IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

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Luis enrique moreno [Link] 1073630301

FUNDACIÓN UNIVERSITARIA INTERNACIONAL DEL TROPICO AMERICANO

UNITRÓPICO
YOPAL

RESUMEN

Durante la práctica de laboratorio se realizan pruebas para el reconocimiento de

carbohidratos naturales, ejecutando una serie de repeticiones con diferentes soluciones
acuosas al 1%pv de carbohidratos. Expuestas a diferentes factores que influyen en la
actividad de la misma. Primero se toman 30 grs de la muestra en este caso se usó “manzana”,
luego se prepararon cada una de las muestras acuosas de los carbohidratos a usar, luego de
tener las soluciones listas se procedió a realizar cada una de las siete “7” pruebas, para esto
se usan los reactivos de molisch; benedict; barfoed; Bial; seliwanoff; prueba para almidón
con Lugol; Fehling, además se realizó hidrolisis del almidón de la papa. En algunos casos se
realizaron pruebas en baño maría a punto de ebullición mientras otras en su estado natural.
Además de esto se utilizaron unos ácidos los cuales ayudaron a identificar los carbohidratos.

PALABRAS CLAVES: Carbohidratos; reactivos; almidón; molisch; benedict; barfoed;

Bial; seliwanoff; Fehling.

ABSTRAC.
During the laboratory practice tests are performed for the recognition of natural
carbohydrates, running a series of repetitions with different aqueous solutions to 1%PV of
carbohydrates. Exposed to different factors that influence the activity of the same. First, 30
grams of the sample were taken in this case, each one of the aqueous samples of the
carbohydrates to be used was used, after having the solutions ready, each one of the seven
samples was performed. tests, for this are used molisch reagents; benedict; barfoed; Bial;
seliwanoff; starch test with Lugol; Fehling, in addition hydrolysis of potato starch was
performed. In some cases, tests were carried out in a boiling water bath while others were
carried out in their natural state. Además de esto se utilizaron unos ácidos los cuales ayudaron
a identificar los carbohidratos.

KEY WORDS; Carbohydrates; reagents; starch; molisch; benedict; barfoed; Bial;

seliwanoff; Fehling.

INTRODUCCIÓN Glucosa: La glucosa es el carbohidrato

más abundante en la naturaleza. También
Carbohidratos: Los carbohidratos son
se le conoce como azúcar sanguínea,
sustancias naturales compuestas de
azúcar de uva, o dextrosa. Los animales
carbono, hidrógeno y oxígeno.
obtienen glucosa al comer plantas o al
Antiguamente se les conocía como
comer alimentos que la contienen. Las
“hidratos de carbono”.
plantas obtienen glucosa por un proceso
En la década de 1880 se reconoció que llamado fotosíntesis.
dicho concepto era erróneo, ya que los
estudios estructurales de estos compuestos
revelaron que no eran hidratos, pues no
Los mamíferos pueden convertir la
contenían moléculas intactas de agua.
sacarosa (azúcar de mesa), lactosa (azúcar
Además, otros compuestos naturales
de la leche), maltosa y almidón en glucosa,
(carbohidratos) tenían fórmulas
la cual es oxidada para obtener energía, o
moleculares diferentes a las anteriores. En
la almacenan como glucógeno (un
la actualidad los carbohidratos se definen
polisacárido). Cuando el organismo
como aldehídos o cetonas
necesita energía, el glucógeno es
polihidroxilados, o bien, derivados de
convertido de nuevo a glucosa. La glucosa
ellos.
puede convertirse a grasas, colesterol y
otros esteroides, así como a proteínas. Las
plantas convierten el exceso de glucosa en
un polímero llamado almidón (el
equivalente al glucógeno), o celulosa, el
principal polímero estructural.

Azúcares reductores El sufijo –osa se

emplea en la nomenclatura sistemática de

Se clasifican en: los carbohidratos para designar un azúcar

reductor, que es un azúcar que tiene un
A. Monosacáridos o Azúcares
grupo aldehído o un grupo α-
Simples:
hidroxicetona.
No pueden ser hidrolizados a
moléculas más pequeñas. Todos B. Oligosacáridos (del griego oligo,
ellos son azúcares reductores, pocos): Contienen de dos hasta

ejemplos: diez unidades de monosacáridos.

I. Disacáridos: producen dos
moléculas de
monosacáridos por
hidrólisis.
II. (a). -Reductores: reducen
el Fehling, Benedict, o
Tollens. (b).-No
reductores: no reducen a
los reactivos anteriores.
III. Trisacáridos: producen tres
moléculas de
monosacáridos por
hidrólisis.
 IV. Tetra-.........Decasacáridos: Un reactivo o reactante es, en química,
producen cuatro........a diez toda sustancia que interactúa con otra en
moléculas de una reacción química que da lugar a otras
monosacáridos por sustancias de propiedades, características
hidrólisis. y conformación distinta, denominadas

C. Polisacáridos: producen más de productos de reacción o simplemente

diez moléculas de monosacáridos productos. Por tratarse de compuestos

por hidrólisis. químicos, los reactivos se pueden

I. Homopolisacáridos: clasificar según muchas variables:

producen un solo propiedades fisicoquímicas, reactividad en

monosacárido por reacciones químicas, características del

hidrólisis. uso del reactivo. (2)

II. Heteropolisacáridos: ALMIDÓN

producen más de una clase
El almidón es un hidrato de carbono
de monosacáridos por
complejo (polisacárido) digerible, del
hidrólisis.
grupo de los glucanos. Consta de cadenas
AZÚCARES D, L de glucosa con estructura lineal (amilosa)
o ramificada (amilopectina). Constituye la
Por convención, un azúcar pertenece a la
reserva energética de los vegetales. En la
“Familia D” si su penúltimo grupo OH está
cocina se valora por ser un hidrocoloide:
orientado a la derecha y a la “Familia L”
tiene la capacidad de atrapar agua, lo que
cuando dicho grupo está orientado a la
provoca la formación de geles, o de
izquierda. Esta denominación es
espesar un líquido o un producto licuado.
independiente de la rotación óptica del
compuesto. Observar que un azúcar de la La amilosa y la amilopectina son
Familia D es enantiómero o imagen polisacáridos que el organismo puede
especular del azúcar de la Familia L. degradar (digerir), mediante las enzimas

(1) amilasa y glucosidasa presentes en la

saliva y el jugo pancreático. En 2007, un
REACTIVO
grupo de investigadores encabezado por
George H. Perry, de la Universidad estatal
de Arizona en Tempe, y Nathaniel J. (3)
Dominy, de la Universidad de California
REACTIVO DE MOLISCH
en Santa Cruz, demostraron que los
humanos poseen copias adicionales del La reacción de Molisch es una reacción

gen AMY1 (básico para la síntesis de la que tiñe cualquier carbohidrato presente

amilasa) y mayor proporción de AMY1 en una disolución; es llamada así en honor

que los demás primates. Existen también del botánico austríaco Hans Molisch

diferencias entre poblaciones humanas, La presencia de carbohidratos en una

según cuál haya sido el consumo de muestra se pone de manifiesto por la
productos ricos en almidón durante reacción de Molisch que a cierto punto es
generaciones. Los almidones, ricos en la reacción universal para cualquier
calorías, pudieron resultar cruciales para la carbohidrato.
alimentación y la evolución humana.
(4)
El almidón se obtiene mayoritariamente
del maíz, el trigo, el arroz, la patata y la
tapioca. Si proviene de un tubérculo suele REACTIVO DE BENEDICT

denominarse fécula (fécula de patata); si es En química, la reacción o prueba de

de un cereal, almidón. Las propiedades del Benedict identifica azúcares reductores
almidón varían en función del producto del (aquellos que tienen su OH anomérico
cual se extrae y de la variedad. Ello se debe libre), como la lactosa, la glucosa,
a la longitud de las cadenas y, sobre todo, la maltosa, y celobiosa. En soluciones
a la proporción de los dos tipos de cadenas alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene
que lo forman. La amilosa (lineal) hace color azul a Cu+, que precipita de la
predominar la estructura gelificada, ya que solución alcalina como Cu2O de color
forma tramas tridimensionales; la rojo-naranja. El reactivo de Benedict
amilopectina (ramificada) produce en los consta de:
líquidos una mayor viscosidad. El arroz  Sulfato cúprico;
con una proporción elevada de
 Citrato de sodio;
amilopectina resulta viscoso (pegajoso) y,
 Carbonato anhidro de sodio.
por tanto, muy apropiado para la
elaboración de sushi.
  Además se emplea NaOH para REACTIVO DE SELIWANOFF
alcalinizar el medio.
Esta prueba es específica para las cetosas.
(5)
Las cetosas se deshidratan más
REACTIVO DE BARFOED rápidamente que las aldosas, dando
furfurales. Estos se condensan con el
El reactivo de Barfoed es débilmente
resorcinol produciendo un complejo
ácido y es reducido solamente por
coloreado. Si el tiempo de ebullición se
monosacáridos, formándose como
prolonga, puede dar también positivo para
producto de reacción óxido cuproso. En
otros azúcares.
medio ácido, tan sólo los monosacáridos
son capaces de reducir el Cu2+ a Cu+. El La prueba de Seliwanoff es una prueba
Cu+ así producido reduce al ácido química que se usa para distinguir entre
fosfomolíbdico a un complejo de intenso aldosas y cetosas. Los azúcares son
color azul oscuro. distinguidos a través de su función como
cetona o aldehído. Si el azúcar contiene un
(6)
grupo cetona, es una cetosa, y si contienen
un grupo aldehído, es una aldosa. Esta

REACTIVO DE BIAL prueba está basada en el hecho de que, al

calentar las cetosas son deshidratadas más
Esta reacción detecta la presencia del
rápido que las aldosas (paul Ipiales).
furfural producido en medio ácido por las
pentosas. El reactivo de Bial contiene (8)
orcinol disuelto en HCl concentrado. El REACTIVO DE FEHLING.
ácido provoca la formación del furfural y
Reacción disuelta propensa a disolverse
el orcinol se condensa con este último
con la acción de la disolución solución
para producir cromógenos de color verde-
descubierta por el químico alemán
azul. Para eso es necesario disolver 0,3 g
Hermann von Fehling y que se utiliza
de orcinol en 100 mL de HCl
como reactivo para la determinación
concentrado. Agregar 0,3 mL de cloruro
de azúcares reductores.
férrico (FeCl3) al 10%.

(7) Esta prueba se utiliza para el

reconocimiento de azúcares reductores. El
poder reductor que pueden presentar los a) se pesan 30 g del material vegetal
azúcares proviene de su grupo carbonilo, y se licua adicionando 50 ml de
que puede ser oxidado a grupo carboxilo agua destilada. Se Filtra y se
con agentes oxidantes suaves. Si el grupo guarda el filtrado para realizar las
carbonilo se encuentra combinado no pruebas. Se mantiene la solución
puede presentar este poder reductor. en hielo, para evitar oxidaciones.
b) preparar cuidadosamente cada una
Los azúcares reductores, en medio
de las soluciones de carbohidratos
alcalino, son capaces de reducir
requeridas, haciendo uso de los
el ión Cu2+ de color azul a Cu+ de color
balones aforados.
rojo. Para ello el grupo carbonilo del
2. IDENTIFICACIÓN DE
azúcar se oxida a grupo carboxilo. En
CARBOHIDRATOS
medio fuertemente básico como en nuestro
caso el NaOH el ión Cu2+ formaría Cu Se realizan cada uno de los ensayos que se
(OH)2 insoluble por eso añadimos tartrato presentan a continuación, en tubos de
sódico potásico que actúa como ensayo, limpios y secos, con la solución
estabilizador al formar un complejo con el patrón que se indica en cada caso.
Cu2+. A. PRUEBA DE MOLISCH:

El reactivo de Fehling consta de Soluciones: ARABINOSA, GLUCOSA,

FRUCTOSA, SACAROSA,
 Fehling A: CuSO4 disuelto en
ALMIDÓN.
H2O
Se toma 1ml de cada solución en tubos de
 Fehling B: NaOH y tartrato Na-K
ensayo respectivamente. Se agrega a cada
disueltos en agua
uno 5 gotas de reactivo de Molisch y
(9) agitar. Luego por la pared del tubo y sin
agitar se agregan 1 ml de H2SO4
METODOLOGIA concentrado de manera que este vaya al
fondo del tubo. No agitar. Observe la
1. PREPARACIÓN DE coloración producida en la unión de los
MUESTRAS dos líquidos. (Anillo violeta prueba
positiva)
 B. PRUEBA DE BENEDICT: Observar la aparición de una coloración
azul verdosa.
Soluciones: GLUCOSA, MALTOSA Y
SACAROSA. E. PRUEBA DE SELIWANOFF:

Se toman 1 ml de cada solución en tubos Soluciones: FRUCTUOSA Y

de ensayo, se agrega a cada uno 0,5 ml de GLUCOSA.
reactivo de Benedict, agitar y calentar a
Se toma 1 ml de cada solución en tubos de
ebullición en agua hirviendo, durante 5
ensayo. Agregar a cada uno 2 ml de
minutos. Observa la formación de
reactivo de seliwanoff y calentar en agua
precipitado rojizo, amarillo rojizo o
hirviendo durante 10 min. Observar la
coloración verde.
aparición de color rojo intenso.
C. PRUEBA DE BARFOED:
F. PRUEBA PARA ALMIDON:
Soluciones: GLUCOSA, MALTOSA Y
LUGOL:
SACAROSA.
Soluciones: ALMIDÓN Y
Se toma 1 ml de las soluciones en tubos de
GLICÓGENO
ensayo respectivamente, se agrega a cada
uno, 2 ml de reactivo de Barfoed, agitar y Se coloca en un tubo de ensayo 2.0 ml de

calentar a ebullición durante 5 minutos. la solución del carbohidrato y se agrega

Observar la formación de precipitado 0.2 ml de Lugol, se mezcla y observa la

rojizo. formación de los colores rojo para

glicógeno, azul-violeta para almidón como
pruebas positivas.
D. PRUEBA DE BIAL:
G. PRUEBA DE FEHLING
Soluciones: RIBOSA, ARABINOSA Y
Soluciones: GLUCOSA, MALTOSA Y
GLUCOSA.
SACAROSA.
Se toma 1 ml de las soluciones patrón en
El reactivo de Fehling consta de dos
tubos de ensayo respectivamente. Agregar
disoluciones que se mezclan a parte
a cada uno 2.5 ml de reactivo de Bial y
iguales en el momento de su utilización.
calentar a ebullición durante 5 minutos.
La solución I está formada por SO4Cu*
5H2O al 7% en agua y la solución II por RESULTADOS
tartrato sódico-potásico al 35%pv en 1) PREPARACIÓN DE
NaOH al 10%pv en agua. En un tubo MUESTRAS: en este
disolvimos 500 mg de la sustancia a procedimiento se realizaron las
ensayar en 5 ml de agua. de igual manera soluciones acuosas que se van a
con otros tubos que contengan azúcares utilizar durante la práctica, para
reductores y no reductores conocidos. ahorrar tiempo el día anterior se
Luego añadimos a todos los tubos 5 ml del dejaron preparadas algunas de las
reactivo de Fehling. Por último, se soluciones.
sometieron a ebullición en baño de agua
durante 5 minutos. La reacción debe 2) IDENTIFICACIÓN DE
considerarse positiva si se forma un CARBOHIDRATOS
I. PRUEBA DE
precipitado rojo de óxido cuproso. MOLISCH:

H. HIDRÓLISIS DEL ENGRUDO los azúcares usados dieron un resultado

DE ALMIDÓN DE PAPA positivo con el reactivo de Molisch, a
pesar de que la glucosa y la fructosa son
Se procedió a realizar la hidrólisis del
monosacáridos y de que la sacarosa y la
polisacárido preparado. Para ello
maltosa son disacáridos, esto hace que
colocamos 3 ml de la solución problema en
dicha clasificación se deba al tiempo que
un tubo de ensayo y agregamos 2 gotas de
tarda en formarse el anillo color rojo
ácido clorhídrico concentrado.
violeta ya que el ácido sulfúrico
Sumergimos el tubo en un baño de agua concentrado [H2SO4] permite que los
hirviendo durante 30 minutos. Dejamos glúcidos se deshidraten formando
enfriar y neutralizamos con carbonato de compuestos furfúricos por tanto diremos
sodio al 15 %pv (utilizando papel de que como en nuestro caso las hexosas dan
tornasol como indicador para la HMF (hidroximetilfurfural).
neutralización).
Ilustración 1: soluciones con Molisch. III. PRUEBA DE
BARFOED:
La glucosa al ser un monosacárido
obtuvimos un resultado positivo, es decir,
la presencia de un precipitado leve de color
rojo de óxido cuproso, lo cual podemos
evidenciar en la imagen.
Sabiendo que la maltosa es un disacárido

fuente: elaboración propia. puede dar o no un resultado positivo

considerando que, si es positivo, entonces
II. PRUEBA DE
BENEDICT: su proceso o reacción es lento, en nuestra
La glucosa y maltosa presentan un experiencia práctica fue positiva ya que
precipitado de color anaranjado en el tiempo determinado que lo
denominado óxido cuproso (Cu20) es decir observamos hubo un cambio mínimo de
que se trata de azúcares reductores. coloración (5-10 minutos) es decir que
La sacarosa no presenta evidencia de nos presentó un precipitado rojo
precipitado color rojo ladrillo con la característico del óxido cuproso (Cu2O).
reacción de oxidación de Benedict, por lo
que se confirma, que no es un azúcar no
reductor.

Ilustración 2: soluciones con Benedict

fuente: elaboración propia

Ilustración 3: solución con barfoed. Ilustración 4: soluciones con bial.

fuente: elaboración propia.

V. PRUEBA DE
fuente: elaboración propia SELIWANOFF:

IV. PRUEBA DE BIAL: Al esperar por varios minutos a ebullición

Como se logra observar en la imagen, la en baño maría las soluciones de azúcar, en

ribosa se torna de un color café verdoso, caso de que sea una cetosa adquieren una

dando la prueba como positivo, la coloración de color rojo con o sin

arabinosa se torna de un color verde separación de precipitado, cuya intensidad

intenso arrojando la prueba como de color depende de la cantidad de azúcar

positivo, en el caso de la glucosa se torna presente en la muestra.

de un color café claro dando esta prueba La fructosa es una cetosa razón por la cual
como negativa. obtenemos un resultado positivo.

Y la sacarosa no es cetosa, pero está

formada por una aldosa y una cetosa razón
por la cual el resultado también es
positivo.
Ilustración 5: soluciones con seliwanoff. Ilustración 6: almidón con lugol

fuente: elaboración propia.

VI. PRUEBA PARA fuente: elaboración propia.

ALMIDON:
VII. PRUEBA DE
En el tubo que contiene almidón al FEHLING:
agregar dos gotas de yodo (lugol) nos dio
en esta prueba se observa la coloración
una coloración azul negruzco esto se debe
que se observa en las soluciones,
a que en esta reacción el yodo entra a la
arrojando negativo en todas tres.
estructura helicoidal del almidón, es
Ilustración 7: soluciones con fehling.
decir, que los átomos de yodo se
introducen entre las espirales provocando
la absorción o fijación de yodo en las
moléculas del almidón.

fuente: elaboración propia

 VIII. HIDRÓLISIS DEL también denominada reacción de
ENGRUDO DE Maillard o glicación.
ALMIDÓN DE PAPA:
 La sacarosa es un disacárido que
En la imagen muestra el almidón de papa
no posee carbonos anoméricos
mezclado con el HCl y puesto a
libres por lo que carece de poder
ebullicion, para luego ser hidralizado por
reductor y la reacción con el licor
el carbonato de sodio al 15%pv.
de Fehling es negativa. (10)
Ilustración 8: almidón de papa hidrolizado. Características de los azucares no
reductores
 Son aquellos que se unen por
enlaces glicosidicos de tipo Alfa y
Beta.
 Cuando 2 monosacáridos iguales o
diferentes se unen forman un
disacárido
 Los disacáridos por condensación
liberan una molécula de agua por
esta razón son no reductores. (11)
fuente: elaboración propia.

DISCUSIONES 2. Realice un esquema para la

1. características principales de los clasificación de los carbohidratos.

azucares reductores
Ilustración 9: clasificación de carbohidratos.
 azúcares que dan resultados
positivos con las Los soluciones de
Tollens, Benedict ó Fehling se
conocen como azúcares
reductores.
fuente: (12)
 provocan la alteración de
las proteínas mediante la reacción
de glucosilación no enzimática
Estos métodos que utilizamos en esta La Prueba de Seliwanoff las cetosas se
práctica de laboratorio son los más deshidratan más rápidamente que las
prácticos para el reconocimiento de aldosas. Ésta prueba es utilizada para
Carbohidratos. el reconocimiento de fructosa, se basa
en azúcares que pueden hidrolizarse, la
Esto nos servirá para toda nuestra carrera
reacción es positiva cuando las soluciones
profesional, obtuvimos un buen
luego detenerlas por un tiempo en baño
conocimiento.
María presentan colores amarillos,
Los Carbohidratos se hidrolizan en anaranjados rojizos.
azúcares más simples, y una vez sucedido
esto reaccionan manifestando cambios de
CONCLUCIONES
color en cada tubo de ensayo y también
con las formaciones de precipitado en la gracias a esta práctica logramos identificar
prueba de Fehling. algunos carbohidratos presentes en
sustancias como la glucosa la fructosa la
Prueba de Molisch, es ácido sulfúrico
arabinosa el almidón la ribosa la galactosa
concentrado que hidrolizaenlaces glicosíd
la sacarosa y demás mediante reactivos
icos para dar monosacáridos que pueden s
como el Molisch, Benedict, barfoed, bial,
er luegodeshidratados dando furfural y sus
seliwanoff, Benedict, para lograr tener una
derivados. Estos productos se combinan
prueba exitosa se consultó las
luego con alfa-naftol sulfonato originando
características principales de los azúcares
un complejo púrpura. Esta reacción es
reductores y no reductores la clasificación
general para los hidratos de carbono, pero
de los carbohidratos la aplicaciones de las
algunos otros compuestos orgánicos dan
pruebas los mecanismos de reacción de
también furfural con ácido sulfúrico
cada una de estas pruebas también se
concentrado.
identifica mediante estas pruebas la
La prueba de benedict es otra de las
presencia de carbohidratos en alimentos de
reacciones de oxidación que nos ayudó
consumo diario y se amplía más nuestro
para el reconocimiento de azucares
conocimiento para lograr tener una
reductores ósea aquellos compuestos que
alimentación completa y balanceada.
presentan su OH anomérico libre como la
glucosa, lactosa y maltosa.
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Referencia de hipervínculo no válida..

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