Scribd
Cargar
59 vistas2 páginas

Protocolo Swim Up para Selección de Espermatozoides

Este documento describe dos técnicas para seleccionar espermatozoides con motilidad y capacidad de separación del plasma seminal llamadas "Swim Up": el Swim Up directo y el Swim Up indirecto. El Swim Up directo implica depositar cuidadosamente medio de cultivo sobre el semen en tubos inclinados para permitir que los espermatozoides naden hacia arriba, luego centrifugar para separarlos de leucocitos y espermatozoides muertos. El Swim Up indirecto divide el semen fluidificado y centrifuga antes de añadir medio e inclinar los

Cargado por

Pedro Moran rios
Derechos de autor
© All Rights Reserved
Nos tomamos en serio los derechos de los contenidos. Si sospechas que se trata de tu contenido, reclámalo aquí.
Formatos disponibles
Descarga como DOCX, PDF, TXT o lee en línea desde Scribd
59 vistas2 páginas

Protocolo Swim Up para Selección de Espermatozoides

Este documento describe dos técnicas para seleccionar espermatozoides con motilidad y capacidad de separación del plasma seminal llamadas "Swim Up": el Swim Up directo y el Swim Up indirecto. El Swim Up directo implica depositar cuidadosamente medio de cultivo sobre el semen en tubos inclinados para permitir que los espermatozoides naden hacia arriba, luego centrifugar para separarlos de leucocitos y espermatozoides muertos. El Swim Up indirecto divide el semen fluidificado y centrifuga antes de añadir medio e inclinar los

Cargado por

Pedro Moran rios
Derechos de autor
© All Rights Reserved
Nos tomamos en serio los derechos de los contenidos. Si sospechas que se trata de tu contenido, reclámalo aquí.
Formatos disponibles
Descarga como DOCX, PDF, TXT o lee en línea desde Scribd

SWIM UP

Introducción
La población espermática presente en una muestra de semen normal tiene un
carácter heterogéneo ya que está compuesta de varias generaciones
espermatogénicas que han pasado diferentes períodos en el epididímo. Esta
heterogeneidad se refleja usualmente en diferencias de morfología y motilidad.
La mayoría de los espermatozoides muestran una motilidad típicamente
progresiva y linear.
La linearidad ha sido relacionada con fertilidad en toros y cerdos, y por ello se
han desarrollado tests basados en la habilidad innata del espermatozoide para
atravesar fluidos de una cierta viscosidad, los llamados test de "swim-up", cuyos
resultados han sido relacionados con la predicción de fertilidad, asumiendo que
imitan la condición de selección espermática por morfología y motilidad normales
in vivo durante el transporte a lo largo del tracto genital femenino. Se basan en la
capacidad de movimiento de los espermatozoides, de migrar desde el semen al
medio cultivo.
Dentro de esta categoría existen dos formas principales Swim Up directo y
Swim Up indirecto.

Objetivo
Mediante esta técnica se seleccionan los espermatozoides con base a su
motilidad y capacidad de separación del plasma seminal. Es la técnica preferida
si la muestra de semen tiene un número normal de espermatozoides

Swim Up directo
El volumen total de la mezcla se divide en fracciones de 1 ml en los tubos de centrífuga,
preferiblemente de punta cónica.

Se depositan con mucho cuidado 1.3 ml de medio de cultivo sobre el semen en cada tubo.

Los tubos se colocan inclinados dentro de la incubadora, en un ángulo de 45°, incubándolos a


37°C durante 30 a 60 minutos.
Al inclinar el tubo a 45° se aumenta la superficie entre el medio y el semen, mejorando la
capacidad de los espematozoides para separarse del semen y alcanzar el medio. Después de esto
los tubos vuelven a la posición vertical.

Se retira 1 ml de la porción sobrenadante de cada tubo, aspirando los espermatozoides del


menisco superior, con una pipeta estéril.

Una alternativa es la de colocar el medio de cultivo en cada tubo y depositar luego bajo el medio,
el semen, con el fin de obtener una superficie más clara entre el semen y el medio.

Adicionalmente, se puede optimizar la recuperación del semen aumentando el número de tubos y


disminuyendo el volumen de semen en cada tubo.

Una vez separado el sobrenadante se adiciona 2 ml de medio a cada tubo y se centrifuga a 300
rpm, por 10 minutos.

Swim Up indirecto
El semen fluidificado se divide en fracciones de 1 ml en cada tubo, adicionándose medio en
proporción 1:1, y luego de centrifugar se retira suavemente el sobrenadante.

Sobre el pellet re-suspendido se adicionan cuidadosamente 1.3 ml de medio y se colocan los


tubos inclinados 45° dentro de la incubadora, por 30 a 60 minutos a 37°C. Después de la
migración de los espermatozoides, se hace recuento y evaluación de motilidad y se remueve el
volumen de semen para IA.

En el “Swim Up directo” se efectúa la centrifugación luego de la migración de los


espermatozoides, o sea, después de la separación de los espermatozoides buenos de los
leucocitos y espermatozoides muertos.

Estas muestras producen generalmente Especies  Reactivas de Oxígeno (ROS), de tal manera que
el “Swim Up directo” es el método preferido con respecto al “indirecto” para seleccionar
espermatozoides para IA.

También podría gustarte