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Protocolo para Pasar Células HEK293

Este protocolo describe los pasos para pasar células HEK293 entre cultivos celulares. Incluye retirar el medio de cultivo, lavar las células con PBS, tratarlas con tripsina para despegarlas, neutralizar la tripsina, centrifugar para formar un pellet celular, resuspender las células en medio de cultivo fresco y transferir una dilución de la suspensión celular a un nuevo cultivo con medio suplementado.

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Protocolo para Pasar Células HEK293

Este protocolo describe los pasos para pasar células HEK293 entre cultivos celulares. Incluye retirar el medio de cultivo, lavar las células con PBS, tratarlas con tripsina para despegarlas, neutralizar la tripsina, centrifugar para formar un pellet celular, resuspender las células en medio de cultivo fresco y transferir una dilución de la suspensión celular a un nuevo cultivo con medio suplementado.

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PROTOCOLO DE PASE DE CÉLULAS DE HEK293

o Retirar medio con una punta y pippetus.


o Lavar con 5 mL PBS, con delicadeza, y retirar este PBS.
o Añadir 5 mL de triple e introducir en el incubador durante 5 minutos. Cuando
saquemos el flask hacer una cruz para que se despeguen las pocas que quedan sin
despegar.

o Neutralizar la suspensión celular con 10 mL de medio que de tripsina (15 ml en


total a pasar a un Falcon).
o Centrifugar el Falcon a 15000 rpm (433 xg) durante 5 minutos.
o Retiramos el sobrenadante y resuspendemos en 10 mL de medio.
o Realizamos una dilución 1/10 de nuevo (ahora ya tendríamos 1/100), cogiendo 1 mL
de la solución resuspendida.
o Cogemos 1 mL de la suspensión 1/100 y lo llevamos a un Flask que contenga 10 mL
de medio suplementado.

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