REPORTE DE PRÁCTICA DE LABORATORIO
TÍTULO DE LA PRÁCTICA: Separación de pigmentos vegetales mediante
cromatografía en capa fina (CCF) cálculo de Rf
CAMPUS: Chapultepec
DEPARTAMENTO ACADÉMICO:
LICENCIATURA DE: QFBT ASIGNATURA: Laboratorio de Analítica III
ALUMNO(S): Brenda
Jesus
Gutiérrez Balbuena Mayra Fernanda
Rodríguez Guzmán Pamela Amairani
Sánchez Lima Daniela Alejandra
Terreros Moysen Paola
1. INTRODUCCIÓN AL REPORTE
Los pigmentos vegetales, pueden dividirse en dos grandes grupos, en base a su
solubilidad:
a) Solubles en agua: antocianinas y antoxantinas, que se encuentran en el jugo
vacuolar.
b) Solubles en solventes orgánicos: clorofilas "a" y "b" y carotenoides (rojo,
naranja y amarillo), que se encuentran en las granas y tilacoides de los
cloroplastos. Son los responsables de la captación de la energía luminosa en el
proceso de la fotosíntesis.
Las
clorofilas poseen unas estructura porfirínica, formada por cuatro anillos pirrólicos
con un átomo de magnesio en su centro, un anillo de ciclopentanona y un éster
de fitol unido a uno de los anillos de pirrol que provee a la molécula de una cola
lipófila. La diferencia entre las distintas clorofilas existentes (se conocen al
menos siete) se encuentran en los sustituyentes que se presentan; así la
clorofila "a" (verde azulada) presenta un grupo metilo (-CH3) en el carbono 3, y
la "b" (verde amarillenta) un grupo aldehido (-CHO) en la misma posición
Para el análisis de los carotenoides se utiliza un disolvente distinto, el hexano.
En hexano se disuelven perfectamente los
pigmentos carotenoides pero también se
solubilizan en parte las clorofilas, por lo que
es necesario eliminarlas de la solución como
paso previo a la lectura espectrofotométrica
del extracto. La eliminación se lleva a cabo
por saponificación del grupo éster de las
clorofilas, lo que las hace insolubles en este
disolvente.
Los pigmentos migran a distintas velocidades
de acuerdo a su solubilidad. De este modo se
puede efectuar una separación entre ellos y cada compuesto puede ser definido
por una magnitud específica denominada Rf (relación de frente), que tiene
valores entre 0 y 1.
Donde e= es la distancia que separa el centro de la mancha inicial, del producto
revelado por arrastre.
h= distancia entre el centro de la misma mancha y la línea frontal del disolvente.
Si e=0 el Rf=0 es decir no hay separación del producto.
Si e=h el Rf=1 es decir que el producto asciende hasta igual nivel que el
solvente.
La cromatografía en capa fina es la técnica de separación e identificación de
sustancias químicas, por medio de un
disolvente que se mueve por una capa
delgada de un adsorbente idóneo. Este
adsorbente, generalmente con un
adhesivo, se deposita sobre una hoja de
vidrio o de otro material que actúa
como soporte inerte de la capa. Para
preparar la capa se hace una masa o
pasta de materiales finamente molidos
y mezclado con un líquido apropiado
como el agua, se coloca sobre la lámina
de vidrio, extendiéndola como una
cubierta fina y lisa, y se seca. En este
trabajo práctico se utilizará sílica-gel G 254, para preparar las placas. El
adsorbente, una vez seco, se adhiere a la lámina.
Se activan las placas en estufa colocándolas a una temperatura de alrededor de
100º C, durante 15 minutos. Luego se retiran y se colocan en el desecador, el
cual contiene una caja de Petri con sílica gel, hasta que se enfríe; de esta
manera se elimina el agua de la placa.
Luego se coloca la mezcla de los solventes (75:25 éter de petróleo-acetona), en
la cuba de cromatografía hasta saturar (tiempo estimado de 1 a 1:30 hs). Este
paso se realiza para evitar distorsión en el frente de la cromatografía y en la
separación de lo sembrado.
2. OBJETIVO
a) Comprender el fundamento de la técnica analítica
b) Capacidad de tomar decisiones acerca del tratamiento previo de las
muestras
c) Identificar cada uno de los elementos presentes en un compuesto
d) Reportar y discutir los resultados obtenidos
3. METODOLOGIA
4. RESULTADOS
5. ANALISIS DE RESULTADOS
6. CONCLUSIONES
Se logró comprender y aplicar el fundamento de la técnica de cromatografía en capa
a elaborar placas de sílice, así como la extracción de pigmentos vegetales tales como
caroteno provenientes de las zanahorias los cuales se identificaron con la mis técnica
observando como la parte móvil (eluyente) desplazaba a la fase estacionaria (pigmen
7. BIBLIOGRAFIA
1- [Link]
m_didactico/manual_practicas/ExtPig_bED.pdf
2- [Link]
3-
RIO O
Universidad del valle de México
Campus Chapultepec escuela de
ciencias de la salud licenciatura en QFBT
Reporte de práctica de laboratorio
Título de la práctica: separación de pigmentos vegetales
mediante cromatografía en capa fina (CCF) cálculo de Rf
Presenta:
Nombre de estudiante (s): brenda
jesus
Gutiérrez Balbuena Mayra Fernanda
Rodríguez Guzmán Pamela Amairani
Sánchez Lima Alejandra Daniela
Terreros Moysen Paola
Nombre del profesor: Lic. Tania Montiel Amador
Materia: Laboratorio de química analítica III
Semestre: quinto
Fecha de entrega: 7/junio/ 18