Dr.

Valmore Bermúdez Pirela

CAPÍTULO 5
SEÑALIZACIÓN INTRACELULAR:
LAS HORMONAS Y SU MECANISMO DE ACCIÓN

Dr. Valmore Bermúdez Pirela

INTRODUCCION

N
inguna célula puede vivir aislada. En todos los organismos multicelulares la
supervivencia depende de una red de comunicación muy intrincada que coordina el
crecimiento, diferenciación y el metabolismo en toda la multitud de células que forman
todos los tejidos y órganos.
Es un hecho sorprendente comparar un organismo multicelular
con una gran ciudad, la cual puede considerarse como una
macro entidad viviente. Una ciudad, está formada por una gran
cantidad de individuos, cada uno de los cuales tiene una
función específica. De la misma forma, en la ciudad existe una
gran variedad de elementos que generan señales, bien sea
visuales (semáforos, carteles, avisos de tránsito, etc.) auditivas
(gritos, bocinas de automóviles, etc.) y cualquier otra que
estimule los sentidos, que permiten que los individuos tomen
conductas que propicien la organización de toda esta masa
humana para que se dirija más o menos hacia la obtención de
un beneficio común. Aquí un individuo se puede comunicar con
otro de manera directa o también a distancia, lo importante es,
que esta comunicación mantiene en equilibrio a esta
macroentidad y con una muy estrecha relación de sus elementos constituyentes. Si se
perdiera la comunicación la entidad se convertiría en un caos por la rápida desorganización
de esta estructura (FIG. 1).
En este corto análisis se examinarán los diferentes mecanismos mediante los cuales las
células (así como los individuos de una ciudad) se comunican entre sí, principalmente a
través de moléculas de señalización denominadas HORMONAS. Las hormonas son
sustancias químicas de naturaleza orgánica que forman grupos heterogéneos según sus
características químicas y que sirven como compuestos que relacionan una célula o grupo
de células con otras. Según el concepto tradicional, para poder considerar un compuesto
como hormona debe ser producido por un tejido específico de donde es secretada al torrente
circulatorio el cual se encarga de transportarla (a distancia) hasta el tejido blanco donde se
observa el efecto fisiológico final. Sin embargo, muchos autores han ampliado este concepto
al incluir a ciertos “factores”, generalmente proteicos, que son producidos por un tejido
 Las hormonas y su mecanismo de acción

específico pero que no son vertidos a la sangre sino que actúan sobre células muy cercanas
o paradójicamente sobre ellas mismas, por lo que no necesitan ganar la circulación para
poder ejercer su efecto. Obviamente, cuando apareció el término hormona, hace ya varias
décadas, no se conocían estos factores (citoquinas, factores de crecimiento, linfoquinas,
prostaglandinas, tromboxanos y leucotrienos) que actualmente se aceptan - aunque de
manera parcial - como elementos que forman parte de sistemas microendocrinos, motivo por
el cual se les ha acuñado el término de “hormonas de acción local” o autoacoides.
Las hormonas son sintetizadas y liberadas por células denominadas señalizadoras y deben
viajar una distancia variable hasta llegar a su célula blanco o diana donde producen una
respuesta específica ya que éstas últimas poseen receptores para las moléculas
señalizadoras. En realidad, la función fundamental de una hormona es la de cambiar el
patrón metabólico de la célula blanco para que ésta se adapte a los diferentes cambios que
pueden acontecer en el medio ambiente. Por ejemplo, cuando un individuo se alimenta, la
concentración de glucosa en sangre se eleva alrededor de 3 - 4 veces del valor basal, esto
estimula la liberación de la hormona insulina, cuyo efecto primario sobre las células blanco
(músculo, por ejemplo) es promover el ingreso de la glucosa a su interior, lo que provoca el
descenso de la concentración sanguínea de la misma a niveles normales. De esta manera, el
cambio primario del medio ambiente es el aumento desmedido de la concentración de
glucosa sérica al alimentarnos, la señal reguladora generada por este desequilibrio es la
secreción de Insulina y la respuesta final es la captación de glucosa por las células blanco y
la disminución de los niveles de glucosa. Esta secuencia se repite para cada uno de los
sistemas hormonales existentes, por lo que no es exclusivo para el mecanismo de secreción
de la insulina mediado por la hiperglicemia.
Los seres vivos deben ser capaces de responder de manera instantánea a una gran variedad
de cambios en su medio interno y externo. Estas respuestas rápidas están mediadas
principalmente por hormonas de tipo proteico y las catecolaminas. Las células productoras
almacenan estas hormonas en gránulos de secreción ubicados justo debajo de la membrana
celular. La cantidad de hormona disponible en depósito es suficiente para los requerimientos
de unas 24 horas para el caso de las hormonas proteicas y para varios días en el caso de las
catecolaminas. En el caso de las hormonas esteroideas y tiroideas, la señal generada se
inicia después de varias horas de secretada la hormona y puede persistir en muchos casos
durante días.
El presente capítulo estudiará de manera general las características de los principales
sistemas de regulación hormonal así como las diferentes formas de clasificación de las
hormonas y la manera de como estos importantes compuestos son capaces de interactuar
con la célula para generar un cambio en las funciones orgánicas que permiten a la célula
sobrevivir en un medio que cambia continuamente.

LAS HORMONAS PUEDEN SER CLASIFICADAS DE DIFERENTES MANERAS

Debido a la gran heterogeneidad estructural de las diferentes hormonas, se ha intentado

clasificar a estos compuestos desde los más diversos puntos de vista, como su solubilidad en
agua o lípidos, su tejido de origen, el segundo mensajero que interviene en la señalización
intracelular, la ubicación de su o sus receptores, su naturaleza química, etc.
Las tablas 1, 2 y 3 resumen tres diferentes formas de clasificar a las hormonas, bien sea
según su naturaleza química, segundo mensajero generado y el tejido de origen, sin
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

embargo una forma muy común de clasificarlas es según su solubilidad en diferentes

solventes como:
a. Hormonas liposolubles: son aquellas hormonas que gracias a su naturaleza
estructural, que se deriva a partir de compuestos hidrocarbonados, son capaces de
difundir a través del ambiente lipídico de la membrana de la célula blanco
fácilmente. Se conocen 2 grupos:
1. Las hormonas esteroideas, que se derivan del núcleo denominado
ciclopentanperhidrofenantreno, las cuales se clasifican en cuatro subgrupos:

Glucocorticoides: Cortisol, cortisona, corticosterona.

Esteroides sexuales: estrogenos, progestágenos y testosterona

Mineralocorticoides : Aldosterona

1,25-Dihidroxicolecalciferol (Calcitriol)
2. Los Eicosanoides, que se derivan de los ácidos grasos esenciales de 20
átomos de carbono: ácido linolénico, linoléico y araquidónico y que pueden
dividirse en:

Prostaglandinas, Leucotrienos y Tromboxanos
3. Hormonas derivadas de un aminoácido

Hormonas tiroideas
b. Hormonas hidrosolubles: Son aquellas que por poseer grupos químicos cargados
eléctricamente (Polares) son fácilmente solubles en agua, pero no pueden atravesar
(debido a la misma naturaleza polar) la membrana plasmática. Por esta razón
necesitan un receptor de membrana y un segundo mensajero para la traslocación
de la señal al interior celular. Este grupo está representado por las hormonas de
naturaleza proteica y por las catecolaminas.

Las hormonas también pueden ser clasificadas según el tipo de receptor que posee cada una
de ellas:
1. Hormonas que poseen receptor de membrana:
• Hormonas derivadas de 1 aminoácido:
◊ Catecolaminas
• Hormonas Proteicas
• Hormonas de naturaleza lipídica:
◊ Prostanoides: El cual es un caso interesante, ya que a pesar que son
liposolubles poseen receptores de membrana.
2. Hormonas que poseen receptores citoplasmáticos y/o nucleares:
◊ Con receptores citoplasmáticos y nucleares: Hormonas esteroideas
◊ Con receptores nucleares: Hormonas tiroideas

Finalmente, existen una serie de sustancias de naturaleza proteica cuyo mecanismo de

generación de señales son indistinguibles de los de las hormonas clásicas, por lo que
algunos autores se refieren a ellas como elementos de un sistema microendocrino de
defensa, entre éstas tenemos:

Familia de las Interleucinas (IL)
◊ IL1α, IL-1β, IL-2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20

Familia del Factor de Necrosis Tumoral (TNF)
◊ TNF-α y TNF-β
 Las hormonas y su mecanismo de acción

Familia de los Interferones

◊ INT-α, INT-β, INF-γ

Familia de los factores estimulantes de colonias
◊ MG-CSF, M-CSF, G-CSF

Tabla 1
Clasificación de las hormonas según su naturaleza química
T ipo de H o rm on a E jem p los

In sulina, glucagó n, p rolactina, T R H , tiro tro pin a,

H o rm onas de naturaleza proteica calciton ina, H orm ona d el crecim iento , G R H ,
G nR H , A C T H , F S H , L H .

E stradio l, cortisol, pro gesteron a, leucotrieno s,

H o rm onas de naturaleza lipíd ica aldostero na, testosteron a, trom box an os.

H o rm onas deriv ad as d e 1 am in oácido T 3, T 4, adrenalin a, n oradrenalina,do pam ina

Tabla 2
Clasificación de las hormonas según el segundo mensajero utilizado

Segundo Mensajero Ejemplo

AM Pc A c e ti lc o li n a ( N i c .) , a n g io t e n s in a II, L H , G lu c a g ó n ,
C a te c o la m in a s ( B e ta 2 ) A D H , F S H , T S H , A C T H ,

C a lc io o u n f o s f o in o s it ó s id o A c e ti lc o li n a ( m u s c a rín ic o ) , V a s o p r e s in a , o x ito c in a ,
C C K , S u s ta n c ia P , G a s tri n a , c a te c o la m in a s (A lfa )

U n a f o s fo t ir o s in p r o t e ín a In s u lin a , IG F - 1 y 2 , P D G F , P r o la c tin a
n o e n z im á t ic a

U n a t ir o s in f o s fa t a s a P r o te í n a le u c o c i ta r ia C D -4 5

U n a t ir o s in c in a s a E r itr o p o y e tin a , in te rf e ro n e s

U n a s e r in /tr e o n in c in a s a F a c to r d e c r e c im ie n to t ra n s fo r m a d o r b e ta

Tabla 3
Clasificación de las hormonas según el tejido de origen

H . h ip o ta lá m ic as e G R H , G N R H , C R H , P IH , G H R IH , v as o p res in a , o x ito c in a ,
h ip o fis ia ria s A C T H , G H , L H , F S H , P ro la c tin a , T S H , β − L P T , γ − L P T ,
α − M S H , β − M S H , E n d o rfin a α , E n d o rfin a β .

H . s u p ra rre n a le s C o rtic o s te ro id e s, m in e ra lo c o rtic o id e s , e s te ro id e s

se x u a le s , A d ren a lin a , n o rad re n alin a, d o p a m in a
H . p la c e n ta ria s G CH , SM TC
H . g a stro in te s tin ale s G a s trin a , s e c re tin a ,P IG , E G , P P , C C K , g lice n tin a , P IV ,
b o m b e s in a , n e u ro te n sin a
P é p tid o s n e u ro e n d o c rin o s S u s ta n c ia P , s o m a to s ta tin a
H . d e l is lo te d e In su lin a , s o m a to sta tin a , P P , g lu c a g ó n
L a n g e rh a n s
H . T iro id e a s y d e T 3 , T 4 , C a lcito n in a y P T H
p a ra tiro id e s
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

VISION GENERAL DE LOS MECANISMOS DE SEÑALIZACION EXTRACELULAR

En los organismos superiores, las hormonas pueden ejercer sus efectos a largas, medianas y
muy cortas distancias. De esta forma, basados en la distancia recorrida por la hormona para
actuar sobre la célula blanco, se pueden diferenciar cuatro grandes mecanismos de acción
hormonal:

a. Mecanismo endocrino: en el cual la hormona es liberada hacia el torrente

circulatorio a través del cual llega a la célula blanco.
b. Mecanismo paracrino: en el cual la hormona es liberada hacia el espacio
intersticial que rodea a la célula productora y actúa sobre otra célula situada muy
próxima a ella.
c. Mecanismo autocrino: en el cual la célula que secreta la hormona responde, ella
misma, al producto que liberó.
d. Mecanismo Yuxtacrino: La hormona está anclada en la membrana y allí se une al
receptor situado muy cercano a la hormona en la misma membrana de la misma
célula (Fig.2).

Algunas hormonas pueden actuar a través

de dos o inclusive tres mecanismos, como
sucede por ejemplo con el EGF (Factor de
crecimiento epidermal) que puede actuar ya
sea endocrina, paracrina o autocrinamente.

La respuesta de un tejido a una hormona en

particular depende de los receptores que la
célula posee y de las reacciones
intracelulares que se inician cuando la
hormona se une al receptor. Diferentes tipos
celulares pueden tener diferentes juegos de
receptores para la misma hormona cada uno
de los cuales puede mediar una respuesta
diferente. De otra manera, el mismo receptor
puede estar presente en diferentes tipos
celulares, y la unión de la misma hormona
puede provocar respuestas diferentes en
cada tejido. Por ejemplo, los receptores para
acetilcolina se pueden encontrar, entre otros
tejidos, en la membrana celular de los
miocitos estriados, en las células musculares
del corazón y en las células acinares del
páncreas, sin embargo, la secreción de
acetilcolina desde una neurona cercana a
cada uno de estos tejido provoca en el
Fig. 3 Clasificación del efecto de una hormona según miocito estriado su contracción, mientras que
la distancia que tiene que recorrer dicha hormona en el corazón disminuye su frecuencia de
para ejercer su efecto sobre la célula blanco.
contracción y en la célula acinar pancreática
 Las hormonas y su mecanismo de acción

produce la secreción de enzimas digestivas.

Debido a sus potentes efectos, las hormonas y neurotransmisores deben estar
cuidadosamente reguladas en cuanto a su liberación, distribución y degradación. En algunos
casos la liberación y degradación de algunos compuestos señalizadores son reguladas para
proporcionar efectos de manera rápida y con una duración corta de su efecto, y en otros
casos, los efectos se producen en un lapso de tiempo mayor y con una persistencia del
efecto también mayor.
Como se comentó antes, para que una hormona pueda ejercer su acción debe unirse a una
molécula orgánica de naturaleza proteica - el receptor - con gran especificidad y afinidad,
dicha interacción involucra los mismos tipos de enlaces que caracterizan la unión específica
entre una enzima y su sustrato o la de un antígeno con su anticuerpo. La especificidad de un
receptor es un término que relaciona la capacidad de éste de distinguir sustancias
estrechamente relacionadas entre sí; por ejemplo, el receptor de insulina puede ligar con alta
afinidad a la insulina y con una afinidad 1.000 veces menor al IGF-1 y 2, pero no es capaz de
ligar a otros péptidos.
Existen diferentes tipos de receptores según su ubicación en distintos sectores de la célula,
de esta manera se distinguen 3 poblaciones de receptores:

1. Receptores de membrana: Los cuales unen a las hormonas de tipo proteico, a las
catecolaminas y los Prostanoides.
2. Receptores Citosólicos: Los cuales ligan a las hormonas esteroideas.
3. Receptores Nucleares: los cuales ligan a las hormonas esteroideas y las hormonas
tiroideas.

De todo lo expuesto se concluye que se deben seguir una serie de pasos para que la
hormona pueda ejercer su efecto. Estos pasos involucran muchas veces una gran diversidad
de tejidos y moléculas que actúan al unísono para regular la actividad del tejido blanco. Así,
de manera didáctica, la acción hormonal transcurre por lo siguientes eventos:

1.- Síntesis de la hormona en la célula señalizadora.

2.- Liberación de la hormona desde la célula señalizadora
3.- Transporte de la señal a hacia la célula blanco
4.- Detección de la señal gracias a la presencia de un receptor en la célula blanco.
5.- Cambios en el metabolismo celular o en la expresión genética (o ambos) en la
célula blanco.
6.- Remoción de la señal, lo que concluye con el efecto hormonal y por ende en la
respuesta del tejido a la misma, en un tiempo variable.

Si se analizan estos seis apartados, se puede deducir que una vez que una célula produce y
libera una hormona, esta recorre una distancia determinada hasta llegar a la célula blanco.
Una vez que la hormona toma relación con dicha célula el siguiente evento dependerá de la
naturaleza química del receptor : si es una hormona de naturaleza proteica, derivada de un
aminoácido (catecolaminas) o un prostanoide, esta se unirá con un receptor de membrana ;
pero si la hormona es esteroidea o tiroidea (Derivada del aminoácido Fenilalanina) puede
atravesar libremente la membrana gracias a la liposolubilidad de estas sustancias, por lo que
obviamente no necesitan un receptor de membrana.
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

El receptor de membrana es una estructura necesaria para aquellas hormonas que no

pueden atravesar la membrana plasmática, bien sea por su tamaño o por su carácter
altamente polar (cargado eléctricamente). De esta forma, luego que estas hormonas se unen
a un receptor de membrana, se debe producir una respuesta que lleve la información de la
hormona (primer mensajero) hacia el interior celular, esta respuesta se denomina
traslocación de la señal, la cual está íntimamente relacionada con la síntesis de una molécula
denominada segundo mensajero, que finalmente transmite la señal a los efectores finales de
la acción hormonal: Proteínas con capacidad catalítica, Proteínas contráctiles, Proteínas con
función de Factor de transcripción o directamente al ADN (actuando como inductores o
represores de la transcripción del ADN). De esta manera, se puede inferir que los
mecanismos de acción del grupo de las hormonas proteicas/catecolaminas es bastante
diferente al del grupo hormonas esteroideas/tiroideas.

MECANISMO DE ACCION DE LAS HORMONAS ESTEROIDEAS Y TIROIDEAS

Introducción

Debido a su liposolubilidad, las hormonas esteroideas/tiroideas (HE/T) pueden atravesar

fácilmente el ambiente lipídico de la membrana por difusión simple, por lo que la señal o
mensaje que ellas transportan puede ser introducido al interior celular sin la necesidad de la
síntesis de un segundo mensajero. Es importante recordar que todas las hormonas
esteroideas y tiroideas utilizan un mecanismo clásico endocrino de acción, es decir, que son
vertidas a la sangre desde el órgano endocrino que la produce y se unen en el torrente
circulatorio a una proteína transportadora que le permite solubilizarse en el ambiente acuoso
plasmático.

Fig. 3 Visión general del mecanismo

de acción de las hormonas
R
PCT R + esteroideas. Nótese que la hormona
PCT
Hormona
esteroidea atraviesa libremente la
membrana plasmática y se une a un
receptor a nivel del citosol. En primera
instancia el receptor forma complejo
R R
con las proteínas de choque térmico
Citosol (PCT) pero cuando la hormona se une
ocurren cambios conformacionales en
el receptor y éste se disocia de las
PCT. Posteriormente el complejo
+ hormona receptor dimeriza con otro
R R
idéntico y se dirige al núcleo y se une
Membrana
Nuclear ADN ERH Gen a una porción específica de ADN que
se denomina elemento de respuesta a
hormonas (ERH) que regula la
expresión de un gen estructural
blanco. Para más información véase el
Núcleo
texto.
Una vez en el citosol de la
célula blanco, la hormona esteroidea encuentra un receptor especifico y de alta afinidad. A
 Las hormonas y su mecanismo de acción

continuación el complejo hormona-receptor sufre una reorganización que se denomina

activación, la cual le permite viajar hacia el núcleo y unirse a elementos específicos de la
cromatina activa para la transcripción denominados elementos de respuesta a hormona
(ERH).
Los ERH son porciones específicas de ADN que se encargan de regular la transcripción un
gen específico a ARNm y que, junto con el sitio promotor, amplificadores y silenciadores,
toman la denominación general de elementos reguladores de la transcripción.
El sitio promotor se encuentra a pocos pares de bases corriente abajo del comienzo del gen
y dicta la orden de ‘’donde’’ comienza la transcripción, es decir, son elementos proximales,
mientras que los elementos de respuesta a hormonas, amplificadores y silenciadores se
encuentran generalmente miles de pares de bases corriente abajo del comienzo del gen,
dictando la orden ‘’cuantas veces ‘’ o ‘’ frecuencia’’ se va a transcribir el gen.
De esta manera, las hormonas esteroideas pueden afectar la síntesis proteica, ya que
pueden aumentar o disminuir la síntesis de una proteína específica y en consecuencia su
concentración. La acción de controlar la cantidad o concentración de una proteína mediante
el control en la síntesis de su ARNm se denomina control de la expresión genética: cuando
un gen se expresa, debemos entender que éste produce un patrón en forma de ARNm que
se traduce en forma de una proteína específica. Este hecho desde el punto de vista
metabólico es extremadamente importante si recordamos que las enzimas son proteínas y si
una célula controla la cantidad de enzima sintetizada, podrá aumentar o disminuir la
velocidad con que acontecen algunas reacciones químicas en una vía metabólica
determinada: son los mecanismos de inducción y represión.(Fig. 3)
Las hormonas tiroideas no poseen receptores a nivel del citosol ni están unidas a las
proteínas de choque térmico (PCT, sin embargo, éstas viajan directamente al núcleo y se
unen a su receptor que está en íntima relación con el ADN, en pocas palabras, el receptor
para hormona tiroidea está unido al elemento de respuesta a hormona. (Fig. 4)

Fig.4 Visión esquemática del mecanismo de

acción de las hormonas tiroideas T3 y T4. La
Hormona hormona es capaz de atravesar libremente la
membrana plasmática por su naturaleza apolar
y su bajo peso molecular. A diferencia de las
hormonas esteroideas, las hormonas tiroideas
no poseen un receptor a nivel citoplasmático
sino a nivel nuclear; de esta forma, la hormona
Citosol ADN ERH Gen llega directamente al núcleo y se une al
receptor que se encuentra ya unido al
elemento de respuesta a hormonas y
+ generalmente dimerizado con el receptor para
Membrana rodopsina con el cual forma un complejo que
Nuclear ADN ERH Gen posee actividad silenciadora basal de la
transcripción. Cuando la hormona se une, el
receptor cambia de conformación, y de
silenciador, se convierte en estimulante de la
Núcleo transcripción de un o varios genes
estructurales. Para una mayor información ver
el texto.
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

Estructura de los receptores para hormonas esteroideas/tiroideas

La superfamilia de receptores de hormonas esteroideas/tiroideas es extremadamente amplia

y representa la familia más grande conocida hasta ahora de factores de transcripción (en
realidad, factores de transcripción activados por ligandos) de células eucarióticas, por lo que
juegan un papel importantísimo en la regulación del crecimiento, desarrollo y duplicación
celular. Esta incluye los receptores para estrógenos (RE), progesterona (RP),
glucocorticoides (GC), mineralocorticoides (MC), andrógenos (RA), receptor de hormonas
tiroideas (RT), para vitamina D (RVD), ácido retinoico (RAR) y ácido 9-cis retinóico (RXR). En
adición a esto, se han identificado un número bastante amplio de genes que tienen
secuencias homólogas con el ADN de los receptores antes nombrados, pero
lamentablemente, aún no se conoce el ligando para los productos proteicos de estos genes,
motivo por el cual se les conoce como receptores huérfanos.
El estudio de la secuencia de aminoácidos indica que un receptor típico se puede dividir en
varias regiones o “dominios” funcionalmente activos (Fig.5). El dominio A/B contiene el
extremo aminoterminal de la proteina receptora y es muy variable en extensión y en su
secuencia de aminoácidos. Usualmente este contiene una secuencia que sirve para su
transactivación así como secuencias de aminoácidos importantes para el reconocimiento de
elementos de respuesta a hormona específicos (es decir, para distinguir las diferentes
isoformas). La región C contiene dos dedos de Zinc tipo 2 que son los responsables del
reconocimiento del ADN por parte del receptor y también del fenómeno de dimerización de
los receptores. La región D ayuda al receptor a cambiar de conformación y contiene regiones
para su fijación en el ambiente nuclear y para la transactivación. El dominio de unión a la
hormona se encuentra en la región E, la cual es relativamente extensa y funcionalmente
compleja, ya que también tiene secuencias que intervienen en la asociación con proteínas
de choque térmico, dimerización, localización nuclear, transactivación, silenciamiento
intermolecular y represión intramolecular. Sin embargo, es obvio pensar que la región más
importante es el dominio de unión con la hormona.
Fig. 5 Estructura esquemática de un receptor para hormona esteroidea/tiroidea (RE/T). Se pueden apreciar los
diferentes dominios
activos de la
proteína y su papel
en la regulación en
la actividad del
mismo. Nótese que
el dominio o región F
no tiene función
conocida hasta el
momento y los
estudios basados en
mutagénesis dirigida
y digestión con
proteasas a este
nivel han revelado
que el receptor
mantiene su
funcionamiento
normal a pesar de la
pérdida de este
segmento.
 Las hormonas y su mecanismo de acción

El mayor dominio para la dimerización de receptores se encuentra en el extremo terminal del

dominio E, esta región contiene secuencias ricas en Leucina que forma interacciones hélice -
hélice para dimerización. En el extremo carboxilo terminal se puede encontrar una región
variable llamada F a la cual hasta la fecha no se la ha atribuido ninguna función; su pérdida
no afecta la actividad del receptor.
Las secuencias de ADN que se unen y responden a las hormonas esteroideas/tiroideas se
denominan elementos de respuesta a hormonas (ERH) y con mucho el mejor estudiado es el
ERH para glucocorticoides, el cual está constituido por 2 cortas repeticiones de bases
colocadas de manera invertida y separadas por 3 nucleótidos. Esta organización se repite de
manera más o menos de la misma manera para los ERH de progesterona,
mineralocorticoides, andrógenos y estrógenos (Tabla 4). Esta conservación en la estructura
de los diferentes HRE sugiere que los aminoácidos del receptor que se une al HRE también
deben estar muy conservados, por lo menos, en lo que se refiere a la región C o dominio de
unión al ADN y solo cambios menores en la secuencia de aminoácidos dan cuenta de la
especificidad a los diferentes elementos de respuesta a hormonas. En este sentido es muy
importante estudiar la estructura de la región C del receptor de hormonas E/T ya que ésta
es la que se encarga de interactuar con el ADN (ERH).

Tabla 4
Receptores para hormonas esteroideas/tiroideas y la secuencia de aminoácidos de la caja P de la región
C del receptor y su correspondiente sitio de unión al ADN (ERH). En color verde se aprecia la secuencia
de la caja P para el receptor de glucocorticoides, compárese con la caja P de la figura 2 y nótese su
correspondencia.

Tipo de receptor Secuencia de aminoácidos Secuencia de nucleótidos

de la caja P del elemento de respuesta a
hormona
TR, RAR, VDR, RXR, PPAR CEGCKG AGGTCAXXXTGACCT
HNF4 CDGCKG AGGTCAXXXTGACCT
EAR2 CEGCKS AGGTCAXXXTGACCT
SF1 CESCKG AGGTCAXXXTGACCT
GR,MR,PR,AR CGSCKV TGTTCTXXXAGAACA
ER CEGCKA AGGTCAXXXTGACCT

La región C es una estructura globular que puede dividirse en dos módulos (Fig.6). Cada
módulo está formado por un complejo de coordinación con un átomo de Zinc y una alfa
hélice, formando un “dedo de Zinc”. El primer módulo contiene el primer dedo de zinc, el cual
comienza con un corto segmento de una hoja beta antiparalela y termina con la alfa hélice
entre el segundo par de cisteínas coordinadas con el átomo de Zinc. La hoja plegada beta
ayuda a orientar los residuos de aminoácidos que se ponen en contacto con la columna de
fosfatos del ADN y la estructura helicoidal fija el receptor a la hendidura mayor del ADN. El
segundo módulo tiene la misma organización estructural del primero, pero además de ayudar
a la fijación de la molécula receptora con los fosfatos del ADN, también es de gran
importancia para la dimerización de este receptor con otra proteina receptora de la misma
clase.
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

Es importante hacer notar que dentro de la estructura de estos dos módulos existen regiones
denominadas “cajas”. En el primer módulo se presenta la caja P (P-box) que está formada
por seis aminoácidos y que para el receptor de glucocorticoides son cisteína-glutamato-
serina-cisteína-lisina-valina formando la verdadera región con la que interactúa el receptor
con el ADN. De la misma manera, en el segundo módulo se encuentra la caja D (D-box) que
contiene siete aminoácidos y es la parte de este módulo que interactúa con el ADN. (Fig. 6)
Los mecanismos mediante los cuales las hormonas esteroideas inducen la unión del
complejo hormona - receptor con el ADN son interesantes. Cuando el receptor no está
ocupado por la hormona dominio de unión al ADN (región C) tiene una orientación espacial
desfavorable para la unión con el ADN. Subsecuentemente, cuando se une la hormona con
el receptor, ocurren cambios
conformacionales en la región C que
provocan la exposición del mismo al ERH
en el ADN. Algunos autores también
han propuesto que los receptores para
hormonas esteroideas cuando no están
unidos a la hormona forman complejos
con las proteínas de choque térmico
(PCT), es probable que la PCT bloquee
el sitio de unión al ADN. Otra posibilidad
es que la asociación entre el receptor y la
PCT formen un complejo proteico tan
grande que sea imposible que este
pueda atravesar los poros de la
membrana nuclear.

Papel del receptor en la activación genética y el silenciamiento

Después de la unión con la hormona, el receptor se une al ADN y actúa sobre la expresión
de genes blanco. El progreso en el entendimiento de los mecanismos de transactivación se
vieron un poco retrasados por la carencia de un modelo apropiado in vitro. Hace varios años,
el desarrollo de sistemas de transcripción in vitro libre de células ha ayudado a demostrar la
activación de genes blanco por medio de complejos receptor-hormonas esteroideas
purificados. En la figura 7 se resumen los mecanismos de activación de la activación de un
gen gracias a la inducción mediada por un receptor de hormona E/T activado (RE/T). Este
esquema propone que el receptor estimula la formación de un complejo de pre-inicio bien
sea por un incremento en la tasa de ensamblaje de sus componentes y/o por la estabilización
del complejo ya formado (Fig. 8).
La formación del complejo de pre-inicio es un proceso secuencial en el cual interviene
proteínas reguladoras de la transcripción denominadas “factores de transcripción”, enzimas
como la ARN polimerasa dependiente de ADN, el sitio promotor del ADN (caja TATA), el
ERH y el complejo hormona-receptor. En un primer paso, el factor de transcripción IID
(FTIID) reconoce la caja TATA del sitio promotor y se une a ella (fig. 7a). Luego, el factor de
transcripción IIA (FTIIA) y el factor de transcripción IIB (FTIIB) se unen al ADN de manera
independiente. Es importante recalcar en este punto que cuando el FTIIB se une se forma un
 Las hormonas y su mecanismo de acción

complejo que tiene alta afinidad por la ARN polimerasa, lo que forma un macrocomplejo
llamado ABDF-polimerasa-ADN, que finalmente sirve de anclaje al resto de los factores de
transcripción como el TFIIE, IIH y IIJ, para formar así el complejo de pre-inicio propiamente
dicho, el cual es capaz de empezar la lectura y transcripción del gen blanco para producir
ARNnh que luego de ser procesado generará ARNm maduro. (Fig.7b-d)

ADN Gen estructural Fig.7 El inicio de la transcripción del ADN a

TATA ARN nuclear heterogéneo es un proceso
A complejo y muy bien regulado que involucra
una gran cantidad de proteínas y elementos
FTIID
reguladores proximales y distales. La caja
TATA es uno de los elementos reguladores
proximales mas importantes y se encuentra
generalmente a pocos pares de bases antes
FTIID del comienzo del gen estructural sobre el
ADN Gen estructural cual se regula su transcripción. Esta caja
TATA tiene la capacidad de dictar el sitio “donde”
B debe comenzar la transcripción gracias a su
alta afinidad por un grupo heterogéneo de
TFIIA TFIIB proteínas que se denominan en conjunto
factores de transcripción. Estos compuestos
generalmente presentan gran actividad y
afinidad por el ADN cuando son fosforilados
FTIID
por cinasas del tipo MAP o por cinasas
ADN Gen estructural dependientes de ciclinas, siendo su
TATA incorporación a la caja TATA es un evento
C secuencial como se muestra en los paneles
A-D. Los estudios mas recientes indican que
es bastante probable que la incorporación
FTIIE ARN pol progresiva de los factores de transcripción a
FTIIJ las cajas determinan un sitio de alta afinidad
y por lo tanto, fácilmente reconocible para la
FTIIF ARN polimerasa dependiente de ADN la cual
es la enzima efectora clave en la síntesis de
FTIID ARNnh. Elementos reguladores distales
ADN como los elementos de respuesta a
TATA hormonas (ERH), silenciadores y
D Complejo de preinicio amplificadores pueden interactuar con estos
de la transcripción
elementos proximales para definir el número
de veces y el momento en el cual debe detenerse la transcripción.

Se ha considerado de manera general que para que un receptor de hormona esteroidea sea
activo debe estar unido a su hormona; es decir, que en ausencia de su ligando natural el
receptor no se puede unir al ADN permaneciendo de forma inactiva o silente. En contraste,
los receptores para hormona esteroidea pueden unirse al ADN en ausencia de su ligando a
pesar que en la mayoría de los casos no son capaces de activar la expresión de genes. A
pesar de esto, no se les puede considerar como simples observadores en el control de la
expresión genética ya que en ausencia de la hormona esteroidea son capaces de silenciar la
actividad basal del sitio promotor es decir la actividad promotora basal (fig.9) . La región mas
importante de la actividad silenciadora se encuentra ubicada en el extremo carboxilo terminal
de del dominio de unión a la hormona del receptor (región E). La inhibición de la actividad
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

promotora basal no parece estar asociada con la unión con el ADN. Al parecer, el
silenciamiento es el resultado de la interacción directa del receptor con la maquinaria
transcripcional, aparentemente a través de la inhibición de la formación del complejo de pre-
inicio al interactuar éste con el FTIIB. La evidencia experimental mas reciente apoya
fuertemente la existencia de elementos de respuesta a hormonas negativos, esto al menos,
para el receptor de glucocorticoides y están representados por porciones específicas de ADN
que poseen una alta afinidad por el receptor pero que le obligan a tomar una conformación
espacial que exponen secuencias de aminoácidos que silencian la transcripción.

C om p lejo h orm ona-receptor C om p lejo de prein icio Fig.8 Posible mecanismo de regulación de la
de la tran scrip ción
In estab le transcripción a través de la interacción del
complejo hormona-receptor con los elementos de
respuesta a hormona. El complejo H-R se une a
sitios específicos reguladores distales llamados
ERH ERH TATA elementos de respuesta a hormonas o HRE
A ctivid ad silen ciadora
basal
(situados a miles de pares de bases corriente
A abajo del gen estructural a ser regulado) y que a
diferencia de los elementos reguladores proximales
C om plejo d e p rein icio como la caja TATA, regula la frecuencia (número
d e la tran scrip ción de veces) que el gen estructural deberá
estab le
transcribirse. Es bastante probable la interacción
H o rm on a
del ERH con el complejo H-R actúe de dos
R eceptor maneras sobre el complejo de preinicio: en primer
ERH ERH
E stab ilización d el
TATA lugar, puede aumentar la velocidad de ensamblaje
com p lejo d e p rein icio de los factores de transcripción o en segundo
lugar, puede estabilizar el complejo una vez que
B
esta se ha ensamblado.

Se creía antiguamente que la actividad silenciadora se debía a elementos adyacentes en Cis

que eran ocupados por factores reguladores en trans lo que provocaba un efecto negativo
por la interacción proteína-proteína entre el elemento regulador y el receptor. En la figura 9
se muestran las posibilidades de cómo los receptores y los complejos H-R pueden regular la
expresión genética.

Fig. 9 Diferentes formas de interacción del

receptor con el ADN y su influencia sobre la
transcripción. A : Activación clásica estimulada por
ERH ERH ERH ERH la hormona, el complejo H-R se une al ERH e
induce la transcripción del gen blanco. B :
A C Represión de la transcripción por silenciamiento
basal debido a la unión del receptor vacío (no
ocupado por la hormona) al los HRE actuando
como un silenciador. C : Silenciamiento inducido
por un factor proteico (silenciador) que impide la
activación completa del complejo H-R y por lo
ERH ERH ERH ERH tanto la inducción. D : ERH de tipo negativo que
B D induce silenciamiento debido a que provoca
cambios conformacionales en el complejo H-R que
impide la transcripción del gen blanco.
 Las hormonas y su mecanismo de acción

Papel del ligando en la transformación y activación del receptor

Los receptores para hormonas E/T tiene una actividad neutral y/o de silenciamiento en
ausencia de ligando. Al momento de unirse a su ligando natural, se convierten generalmente
en reguladores positivos. El proceso de activación del receptor se denomina transformación.
Los miembros de la superfamilia de receptores de hormonas E/T se pueden dividir en dos
grandes grupos según sus propiedades funcionales: el grupo A, que comprende a los
receptores de mayor tamaño (GR, AR, PR, MR y ER) los cuales poseen grandes dominios
A/B y que en ausencia de su ligando forman complejos con las proteínas de choque térmico
(PCT) 90, 70 y 56. Para casi todos éstos, en ausencia del ligando no ocurre unión al ADN (al
elemento de respuesta a hormonas) aparentemente porque mientras que no se una la
hormona al receptor éste permanece formando complejos de alto peso molecular con las
PCT que le impiden atravesar los poros nucleares, este hecho trae como consecuencia que
no tengan a este nivel ninguna actividad sobre la transcripción de ARN. Después de su
unión con la hormona, las PCT se disocian del receptor el cual es capaz de dimerizar con
otro de igual familia (homodímero), o como también ocurre frecuentemente pueden formar
heterodímeros con el receptor para el ácido 9-cis retinóico (RXR) en el núcleo uniéndose al
ADN en elemento de respuesta a hormonas. En contraste, los receptores del grupo B (TR,
RAR, VDR, RXR, PPAR) tienen dominios A/B pequeños, no se asocian a las PCT por lo que
tiene ubicación nuclear y se pueden unir al ADN en ausencia de ligando como silenciadores,
pero, en presencia de ligando, se activan y pueden actuar como activadores o represores de
la expresión genética. Estos receptores generalmente se encuentran unidos al elemento de
respuesta a hormonas en forma de heterodímeros con el RXR.

REGULACION DE LA ACTIVIDAD DE LOS RECEPTORES PARA HORMONAS

ESTEROIDEAS/TIROIDEAS

a.- Isoformas de receptores para hormonas esteroideas/tiroideas

Es bien conocida la existencia de isoformas de receptores para cada una de las hormonas
esteroideas y se ha determinado que cada una de estas isoformas tiene actividad distinta,
diferentes afinidades por los elementos de respuesta a hormonas, grado de unión con
proteínas de choque térmico e inclusive diferente capacidad de dimerización. En la mayoría
de las aves y mamíferos el RP se expresa en dos grandes isoformas, el RP-A y el RP-B. La
única excepción ocurre en el conejo que solo expresa el RP-B. Ambas formas se derivan del
mismo gen. El RP-B del humano contiene una secuencia extra de 164 aminoácidos a nivel
del extremo amino terminal. Ambas formas son biológicamente activas, pero su capacidad
relativa de activar genes blanco difiere. Recientemente se ha descubierto una tercera forma,
el RP-C, pero lamentablemente aún no se ha caracterizado completamente.
Las isoformas A y B también se han reportado para el RA y en contraste con el RP, la
isoforma A se expresa a niveles mucho mas bajos que la forma B ; la contribución de este
hecho sobre la regulación de la acción de los andrógenos es un campo de intensa
investigación en la actualidad. Junto con las variantes anteriormente expuestas se han
descrito muchas isoformas para el RE que se derivan cada una de la pérdida de uno de los
exones del gen del receptor. Éstos se detectaron inicialmente a nivel de ARNm y su papel in
vivo actualmente está sujeto a investigación.
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

El RG también se expresa en dos isoformas RG α y RG β. La forma α es la forma clásica del

receptor para glucocorticoides y la forma β difiere de la anterior al nivel de la porción
carboxilo terminal ya que no liga a los glucocorticoides reprimiendo la actividad de la forma
RG α. La expresión relativa y la importancia de la forma β aún está por determinarse.

b.- Regulación de la función del receptor a través de interacciones físicas o

funcionales con otras proteínas

Muchos estudios han demostrado que la actividad de los receptores para hormonas
esteroideas pueden al menos ser reguladas en parte por proteínas muy cerca (y a veces
hasta solapan) los elementos de respuesta a hormonas.
Se han descrito dos clases importantes de proteínas que pueden interactuar con el complejo
H-R ó con el receptor mismo: Los co-activadores y los co-represores. Los co-activadores se
unen al receptor mismo y presumiblemente sirven de puente para que otros factores de
transcripción puedan unirse al ADN. Aquellos que interactúan con la porción C terminal del
receptor solo lo hacen cuando está presente la hormona. Los co-represores solo interactúan
con el grupo B de receptores (receptores nucleares que no se unen a las PCT) y
generalmente se separan del receptor cuando el ligando natural se une al receptor.

c.- Fosforilación de los receptores para hormonas esteroideas/tiroideas

Además de ser receptores, los RE/T (receptores para hormonas esteroideas/tiroideas)

también son fosfoproteínas y su función es en parte regulada por fosforilación. Los estudios
realizados con otros factores de transcripción han demostrado que la fosforilación puede
intervenir en la traslocación nuclear, la unión al ADN, la interacción con otras proteínas y la
transactivación. Los factores de transcripción frecuentemente están fosforilados en muchos
residuos de aminoácidos y como en el caso del c-Jun pueden contener sitios que aumentan
su actividad así como sitios que la reducen. Las reacciones de fosforilación y defosforilación
son llevadas a cabo por una gran cantidad de enzimas como las MAP-Cinasas, Cinasas
dependientes de ciclinas y proteincinasas activadas por estrés, lo que indica que la célula
puede alterar la actividad de una proteína en respuesta a diferentes vías de señalización.
A pesar que la fosforilación de RE/T no se ha estudiado a fondo aún, se conoce que la
regulación de la actividad del receptor es compleja e incluye muchos aspectos de la acción
del mismo. El hallazgo que algunos de estos receptores pueden activarse por fosforilación en
ausencia de hormona indica que la presencia de esta última es solo un paso dentro de la
aparición de la respuesta biológica final y de una u otra forma este hecho ha ido forzando a
una revisión en los mecanismos de acción de los receptores para hormonas E/T(Fig. 8). En
la tabla 5 se muestran los sitios de fosforilación para algunos de estos receptores en
diferentes especies y la función que esta cumple a nivel del mismo.

MECANISMO DE ACCION DE LAS HORMONAS PROTEICAS, CATECOLAMINAS Y

EICOSANOIDES

El mecanismo de acción de estas hormonas está íntimamente ligado con los eventos que
acontecen cuando éstas se unen a su receptor de membrana generándose un segundo
 Las hormonas y su mecanismo de acción

mensajero particular para cada complejo hormona-receptor. Podemos distinguir varios

sistemas de traslocación de la señal (Fig. 8 y 9 ) :

Tabla 5
Receptores de hormonas E/T sitios de fosforilación y función

Tipo Animal Sitios de Secuencia Función Grupo de

fosforilación Investigación
RP Pollo 4 Ser-Prol Act. Transcripción Donner y cols.
Unión al ADN y ;a Poletti y cols.
hormona
RG Ratón 7 Ser-Prol Estabilidad y actividad del Bodwell y cols.
Treonina receptor
RE Ratón 6 Tirosina Unión al ADN Aurichio y cols.
Ser-Prol Act. Transcripción Arnold y cols.
RA Humano 3 Ser-Prol Act. De la transcripción? Zhou y cols.
RT Ratón ? ? Unión al ADN Bodwell y cols.

Fig. 8 Se aprecian los dos

H orm ona E x t e r io r principales mecanismos de
A trasducción de señal a través de la
M e m b r a n a p lla
a s m á tic a
C membrana plasmática que
R ecep to r + C ito s o l
G
G involucran a las proteínas G. En el
P r o t e in a G
a c o p la d a a l ATP A
AMM PP cc
R esp u esta panel 1 se observa que la
r e c e p to r M ee t aa b ó llii c a
activación de la proteína G activa a
1 la enzima guanilato ciclasa cuyo
producto principal es el segundo
C a++ mensajero AMPc. En el panel 2 se
H orm ona
evidencia que la proteína G es
P
P I P 22
capaz de activar a una enzima
L
C diferente, la fosfolipasa C que
R ecep to r + +
G
G IP 3 + D A G cataliza la conversión del
P r o t e in a G
a c o p la d a a l fosfatidilinositol-P2 (PIP2) en
r e c e p to r
Inositol trifosfato (IP3) y
+ diacilglicerol, dos importantes
segundos mensajeros que son
R esp u esta
M ee t aa b ó llii c a
responsables del aumento del
C a ++ C a ++ influjo de calcio al interior celular.
El aumento en la concentración de
calcio en el citosol activa a la
C a++ C a++ C a++ C a ++
proteína Calmodulina, la cual es
C a llm
m o dd uu li n aa
l in C a llm
m o dd uu lliin
n aa C a l m o d u llii n a
capaz de formar complejos con
enzimas que aumentan su
C a++ C a++ C a++ C a ++
Enz actividad en gran medida. Este
hecho es el responsable de la
2
respuesta metabólica final.
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

1. Sistema de traslocación de señal dependiente de receptores acoplados a Proteína

G y producción de AMPc como segundo mensajero.
2. Sistema de traslocación de señal acoplado a proteína G dependiente de Ca++,
Fosfoinositósidos y calmodulina.
3. Sistema de traslocación de la señal dependiente de la síntesis de GMPc.
4. Sistema de traslocación de señal dependiente de receptores tipo tirosincinasas y
generación de fosfotirosinproteinas como segundos mensajeros.
5. Sistema de traslocación de señal dependiente de receptores con capacidad de
Treonin/serin cinasas y generación de fosfoserin y fosfotreoninproteinas como
segundos mensajeros.
6. Sistema de traslocación de señal dependiente de receptores con capacidad de
tirosinfosfatasa generando un segundo mensajero proteico defosforilado.

Hormona Fig. 9 En la gráfica se pueden

Hormona
apreciar otros mecanismos
importantes de traslocación de
Receptor
señal a través de la membrana
Receptor plasmática. En el panel 3 se
Membrana plasmática observa un receptor tipo
P Tir Tir P
ATP tirosincinasa
Activación autofosforilándose y
P Tir Tir P
ADP heterofosforilando al segundo
Guanilato Guanilato
Guanilato
P
Ciclasa
Ciclasa Ciclasa
Ciclasa mensajero. En el panel 4, un
22do
do Mensajero
Mensajero P 2do
do Mensajero
Mensajero P
II AA receptor acoplado a la enzima
guanilato ciclasa, enzima que
P GTP GMPc cataliza la producción de
3 4 GMPc a partir de GTP. El
panel 5 muestra a un receptor
Hormona que fosforila a una enzima y
Receptor Hormona luego ésta última es capaz de
fosforilar al segundo
mensajero que se activa para
ATP ADP llevar a cabo su estimulación
Receptor
P de vías claves. El panel 6
P muestra un receptor con
Enzima P Enzima P
actividad de fosfatasa
P Proteína P Proteína
P defosforilando a una proteína
P (2do mensajero) y
Pi Pi
Pi convirtiéndola de esta manera
2do 2do
P P Pi en su forma activa. Para más
Mensajero Mensajero
5 6 detalles ver texto.

SISTEMA DE TRASLOCACIÓN DE SEÑAL DEPENDIENTE DE RECEPTORES

ACOPLADOS A PROTEÍNA G Y PRODUCCIÓN DE AMPc COMO SEGUNDO
MENSAJERO

Una buena cantidad de hormonas que se unen a receptores de membrana activan el sistema
de traslocación de señal mediado por proteína G, que posteriormente activa a una enzima
efectora que genera un segundo mensajero intracelular, el AMPc.
 Las hormonas y su mecanismo de acción

A pesar que diferentes receptores de este tipo fijan hormonas diferentes, se pueden
enumerar varias características que son similares para todos ellos:

a. Los receptores son proteínas integrales de membrana con tres dominios: el

extracelular, que contiene el extremo aminoterminal, el dominio trasmembrana, que
esta constituido por siete asas de aminoácidos hidrofóbicos enumeradas de H1 a
H7, y un dominio intracitoplasmático que contiene el extremo carboxilo terminal.
b. En el lado citoplasmático, entre las alfa hélices 5 y 6 se encuentra un asa llamada
C3 la cual se encarga de interactuar con la proteína G (Fig.10).
c. La proteína G asociada con el receptor es un apagador (on / off) intracelular, el cual
se encuentra apagada (sin transmitir señal) cuando esta unido al GDP y en posición
on o de encendido (transmitiendo señal) cuando está unido al GTP.
d. La proteína G activada (unida a GTP) se une y activa a una enzima efectora, la cual
cataliza a un segundo mensajero.
e. La hidrólisis del GTP unido a la proteína G, la convierte a su forma inactiva,
terminando la señalización.

NH2 E1 E2 E3 Fig. 10 Estructura general de un receptor

acoplado a proteína G (seven spanning
R e c e p to r D o m in io receptor). Se pueden apreciar los siete
E x tr a ce lu la r
segmentos que cruzan completamente la
M em b r a n a H1 H2 H3 H4 H5 H6 H7 D o m in io membrana plasmática y que determinan
P la s m á tic a T r a sm e m b r a n a
que cada una tenga un dominio
D o m in io extracelular un dominio trasmembrana (H1-
In tra c e lu la r H7) y otro intracelular. Cada uno de estos
C1 C2 C3 COO- segmentos está conectado con el siguiente
a través de asas de aminoácidos, algunas
extracelulares (E1,E2,E3) y otras
intracelulares (C1,C2,C3). La proteína G se
conecta al receptor en el asa C3.
P ro te ín a G

La proteína señalizadora G, que trasloca la señal desde los receptores antes nombrados, es
una proteína de membrana constituida por 3 subunidades que forman un complejo trimérico
entre sí ,dichas unidades son, la subunidad α, subunidad β y subunidad γ. La proteína G se
une al receptor de membrana gracias al asa C3 que se encuentra entre las α- hélices 5 y 6.
La subunidad α de la proteína G tiene la capacidad de fijar al GDP (forma inactiva) ó al GTP
(forma activa de la proteína G). La unión de una hormona a su receptor provoca un cambio
en la conformación tridimensional del mismo que produce un desplazamiento del GDP de la
subunidad α por el GTP, fenómeno que causa la disociación de la proteína G en un dímero
β-γ y un monómero α-GTP. Este último es capaz de unirse a la adenilato ciclasa (la enzima
efectora de este sistema de segundo mensajero) activándola, lo que concluye en la
formación de AMPc a partir del ATP. Esta activación tiene una vida muy corta ya que la
subunidad α-GTP hidroliza el GTP a GDP rápidamente, lo que provoca la reasociación de la
subunidad α-GDP con las subunidades β y γ y la consecuente inactivación de la adenilato
ciclasa. La subunidad αGs pertenece a una superfamilia de GTPasas (enzimas que
hidrolizan el GTP a GDP) cuyo conocimiento se ha derivado del estudio de otra proteína muy
relacionada, la proteína RAS, que al igual que la αGs se alterna entre una forma activa (RAS-
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

GTP) y una forma inactiva (RAS-GDP), aceptándose en la actualidad que ambas pertenecen
a la misma familia de GTPasas. La proteína RAS tiene 170aa y es más pequeña que la αGs
(300aa) y en su estructura tridimensional es idéntica a la parte de la αGs que se une al GTP.
La activación del RAS ocurre mediante 2 pasos :
1.- La disociación del GDP de la proteína RAS
2.- La unión del GTP a la misma.
La primera reacción es acelerada en presencia de una proteína denominada “proteína
intercambiadora de nucleótidos de Guanosina” o GEF el cual se une al RAS-GDP
desplazando al GDP. Debido a que el GTP está presente en las células en concentraciones
mayores que el GDP, el GTP se une espontáneamente para llenar las moléculas del RAS
que no tienen nucleótido, en este momento se libera el GEF. De esta manera el GEF es un
activador que promueve la formación del RAS activo (RAS-GTP).
El tiempo promedio de vida del RAS-GTP, lo que indica que la tasa de hidrólisis del GTP por
el RAS es mucho menor que en la αGs. La desactivación del RAS, al igual que en su
activación, ocurre gracias al cumplimiento de 2 pasos:
1.- La unión del complejo RAS-GTP con un proteína GAP (proteína activadora de
GTPasa)
2.- Hidrólisis del GTP y liberación de la GAP.
De esta forma la proteína GAP se comporta como un inhibidor de la actividad del RAS ya que
promueve la formación del complejo inactivo RAS-GDP.
Se ha propuesto un nuevo modelo para el funcionamiento de la subunidad αGs de la
proteína G basado en la gran similitud, desde el punto de vista estructural y tridimensional
con la proteína RAS. De acuerdo con este modelo la subunidad αGs está constituida por 2
dominios funcionales : un dominio similar a la proteína RAS, en el cual se incluye el sitio de
unión al GTP y otro dominio de 133 residuos de aminoácidos que funciona de manera similar
a la proteína GAP. En la αGs intacta el dominio GAP se conecta con el dominio RAS
exactamente donde el GAP se une al complejo RAS-GTP durante el ciclo de la proteína
RAS. A diferencia del RAS, la activación de la proteína G no requiere de una molécula
activadora como la GEF. Como se dijo anteriormente la interacción entre la hormona y el
receptor provoca un cambio conformacional en la αGs-GDP que facilita la liberación del
GDP, este cambio se puede explicar a través de un sencillo modelo de bisagra donde, los
dos dominios de la proteína αGs pivotean en uno de sus extremos fenómeno que abre un
canal entre ellas a través del cual se libera el GDP con unión subsecuente del GTP.
La gran similaridad entre la estructura y función de la proteína RAS y la αGs y la
identificación de ambas proteínas en todas las células eucarióticas, indican que estas se
originaron a partir de un precursor común con actividad GTPásica muy temprano en la
evolución hacia los organismos superiores en el planeta.
Estudios en bacterias han demostrado la existencia de diferentes tipos de proteína G
acopladas a proteínas efectoras. Más recientemente el clonaje molecular ha llevado al
aislamiento de un amplio número de proteínas relacionadas con las subunidades α, β y γ de
las previamente caracterizadas proteínas G. En mamíferos, por ejemplo, se han descubierto
hasta ahora16 tipos diferentes de αG, 4 βG y 5 γG.
Actualmente está claro que diferentes tipos de proteínas tipo G se pueden unir a diferentes
tipos de receptores de membrana tipo 7S y llevar la señal a diferentes tipos de proteínas
efectoras, incluyendo a canales iónicos, adenilato ciclasa, fosfolipasa C y algunas isoenzimas
de la fosfodiesterasa. El papel de estas proteínas G triméricas en estas vías de señalización
 Las hormonas y su mecanismo de acción

se ha demostrado por inhibición gracias a análogos no hidrolizables de GTP. Debido a que

una misma célula puede expresar diferentes tipos de proteínas G es difícil determinar cual
proteína G es la que media el efecto de una hormona en particular.
La presencia de múltiples subunidades αG en una misma célula aumenta la posibilidad que
un ligando único pueda iniciar una señal a través de más de una proteína efectora. Se han
descrito muchos ejemplos sobre estas múltiples vías señalizadoras pero los detalles de
cuales proteínas G y cuales subunidades median estos efectos aun no se conocen. En
algunas células la modulación de los diferentes efectores acoplados al mismo receptor de
membrana puede ser distinta a diferentes concentraciones de la hormona o de los receptores
de membrana. La gran cantidad de posibilidades de combinaciones entre los diferentes tipos
de subunidades, los tipos de receptores y las proteínas efectoras, capacita a una célula a
una célula a responder de manera diferente a una misma hormona en comparación con otra
célula, estableciendo así una diferencia para el control de su función y desarrollo.
Independientemente de la vía de activación de la αGs, el efecto final de esta será la
activación de una enzima que se encuentra en la cara citosólica de la membrana celular: la
adenilato ciclasa, la cual cataliza la conversión de ATP en AMPc, un importante segundo
mensajero intracelular.
Los efectos del AMPc son mediados a través de la acción de proteincinasas dependientes
de AMPc (conocida también como PKA) la cual modifica la actividad de enzimas específicas
en varios tipos celulares. Las proteincinasas transfieren el fosfato terminal del ATP al grupo
hidroxilo en los aminoácidos Serina, Treonina y Tirosina en las proteínas que le sirven de
sustrato. La fosforilación de algunas de estas enzimas incrementa su actividad catalítica,
mientras que la fosforilación de otras disminuye su actividad.
Las proteincinasas dependientes de AMPc son proteínas tetraméricas con 2 subunidades
reguladoras y 2 subunidades catalíticas. En su forma tetramérica esta proteína es inactiva
catalíticamente hablando, pero la unión del AMPc a las subunidades reguladoras causa la
separación del tetrámero, lo que libera a las subunidades catalíticas, las cuales son libres en
este momento para catalizar reacciones de fosforilación. Es importante hacer notar que cada
unidad reguladora puede fijar 2 moléculas de AMPc en un patrón cooperativo, lo que significa
que la unión de la primera molécula de AMPc disminuye el Kd para la unión de las
siguientes. De esta forma, pequeños cambios en el nivel de AMPc citosólico pueden
provocar cambios grandes en la cantidad de unidades catalíticas disociadas aumentando la
actividad de la cinasa dependiente de AMPc.

La cascada de cinasas permite la regulación multienzimática y amplifica la señal

multienzimática

Una cascada metabólica se define como un conjunto de reacciones de fosforilación y

defosforilación que provocan una amplificación de la señal enviada por una hormona hasta el
efector final, donde el producto de la primera reacción activa (o inactiva) el paso
subsiguiente.
La presencia de una cascada metabólica cumple con el paradigma bioquímico de
funcionalismo con el mínimo consumo energético, ya que esta en primer lugar ayuda a que
un grupo de reacciones catalizadas enzimáticamente sean reguladas por un solo tipo de
molécula. De esta manera por ejemplo, las tres enzimas principales de la cascada de la
glucogenolisis, la proteincinasa dependiente de AMPc, la glucogenofosforilasa cinasa, y la
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

glucógeno fosforilasa, están todas reguladas directa o indirectamente por el AMPc. En

segundo lugar la cascada provee de puntos de amplificación de una señal que inicialmente
es pequeña: Los niveles de Epinefrina en sangre que estimulan la glucogenolisis son muy
pequeños (10-10 M) ya que su estimulo genera la producción de AMPc en una magnitud de
10-6 M (una amplificación de 10-4) y esta a su vez aumenta 10 veces la actividad del siguiente
paso y 240 veces a nivel del efector final (glucógeno fosforilasa).

SISTEMA DE TRASLOCACIÓN DE SEÑAL ACOPLADO A PROTEÍNA G CON

PRODUCCIÓN DE FOSFOINOSITÓSIDOS, DIACILGLICEROL Y AUMENTO DE CALCIO
INTRACELULAR COMO SEGUNDOS MENSAJEROS

La mayor parte del Calcio intracelular se encuentra almacenado en el interior de las

mitocondrias y en el retículo endoplasmático liso. La concentración citosólica del calcio libre
es alrededor de 0,2 uM. Las ATPasas de Calcio son las encargadas de bombear al mismo
hacia el exterior celular o hacia el interior de los depósitos, manteniendo así, a este ion en
concentraciones normales.
En algunas células, pequeños incrementos en las concentraciones citosólicas de Ca++
pueden conducir a muchas respuestas intracelulares, ya que, a estos niveles, el Ca++ se
comporta como segundo mensajero. En la mayoría de los casos, el aumento de este
elemento dentro del citosol se debe a un aumento del IP3 (Inositol 1,4,5- Trifosfato). En
células secretoras como por ejemplo las células β de los islotes de Langerhans, un aumento
del Ca++ conduce a la exocitosis de las vesículas secretorias y liberación de Insulina. En el
músculo liso o estriado, un aumento del Ca++ conduce a la contracción.
Es pertinente en este momento plantear la pregunta : Que eventos producen la elevación del
Ca++ intracelular ?
La unión de varios grupos de hormonas a su receptor de membrana inducen a una elevación
del Ca++ intracelular, el cual proviene, como ya se dijo de diferentes sitios intra y
extracelulares. Los mecanismos por los cuales se establece una traslocación de la señal
hacia los efectores que median este aumento de Ca++ se determinaron en los años 80,
cuando se logro demostrar que dicha elevación de calcio estaba precedida de por la hidrólisis
de un fosfolípido de membrana, el Fosfatidilinositol 4,5-bifosfato (PIP2).
La unión de la hormona al receptor es capaz de activar a una proteína de membrana
perteneciente a la familia de la Proteína G, que en este caso, no activa a la adenilatociclasa,
sino a otra proteína de membrana denominada Fosfolipasa C, que cataliza la reacción de
hidrólisis del Fosfatidilinositol 4,5-bifosfato a Diacilglicerol (PIP2) y trifosfato de inositol (IP3),
compuestos considerados como segundos mensajeros.
El IP3 puede incrementar las concentraciones citosólicas de Ca++ al activar canales de IP3
sensibles tanto en la membrana celular como en las membranas mitocondriales y del retículo
endoplasmático. Estos canales están constituidos por cuatro subunidades idénticas entre sí,
las cuales poseen un sitio de unión al IP3 situado a nivel del extremo aminoterminal de la
proteína. El diacilglicerol como segundo mensajero puede activar por un lado el canal de
Calcio situado en la membrana plasmática y por el otro lado a la Proteinquinasa C, que se
encuentra fijada en la cara citosólica de la membrana y cataliza la fosforilación de muchos
sustratos intracelulares, incluyendo enzimas. Una vez que por medio de los mecanismos ya
descritos aumenta el Ca++ intracelular, una proteína, la Calmodulina, puede intervenir
también en la traslocación de esta señal.
 Las hormonas y su mecanismo de acción

La Calmodulina, una proteína pequeña citoplasmática de 148 aminoácidos es la encargada

de mediar muchos de los efectos del Calcio. Cada molécula de Calmodulina puede ligar
cuatro iones de Calcio en un patrón cooperativo, es decir, que la unión del primer ion Calcio
favorece la unión del resto de los iones. Dicha unión es bastante específica, ya que los sitios
de unión para el calcio están representados por residuos de ácido glutámico, ácido aspártico
y Asparagina, cuyas cadenas laterales pueden establecer uniones iónicas con este elemento.
Una vez que el Ca++ ocupa sus sitios, la proteína sufre un cambio mayor conformacional en
su estructura tridimensional caracterizado por la formación de lazos en los sitios de unión al
Ca++ y conformación α- helicoidal en el resto del esqueleto de la proteína, lo que le permite a
la misma activar enzimas al formar complejos con ellas (Por ejemplo cinasas dependientes
de Calmodulina). Debido a que la unión Ca++ - Calmodulina es cooperativa, pequeños
cambios en la concentración de Ca++ producen cambios muy grandes en el nivel de
Calmodulina activa, con amplificación de la señal originada primariamente.
Una estimulación continuada por parte de la hormona puede depletar los depósitos
intracelulares de Calcio en muy pocos minutos, el mantenimiento de niveles elevados del ion
necesita de un mecanismo que transporte el calcio a través de la membrana al interior
celular. Hay evidencia que sugiere que este evento está mediado por el 1,3,4,5-inositol
tetrafosfato, el cual se forma por la fosforilación del IP3 gracias a una cinasa especifica.

SISTEMA DE TRASLOCACIÓN DE SEÑAL DEPENDIENTE DE RECEPTORES CON

ACTIVIDAD DE GUANILATO CICLASA

El GMPc es una molécula señalizadora intracelular de muy amplia distribución y que es

capaz de regular canales iónicos, la concentración de AMPc (al regular la actividad de
fosfodiesterasas) y la actividad de proteincinasas. La síntesis de GMPc a partir del GTP es
llevada a cabo a partir de una familia de enzimas que reciben el nombre genérico de
guanilato ciclasas y que a su vez puede ser dividida en dos grandes sub-familias (en
mamíferos) : La primera sub-familia comprende receptores de membrana que contienen en
su porción citosólica un dominio con actividad tipo guanilato ciclasa; dicho de otra
manera, este tipo de receptor también es una enzima como ocurre por ejemplo

Fig. 17 Características generales de las proteínas

Domio de con actividad intrínseca de Guanilato ciclasa. La
unión a la
figura A muestra un receptor de membrana en cuyo
hormona
segundo dominio citoplasmático tiene la capacidad
de catalizar la conversión de GTP en GMPc en
presencia de una señal generada por una hormona.
Membrana pasmática
Este tipo de receptor posee también un dominio
regulador que tiene actividad tipo proteincinasa y un
Dominio con dominio extracelular que tiene como función unir a la
Dominio de
actividad tipo hormona. La figura B muestra la forma más conocida
unión al hemo
proteincinasa
y típica de guanilato ciclasa, es decir, una enzima
intracelular que posee dos dominios, uno catalítico,
donde reside la capacidad de ciclasa y otro activador,
Dominio
Dominio con donde se encuentra un grupo Hemo. En este caso,
Catalítico
actividad tipo una molécula activadora como el óxido nítrico, puede
Guanilatociclasa unirse al grupo hemo y provocar cambios
conformacionales en la enzima que favorezcan la
A B producción de GMPc a expensas del GTP.
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

con el receptor para insulina que posee actividad enzimática tipo tirosincinasa. Estos
receptores son activados por hormonas tipo peptídicas como el factor natriurético atrial
(FNA) y generan GMPc como segundo mensajero. La segunda sub-familia comprende a un
grupo de enzimas de localización citosólica que forman estructuras heterodiméricas que
contienen al hemo como grupo prostético y son activadas por agentes vasodilatadores como
el Nitroprusiato de sodio y la nitroglicerina. El activador biológico mas conocido de estas
enzimas es el óxido nítrico (EDRF) que se une a nivel del grupo hemo de la misma
provocando cambios conformacionales que aumentan su actividad, generándose cantidades
elevadas de GMPc que finalmente median la relajación de la musculatura lisa que conducen
a vasodilatación de arterias y venas. Este segundo grupo de guanilato ciclasas serán
estudiadas profundamente en el capítulo que versa sobre las bases moleculares de la
hipertensión arterial. La figura 17 muestra las características estructurales generales de estos
grupos de enzimas.

RECEPTORES DE MEMBRANA CON ACTIVIDAD DE GUANILATO CICLASA

El primer receptor de membrana con actividad de guanilato ciclasa en ser descubierto,

purificado y clonado fue el receptor tipo guanilato ciclasa del espermatozoide de la anémona
marina, cuyo ligando natural es un péptido secretado por el ovocito de la anémona hembra.
Posteriormente, el ADNc preparado a partir del ARNm de este receptor se usó como sonda
para identificar y aislar los receptores humanos acoplados a guanilato ciclasa, siendo el
receptor GC-A el primero en ser identificado y posteriormente los receptores GC-B y GC-C.
Estudios posteriores demostraron que el GC-A es el receptor para el factor natriurético atrial
(FNA), el GC-B es el receptor para el péptido natriurético tipo C y el GC-C es un receptor
candidato para enterotoxinas estables al calor secretadas por bacterias (Tabla 6).

Características estructurales

Todos los receptores de este tipo comparten una serie de características comunes. El peso
molecular de casi todos están en el rango entre 110 - 180 kD presentando 3 dominios bien
definidos : uno extracelular o de unión a la hormona, otro trasmembrana y un tercero
intracitoplasmático (Fig.17).

Tabla 6
Diferentes formas de Guanilato ciclasa

Tipo de Guanilato ciclasa Localización celular Molécula reguladora

GC de retina Membrana plasmática Ca++/recoverina

GC de anémona de Mar Membrana plasmática Péptidos del ovocito
GC-A Membrana plasmática PNA/ATP
GC-B Membrana plasmática PNC/ATP
GC-C Membrana plasmática Enterotoxinas estables
al calor
 Las hormonas y su mecanismo de acción

Dominio extracelular o de unión a la hormona

Esta es la región más divergente dentro de esta familia lo cual es un hecho de esperar
debido a que la conformación estructural primaria y terciaria debe ser diferente en cada
receptor debido a la especificidad que este debe mostrar para su ligando específico, esto
implica, en primer lugar, aminoácidos diferentes en estos dominios y, como consecuencia de
esto, una conformación tridimensional diferente en cada sitio de unión con la hormona. Sin
embargo, a pesar de este hecho, esta es una zona bastante conservada para un mismo tipo
de receptor pero entre especies diferentes. Por ejemplo, existe un 95 % de homología entre
los receptores GC-A de rata, ratón y humano.
Todos estos receptores tienen sitios potenciales para glucosilación ( 6 en el GC-A de rata y 4
en el humano) y una región rica en cisteína, pero aun no esta claro si éstas se utilizan para
formar puentes disulfuro o si intervienen directamente en la unión del receptor con la
hormona.

Dominio trasmembrana

Esta formada por una cadena sencilla de aminoácidos dispuesta en forma de una alfa hélice
que cruza una sola vez la membrana plasmática. Este dominio es muy conservado ya que
entre el GC-A y el GC-B solo existe una diferencia de 5 aminoácidos (la región tiene 21
aminoácidos en total). Este dominio es mas divergente en el GC-C ya que solo coinciden con
el GC-A o el GC-B solo 3 de los 21 aminoácidos.

Dominio homólogo a proteincinasa

Este dominio esta constituido por una secuencia de 250 aminoácidos y es extremadamente
parecido al mismo dominio del receptor para factor de crecimiento derivado de plaquetas
(PDGF). Al comparar este dominio entre los diferentes receptores (GC-A, B y C) se ha
encontrado que existe una secuencia de 30 aminoácidos llamada dominio “no variable” en la
cual estos aminoácidos además de ser idénticos ocupan la misma posición relativa dentro de
la molécula. A pesar de este gran parecido con enzimas tipo proteincinasas hasta ahora no
se ha evidenciado actividad enzimática tipo cinasa dentro de la molécula del receptor tipo
guanilato ciclasa. Cuando se produce la delección de esta región en el GC-A por ejemplo, el
receptor conserva su capacidad de unión con el PNA y su actividad de guanilato ciclasa, pero
aparentemente, tanto en presencia como en ausencia del ANP parece estar
constitutivamente activo, por lo que se especula que este dominio puede regular la actividad
del receptor de manera que cuando esta libre no se observa actividad de guanilato ciclasa.

Dominio con actividad de guanilato ciclasa

Esta región está extremadamente conservada entre las diferentes formas de receptores (GC-
A,B,C) e inclusive entre especies. La porción carboxilo terminal de este segmento contiene la
secuencia de aminoácidos responsable de la actividad de ciclasa (los últimos 293
aminoácidos en el receptor GC-A). Esta región es homóloga a dos dominios internos en la
molécula del receptor tipo guanilato ciclasa de cerebro de vaca e inclusive al de otras
enzimas con actividad de guanilato ciclasa.
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

Los estudios mas recientes sugieren que la función de ciclasa aumenta cuando el receptor
dimeriza con otro de la misma clase, ocurriendo algo muy parecido a lo que pasa con el
receptor para factor de crecimiento epidermal, en el cual, la interacción de dos receptores
forma un homodímero en el cual la actividad enzimática aumenta entre 50 - 100 veces
(Fig.18).

Fig. 18 En esta gráfica se puede apreciar la

capacidad de dimerización que tiene este tipo de
receptores, lo cual es un hecho bastante común a
nivel de receptores de membrana. Este proceso
está íntimamente involucrado con la
autofosforilación del receptor a través de la
actividad intrínseca de proteincinasa del receptor.
PO 4 PO 4 Aparentemente, para que la catálisis sea máxima
se necesita la presencia del dímero, ya que,
secuencias de aminoácidos específicas de cada
monómero son fundamentales para su función.

MECANISMOS DE REGULACIÓN DE LOS RECEPTORES DE MEMBRANA CON

ACTIVIDAD DE GUANILATO CICLASA

Es bien conocido el hecho que el ATP potencia la activación del CG-A mediada por el PNA,
al menos, en preparados de membrana plasmática. De esta manera, los cambios en la
concentración intracelular de ATP pueden modular la activación de este tipo receptor
mediada por su ligando.
La activación del CG-A es dependiente tanto del ligando como del ATP ya que ninguno de
los dos activa individualmente (de forma significativa) al CG-A. El papel del ATP dentro del
contexto de la trasducción de la señal no parece ser el de servir de sustrato para la
transfosforilación de receptores. La eficacia del ATP de mediar la activación hecha por el
ANP aparentemente radica en el grado de hidrofobicidad del fosfato -γ del ATP ya que
análogos del ATP no hidrolizables ( y que no activan receptores ATP dependientes tipo
tirosincinasa como el receptor de la insulina) como el ATP-γ-S y el ATP-γ-nitrofenil no activan
receptores tipo tirosincinasa pero si a los receptores tipo guanilato ciclasa, inclusive con una
mayor eficacia que el ATP.
La identidad del sitio de unión al ATP aún no se ha determinado de manera inequívoca. La
activación del GC-A por el ATP y PNA es sensible a una serie de elementos como iones
metálicos, detergentes y procedimientos de lavado, por lo que se ha especulado que la parte
del receptor que une al ATP es una proteina accesoria separada del mismo. Por otro lado, la
homología que existe entre el dominio tipo proteincinasa del receptor con otras
proteincinasas de tipo intracelular ha llevado a dos investigadores, Chinkers y Garbers a
proponer que este dominio contiene el sitio de unión regulador dependiente de ATP. Esta
proposición tiene también como soporte el hecho que el ATP disminuye la capacidad de
unión del receptor GC-A con el ANP.
Cuando se analiza la estructura de las Guanilato ciclasas citosólicas se puede observar que
están constituidas por dos subunidades que forman un heterodímero, una denominada α y
otra β que aseguran, en conjunto, una máxima actividad de la enzima. Este hecho, unido a la
evidencia que los receptores GC-A pueden dimerizar, hace pensar que uno de los posibles
 Las hormonas y su mecanismo de acción

mecanismos de regulación es a través del proceso de dimerización. Todo esto, junto con la
posibilidad que el dominio tipo proteincinasa sea un regulador negativo del receptor ha
servido para que Stephen K., F. Wong y L. Garbers propusieran que en estado de reposo el
receptor puede existir como monómeros o como dímeros sin actividad de guanilato ciclasa
apreciable. Cuando el PNA se une al receptor ocurren cambios conformacionales en el
mismo que provocan la activación del dominio tipo proteincinasa con fosforilación del
receptor a expensas del ATP, trayendo como consecuencia, la activación de los receptores
por dimerización (Con activación del dominio de ciclasa y síntesis de GMPc) y
posteriormente, disminución de la afinidad del receptor por el ANP como consecuencia del
mismo proceso de autofosforilación del receptor, hecho que provoca la desensibilización del
mismo y finalización de la estimulación del receptor por su ligando (Fig.19).

Fig.19 En este panel puede apreciar la

activación y desensibilización del
PNA receptor GC-A en conjunto y como la
molécula de ATP regula la actividad del
mismo. Para mas detalles ver el texto.
ATP ATP

ADP ADP

PO4 PO4 PO4 PO4 PO4 PO4

PO4 PO4 PO4 PO4 PO4 PO4

GTP GMPc

SISTEMA DE TRASLOCACIÓN DE SEÑAL DEPENDIENTE DE RECEPTORES CON

ACTIVIDAD DE TIROSINCINASA O DE TIROSINFOSFATASA

La regulación del crecimiento y la división celular por señales extracelulares (hormonas) es

actualmente el mayor campo en la investigación bioquímica. Dentro de esta área han
recibido una notable atención las vías de señalización intracelular que son estimuladas de
manera temprana en el fenómeno de la mitogénesis. Los mayores avances en esta línea se
han hecho a nivel de la activación de enzimas a través de un mecanismo de modificación
covalente mediante la fosforilación de residuos de tirosina y desde el punto de vista histórico
se puede decir, que de manera clásica, este es un mecanismo que ha sido asociado a un
grupo de hormonas mas o menos heterogéneo denominadas “factores de crecimiento”
debido a los efectos que promueven a nivel celular (fig.20).
Fig. 20 Los aminoácidos Serina, Treonina y Tirosina tienen
-
CH2 CH COO características estructurales especiales que les permiten ser
OH NH3 aminoácidos claves en la regulación de la actividad enzimática por
S e r in a
modificación covalente. La característica mas importante es la
presencia de grupos hidroxilo que participan en el establecimiento
CH3 CH CH COO - de enlaces covalentes con grupos fosfato para formar fosfotirosina,
fosfotreonina o fosfoserina, cambiando la disposición espacial de
OH NH3 T r e o n in a dominiois importantes para la actividad de enzimas reguladas a
través de este mecanismo. Estos aminoácidos son de particular
OH CH2 CH COO - importancia en el mecanismo de acción insulínico ya que el
segundo nivel de acción de ésta se basa en una cascada de
NH3 fosforilación en los aminoácidos serina y treonina y el primer nivel
T ir o s in a
en fosforilaciones en el aminoácido tirosina.
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

Los receptores para este tipo de hormonas exhiben capacidad intrínseca de tirosincinasa, es
decir, también se comportan como enzimas, autofosforilándose, a expensas del ATP en
residuos de tirosina pudiendo fosforilar al mismo tiempo a otros sustratos intracelulares,
generalmente proteínas, que se comportan como segundos mensajeros (Fig.21).
La estimulación de este tipo de receptor cumple los mismo mecanismos básicos que se han
estado analizando para otras hormonas, por lo que la unión de la hormona con el receptor
provoca cambios conformacionales en este último que son los responsables de la generación
de segundos mensajeros, siendo muy lógico pensar que estos cambios son muy diferentes
en su origen a los que se observan, por ejemplo, con los receptores acoplados a proteína G.
Desde el punto de vista didáctico es válido clasificar los eventos celulares relacionados con
cualquier receptor tipo tirosincinasa en tres grandes niveles de acción: 1. Los eventos
relacionados con la unión de la hormona con el receptor y la generación de segundos
mensajeros fosforilados en residuos de tirosina. 2. Los eventos relacionados con la
activación de un grupo de enzimas con capacidad de serin/treonincinasa, como producto del
paso anterior y 3. Los efectos biológicos finales de la hormona, representados por la
activación/inactivación o inducción/represión de enzimas del metabolismo intermediario o de
proteínas responsables de la regulación del ciclo celular.

Fig. 21 La fosfotirosina juega un papel

fundamental en todos los mecanismos de
regulación hormonal donde están involucrados
CH2 CH COO - los receptores tipo tirosincinasa ya que en
éstos, la autofosforilación ante la señal
hormonal y la heterofosforilación en residuos de
NH3 tirosina forman parte de los primeros eventos de
la transmisión de la señal. De la misma forma,
la eliminación de la señal primaria, luego que se
+ H2O ha tenido el efecto deseado, se hace a través
Fosfotirosina de enzimas del tipo de las fosfatasas que
hidrolizan estos enlaces covalentes y devuelven
a estas proteínas a su conformación nativa.

Una buena forma de estudiar los mecanismos intracelulares de señalización que se apoyan
en la activación de un receptor de membrana tipo tirocinsinasa es tomando como ejemplo
todos los mecanismos moleculares implicados en la generación de segundos mensajeros
por la estimulación de la insulina sobre su receptor, que de hecho, es un receptor tipo
tirosincinasa.

NIVELES DE ACCIÓN INSULÍNICA

El primer paso para la acción de la insulina es la unión con su receptor, fenómeno que fue
demostrado por primera vez en 1971 y que ha sido extensamente estudiado por muchos
investigadores. El receptor de insulina es una proteína integral de membrana constituido por
cuatro subunidades, 2 subunidades α (PM = 135 kDa) que son completamente extracelulares
y que se encargan de unir el receptor con la hormona y 2 subunidades β (PM = 95 kDa) que
atraviesan completamente la membrana. Durante la década de los ochenta Khan y cols.
Demostraron que este receptor también es un enzima, es mas, es miembro de una familia de
enzimas que reciben el nombre de tirosincinasas y que desde el punto de vista funcional se
 Las hormonas y su mecanismo de acción

comporta como una enzima alostérica, donde las subunidades β representan la porción
catalítica y las subunidades α la porción reguladora. Cuando la hormona se une al receptor
ocurren cambios conformacionales en la subunidad β que activan su capacidad intrínseca de
tirosincinasa que llevan a la transferencia de grupos fosfato del ATP a múltiples residuos de
tirosina a nivel del mismo receptor (autofosforilación), de otros receptores de insulina que no
están ocupados por la hormona (homofosforilación) y a otros sustratos intracelulares
(heterofosforilación). Los datos mas recientes indican que existen al menos seis residuos de
tirosina que intervienen en el fenómeno de autofosforilación y que están agrupados en tres
dominios en la porción intracelular de la cadena β : 1. El dominio yuxtamembrana, el cual
contiene a la tirosina 960, 2. El dominio catalítico (con actividad de tirosincinasa) que
contiene las tirosinas 1146,1150 y 1151 y 3. El dominio carboxilo terminal que tiene las
tirosinas1316 y 1322. El dominio que está alrededor de las tirosinas 1146,1150 y 1151
también se denomina “región reguladora” porque la fosforilación de estos residuos de tirosina
permite que el receptor sea capaz de fosforilar otros sustratos.

Fig.22 El receptor de insulina es un

Cadena típico receptor de membrana constituido
Dominio rico en por 2 cadenas α y 2 cadenas β. La
cisteína característica distintiva de este tipo de
receptor es la de poseer actividad
enzimática tipo fosfotransferasa, con la
cual, a expensas del ATP es capaz de
transferir grupos fosfatos a propios
residuos de tirosina presentes en la
misma estructura del receptor,
Dominio P fenómeno que se denomina
Yuxtamembrana autofosforilación. De la misma manera,
P Cadena también el receptor puede fosforilar a
Dominio otros receptores de insulina que no
Regulador P
P estén ocupados por la hormona, lo cual
se denomina homofosforilación de
receptores. La heterofosforilación, es la
Dominio P capacidad que tiene este receptor de
COOH terminal P fosforilar a sustratos intracelulares,
generalmente proteínas, como el IRS-1,
el primer segundo mensajero de la insulina.

Además de todos estos sitios activos, existen otros dominios importantes desde el punto de
vista funcional como por ejemplo el dominio rico en cisteína de la cadena α, el cual se cree
que es el punto de unión entre la insulina y el receptor. Estudios bastante detallados de
estructura/función de la cadena α han arrojado como resultado que una de las funciones mas
importantes de la cadena α es la de suprimir la actividad fosforiladora de la cadena β y
estudios de mutagénesis dirigida y digestión proteolítica de la cadena α han comprobado que
cuando la cadena α es eliminada del receptor se provoca una actividad fosforiladora
constitutiva de la cadena β es decir, fosforilación sin freno. El dominio yuxtamembrana de la
cadena β es especialmente interesante debido a que contiene las secuencias requeridas
para la interacción y la fosforilación de sustratos exógenos, así como las secuencias
responsables en la internalización del receptor. El dominio carboxilo terminal es la zona que
mas difiere entre los receptores de insulina y de factores de crecimiento parecidos a insulina
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

(IGF-1 e IGF-2). Es muy probable que las diferencias a nivel de este dominio sean las
responsables de que la insulina exhiba una respuesta de tipo metabólica y los factores de
crecimiento provoquen una respuesta de tipo proliferativa (Fig.22).
Fig.23 Visión esquemática de un grupo
de receptores de insulina. Nótese que el
primer receptor de izquierda a derecha
está ocupado por la hormona. En este
caso, dicho receptor es el primero en ser
activado y por lo tanto el primero que se
autofosforila. Es importante hacer notar
P P P P P P
que este receptor inicia en primer término
la heterofosforilación del IRS-1
P P P P P P
P P P P P P
activándolo, pero también inicia la
P P P P P P homofosforilación del receptor que está a
su lado, iniciando una cascada
P P P P P P
P P P P P P amplificadora que concluye en la
fosforilación de una cantidad muy grande
de receptores y de muchas moléculas de
IRS-1. Este fenómeno explica fácilmente
el hecho de cómo se podía observar el
P efecto máximo de la insulina con solo el
5 % de los receptores ocupados por la
P IRS-1 P hormona. La transfosforilación de
receptores actualmente es un hecho
P aceptado para todos los receptores tipo
tirosincinasa

El segundo mensajero de la insulina es una proteína llamada IRS-1

Desde hace muchos años se conocía el hecho que el receptor de insulina era capaz de
fosforilar a una gran cantidad de sustratos in vitro, pero la búsqueda de estos sustratos
intracelularmente no había producido los resultados esperados, siendo involucradas una gran
cantidad de sustancias como posibles segundos mensajeros.
El primer paso firme hacia la determinación de los segundos mensajeros insulínicos fue dado
por Morris White y Paul Rothemberg del Centro Joslin de Diabetes de la Universidad de
Harvard, quienes determinaron por electroforesis la presencia de fosfotirosinproteínas en
hígados de rata antes y después de la estimulación por insulina. Interesantemente, después
de la administración de insulina se reportó la aparición de una fosfoproteína con un peso
molecular de 185 kDa, reservándose como nombre provisional para este compuesto : pp
185. Poco tiempo después se cambia esta denominación a su nombre actual : IRS-1 ó Insulin
Receptor Sustrate -1. (Fig.24).
El IRS-1 es una proteína citoplasmática con un peso molecular que varía entre 160-190 kDa
debido a su estado de fosforilación, ya que este compuesto posee unos 22 sitios potenciales
con residuos de tirosina que pueden ser fosforilados por la acción de cinasa del receptor
insulínico, así que, entre mas fosforilada esté la proteína mayor será su PM. El IRS-1 es
sustrato no solo del receptor de insulina, sino también para los receptores de IGF-1, IGF-2
en interleucina -4 (IL-4). Se expresa ampliamnete en los tejidos y está muy conservado entre
diferentes especies animales. La capacidad del IRS-1 de ser un excelente sustrato para el
receptor de insulina y por ende su primer segundo mensajero, depende de la organización de
los residuos de tirosina dentro de dos tipos de secuencias de cuatro aminoácidos cada una
 Las hormonas y su mecanismo de acción

altamente conservadas : Tirosina-Metionina-Cualquier AA-Metionina y Tirosina-Cualquier

AA-Cualquier AA-Metionina. La fosforilación de estas tirosinas conlleva a que estos
pequeños dominios del IRS-1 se unan a proteínas intracelulares específicas corriente abajo
en el mecanismo acción de la insulina. La pregunta lógica en este momento es ¿Cual es el
mecanismo mediante el cual las fosfotirosinas del IRS-1 se unen a proteínas blanco?
Fig.24 Se puede apreciar una visión
esquemática de la molécula del IRS-1.
658 727 Este compuesto posee alrededor de 21
sitios de fosforilación (con el aminoácido
939 PI-3K tirosina) mediada por el receptor de
insulina. El IRS-1 fosforilado es la forma
PI-3K 608 987 activa de esta molécula, pudiendo
formar complejos activos con otras
546 1010 proteínas gracias a sus residuos de
PI-3K 460 1222
tirosinas fosforiladas. Como se puede
apreciar en la figura, enzimas como la
NH2 COOH fosfatidilinositol-3 cinasa y la fosfatasa
SHPTP2 pueden aumentar su
46,47 426 1172 GRB2 capacidad de catálisis hasta 20 veces al
107 formar complejos con el IRS-1. Otras
578 999 proteínas como la GRB2 no tiene
147
función catalítica conocida, pero sirven
745,746 895 SHPTP2
como proteínas adaptadoras que sirve
de “puentes” al unir al IRS-1 con otras
proteínas importantes como el RAS.

Las proteínas con dominios SH2 se unen ávidamente al IRS-1

La unión del IRS-1 con proteínas citoplasmáticas dentro de la célula ocurre gracias a la
presencia en las proteínas blanco de dominios específicos llamados SH2 (src homology 2),
nombre que proviene de una proteína producto de la expresión de un oncogen denominado
src. De esta forma, este dominio, es prácticamente idéntico a la proteína completa src.
Durante los últimos años se han identificado más de 20 proteínas con dominios rsc. Están
incluidas, por ejemplo, enzimas modificadoras de lípidos como la fosfolipasa Cγ y la
fosfoinositol-3-cinasa, algunas tirosincinasas intracelulares pequeñas como la lck, fyn y abl ;
dos fosfotirosinfosfatas llamadas SHPTP1 y SHPTP2 (que potencialmente pueden
defosforilar al IRS-1 y al mismo receptor) y muchas moléculas cuyas estructuras solo están
constituidas por dominios SH2 y SH3 (src homology 3) que actúan como adaptadoras entre
fosfotirosinproteínas con otras proteínas citoplasmáticas.
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

Secuencia de unión del Fig.25 El IRS-1 es capaz de formar complejos con otras proteínas
IRS-1 con una proteína con gracias a la presencia de una serie de secuencias de consenso
dominio Sh2 (Tir-Met-AA-Met) formadas por cuatro aminoácidos. En este caso, la secuencia en el
A.A. IRS-1 que le permite unirse a la proteína GRB2 es Tirosina-P-
Met A.A Metionina-Cualquier-A.A-Metionina. El lugar donde el IRS-1 “encaja”
A.A. A.A. A.A. dentro de la GRB2 se denomina dominio SH2, recibiendo este nombre
Tir Met porque su conformación primaria (secuencia de aminoácidos) es
idéntica a una proteína que es el producto de la expresión del oncogen
P
src. La unión del IRS-1 con otras proteínas como la fosfatidilinositol-3-
Proteína K, la SHPTP2 ó la fosfolipasa Cγ se hace siguiendo siempre este
mismo patrón. Como se verá mas adelante, en algunos casos la
GRB2 proteína GRB2 se puede unir directamente con las fosfotirosinas de
algunos receptores sin intervención del IRS-1, este es el caso del
receptor para el factor de crecimiento epidermal ó EGF.

Fig.26 P roteín as con d om in ios S H 2

E n zim as
Tirosincinasas citoplasm áticas
Fosfatidilinositol-3-cinasa
Fosfolipasa C -gam m a
Proteína activadora de la proteína G (G ap)
PTP asas (F osfatasas SP TP H 1 y 2)
M oléculas adap tadoras
Proteína GRB2
CRK
GRB2 p85 beta
Dominio SH2 Dominio SH3 P roteínas estru cturales
Espectrina
de la GRB2 de la GRB2 M iosina Fig.27

Fig. 26 Esta figura muestra cómo el IRS-1 se une a la proteína adaptadora GRB2 a través del dominio SH2 de
esta proteína. Nótese que en la unión solo aparecen haciendo unión con la GRB2 1 tirosina fosforilada (círculo
amarillo) y una Metionina, por lo que es obvio pensar que en este caso la secuencia de consenso del IRS-1
para la unión con la GRB2 es Tirosina-P-Metionina- Cualquier AA-Metionina. También se puede observar como
la GRB2 se une al otro extremo con la proteína SOS mediante un dominio tipo SH3.
Fig. 27 Diferentes proteínas que poseen dominios tipo SH2 y su función general dentro de la célula.

Algunas de estas proteínas, como se ha visto, tienen función enzimática y su unión con el
IRS-1 aumenta la actividad de éstas de 20 a 50 veces. En otros casos, la unión del IRS-1 se
hace con proteínas que por sí mismas no tienen actividad catalítica, si no mas bien una
función adaptadora, mediante la cual, se puede formar un macrocomplejo molecular entre el
IRS-1 y dos o más proteínas. El IRS-1 al poder unirse con una gran variedad de proteínas es
considerado como un entronque entre vías metabólicas múltiples. De todas estas
ramificaciones, tal vez la mejor estudiada, es la que involucra la unión del IRS-1 con la
proteína adaptadora GRB2.

La proteína GRB2 es el puente de unión entre la activación del receptor y la activación

de la proteína RAS
 Las hormonas y su mecanismo de acción

La proteína GRB2 es una proteína citosólica adaptadora formada por dos dominios
importantes: un dominio SH2 con el cual establece unión con el IRS-1 y un dominio SH3 que
establece unión con una proteína llamada SOS (soon of sevenless). Toda la evidencia
experimental apunta al hecho que la GRB2 produce la traslocación hacia la membrana, a
modo de bisagra, de la proteína SOS para que esta pueda alcanzar a su sustrato natural, la
proteína RAS.
La proteína Ras ha sido muy estudiada pero aún está lejos el día de entenderla
completamente. Originalmente se descubrió como el producto un oncogen, pero se sabe
actualmente que juega un papel importante en el control del crecimiento celular y el
metabolismo intermediario, así como en la acción de la insulina. Ras es una proteína de
membrana de 21 kDa, que como se dijo en el principio del capítulo, pertenece a la familia de
las enzimas hidrolíticas y al grupo de las GTPasas, ya que son capaces de hidrolizar al GTP
y convertirlo en GDP. Basado en múltiples estudios se sabe que la forma activa del RAS es
el complejo RAS-GTP y que la unión del GTP a esta proteína es regulada por una serie de
proteínas de bajo peso molecular llamadas en conjunto “factores intercambiadores de
nucleótidos de guanosina”o GEF’s, de los cuales el SOS uno de ellos. De la misma forma, a
pesar que RAS pp21 por sí solo tiene actividad GTPásica, la hidrólisis del GTP puede ser
fuertemente aumentada gracias a otros factores proteicos llamados proteínas GAP. De este
hecho se concluye que Ras puede fluctuar entre dos estados ; uno en el cual está unido al
GDP y otro en el cual está unido al GTP. El intercambio de GDP por GTP es llevado a cabo

Pi RAS GTP

Receptor de GDP
insulina
Membrana plamática
GAP SOS

RAS

GTP
RAS
Fig.28
GDP GTP
Fig. 28 Resumen del primer y segundo nivel de acción insulínica. Obsérvese como el receptor activado por la
insulina fosforila al IRS-1, acción que provoca la formación del complejo IRS-1—GRB2—SOS, el cual es capaz
de activar a la proteína RAS al facilitar el intercambio de GDP por GTP gracias a la cualidad de la proteína SOS
de servir como un factor de intercambio de nucleótidos de guanosina (GEF’s).
Fig.29 Representación del ciclo de actividad de la proteína RAS. Esta proteína oscila entre dos formas
interconvertibles enzimáticamente, una inactiva (RAS-GDP) y otra activa (RAS-GTP). Se debe recordar que la
proteína RAS por sí misma es una GTPasa, es decir, tiene la función de una enzima hidrolítica. Sin embargo, la
velocidad de la hidrólisis se ve muy aumentada en presencia de una proteína auxiliar llamada GAP, la cual
incrementa la velocidad de la hidrólisis hasta 100 veces. Una vez hidrolizado el GTP a GDP el RAS disminuye
en mucho su actividad. Aparentemente la función de esta proteína dentro del mecanismo de señalización
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

intracelular de la insulina es la de unirse y activar a una enzima del tipo de las serin/treonincinasas llamada
RAF, la cual forma parte del segundo nivel de acción insulínica.

gracias a la proteína SOS y la posterior hidrólisis del GTP es facilitada por la proteína GAP.
De esta manera, el nivel uno de la acción insulínica involucra la autofosforilación del receptor
y fosforilación del IRS-1 que forma complejo con la proteína GRB2 gracias a su dominio SH2,
y por medio del dominio SH3 la GRB2 se une a su vez con la proteína SOS, que es
traslocada a la membrana y puesta en presencia de la proteína RAS. En este momento, la
SOS intercambia, en la proteína RAS, el GDP por GTP, convirtiendo a esta última en el
complejo RAS-GTP activo, proceso que concluye con el nivel 1 de la acción insulínica.
La activación de RAS al complejo RAS-GTP permite que esta proteína inicie el segundo nivel
de la acción insulínica, que no es mas que una cascada de fosforilaciones sucesivas que
activan enzimas del tipo de las treonin/serincinasas. RAS-GTP es capaz de unirse y activar a
una serin/treonincinasa llamada RAF, que en su forma activa fosforila en residuos de serina y
treonina y a expensas del ATP a otra enzima llamada MAPcinasa-cinasa (MAPKK) que al
mismo tiempo fosforila a la MAP cinasa (MAPK). Como se puede observar, esta cascada de
fosforilaciones no es mas que una clara representación de regulación enzimática por
modificación covalente, al igual que por ejemplo, la que podemos observar con la proteína
G. La MAPcinasa es la última enzima de este nivel y tiene como función fosforilar a enzimas
blanco de muchas vías metabólicas pertenecientes al tercer nivel de acción insulínica, como
por ejemplo, a la proteinfosfatasa-1, que en su forma fosforilada es muy activa y que se
encarga de defosforilar a la glucógeno sintetasa, convirtiéndose en enzima activa. Como se
puede observar, la vía de la MAPcinasa es un camino diametralmente opuesto, en este caso
por lo menos, a las vías estimuladas por la proteína G.
 Las hormonas y su mecanismo de acción

Fig.30 Cascada de fosforilaciones desencadenada por la activación de la proteína RAF al interactuar con la
proteína RAS. La fosforilación de RAF activa su capacidad de treonin/serincinasa, lo que provoca la fosforilación
a expensas del ATP de la MAPKK (MAPcinasacinasa) que a su vez, también a expensas del ATP, fosforila a la
MAPK (MAPcinasa). La enzima MAPcinasa es una serin/treonincinasa que juega un papel fundamental en el
segundo nivel de la acción insulínica ya que es la encargada de fosforilar a la mayor parte de las enzimas y
otras proteínas que forman parte del tercer nivel de acción. En la ilustración se puede apreciar que la MAPK
fosforila a la enzima efectora Proteinfosfatasa-1, que es la responsable de defosforilar en última instancia a la
enzima del metabolismo de carbohidratos Glucógeno sintetasa, la cual es activa en su forma desfosforilada.
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

Tabla 7
Principales abreviaturas utilizadas en el estudio de los mecanismos de transducción mediada por
receptores tipo tirosincinasa. Debido a la cantidad de abreviaturas, generalmente de tres letras, los
autores norteamericanos le han llamado “pesadilla de tres letras”

FAK Focal adhesion kinase Proteintirosincinasa de membrana de unos 125 kDa

Cinasa de adherencia focal presente en casi todas las células.
GAP G-protein activating protein Es una proteína reguladora de la actividad de RAS que
Proteína activadora de proteína G promueve la hidrólisis del GTP unido al RAS,
inactivándolo.
GEF Guanine nucleotide exchange factor Proteína que activa al RAS mediante la promoción de la
Factor de intercambio de nucleótidos liberación del GDP y la unión subsiguiente del GTP.
de Guanosina También se le denomina GNRF’s (Guanine nucleotide
release factor).
GRB2 Growth factor receptor binding protein Proteína adaptadora de 23 kDa que contiene un
2 dominio SH2 que se une a una fosfotirosinproteína y
Proteína enlazadora 2 del receptor de dos dominios SH3 que unen al SOS, acoplando así a
factores de crecimiento las fosfotirosinproteínas con la vía RAS.
IRS-1 Insulin receptor sustrate-1 Es el principal sustrato citosólico del receptor de insulina
Sustrato 1 del receptor de insulina y de los IGF-1 e IGF-2.
MAP-Kinase Microtubule-associated protein or Es una familia de serinproteincinasas capaces de
mitogen-activated protein kinase fosforilar y activar a otras proteincinasas. Llamadas
Proteincinasa asociada a los anteriormente ERK (Extracelular-regulated kinases)
microtúbulos
PI Fosfatidilinositol Un fosfolípido de membrana que sirve de sustrato a la
PI-3-cinasa
PI-3-Cinasa Fosfatidilinositol-3-cinasa Una enzima que fosforila el PI en posición 3
PTPasa Phospotirosinphosphatase Una enzima capaz de hidrolizar el fosfato presenta en
Fosfotirosinfosfatasas fosfotirosinproteínas.
Rab Ras associated binding proteins Proteínas relacionadas con RAS que se cree que
Proteínas de unión asociadas a RAS juegan algún papel en el transporte de vesículas a la
membrana celular.
Rad RAS associated with diabetes Proteínas relacionadas con RAS cuya expresión está
RAS asociado con la diabetes aumentada en individuos con diabetes tipo 2.
RAF Serincinasa citoplasmática activada por RAS que es
capaz de fosforilar cinasas corriente abajo de RAS.
RAS Es una familia de GTPasas identificadas originalmente
en células tumorales como productos proteicos de
oncogenes.
Dominio SH2 src homology 2 domain Es una región de una proteína que tiene similitud con la
Dominio homólogo al src2 oncoproteína viral src y que es capaz de unirse a
residuos de tirosinas fosforiladas en proteínas
intracelulares.
Dominio SH3 src homology 3 domain Es una región de una proteína que tiene similitud a la
Dominio homólogo al src3 oncoproteína viral src y que es capaz de unirse a
dominios específicos de otras proteínas.
shc Es una molécula adaptadora y sustrato del receptor de
insulina que es capaz de unirse con SOS y GRB2 para
activar a RAS sin la intervención del IRS-1.
SHPTP2 Es una fosfotirosinfosfatasa con dominios SH2 que es
activada por el IRS-1. Antiguamente llamada syp.
SOS Son-of-sevenless Es un factor de intercambio de nucleótidos de
guanosina que acelera la liberación del GDP de RAS.
Tirosincinasa Una enzima capaz de transferir un fosfato del ATP a
residuos de tirosina en una proteína.
 Las hormonas y su mecanismo de acción

Actividad de auto-evaluación

1. ¿Cómo se clasifican las hormonas desde el punto de vista químico y desde el punto de
vista del mecanismo de acción?

2. Explique desde el punto de vista molecular los diferentes mecanismos por los cuales una
hormona es capaz de regular el metabolismo intermediario.

3. ¿De qué factores depende la actividad de una hormona? Cite ejemplos

4. ¿Que diferencias encuentra entre los términos autocrino y yuxtacrino en la acción de una
hormona?

5. Explique la diferencia entre sustancias endocrinas, autocrinas y paracrinas. Cite ejemplos

y la naturaleza químicas de cada una.

6. ¿Por qué las hormonas esteroideas y tiroideas requieren de proteínas plasmáticas de

transporte? Explique a nivel molecular.

7. ¿Que analogías encuentra usted entre los complejos Enzima-Sustrato, Hormona-

Receptor y antígeno-Anticuerpo? Explique a nivel molecular.

8. Explique a nivel molecular cuales son los determinantes de que la acción de una hormona
cualquiera finalice después de haber ejercido su función biológica.

9. Cuando una hormona se une a su receptor ocurren “Cambios conformacionales en el

receptor” que activan la generación de segundos mensajeros (como ocurre en el caso de
los receptores de membrana). Explique a nivel molecular cómo acontecen estos cambios
y cuales son sus consecuencias.

10. ¿Que significa el término regulación en bajada de receptores hormonales? ¿El término
puede ser aplicado a todos los receptores por igual?

11. ¿Que similitudes y diferencias encuentra usted entre los complejos hormona/receptor,
antígeno/anticuerpo y enzima/sustrato?

12. El mecanismo endocrino de acción hormonal implica el recorrido de grandes distancias

desde la célula señalizadora hasta la célula blanco. ¿Qué mecanismos y moléculas
accesorias están involucradas en este transporte?

13. Normalmente se observa que una célula señalizadora controla a través de la secreción
de una hormona el funcionamiento, proliferación y metabolismo de la célula blanco.
¿Existe la posibilidad que una hormona controle a su vez la secreción de otra hormona en
otra célula?
Dr. Valmore Bermúdez Pirela

14. La placenta humana es un órgano de gran actividad biológica. Enumere todas las
hormonas producidas por este elemento.

15. Cual es la importancia de las cadenas laterales de los aminoácidos que forman parte del
dominio de unión a la hormona (del receptor) en la afinidad de la hormona a este último.

16. Si la membrana plasmática es una bicapa lipídica de naturaleza eminentemente apolar.

¿Cómo las proteínas, que son de naturaleza eminentemente polar pueden anclarse en la
membrana e incluso atravesarla?

17. ¿Que es el fenómeno de promiscuidad de receptores? Cuales son sus bases

moleculares.

18. Generalmente las hormonas son producidas y almacenadas dentro de la misma célula
(Célula señalizadora). Investigue si existe algún caso el cual la hormona se produce en
una célula y se almacena en otro sitio distante a ella. (De un ejemplo).

19. ¿Por qué se considera al receptor insulínico un receptor hormonal, una enzima alostérica
y al mismo tiempo sustrato? ¿Cual es su sitio catalítico? ¿Cual es el alostérico? ¿Cuáles
son sus efectos como enzima?

20. ¿Cuantos residuos de tirosina del receptor de insulina se autofosforilan? ¿Qué papel
juegan cada uno de ellos?

21. ¿Cuantos tipos de sustratos existen para el receptor de la insulina? ¿Cuáles son sus
funciones?

22. ¿Qué importancia tiene los dominios SH2 y SH3 en la proteína GRB2?

23. ¿Qué papel juega la proteína RAS en los mecanismos de señalización de la insulina?

24. ¿Qué relación tiene RAS con la molécula de GTP? ¿Qué papel juegan las proteínas GEF
y GAP?

25. ¿Que analogías existen en las proteínas G y las proteínas RAS? Explique a nivel
molecular.

26. ¿Que son las proteínas MAP kinasas? ¿Cuales son sus sustratos y que papel
desempeñan en la cascada de señalización insulínica?

27. ¿A través de que mecanismos las MAP kinasas alteran la expresión genética?

28. Explique el mecanismo molecular en el cual la insulina es capaz de activar la enzima

glucógeno sintetasa

29. Explique el mecanismo molecular en el cual el glucagón es capaz de contrarrestar los

efectos que la insulina ocasiona sobre la glucógeno sintetasa
 Las hormonas y su mecanismo de acción

30. ¿Qué sucede con la actividad de una hormona que utiliza la MAPK como sistema de
señales si la proteína RAS pierde sus propiedades GTPasa?

31. Explique a nivel molecular el término expresión genética.

32. ¿Que es amplificación y silenciamiento genético?

33. ¿Que es inducción y represión genética? Explique el mecanismo molecular de acción

involucrado en estos mecanismos de regulación de la expresión genética.

34. Cuantos dominios tiene un receptor para la insulina. Explique a nivel molecular la
importancia de cada uno de ellos.

35. Cuales son las características básicas de los receptores citoplasmáticos para hormonas
esteroideas/Tiroideas. Cuales son las diferencias básicas entre uno y otro. Explique a
nivel molecular las consecuencias de estas diferencias.

36. Explique que es el fenómeno de dimerización de receptores, explique su importancia y

cite ejemplos de diferentes hormonas que estimulen la dimerización de receptores.

37. Explique a nivel molecular cómo las hormonas tiroideas aumentan la sensibilidad del
músculo cardíaco a las catecolaminas.

38. ¿Explique por qué las catecolaminas usan un segundo mensajero mientras que los
estrógenos no usan un segundo mensajero para ejercer sus efectos reguladores sobre el
metabolismo?

39. Cuales son las características básicas de los receptores acoplados a guanilato ciclasa.
Que diferencias existen entre estos últimos y la guanilato ciclasa soluble citoplasmática.

40. Explique a nivel molecular el mecanismo de acción de los receptores hormonales

acoplados a canales iónicos. Cite ejemplos.

41. Explique desde el punto de vista químico la diferencia entre AMPc, GMPc, Diacilglicerol,
Fosfatidilcolina, Fosfatidilinositol, Inositol 3 fosfato.

42. ¿Qué es una proteína G, cómo se clasifica, y por cuantas subunidades está formada?

43. Cuales son las características básicas de un receptor acoplado a proteína G. Enumere los
dominios más importantes y las bases moleculares de la activación de este tipo de
receptores.

44. Explique el mecanismo mediante el cual algunas hormonas utilizan el AMPc como
segundo mensajero

45. ¿A través de qué mecanismo el AMPc altera la expresión genética?

Dr. Valmore Bermúdez Pirela

46. Explique que sucederá con la actividad de una hormona, si la proteína G que media sus
efectos, pierde sus propiedades GTPasa.

47. ¿Qué tipo de enzimas actúan como efectores de las hormonas que aumentan el AMPc?

48. ¿Qué mecanismos moleculares utilizan las hormonas que contrarregulan la actividad de
las hormonas que aumentan el AMPc?

49. ¿Cómo modifica la toxina producida por el Vibrio cholerae los efectos de las
catecolaminas sobre los receptores Beta? Analice el mecanismo a nivel molecular.

50. ¿Cómo modifica la toxina pertrusis el efecto que ejerce el AMPc sobre la adenosina al
fijarse a los receptores A1. Analice y explique a nivel molecular?

51. ¿Cómo modifican las Xantinas los efectos de las catecolaminas sobre los receptores
Beta? Explique a nivel molecular.

52. Explique el mecanismo a través del cual la acetilcolina es capaz de producir relajación del
músculo liso de los vasos sanguíneos

53. ¿Cuántos tipos de receptores para guanilatociclasa conoce? Cite ejemplos de cada uno.

54. Explique el mecanismo a través del cual las hormonas esteroideas son capaces de
promover la transcripción genética

55. ¿Cuál es el papel de la proteína de choque térmico en el mecanismo de acción de las

hormonas esteroideas?

56. ¿Por cuántas partes está constituido el receptor citosólico para las hormonas
esteroideas?

57. Explique en que se diferencian el receptor de las hormonas esteroideas y tiroideas

58. ¿Qué son los receptores PPAR, y cómo se clasifican?

59. ¿Qué significa que los PPAR forman heterodímeros y explique el mecanismo a través del
cual los PPAR promueven la transcripción genética?

Literatura recomendada para este capítulo

1. Stephen K. Receptor guanylyl cyclases. J. Clin. Inv. Vol 90 August 1992.

2. Chinkers, B. et al. Signal trnasduction by guanylyl cyclases. Annu. Rev. Biochem.1993. 60 :553-575.
3. Brenner, B et al. Diverse biological action of atrial natriuretic peptide. Physiol. Rev. 1994.70 :665-669.
4. Yuen, P et al. The guanylyl ciclase receptor family. Annu. Rev. Neurosci. 1995.15 :193-225.
5. Palmer, R. et al. Nitric oxide release accounts for the biological activity of the EDRF. Nature, 327 :524-
526.1996
 Las hormonas y su mecanismo de acción

6. Kamisaki, Y. et al. Soluble guanylate cyclase from rat lung exist as a heterodimer. J. [Link].1994
261 :7236 :-7241.
7. Hayashi, F et al. Polymorfism in purified forms of guanilate ciclase from vertebrate rod photoreceptor.
Proc. Natl. Acad Sci. USA. 1993.88 :4746-4750.
8. Stryer, L et al. Visual excitation and recovery. J. Biol. Chem. 1991. 266, 10711-10714.
9. Radany, E et al. [Link] and identification of particulate guanilate cyclase from sea urchin
spermatozoa. J. Biol. Chem. 258 :8346-8351.
10. Khan R. Insulin action, diabetogenes and the cause of type II diabetes. Diabetes. Vol 43. August 1994.
th
11. Murray R. ; Granner D. ; Mayes P. Harper’s Biochemistry. Lange medical Book. 24 edition.1996.