hto
Hipernatremia
No es un valor fidedigno inmediatamente a una
transfusión o hemorragias.
VALORES DE REFERENCIA
Recien nacido: 45-65%
Niños de 1 año : 30-40%
Niños entre los 3 y 5 años : 36-43%
Niños de 5 -15 años : 37-45%
Mujeres : 37-47%
Hombres: 40-55%
Hemoglobina
La hemoglobina (Hb) es una proteína globular,
que está presente en altas concentraciones en
lo glóbulos rojos y se encarga del transporte
del oxígeno de los pulmones a los tejidos y del
bióxido de carbono desde los tejidos hacia los
pulmones para ser excretados.
Una molécula de globina
consta de dos pares de
cadenas polipeptídicas
(globina) y cuatro grupos
prostéticos hemo,
conteniendo cada uno un
átomo de ión ferroso.
El hemo se combina
reversiblemente con una
molécula de O2 o [Link]
cadenas de globina, alfa,
beta, gamma , delta, se
presentan en pares.
Reacciones de la hemoglobina
Del estado en que se encuentra la Hb. :
Oxihemoglobina (Hb- O2).
Desoxihemoglobina o (Hb red): hemoglobina libre de
oxígeno /disposición de unirse O2 o CO2
Carbaminohemoglobina (Hb- CO2 )
Carboxihemoglobina: (Hb- CO); inusual /muerte
Metahemoglobina: Cuando el hierro se oxida a estado
férrico, así no se une al O2
Factores que alteran la afinidad
de la Hb por el O2
Aumento de tº normal
disminución del pH medio.
Aumento de la concentración del CO2 .
Aumento del 2,3 DPG (2,3 difosfoglicerato),
un metabolito de la glucólisis.
Tipos de hemoglobina
Las hemoglobinas
Gower I, Gower II y
Portland / embrionarias
aparecen durante el
primer trimestre de Nominación Composición Proporción
adultos (%)
Proporción
neonatos (%)
gestación. α2β2
HbA 97 20
HbA2 α2δ2 2.5 0.5
HbF α2γ2 <1 80
*Gower II. 50 -60%
[Link]
Normalmente existen diversas especies de HbA
modificada; A1a1, A1a2, A1b y A1c.
Hb [Link] postraduccionales con
diversos azúcares (glucosa-6-fosfato)
Cuantitativamente Hb A1c. constituye una medida
útil del control de los pacientes diabéticos durante los
días o semanas previos a la toma de la muestra
.
Metabolismo de la hemoglobina
Hb GR Globina Aminoácidos Reutilizada en la síntesis de
proteínas
Macrófago
MO, Bazo, Hígado Hem
Fe MO, Transfiere Síntesis de GR, Ferritina
Biliverdina
Biliberdina reductasa
Bilirrubina I o no conjugada
Albumina+ Bilirrubina
HIGADO/Hepatocitos
UDP Glucoronil transferrasa
Diglucurónido de Bilirrubina D. o conjugada
Bílis
Intestino abs. enterocitos
Enzimas bacterianas
Urobilinógeno
Riñón Estercobilina
Orina Heces
Valores de referencia
Hombres: 13.8 -17.2 g/dL
Mujeres : 12.1 -15.1 g/dL
DETERMINACION DE LA FORMULA
LEUCOCITARIA:
RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS
Lic. Mercedes Tapia .MSc
Carrera de Laboratorio Clínico
Hematología I
FORMULA LEUCOCITARIA
• Recuento relativo de los distintos tipos
leucocitarios. Su interpretación se debe realizar
con la información del recuento absoluto.
• Frotis coloreado por May Grünwald-Giemsa
• 1º bajo aumento , gota de aceite de inmersión,
con un aumento de 100X para comenzar el
recuento.
• No contar 2 veces la misma célula.
FORMULA LEUCOCITARIA
• UTILIDAD .
• Detectar enfermedades
• Seguimiento de la evolución de
enfermedades infecciosas
• Los cuadros mieloproliferativos y
linfoproliferativos.
Cálculo de la lobularidad
• Los modernos autoanalizadores
proporcionan Indice de lobularidad (IL)
• El IL normal entre 1.9 y 3
• IL < 1.9 desviación a la izquierda
• IL > 3 desviación a la derecha.
Interpretación de resultados
• D. Izq. Neutrofilia – Neutropenia
• D. Izq Neutrofilia inf. Agudas (apendicitis,
sepsis, neumonía ,etc)
• D Izq. Neutropenia otras Inf (fiebre
tifoidea, brucelosis,etc.)
• D Derecha proceso patológicos ( anemias
megaloblásticas. Agonía
Clasificación de los neutrófilos
según Shilling.
• Formas juveniles:
Mielocitos, Metamielocitos, neutrófilos en
banda o cayados
• Formas maduras.
• Neutrófilos segmentados. (PMN)
Clasificación de los neutrófilos
según Shilling
• una forma juvenil por unas 16 formas de
neutrófilos (1/16).
• Aumento del % de juveniles D. Izq.
• Aumenta el % de segmentados D. Der.
• Desviación degenerativa a la izquierda
(jóvenes, con características anormales).
Clasificación y morfología de los
leucocitos
• Actualmente, la cantidad de lóbulos
regulada por el numero de mitosis.
Numero definitivo transición de C a Seg.
• D. Izq. + Mielocitos, metamielocitos,
mieloblastos, blastos.
CLASIFICACION GENERAL
• Mielocitos,
• Neutrófilo juvenil o metamielocito
• Granulocitos • Neutrófilo Segmentado o PMN
específicos, MO. • Eosinófilo
función fagocítica. • Basófilo
• Monocitos (SFM) Fagocitosis
• Linfocitos gánglios linfáticos,
• Agranulocito bazo
• Inmunidad L T (celular )
inespecíficos
L B (Humoral
prod. Ab)
Morfología de los leucocitos en sangre periférica normal
Célula Núcleo Cromatina Granulación Citoplasma Diámetro %
μm
Juvenil o Reniforme, Condensada Pequeños Rosado o 12-18 0-1
Metamielocito ovalado o de filamentos específicos finos celeste pálido
frijol gruesos y regulares de
color rosado,
escasos
azurófilos
presentes
En Banda o Herradura Gruesa Picnótica Específicos Rosado pálido 9-15 2-4
Cayado en los extremos finos y regulares
del núcleo pequeños,
abundantes de
color rosa
Segmentados 2-5 lóbulos Condensada Específicos Rosado pálido 9-15 54-66
unidos por pequeños, finos
filamentos y regulares de
color morado
oscuro
Eosinófilo Bilovulado a Gruesa escasos Gruesa esférica, Celeste pálido 12-17 1-4
veces 3 lóbulos grumos y áreas regular, color
o en cayado cromófobas rojo naranja,
ocupa todo el
citoplasma.
Basófilo Reniforme o Gruesa escasos Forma número y Color rosado 10-14 0-1
bilovulado grumos tamaño
variables, color
violeta
negruzco. A
veces cubren el
núcleo
Monocito Irregular forma Condensada en Finos, rojo Azul grisáceo 12-20 2-8
de herradura o bandas alargadas grisáceo, a veces opaco, Promedio
de frijól gránulos irregular, de 18
azurófilos vacuolas
frecuentes,
pseudópodos
ocasionales
Linfocitos Redondo o con Placas densas, azurófilos Azul cielo Linfocitos 20-40
muesca condensación Pequeños
periférica 7-10
Linfocitos
Grandes 11-
16
Metamielocito o Juvenil
• Más pequeños que los
mielocitos. Se inicia la
lobulación del núcleo
hendidura.
• En el citoplasma finaliza la
síntesis de granulación.
• Carece de actividad mitótica.
Célula Núcleo Cromatina Granulación Citoplasma Diámetro %
μm
Juvenil o Reniforme, Condensada Pequeños Rosado o 12-18 0-1
Metamielocito ovalado o de filamentos específicos celeste
frijol gruesos finos y pálido
regulares de
color rosado,
escasos
azurófilos
presentes
CAYADO o EN BANDA
Libera en virtud de la emergencia,
antes de terminar su maduración
Célula Núcleo Cromatina Granulación Citoplasma Diámetro %
μm
En Banda o Herradura Gruesa Específicos Rosado 9-15 2-4
Cayado Picnótica en finos y pálido
los extremos regulares
del núcleo pequeños,
abundantes
de color rosa
NEUTROFILO SEGMENTADO
• Función principal
defensiva, consiste :
• Ingerir (gránulos
primarios;digestión
intracelular) y destruir
(gránulos secundarios
secreción de moléculas
degradadoras y
reguladoras)
microorganismos
invasivos.
NEUTROFILO POLIMORFONUCLEAR
• Citoplasma posee los
órganulos celulares habituales.
• Lo más destacado es la
presencia de granulación.
Contiene gránulos lisosomales
cargados de enzimas.
• Están en relación con la
función de la célula. Los
neutrófilos son activamente
fagocíticos.
Célula Núcleo Cromatina Granulación Citoplasma Diámetro %
μm
Segmentados 2-5 lóbulos Condensada Específicos Rosado 9-15 54-66
unidos por pequeños, pálido
filamentos finos y
regulares de
color morado
oscuro
CORPUSCULO O CUERPO DE BARR
• pequeño apéndice en
forma de palillo de
tambor representan el
cromosoma X
quiescente o inactivo.
1 a 5% de los PMN de
las mujeres.
EOSINOFILOS
• Variación diurna más altas en
la mañana y más bajas en la
tarde. primeros tres meses de
vida, es 3 > que el adulto.
• Reacciones alérgicas, inf.
parasitarias e infl. crónica.
Célula Núcleo Cromatina Granulación Citoplasma Diámetro %
μm
Eosinófilo Bilovulado a Gruesa escasos Gruesa Celeste pálido 12-17 1-4
veces 3 grumos y áreas esférica,
lóbulos o en cromófobas regular, color
cayado rojo naranja,
ocupa todo el
citoplasma.
Proteínas de los gránulos de los
eosinófilos
• Proteína básica mayor (MBP)
Citotóxica para parásitos y helmintos libera
histaminas.
• Proteína catíonica eosinofílica (PCE)
Capaz de matar cel. Mamíferos y no
mamíferos, libera histaminas.
• Neurotoxina derivada de eosinófilos(NDE)
• Peroxidasa eosinofílica (EPO)
BASOFILOS
• Menos abundantes en SP. • Hidrosolubles, membrana
• Son los granulocitos más externa delicada
pequeños.
• funcionan como mediadores de • NO SON FAGOCITICAS
las respuestas inflamatorias en
especial de la
hipersensibilidad.
• Basofilia malignidad hemática
Célula Núcleo Cromatina Granulación Citoplasma Diámetro %
μm
Basófilo Reniforme o Gruesa Forma Color 10-14 0-1
bilovulado escasos número y rosado
grumos tamaño
variables,
color violeta
negruzco. A
veces cubren
el núcleo
BASOFILO
• Poseen gránulos de dos clases :
• Gránulos azurófilos Lizosomas ---
hidrolazas ácidas.
• Gránulos Específicos (Histaminas, heparán
sulfato,heparina, leucotrienos.
• Son los responsables
del inicio de la
respuesta alérgica.
• Participación en la
respuesta inmunitaria
con la liberación de
histamina, serotonina
en bajas () y otras
sust. Químicas.
MONOCITOS
• más grande SP. Son
células fagocíticas con
gran capacidad
bactericida. reacción
Célula
inflamatoria
Núcleo Cromatina Granulación Citoplasma Diámetro %
μm
Monocito Irregular Condensada Finos, rojo Azul 12-20 2-8
forma de en bandas grisáceo, a grisáceo Promedio
herradura o alargadas veces opaco, de 18
de frijól gránulos irregular,
azurófilos vacuolas
frecuentes,
pseudópodo
s
ocasionales
MACROFAGOS
• Los monocitos al pasar a los tejidos se
transforman en macrófagos fijos y libres, que
experimentan cambios morfológicos y
metabólicos.
• Fijos :células de kupffer - hígado, mesangiales -
riñon , macrófagos alveolares - pulmón,
microgliales-cerebro, etc.
• Libres macrófagos pleurales, peritoneales y los
que se acumulan en los sitios de inflamación.
LINFOCITOS
• LT60-80% LB 10-20%
• la mayoría de los linfocitos son pequeños.
marcadores biológicos para la identificación
celular. “CD”
• Linfocitos Activados, reactivos.
• Inf. virales herpes, rubéola, CMV,
mononucleosis infecciosa por virus de
Epstein Barr.
Célula Núcleo Cromatina Granulación Citoplasma Diámetro %
μm
Linfocitos Redondo o Placas densas, azurófilos Azul cielo Linfocitos 20-40
con muesca condensación Pequeños
periférica 7-10
Linfocitos
Grandes
11-16
VARIACION FISIOLOGICA ABSOLUTA Y RELATIVA
DE LOS LEUCOCITOS EN ADULTOS NORMALES
• Determinar si un paciente presenta un
aumento o un descenso significativo de un
tipo celular en particular.
VALORES VALORES Aumentados Disminuidos
ABSOLUTOS RELATIVOS
%
/mm3
Mínimo Máximo
Total Leucocitos 5 - 10 5.000-10.000 Leucocitosis Leucopenia
Juveniles 0 - 100 0-1 Des. Izq. -
Cayados 100 - 400 2-4 Des. Izq. -
Segmentados 2.700 - 6.600 54-66 Neutrofilia Neutropenia
Eosinófilos 50 - 400 1-4 Eosinofilia -
Basófilos 25 - 100 0-1 Basofilia -
Monocitos 100 - 700 2-8 Monocitosis -
Linfocitos 2.000 - 4.000 20-40 Linfocitosis -
VALORES DE REFERENCIA
No hay variación de la fórmula según el sexo, pero
sí según la edad. (variación fisiológica)
• Nacimiento: 70% de neutrófilos.
• Primera semana: 50% de neutrófilos y 50% de
linfocitos.
• Segunda semana: 65% de linfocitos y 25% de
neutrófilos
• 3-4 años: 50% de linfocitos y 50% de
neutrófilos.
• 10-12 años: valores de referencia del adulto.
Fórmula leucocitaria
• Extensiones de la capa de blancos.
• Evitar los campos en los que los glóbulos blancos y rojos
estén aglutinados o deformados y las zonas en que
existen deficiencia de coloración.
• Realizar un examen general de las células sanguíneas.
• a)Glóbulos rojos. forma , tamaño, y grado de
hemoglobinización.
• b)Plaquetas : forma, tamaño, cantidad y agregación.
• c)Leucocitos: maduración, y anomalías ( Granulación)
• una relación numérica normal, entre los Glóbulos rojos ,
plaquetas y leucocitos es aproximadamente 600:30:1.
• En caso de encontrarse eritroblastos se les
contará simultáneamente , pero
independientemente de los leucocitos y se
los reportará en número de eritroblastos
por cada 100 leucocitos.
Reglas de maduración y
diferenciación
• Tamaño :Inmadura Grande- madura pequeña
• Forma : Inmadura Redonda u ovalada- madura
irregular
• Color: Inmadura Rojizo púrpura - Madura
Púrpura oscura inclusive violeta
• Cromatina: Inmadura fina reticular - Madura
gruesa densa
• Nucleolos: Inmadura presentes - Madura
Ausentes
Transformaciones citoplasmáticas
• Color: Inmadura azul ,basófilo intenso
Madura: azul ,celeste oscuro, celeste pálido, por
último en la célula madura acidófila , color
rosado.
• Granulación: Inmadura no existe granulaciones
Madura - inespecíficas
específica de mayor tamaño.
• Tamaño :Inmadura - pequeño
Madura - aumenta .
Cuando considerar un conteo de
más de 100 células en el diferencial
• CGB > 35.0 x 109/l
• Linfocitos > 40% o < 17%
• Monocitos > 12%
• Blastos ( primera vez en un paciente)
FORMULA LEUCOCITARIA
Rango de normalidad:
- Neutrófilos:......%
- Linfocitos:....... %
- Monocitos:....... %
- Eosinófilos:.......%
- Basófilos:........ %
Leucopenia < 5000/mm3
LEUCOCITOSIS > 10.000/mm3
Neutrófilos Linfocitos Monocitos Eosinófilos Basófilos
Infecc. Bact. Infecc. viral Infecc. crónica Infecc. parasitarias Infecc. virales
Autoinmune Mononucleosis Recuperación m.o. Alergia SMP
Leucemia mieloide Leucemia linfatica Leucemias Leucemia
Inflamación Vasculitis
Sd. hipereosinofílico
Cifra total de leucocitos
10.02 103L LEU
% 103L
89.7 NEU 8.98
6.0 LINF .60
1.9 MONO .19
1.2 EOS .12
.5 BASO .05
.8 LUC .08
Fórmula leucocitaria
GRAFICAS DE DISTRIBUCIÓN
LEUCOCITARIA
N
COMPLEJIDAD
M E
PEROXIDASAS
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL
ECUADOR
CARRERA DE LABORATORIO
CLINICO
ANTICOAGULANTES
[Link] Tapia .
MSc. Ciencias de Laboratorio
Clínico.
ANTICOAGULANTES
En medicina y farmacia, un anticoagulante
es una sustancia endógena o exógena que
interfiere o inhibe la coagulación de la
sangre, creando un estado prohemorrágico.
Anticoagulantes
Sangre total (hemograma)
Plasma (hemostasia)
Los anticoagulantes deben:
• Respetar la morfología eritrocitaria
• No alterar el tamaño
• No producir hemólisis
• Evitar la agregación plaquetaria
• Asegura la conservación de los elementos
formes por 24 horas si se mantiene a 4ºC
Inhibir el crecimiento microbiano
Anticoagulantes
Elección/de acuerdo a la determinación
Proporción adecuada (sangre-
anticoagulante)
Actúan fijando Ca2+ (excepto heparina-
inhibe la acción de la trombina)
Sangre anticoagulada/procesamiento
rápido (se deteriora con facilidad incluso
a 4ºC)
Anticoagulantes
De acuerdo a las determinaciones a realizar:
Recuentos celulares: Acido
Etilendiaminotetracético EDTA
preferentemente
ERS y pruebas de coagulación: citrato
trisódico
Bancos de Sangre: fundamentalmente ACD
Anticoagulantes
EDTA - Autoanalizadores
Sal (C10H16N2O8) o sal disódica, dipotásica o tripotásica (Na
o K)
Actúa como quelante sobre el Ca 2+ , al fijarse impide la
coagulación.
Recuento (GR, GB, plaquetas) y determinación de
hemoglobina
El ICSH (International Council for Standardization in
Hematology) recomienda- sal dipotásica (1,5+0,25 mg/ml de
sangre)/ más soluble (1650 g/l) que la sal disódica (108g/l)
La sal dipotásica es más soluble en sangre
Exceso EDTA-cambios degenerativos en GR (crenados), GB y
plaquetas
Anticoagulante
EDTA
Frotis sanguíneo hasta 2 hs. después de la
extracción de la muestra.
Impide la aglutinación de las plaquetas.
Una mayor cantidad de anticoagulante,
disminuye Hto.
Un exceso de sangre con relación al
anticoagulante, forma de microagregados.
HEPARINA SÓDICA
o ( HEPARINA DE LITIO)
Anticoagulante fisiológico.
Neutraliza trombina.
Proporción utilizada: 10-20 IU /ml de sangre
No altera el tamaño de GR y GB
Utilidad.
Hto, Hb, CGR, CGB
» No se utiliza:
Extendidos de sangre-MGG (fondo de azul)
Recuento GB (agregación)
Pseudovacuolización celular.
CITRATO DE SODIO
Citrato trisódico (32 g/l)
Actúa impidiendo que el calcio se ionice, evitando así la
coagulación.
Pruebas de Coagulación: 9 vol. Sangre/ 1 vol. Citrato.
(0,5 mL de anticoagulante para 4,5 mL de sangre total).
ERS: 4 vol. sangre/1 vol. Citrato (MÉTODO DE
WESTERGREN).
No se utiliza:
Modifica la morfología celular.
TRANSFUSION
ACD (Acido-citrato-dextrosa)
CPD (Citrato-fosfato-dextrosa)
Anticoagulante: Acido Cítrico 0.9 g, Citrato
disódico 2 g, Dextrosa 2 g, H2O destilada 120 ml
Proporción utilizada: 4 vol. de sangre/ 1 vol. de
ACD
En Bancos de Sangre
(conservar unidades de sangre) 21 días .
Estudios metabólicos eritrocitarios por permitir
una buena conservación de los hematíes. ACD
Efecto de la conservación de las
muestras con anticoagulante
(EDTA)
Alteraciones morfológicas
Alteraciones cuantitativas
Alteraciones morfológicas
Glóbulos blancos
Hasta 1 h a t.a. (18-25°C) no se distinguen cambios
A las 3 hs a t.a. / cambios / tipos celulares distinguibles
A las 12-18 hs a t.a./ cambios muy importantes:
» Polimorfonucleares: núcleo- color homogéneo, lóbulos
separados, vacuolas citoplasmáticas, borde celular indefinido
» Células mononucleares: vacuolas en el citoplasma, núcleo-
lobulación irregular
» Linfocitos: núcleo lobulado, con coloración homogénea,
vacuolas en citoplasma
Alteraciones morfológicas
Glóbulos rojos
A las 6 hs a t.a. /cambios no apreciables
> 6 hs a t.a./ aumenta la presencia de glóbulos
crenados y esféricos
Todos los cambios se retrasan si se
conserva la sangre a 4°C
Alteraciones Cuantitativas
(t.a.)
GR: tamaño/VCM / fragilidad osmótica
ERS
GB: paulatinamente el recuento
Plaquetas : paulatinamente el recuento
Reticulocitos: sangre EDTA/ su valor a las 6 hs
aprox.
Hemoglobina: inalterada-varios días /evitar
contaminación
» ERS: dentro de las 2 hs
Estabilidad de las pruebas de
coagulación
fundamental para el Dg y el tto de
coagulopatías.
NCCLS recomienda :
Su proceso las 2 h cuando la sangre o el
plasma se han almacenado a 22-24 °C.
A las 4 h a 4 °C,
a las 2 semanas a –20 °C
a los 6 meses a –70 °C
Estabilidad de las muestras
Efectos de almacenamiento sobre la
morfología de las células sanguíneas
Realizar las extensiones tan pronto como sea posible.
Norma Aceptable un retraso de hasta 3hs.
BIOMETRIA HEMATICA O
HEMOGRAMA
Respetar el orden de extracción de los tubos:
este variará en función del sistema utilizado
para realizar la extracción.
Secuencia de extracción para tubos plásticos de
extracción de sangre
1. Frascos para hemocultivos.
2. Tubos con citrato (tapa azul claro).
3. Tubos para suero con activador de coágulo, con
o sin gel separador (tapa roja o amarilla).
4. Tubos con heparina con o sin gel separador de
plasma (tapa verde).
5. Tubos con EDTA (tapa malva ).
6. Tubos con fluoruro (tapa gris).
Secuencia de extracción para tubos de
vidrio de extracción de sangre
1. Frascos para hemocultivos.
2. Tubos para suero de vidrio siliconizado
(tapa roja).
3. Tubos con citrato (tapa azul claro).
4. Tubos con EDTA (tapa malva o lila ).
5. Tubo para VSG (Tapa negra)
6. Tubo con heparina de litio (Tapa verde)
Extendido
Sangre sin anticoagulante
preferentemente ( con
anticoagulante se pueden
observar alteraciones
morfológicas)
Un extendido así obtenido poseerá tres áreas de
diferente espesor y con distribución distinta de
leucocitos:
Zona excesivamente gruesa (cabeza). : se encuentra
en la región inmediata al punto de partida de la
extensión . aumento de linfocitos.
Zona excesivamente fina (cola), : final de la
extensió[Link] Granulocitos y Monocitos.
Zona ideal: (cuerpo), Reparto Equilibrado de células.
Para que un frotis sea valido:
1) No debe ser demasiado grueso (los elementos
estarán retenidos y no serán identificados.
2) No debe ser demasiado delgado (será muy
pobre en elementos lo que impediría una
lectura conveniente).
3) No debe alcanzar los bordes ni las extremidades
del porta (se perderían los elementos mas
voluminosos). La gota debe agotarse sobre el
porta.
4) No debe presentar agujeros (utilización de portas mal
desengrasados) ni estrías o flecos (provocados por un
extensor de bordes no esmerilados, irregulares). Conviene
elegir el extensor observando sus bordes en el microscopio
para asegurarse de que sean bien lisos.
5) Debe ser regular (si no, el reparto de elementos es
heterogéneo y por tanto el recuento variara según los
campos examinados).
6) Debe ser secado correctamente (un secado defectuoso
produce artefactos: hematíes festoneados por ejemplo).
Extensiones sanguíneas realizadas en
portaobjetos.
FROTIS DE SANGRE POR GOTA
GRUESA
Detección de Malaria.
Los frotis de gota gruesa es una capa gruesa de
eritrocitos deshemoglobinizados (lisados)
Colocar una gota de sangre de 3mm de diámetro en
el centro un portaobjetos.
Dejar secar unos 25 a 30 min.
Colorear con WRIGHT , MAY - GRÜNWALD-
GIEMSA
COLORACIÓN DEL FROTIS DE
SANGRE SEGÚN WRIGHT ,MAY -
GRÜNWALD-GIEMSA
Fijación : alcohol metílico - Facilitar la conservación y la
fijación de las células
FUNDAMENTO
los métodos empleados para teñir las células emplean la
eosina y azul de metileno.
son sensibles a las variaciones de pH de las diferentes
estructuras celulares.
Las que tienen carácter básico fijan en mayor medida la
eosina (colorante ácido),
Las que poseen propiedades ácidas fijan principalmente el
azul de metileno (colorante básico).
Ciertas estructuras basófilas presentes en el núcleo (nucléolo)
o en el citoplasma (ribosomas) se coloreen de azul,
componentes acidófilos como la hemoglobina adquieren color
rosado.
Polimorfonucleares
Neutrófilos Eosinófilos Basófilo
La diferente afinidad de ciertas granulaciones
citoplasmáticas por dichos colorantes:
polimorfonucleares : neutrófilos, en los que la
granulación específica posee compuestos neutros son
fijados por ambos colorantes , dando un color pardo;
eosinófilos, granulación específica de carácter básico
que fijan fundamentalmente los colorantes ácidos rojo
naranja;
basófilos, granulación específica de carácter ácido,
que fijan colorantes básicos dando un color azul
oscuro.
Reactivos
Solución May Grünwald: eosinato de azul
de metileno en metanol.
Solución Giemsa: azul de metileno
(clorhidrato de tetrametiltionina), su
derivado oxidado en medio alcalino (el azur
II), y eosina (tetrabromofluoresceína).
Solución Wrigth: policromado de azul de
metileno en solución alcalina.
PROCEDIMIENTO
Cubrir el frotis de sangre seco con solución
May Grünwald.
Dejar 3 minutos. A continuación, inclinar y
cubrir el preparado con una solución de
Giemsa, obtenida a razón de dos gotas del
colorante por ml de agua. Dejar 10 minutos.
Lavar con agua , limpiar la cara inferior del
portaobjeto con un algodón y secar al aire.
Causas potenciales de frotis de sangre teñidos de
manera inapropiada.
Aspecto Causa
Excesivamente azul u oscuro Tinción prolongada
Lavado inadecuado
Alcalinidad demasiada alta del colorantes
O del amortiguador o ambos
Excesivamente claro o rosado Frotis de sangre grueso
Tinción insuficiente
Lavado prolongado
Acidez demasiado alta del colorante o del
amortiguador o ambos
Presencia de precipitado Portaobjetos no limpios
Desecación durante el proceso de tinción
Filtrado inadecuado del colorante
Bibliografía
[Link]
[Link]/atlas/doc/[Link] (Nagoya University)
[Link]
roscope/[Link] (Wadwordth
Laboratory)
McKenzie, Shirlyn B, et al 2000 Hematología
Clínica, 2 da Edición. México
Dacie y Lewis , 2008 Hematología Práctica, 10ª
edición, Elsiever España
ANORMALIDADES DE LOS
ERITROCITOS
Lic. Mercedes Tapia.
Magister en Ciencias de Lab. Clínico
Hematología I
Carrera de Laboratorio Clínico
Anormalidades morfológicas de los
Eritrocitos
1. Tamaño
2. Forma
3. Inclusiones citoplasmáticas
1. Anormalidades en el tamaño:
Anisocitosis
Diámetro oscila 6-8 μm
a. Macrocitos:
> 7 μm
VCM > 96 fl
•Deficiencia de vit B12 y/o ácido fólico.
•Estrés medular (eritropoyesis
acelerada)
•Transtornos hepáticos
b. Microcitos
Diámetro < 7 μm
VCM < 80 fl
•Disminución de Hb (microcitos
hipocrómicos)
•Anemias por deficiencias de hierro
•Talasemias
Anisocitosis ADE
Homogeneidad
Heterogeneidad
2. Anormalidades en la forma: Poiquilocitosis
Equinocito:
(crenocito)
Célula dentada (10-30 proyecciones redondeadas)
Tamaño uniforme Simétricamente distribuidas Erizo
de mar (equino)
Equinocitos
Uremia
Ulcera péptica
Cáncer de estómago
Terapia con heparina
RN con enfermedades de Hígado
Transfusiones de sangre
Estomatocito
Célula biconcava
ESP con wright (depresión central
elongada)
Forma de boca o estoma
Estado transicional discocito-esferocito
Estomatocito
Heredados o adquiridos
Alteración de la permeabilidad Na+-
K+
Ausencia de antígenos del sistema Rh
(Rh null)
Alteración estructural de la
membrana (aumento capa interna
doble capa lipídica)
Acantocito
Hematíe con escasas proyecciones espiculadas
Distribución heterogénea
Variación en longitud y número
Condiciones que modifican el contenido lipídico
(pérdida de glicerofosfolípidos, incremento
esfingomielina)
Alteración: relación colesterol libre/fosfolípidos
Irreversible
•abeta-lipoproteinemia
•Deficiencias en PK
•Hepatitis del recién nacido
•Esplenectomía
•Cirrosis alcohólica con anemia hemolítica
Acantocito
Esferocito
GR adopta una configuración esferoidal
Reducción de la relación superficie/volúmen
Relacionada con desordenes hemolíticos
Heredados o adquiridos
Esferocito
Deficiencia parcial de la espectrina
•Unión defectuosa de la espectrina a la proteina 4.1
Perturbación de la deformabilidad del GR
Manipulación esplénica (Lisis o fagocitosis)
Esferocitos con aumento de volúmen (Hidrocitos):
Lesión bioquímica de membrana (Na+ y H2O)
Glicólisis anaeróbica
Aumento de ATP
Agotamiento energético (Lisis celular)
Dianocito
Expansión de la superficie
Aumento de lipidos de membrana
Sin cambio del volúmen
Incremento de la relación S/V
Distribución anómala de la Hb
(target cell)
Enfermedad hepática obstructiva
Deficiencia de lectin-colesterol-Acyl-transferasa
(LCAT)
Esplenectomia
Talasemia
Deficiencia de Fe++
Pérdida selectiva de K+ y H2O
Defecto permeabilidad o carencia de ATP
Presencia de hemoglobinas anormales (S, C, D, E)
Ovalocito
(Eliptocito)
Célula bicóncavo oval
Extremos redondeados
Distorsión oval hasta forma cilíndrica
elongada
Polarización de la Hb
< 1% individuos normales
> 1% Anemias (megaloblásticas,
microcíticas hipocrómicas)
20 - 75 % Eliptocitosis hereditaria
(desorden clínico genético)
Drepanocito o
Cel. falciforme
Célula elongada Extremos puntiagudos o
espiculados (hoz)
Anemia falciforme
Concentración de Hb S (Glu-Val)
Polimerización:
Hipoxemia
Acidosis
Aumento 2-3 DPG
Deshidratación del GR
(MCHC incrementado
Sindromes falciformes:
[Link] de células falciformes
(Homocigosis S-S)
[Link] falciforme (heterocigosis A-
S)
[Link] interactuante (b-
talasemias Hb S)
[Link]ías raras (Hb
anormales
Dacriocito o Célula en gota
GR elongación única
Forma piriforme o en
gota
Génesis desconocida
Anemias
megaloblásticas
Talasemias
Mielofibrosis
Queratocito
Célula mordida
GR parcialmente fragmentados
Pérdida de una porción de la membrana
No alteración del contenido intracelular de Hb
Wright: proyecciones que semejan cuernos
Ruptura de la vacuola alrededor del cuerpo de
inclusión
Formación de cuerpos de Heinz
Deficiencia de G-6-PDH
Talasemias
Esquistocito o Esquizocito
Estructuras resultantes de la
fragmentación total del GR
Anemias micro y
macroangiopáticas (defectos de
pequeños y grandes vasos y
defectos estructurales del
corazón)
Sindrome hemolítico urémico
Púrpura trombocitopénico
trombótico CID
Formación de Rouleaux
Cúmulo de eritrocitos en pilas de monedas
Concentración de proteínas plasmáticas
es alta
Mieloma múltiple, hiperproteinemia,
macroglobulinemia, anemias hemolíticas.
3. Anormalidades en el citoplasma
Inclusiones eritrocitarias
Punteado Basófilo
Granulaciones (azules) varían en tamaño y número
Agregados de ribosomas (mitocondrias y siderosomas
degenerados)
Intoxicación por plomo
Talasemias
Deficiencia de hierro
Eritropoyesis ineficaz
Deficiencia de 5 pirimidin
nucleotidasa
Cuerpos de Howell-Jolly
Remanentes de DNA (Representan cromosomas separados
del huso mitótico durante mitosis anormal)
Gránulos esféricos 0.5 μm (morado o violeta obscuro.)
pueden ser únicos o pocas veces dos /cel.
Cerca de la periferie
Anemias megaloblásticas
Anemias severas
por def. Fe++
Anemia perniciosa
Anemia hemolítica
Esplenectomía-
hipoesplénicos
Anillos de Cabot
Anillos circulares (doblados sobre si mismos o
en forma de ocho)
Remanentes nucleares
(mitosis anormales)
Intoxicaciones por plomo
Anemia megaloblástica
Anemia perniciosa
Anemia hemolítica
Cuerpos de Heinz
Representan Hb desnaturalizada o precipitada
Observables con Coloración supravital (azul de cresilo
brillante)
Adheridos en la parte interna de la membrana del GR
Intoxicaciones
Enfermedades hereditarias
Defecto en la hesoxa monofosfato (def. Enzimática)
Estrés oxidativo
Talasemias
Sindromes de Hb inestables
Anemia falciforme
Gránulos sideróticos
(siderosomas o cuerpos de Pappenheimer)
Sideroblastos: E. nucleados, Gránulos teñibles de hierro
Siderocitos: E. No nucleados ,contienen gránulos de Fe
( Tinción de Prusia o de Persl)
Cuerpos de Pappenheimer : Lisosomas secundarios,
composición variable de Fe y Proteí. o mitocondrias
con micelas de Fe.
Granulaciones pequeños y numerosas que contienen Fe
(azul de prusia y Wright) Periferia del GR
Anemia Sideroblástica
Anemia aplástica
Anemia hemolítica
Infecciones crónicas
Esplenectomizados
Variaciones del contenido de hemoglobina y
de las propiedades de tinción del GR
Normocromia:
Nivel Hb igual al nivel
normal
determinado MCHC
Hipocromia:
Disminución de Hb
(síntesis anormal)
Anemia def. hierro
Mayor palidéz central
Policromasia o Policromatofilia
Policromatofilia:
Reticulocito (azul de cresilo brillante)
Más grandes que [Link]
Termino empleado para describir la tonalidad gris-
rosada o azul-rosado del GR que aún posee
remanentes de RNA ribosomal
Anemias hemolíticas RN
recuperación de hemorrágia aguda.
Ciesla B.2014 Hematología en la Práctica
ALTERACIONES CUALITATIVAS
Y CUANTITATIVAS DE LOS
LEUCOCITOS
ALTERACIONES CUANTITATIVAS
• Una cantidad suficiente de glóbulos
blancos debe estimular las respuestas
adecuadas, llegar al sitio que se necesitan
matar, digerir los organismos y sustancias
perjudiciales.
• Patológicas
• ALTERACIONES • Fisiológicas
CUANTITATIVAS
• Desviaciones
• Alteraciones asociadas al
• ALTERACIONES núcleo
CUALITATIVAS • Alteraciones asociadas al
citoplasma
Alteraciones Cuantitativas
• El numero, tipo de población y la
importancia de los leucocitos presentes en
SP varían en cada paciente. (niños-
adultos – diferencias étnicas)
• Es necesario los valores absolutos para
determinar un aumento o un descenso
significativo de un tipo celular en
particular.
Alteraciones Cuantitativas
• Maligno: Transformación neoplásica
de las CPH.
• Benignos : Adquiridos Neutrofilia
Neutropenia
• Los trastornos familiares
(neutropenia)
ALTERACIONES CUANTITATIVAS
DE TIPO PATOLÓGICO
• Varias condiciones dan lugar a aumentos o
disminuciones en una línea celular particular.
• Leucocitosis : > 10.0 x 109/L
• Reacciones Leucemoides .
• Neutrofilia , eosinofilia, basofilia linfocitosis,
monocitosis.
• Leucopenia < 5.0 x109/L
• Neutropenia
ALTERACIONES CUANTITATIVAS
• Las concentraciones de los neutrófilos en
SP.
• 1)Producción y liberación de la MO.
• 2)Tasa de salida de los neutrófilos a los
tejidos periféricos o tiempo de
supervivencia en la sangre.
• 3)Proporción entre neutrófilos marginales
y los circulantes en la SP.
Vida media de los granulocitos
• En médula ósea 9 días
• En Sangre Periférica de 3 a 6 horas
• En los Tejidos de 1 a 4 días.
Condiciones que incrementan los
neutrófilos.
• Neutrofilia.
( concentración absoluta de neutrófilos). varía con la
edad , es importante evaluar la cifra con los VR.
por grupos específicos de edad.
• Neutrofilia Inmediata : sin lesión tisular o estímulo
patológico.
• Redistribución (FCM) al (FCC) transitorio 20 a
30 min.
• Ejercicio activo, administración de adrenalina,
anestesia, convulsiones, y estados de ansiedad.
NEUTROFILIA AGUDA
• 4 a 5 hs. después del estímulo patológico
(Ejem; inf. Bacteriana, toxina). Aumento
en el flujo de neutrófilos del fondo común
de almacenamiento de la MO hacia la
sangre.
• La neutrofilia es más pronunciada y es
posible que aumente la proporción de
neutrófilos inmaduros. (en banda)
NEUTROFILIA CRONIA
• Después de neutrofilia aguda .
• Agota el fondo común almacenamiento, el
fondo común mitótico aumenta la
producción en un intento de cubrir la
demanda de neutrófilos.
• La MO > número de mieloblastos,
promielocitos, mielocitos.
Alteraciones Fisiológicas
• Son diferentes a la enfermedad subyacente , son
transitorias y No necesitan tto, no constituyen un
parámetro de enfermedad.
• Edad, embarazo, stress emocional, ejercicio, raza.
• Alteraciones fisiológicas debidas al stress emocional.
• Miedo, excitación, dolor, preocupación y stress,
estimulan la producción de glucocorticoides los cuales
favorecen el aumento del pool circulante a expensas del
pool marginal ------- leucocitosis.
• Ejemplo ( al nacer , exposición a temperaturas extremas,
estímulos emocionales y el trabajo de parto pueden
causar neutrofilia)
Alteraciones fisiológicas
• Ejercicio:14000 a 15000/mm3 pool circulante a
expensas del marginal.
• Aparece y desaparece 1 h.
• Embarazo.
• Aumento de granulopoyesis es más intenso
presencia de PMN y BANDA partir del tercer
mes, con leucocitosis hasta 18000/mm3.
• Raza
• Presentan una ligera leucopenia.(negra)
ALTERACIONES EN EL NUMERO Y LA
MADUREZ DE LOS GRANULOCITOS
• Desviaciones
• Desviación a la Izquierda.
ALTERACIONES EN EL NUMERO Y LA
MADUREZ DE LOS GRANULOCITOS
• Reacción Leucemoide
• Benigna. Respuesta exagerada a la infección
Leucocitosis encima de 50.000 /mm3 se
confunde con una LMC.
• Un incremento neutrófilos tanto maduros
como en banda e inclusive (cls. jóvenes) con
una Des. Izq.
• Granulación tóxica y vacuolización en
granulocitos.
Reacción Leucemoide
• Infección aguda o crónica, tuberculosis,
intoxicaciones, hemorrágias o hemólisis severa,
cetoacidosis diabética, quemaduras graves,
neoplasias (riñón, mama y estómago) o
neoplasias que infiltren la médula ósea.
• Leucemia : la anemia, y la trombocitopenia o la
trombocitosis, no están en la reacción
leucemoide., y cuando está es más difícil el
diagnóstico diferencial.
REACCION
LEUCOERITROBLASTICA
• Presencia de eritrocitos nucleados
(eritrobalstos) y una D. Izq.
• Los neutrófilos, , N
• poiquilocitosis y anisocitosis.
• Anomalías plaquetarias vistas en SP.
• Hemorragia intensa o en las anemias
hemolíticas como eritroblastosis fetal.
NEUTROPENIA
• < 2.5 x 109/L en la raza blanca - 1.3 x 109/L en negros.
• 1)disminución de la producción o producción ineficaz MO.
• 2)Aumento de la pérdida celular (destrucción mecánica o
inmunitaria, aumento de la salida de neutrófilos a los tejidos.
• 3)Seudoneutropénia. transferencia de una proporción
aumentada de los neutrófilos circulantes al FCM.
• Es característico en infecciones virales. Debido a la marginación
selectiva de neutrófilos cae la cifra total de leucocitos y se
desarrolla una linfocitosis relativa.
• Secuestro esplénico.
NEUTROPENIA FALSA
• En sangre con EDTA , los neutrófilos se
adhieren a los eritrocitos .
• Los neutrófilos se desintegran más rápidamente
que otros leucocitos , ( sangre en reposo por
períodos prolongados)
• En estados patológicos los leucocitos son más
frágiles de los normal
• Los neutrófilos se agrupan entre sí , en
presencia de paraproteínas . (agregación de los
neutrófilos).
ALTERACIONES EN EL NUMERO
DE EOSINÓFILOS
• > 0.45 x109/L. primeros tres meses de vida existe una
ligera eosinofilia fisiológica.
• Dermatitis crónica, alergias, Asma , parasitismo.
Trastornos mieloproliferativos, Rechazos a transplantes.
• EOSINOPENIA.
• Disminución de los eosinófilos circulantes, es difícil de
establecer .
• situaciones estresantes agudas, reacciones inflamatorias
y con la administración de glucocorticosteroides,
adrenalina y prostaglandinas.
ALTERACIONES EN EL NUMERO DE
LOS BASÓFILOS
• BASOFILIA >0.15 x109/L. reacciones de
hipersensibilidad inmediata.
• Trastornos mieloproliferativos crónicos,
Colitis ulcerativa ,condiciones inflamatorias
crónicas, policitemia vera, LMC.
• Basopenia.
• Tto. Con esteroides, inflamación.
TRASTORNOS CUANTITATIVOS DE
LOS MONOCITOS
• MONOCITOSIS
• >0.8 x109/L. importante la edad. En los lactantes
y en los niños lo normal es de 1-10 %.
• Etapa de recuperación de las infecciones agudas.
(tuberculosis activa), endocarditis bacteriana
subaguda, sífilis ,
• Leucemia con fuerte componente monocitico y
enfermedades del colágeno.
• Falla en la MO.
• MONOCITOPENIA
• Procesos autoinmunes, Leucemia de cls. peludas.
ALTERACIONES EN EL NUMERO
DE LINFOCITOS
• LINFOCITOSIS
• >4.0 x109/L.
• linfocitosis fisiológica de efecto pasajero
en estados emocionales y estrés físico.
• Generalmente responde a una infección
viral
• La linfocitosis de tipo proliferativa se
asocia a neoplasias , LLC.
ALTERACIONES EN EL NUMERO
DE LINFOCITOS
• LINFOPENIA
• <1.5 x109/L.
• Disminución en la producción
• aumento en la destrucción de los cambios en la
circulación del linfocito, o de otras causas desconocidas.
• La terapia con corticoides produce caída brusca en
linfocitos circulantes en 4 hs. retornan luego de 12 a 24
hs.
• Los trastornos inflamatorios agudos, incluyen infecciones
virales y bacterianas.
• Las enfermedades neoplásicas diseminadas, las
enfermedades del tejido conjuntivo y la enfermedad de
Hodking
• La desnutrición, SIDA.
ALTERACIONES CUALITATIVAS DE LOS
NEUTRÓFILOS.
ALTERACONES ASOCIADAS AL NUCLEO Y
CITOPLASMA
CUERPOS DE DÖHLE
• Son áreas ovales de color gris-
azúl claro cerca de la mb
citoplasmática de neutrófilos,
monocitos y en banda
• Están constituidos ARN
ribosom.
• Infec. bacterianas intensas,,
quemaduras, cáncer anemia
aplásica y los estados tóxicos.
Embarazo. Deben buscarse
cuerpos de Döhle siempre que
se presente cualquier
granulación tóxica o también
otros cambios morfológicos
reactivos.
GRANULOS TOXICOS
• son color azul-negro
en el citoplasma de
neutrófilos
segmentados y a
veces en los
neutrófilos en banda
y los metamielocitos
• Inf. bacterianas
intensas,
quemaduras, cáncer,
anemia aplásica
Vacuolización tóxica
• Areas claras, no teñidas, en
el citoplasma. la etapa
terminal de la digestión del
material fagocitado, o grasa
u otras sustancias
almacenadas.
• las vacuolas son un
parámetro sumamente
sensible de presencia de
septicemia.
• Infecciones bacterianas
intensas, quemaduras,
cáncer, anemia aplásica
• 10% Neutrófilos afectados
(Pronóstico serio y
significativo)
CUERPOS DE AÜER
• son estructuras
alongadas en forma
de bastón,
constituidos por
gránulos alineados.
• Se tiñen de color rojo
púrpura, aparecen en
las células inmaduras
de los pacientes con
(LMA). Son un
marcador morfológico
para diferenciar (LMA)
(LLA)
ANOMALIAS HEREDITARIAS
CUALITATIVAS FUNCIONALES
• Hereditarias
• Se acompañan con anormalidades
morfológicas.
• Infecciones graves recidivantes, abscesos,
retardo en la reparación de las heridas y
sepsis resistente a antibióticos.
ANOMALIA DE ALDER- REILLY
• gránulos azurófilos
agrupados en racimos.
• Se observa en
granulocitos, monocitos y
linfocitos
• se pueden confundir con
granulaciones tóxicas; sin
embargo, la existencia en
otras células diferentes
de granulocitos y la
ausencia de vacuolas
tóxicas y de cuerpos de
Döhle ayudan a hacer la
diferenciación.
ANOMALIA DE MAY-HEGGLIN
• Enf. Autosómica
dominante Asociado a
trombocitopenias con
purpura y sangrados
macroplaquetas con
escasos gránulos. Se
caracteriza por la
presencia de
inclusiones
citoplasmáticas, en los
PMN
• Forma de huevo
ANOMALIA DE CHEDIAK- HIGASHI
• Se encuentran en los
granulocitos y monocitos,
en los linfocitos se
observan como gránulos
gigantes únicos muy
llamativos de color
púrpura.
• Los Gb no funcionan
completamente.
• Los niños infecciones
crónicas graves.
neutropénia.
• Albinismo
ALTERACIONES ASOCIADAS AL
NUCLEO
• ANOMALIA DE PELGER-HUET
• Benigno autosómico
dominante, (heredado )
• no se segmenta más de dos
lóbulos.
• Pseudo PELGER HUET
(adquirido)
• Leucemia , síndromes
mielodisplásicos y
mieloprolifrativos, infecciones
severas y tras la exposición
a ciertos fármacos.
NEUTROFILOS HIPERSEGMENTADOS O
HIPERLOBULADOS
• Neutrófilos grandes con
más de 5 lóbulos.
• hipersegmentados
• Una anormalidad en la
maduración del núcleo
• Anemias megaloblasticas.
deficiencia de vitamina
B12 o ácido fólico o
mutaciones puntuales
que afectan la replicación
del DNA
• Se encuentran asociadas
a infecciones crónicas.
Linfocitosis reactiva en estados de
enfermedad común.
• Mononucleosis Infecciosa
(EBV)
• LB ( L. reactivos)
• SP linfocitosis reactiva,
con 10-60%.
• Mas grandes que los
normales, citoplasma
abundante azul que
simula a GR.
• Contar separadamente de
los LN.