PRÁCTICA No.
6 ENZIMAS, MOLÉCULAS FUNDAMENTALES PARA EL
METABOLISMO
I. Procedimiento
Parte I: Presencia de enzimas
1. Coloca un trozo de 1cm3 de hígado fresco en un tubo de ensayo y agrega 20 gotas (1
mL) de H2O2.
2. Transfiere el líquido (sin el trozo de hígado) a un segundo tubo y agrega un nuevo
trozo de 1cm3 de hígado fresco. ¿Hay reacción? Explique.
No hubo una reacción tan intensa, difícil de apreciar a simple vista. Solamente se
observó un leve burbujeo.
3. Agrega nuevamente 20 gotas de H2O2 al tubo original. ¿Hay reacción? Explique.
En este caso al agregar más agua oxigenada, el burbujeo va aumentando cada vez más.
La reacción es más fuerte.
4. Tritura con un mortero y una pizca de arena un trozo de 1cm3 de hígado fresco, coloca
el triturado dentro de un tubo y agrégale 20 gotas de H 2O2. ¿Observaste algún
cambio? ¿Por qué?
No se observa ningún cambio a simple vista. No hay ningún burbujeo y la arena no
permite que se observe algún cambio aparente. Al triturar tanto las membranas, las
mismas están tan separadas que el efecto casi ni se aprecia.
Parte II: Presencia de catalasa en otros tejidos
La catalasa se encuentra en otros tejidos además del hepático. Utilizando diferentes tejidos;
seguiremos los pasos del método científico para comprobar la presencia de catalasa.
1. Debe tener un trozo de cada tejido crudo (Hígado, pollo, corazón y res).
2. Coloca cada tejido en un tubo y agrega 20 gotas de H2O2 a cada uno.
3. Registra tus resultados en el cuadro 1 incluye observaciones sobre la intensidad de la
reacción para cada uno de los tejidos. Pueden utilizar el tiempo de reacción o la
intensidad clasificada en una escala de 1 a 5.
Cuadro 1.
No. Tejido Fotografía Intensidad Observaciones
de la
reacción
1 Hígado 5 Hubo un gran burbujeo. La
gran cantidad de catalasa en
el hígado provoca que se
produzca una gran cantidad
de oxígeno y agua. Se puso
de un color más opaco el
hígado.
Burbujeo por un tiempo
estimado de 1 min.
2 Pollo 3 Burbujeó poco por menos
tiempo y el color cambió con
baja diferencia. Se tornó a un
color crema.
3 Corazón 2 La reacción del corazón crudo
fue cas imperceptible.
Burbujeó muy poco y por 45s
aprox.
El color se tornó a un rojo más
opaco.
4 Carne de Res 4 La carne tuvo un efecto
sorpresivo. Se produjo una
gran cantidad de oxígeno que
levantó la carne de su
posición original. No obstante,
la duración fue menor a la del
hígado.
La carne pasó a un color café
opaco.
Parte III: Factores que afectan la actividad enzimática
Usaremos los tejidos cocidos como forma de explorar el efecto de la temperatura en la actividad
enzimática. El HCl para evaluar el efecto del pH y un compuesto llamado hidroxilamina que
funciona como inhibidor competitivo de la catalasa.
1. Debe tener un trozo de cada tejido cocido (Hígado, pollo, corazón y res).
2. Coloca cada tejido en un tubo y agrega 20 gotas de H2O2 a cada uno.
3. Registra tus resultados en los primeros 4 espacios del Cuadro 2. Compara la
intensidad de reacción con la de los tejidos crudos.
4. En un nuevo tubo coloca un trozo de hígado, agrega 5 gotas de HCl y posteriormente
20 gotas de H2O2. Registra tus resultados en el Cuadro 2 y compara con el hígado
crudo.
5. En un nuevo tubo coloca un trozo de hígado, agrega 5 gotas de Hidroxilamina (NH2OH)
y posteriormente 20 gotas de H2O2. Registra tus resultados en el Cuadro 2 y compara
con el hígado crudo.
Cuadro 2.
Tejido Fotografía Intensidad de la reacción Observaciones
1 Hígado cocido 2 El hígado cocido no
mostró una reacción tan
fuerte como la del crudo.
Hubo un burbujeo leve y
poca diferencia de color.
Se puso más seco.
2 Pollo cocido 3 El pollo cocido sí
reaccionó un poco más
que el hígado cocido.
Pude encontrar una
especie de sedimento en
el tejido.
Hubo un burbujeo leve,
poco oxígeno producido.
3 Corazón cocido 4 El corazón cocido burbujeó
más y se puso de un color
más opaco. Se produjo
más oxígeno y agua.
Se puso bastante más
opaco.
4 Carne de Res 1 La reacción fue muy leve
cocida en este caso en
comparación a la carne
cruda. No se produjo
mucho oxígeno ni agua.
Se observó que se puso
más seca.
5 Hígado + HCl 4 El hígado se puso mucho
más seco hasta el punto
de partirse. Hasta se notó
como había fibras
pequeñas en el tubo. La
acidez del HCl coció al
hígado.
6 Hígado + El hígado mostró un color
Hidroxilamina amarillento. Se puso más
3 seco y hubo un leve
burbujeo.
Discusión de Resultados
La práctica se basó en una reacción entre la catalasa y el peróxido de hidrógeno (Agua
oxigenada).
En este caso, la catalasa es el catalizador de la dismutación del agua oxigenada
(H2O2). (Solomon, 2013)
En la primera parte de la práctica se observó cómo reacciona el peróxido con tejidos
crudos. En términos generales, se producía oxígeno en diferentes cantidades.
El hígado y res cruda mostraron las reacciones más fuertes y violentas, produciendo
altas cantidades de oxígeno y agua. El pollo y corazón mostraron la dismutación del
agua oxigenada en menor medida.
Aunado a lo anterior, todos los tejidos se pusieron más opacos.
Cabe mencionar que el hígado es el que más catalasa posee, por esa misma razón es
que la reacción se presenta vehemente. Por ello mismo, los demás tejidos no
mostraron tan ilustrativamente la reacción.
En la segunda parte de la práctica se utilizan los mismos tejidos, pero cocidos. En este
caso existe una desnaturalización de la enzima que sucede cuando hay pérdidas de
estructuras químicas y se pierden propiedades nativas adquiriendo nuevas
propiedades. (Solomon, 2013)
Al cocer cada tejido se desnaturalizan las enzimas que poseen. La reacción del hígado
cocido fue una decepción comparada a la del hígado crudo, esto porque la catalasa se
deformó y no tuvo la misma capacidad de reacción.
Así también en los demás tejidos la liberación de oxígeno y de agua no fue la misma.
El pH juega un papel importante en las enzimas. Al alterarse el pH de la célula, las
enzimas se desnaturalizan y dejan de realizar su función. (Solomon, 2013)
El HCl al ser un ácido desnaturaliza por completo a la catalasa, por esa razón es que la
catalasa no se activa correctamente y no se libera oxígeno en forma de calor.
Al sumergir el catalizador con Hidroxilamina se produce una catálisis. En otras
palabras, la catalasa aumentó su velocidad de reacción (Solomon, 2013). Hay un
burbujeo, pero es fugaz. Se libera el O2 y agua, el trozo de hígado cambió rápidamente
de apariencia.
Conclusiones
• Dependiendo de la cantidad de catalasa que posea el tejido, así dependerá la
cantidad de oxígeno liberado y agua producida.
• En este caso, la catalasa provoca que el agua oxigenada se convierta en agua y
oxígeno. En esta reacción se libera calor.
• Al alterar el pH de la catalasa o cualquiera enzima la reacción que antes se
producía cambia totalmente.
• Al exponer a altas temperaturas una enzima, la misma se desnaturaliza, por lo que
la reacción cambia significativamente.
II. Valoración
Ítem Puntos Observaciones
Resultados y observaciones /20
Discusión /50
Conclusiones /30
Total /100
Referencias
Solomon, e. a. (2013). Biología . Ciudad de México: Cengage Learning.