FICHA TÉCNICA: 770216
Rev. : Septiembre/2009
Producto: CLED AGAR
PLACA DE 90 mm
USO
El Agar CLED ( Agar Cistina-Lactosa- Electrolitos - Deficiente.) es un medio de cultivo
diferencial para el aislamiento y enumeración de microorganismo presentes en muestras de orina,
siendo un medio que permite el crecimiento de los patógenos urinarios , y por su composición
electrolítica evita el “swarming” del Proteus spp.
PRINCIPIO
En 1960 , Sandys informo del desarrollo de un nuevo método de prevención para el “swarming”
producido por Proteus en medio sólido gracias a las restricciones de electrolitos en el medio de
cultivo, que fue posteriormente modificado para su uso en cultivo de muestras de orina, y fue
denominado como Cistina-Lactosa-Electrolitos –Deficiente (CLED).
Los nutrientes en el Agar CLED son los hidrolizados de caseína y gelatina conjuntamente con el
extracto de carne, la lactosa es la fuente de energía para microorganismo capacitados para utilizarla
por medio de mecanismos fermentativos. El Azul de Bromotimol es un indicador de pH que ayuda
a diferenciar los micoorganismos fermentadores de lactosa de los que no lo son , los fermentadores
acidifican el medio y este cambia de color verde a amarillo. La Cistina permite el crecimiento de
micro-colonias coliformes. Permite determinaciones cuantitativas de los patógenos urinarios
utilizando asas calibradas para la inoculación.
COMPOSICION POR LITRO DE MEDIO EN AGUA PURIFICADA
Hidrolizado pancreático de caseína 4.0 g
Hidrolizado pancreático de gelatina 4.0 g
Extracto de carne 3.0 g
Lactosa 10.0 g
L-Cistina 0.128 g
Azul de Bromotimol 0.02 g
Agar 15.0 g
1
pH : 7,3 +/- 0,2
PRECAUCIONES
Este producto es para uso exclusivo de profesionales.
No debe ser utilizado en caso de presentar contaminación microbiana, decoloración , signos de
deshidratación, roturas u otros signos de deterioro.
Utilizar bajo procedimientos de laboratorio , tratar siempre como material biopeligroso.
ALMACENAMIENTO Y VIDA UTIL
Una vez recibidas en el laboratorio, almacenar en lugar oscuro y seco a una temperatura de
8 ºC, en su embalaje original hasta el momento de uso.
Evitar la congelación y el sobrecalentamiento.
Las placas deben estar a temperatura ambiente antes de ser inoculadas.
No deben utilizarse con posterioridad a la fecha de caducidad.
Las bolsas deben ser abiertas cuando vayan a ser utilizadas, una vez abiertas las que no se
utilicen deberán mantenerse en áreas limpias y refrigeradas.
CONTROL DE CALIDAD
Estas placas han sido inoculadas con la cepas que a continuación se indican, incubadas a 35 +/- 2
ºC en condiciones aeróbicas y examinadas transcurridas de 18 a 24 horas de la inoculación,
obteniéndose los siguientes crecimientos, tamaños de colonias, pigmentación y selectividad, como
procedimiento de control de calidad.
Cepas Resultados de Crecimiento
Escherichia coli ATCC 25922 Buen crecimiento, colonias amarillas , medio amarillo
Proteus vulgaris ATCC 8427 Buen crecimiento , colonias de no coloreadas a azules ” swarming”
inhibido leve diseminación aceptable,
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Buen crecimiento, colonias de no coloreadas a amarillas, medio
amarillo.
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Buen crecimiento , pequeñas colonias amarillas y medio amarillo.
Staphylococcus saprophyticus Buen crecimiento , pequeñas colonias de blancas a amarillas, medio
NCTC 10516 amarillo
No inoculadas Color: de verde a azul verdoso
CARACTERISTICAS y LIMITACIONES DE USO
Las placas de CLED Agar , han sido controladas microbiológicamente, pueden requerir el uso de
otros medios de cultivo auxiliares, reactivos y equipos de laboratorio de forma complementaria
Este medio es exclusivo para la enumeración y diferenciación de bacterias en orina.
La toma de muestra de orina en condiciones asépticas es condicionante , si no se utiliza dentro de
las dos horas siguientes debe ser almacenada refrigerada , no mas de 24 horas, para prevenir
crecimientos adicionales o contaminaciones.
Las morfologías típicas de las colonias en el CLED Agar en aerobiosis a 35+/- 2ºC durante 24-
48 horas es la siguiente:
2
Microorganismos Resultados
Escherichia coli Colonias amarillas opacas, medio amarillo
Klebsiella, Enterobacter Colonias de amarillo a azul desteñido, en ocasiones con aspecto mucoide,
medio amarillo
Proteus Colonias azul traslúcido y medio de azul-verde a azul
Pseudomonas aeruginosa Colonias verdes con una típica superficie irregular y contorno desigual,
medio azul
Enterococcus Pequeñas colonias amarillas, con unos 0,5 mm de diámetro, medio amarillo
Staphylococcus aureus Profundas y uniformes colonias amarillas, medio amarillo
Staphylococcus coagulasa Colonias amarillo pálido muy opacas
negativa
Aunque es un medio básicamente no selectivo, la deficiencia en electrolitos puede provocar que
algunas cepas de Shigella no crezcan bien en este medio.
La prolongación de la incubación por encima de las 24 horas no es aconsejable pudiéndose en
este caso presentar fenómenos de “swarming”.
Los patógenos genitourinarios como Neisseria gonorrhoeae, Gardenella vaginales y Chlamydia
no crecen en este medio por sus requerimientos nutricionales.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Sandys, G.H. 1960. A new method of preventing swarming of Proteus sp. with a description of a new
medium suitable for use in routine laboratory practice. J. Med. Lab. Technol. 17:224-233.
2. Mackey, J.P., and G.H. Sandys. 1965. Laboratory diagnosis of infection of the urinary tract in general
practice by means of a dip-inoculum transport medium. Br. Med. J. 2:1286-1288.
3. Mackey, J.P., and G.H. Sandys. 1966. Diagnosis of urinary infections. Br. Med. J. 1:1173.
4. Barry, A.L., P.B. Smith, and M. Turck. 1975. Cumitech 2, Laboratory diagnosis of urinary tract infections.
Coordinating ed., T.L. Gavan. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
5. Thomson, R.B., and J.M. Miller. 2003. Specimen collection, transport, and processing: bacteriology. In:
Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical
microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
6. Clarridge, J.E., M.T. Pezzlo, and K.L. Vosti. 1987. Cumitech 2A, Laboratory diagnosis of urinary tract
infections. Coordinating ed., A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington
PRESENTACION Y NUMERO DE CATÁLOGO
Número de catálogo: 770216
Presentación: caja conteniendo 20 placas de medio listo para su uso
3
958 412 886
629 636 705
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