UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA
CARRERA DE MEDICINA
MICROBIOLOGÍA PRÁCTICA
NOMBRE: ISABEL PALACIOS
FECHA: 29/11/2022
PARALELO: A
TIPOS DE TINCIONES
Las tinciones en microbiología son las primeras herramientas que se utilizan en el
laboratorio para el diagnóstico de las enfermedades infecciosas. Hay una gran
variedad de tinciones, que se han ido desarrollando para la detección de los
diferentes agentes infecciosos en los que se incluyen bacterias, parásitos y hongos.
Se distinguen tres tipos de tinciones dependiendo del resultado que se busca
obtener y lo que se desea identificar:
Simples: Las tinciones se pueden clasificar como simples cuando toda la muestra
se tiñe del mismo color y se utiliza un sólo colorante, posterior a la fijación de la
misma, permitiendo la visualización de la morfología bacteriana. Hay tres pasos
básicos a seguir cuando se realiza una tinción simple: calentar, teñir y
enjuagar/secar.
Azul de metileno: Es uno de los colorantes más indicados ya que actúa rápida y
suavemente sobre todas las células bacterianas y no oscurece los detalles
celulares. Además, es especialmente útil para detectar la presencia de bacterias en
muestras naturales puesto que la mayor parte del material no celular no se tiñe.
Cristal violeta: Es el colorante simple más utilizado. Es un colorante básico que tiñe
las células de color púrpura. Es la tinción primaria utilizada en el procedimiento de
tinción de Gram. Colorea de púrpura la pared celular de las bacterias
Gram-positivas y Gram-negativas.
Fucsina básica: Tiñe las bacterias acidorresistentes de rojo o rosa, mientras que la
safranina tiñe de verde a todas las demás bacterias.
Diferenciales: Para estas tinciones se necesitará fijación previa generalmente por
calor, además se utilizarán dos colorantes, siendo el último el colorante de
contraste. Una de las características más importantes es que además de visualizar
la morfología, permite observar la composición de la pared bacteriana, resistencia a
la decoloración ácida, etc.
Tinción de Gram: Es el método capital para diferenciar grandes grupos
microbianos por microscopía en función de la distinta composición de su pared
bacteriana y el más empleado en bacteriología gracias al cual las bacterias se
pueden clasificar en 2 grandes grupos (Gram +, Gram -). Esto es debido a la distinta
composición de la pared de las células bacterianas. Se basa en el empleo de un
primer colorante básico (cristal violeta) que teñirá de color azul todas las bacterias.
Posteriormente, un mordiente (lugol) aumentará la afinidad del primer colorante a
las células; finalmente, un agente decolorante en el que solamente un tipo de
bacterias serán teñidas. Gram+ (aquellas que no han sido decoloradas y quedan
teñidas con cristal violeta de color azul violáceo). Gram- (aquellas bacterias que han
sido decoloradas y son teñidas con el colorante de contraste, la safranina; con un
rosa-rojo).
Tinción de Ziehl-Neelsen: Se ha demostrado que algunas bacterias contienen un
alto porcentaje de sustancias lipídicas o serosas, por lo que se tiñen con dificultad
por procedimientos usuales como Gram. Se usa especialmente para la identificación
de Mycobacterium tuberculosis o Mycobacterium leprae.
La tinción se basa en colocar carbol-fucsina y calentar la preparación ligeramente
para solubilizar las ceras, lípidos y otros ácidos grasos de la pared celular para que
permita el paso libre del colorante, el cual tiene una enorme afinidad por los ácidos
micólicos presentes en la pared, Al enfriar con agua, los componentes de la pared
vuelven a solidificar, resistiendo la acción abrasiva del alcohol-ácido, y el azul de
metileno se utiliza como colorante de contraste.
Selectivas: Se utilizan para incrementar el contraste en las células microbianas y
revelan estructuras particulares, entre las que se incluyen en los flagelos, las
esporas y las cápsulas.
Tinción de cápsulas: En este tipo de tinción se prescinde de la fijación por calor, se
deja secar la preparación y se observan los microorganismos brillantes sobre un
fondo [Link] técnica utiliza cristal violeta y tinta india o nigrosina. El cuerpo
bacteriano toma el color púrpura del cristal violeta debido a que está cargado
negativamente, en tanto que la nigrosina colorea el fondo del frotis. Si la bacteria
tiene cápsula, ésta se verá como un halo transparente alrededor del
microorganismo.
Tinción de esporas: El método más empleado es el de Schaeffer-Fulton donde la
suspensión de microorganismos se tiñe en caliente con el colorante verde
malaquita, un colorante soluble en agua por cuya razón no se utiliza habitualmente
en tinciones convencionales. El calor modifica la permeabilidad de la endospora y
permite la entrada del colorante a través de las capas externas de la endospora. A
continuación, el lavado con abundante agua produce la decoloración de las formas
vegetativas, así como de los extremos de las bacterias esporuladas, que se tiñen
por último con un colorante de contraste, la safranina.
Tinción de flagelos: Los distintos métodos de tinción utilizan combinaciones de
mordientes y metales para engrosar los flagelos, así como colorantes para teñirlos.
Una de estas técnicas es la tinción de flagelos de Leifson, en la cual se cubre la
preparación con una mezcla de ácido tánico y el colorante rosanilina. El ácido tánico
engruesa los flagelos y la rosanilina los tiñe.
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