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Examen de Biotecnología de Alimentos

1. Se proporcionan datos de crecimiento de Bacillus subtilis para determinar la velocidad de crecimiento en la fase logarítmica. 2. Se proporcionan datos de velocidad de esporas de Bacillus sp. a diferentes temperaturas para determinar la energía de activación. 3. Se pide determinar el rendimiento de conversión de sustrato en biomasa y la constante de saturación ks a partir de ecuaciones dadas para un cultivo de Corinebacterium sp.
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Examen de Biotecnología de Alimentos

1. Se proporcionan datos de crecimiento de Bacillus subtilis para determinar la velocidad de crecimiento en la fase logarítmica. 2. Se proporcionan datos de velocidad de esporas de Bacillus sp. a diferentes temperaturas para determinar la energía de activación. 3. Se pide determinar el rendimiento de conversión de sustrato en biomasa y la constante de saturación ks a partir de ecuaciones dadas para un cultivo de Corinebacterium sp.
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN DE AREQUIPA

INGENIERÍA DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS


DOCENTE: Ing. Sonia J. Zanabria G.; [Link].
Biotecnologìa de Alimentos

EXAMEN A DISTANCIA
Indicaciones: Para sus respuestas concretas se puede trabajar de dos personas para extraer
conclusiones por debate. Elabore sus fichas de redacción técnica y científica,
ci entífica, esto
le ayudará a obtener respuestas relevantes.
La revisión será exhaustiva, así que evite fraudes.

1. Determinar la velocidad de crecimiento (en la fase logaritmica) con Bacillus subtilis  los
siguientes datos:

Tiempo X (g/L) rx ux
(h)
0 0.02 0
2 0.034 0.050 1.478
4 0.221 0.286 1.295
6 1.179 2.120 1.798
8 8.7 1.950 0.224
10 8.98 1.088 0.121

2. Determinar la energía de activación de esporas de Bacillus sp.

T°K Veloc. 1/T Ln(V)


(min-1)
85 0.012 0.012 -4.422
90 0.032 0.011 -3.442
110 1.6 0.009 0.4700
220 9.61 0.005 2.2628

3. Resolver: En un cultivo batch con una cepa de Corinebacterium sp., 100L de cultivo se
encuentran infinitamente mezclados y aereados, con los datos de velocidad de crecimiento y
velocidad específica de consumo de sustrato se obtuvo la siguiente recta y=0.075+3.009x,
determine el rendimiento de conversión de sustrato en biomasa, asimismo determine ks si la
ecuación obtenida fue de y=1.002+0.095x

Yx/s = Y=0.075+3.009x Ks= Y =1.002+0.095x


 
     

           
    

    
   
    + 
y=bx+a
   
Por lo tanto. Y =bx +a
 Por lo tanto.
    
  = 1.002


 Yx/s= 0.332 entonces
 umax = 0.998
 ms =0.075


   

Entonces
Ks =0.095(0.998)
Ks =0.09481

4. La ecuación para la producción aerobia de ácido acético a partir de etanol es:

C2H5OH + O2 CH3CO2H + H2O

Se ha añadido la bacteria  Acetobacter aceti   a un medio altamente aireado que contiene 10 g l -1


de etanol. Transcurrido cierto tiempo, la concentración de etanol es 2 g l -1  y se han producido
7.5g l-1 de ácido acético ¿Cómo es el rendimiento global de ácido acético a partir de etanol en
comparación con el rendimiento teórico?

Solución:

    


 ()
El rendimiento teórico se basa en la masa de etanol utilizado para la síntesis del ácido acético.

De la ecuación estequiometria.

        


   
Hallando el rendimiento teórico:

  
   
Por consiguiente el rendimiento observado es el 72.31% del teórico.

5. Determinar Ks de un organismo que crece en un medio complejo sumergido aerobio:

Tiempo Numero de S
(h) Organismos (g/L) X(g/l) rx U 1/u 1/s
/mL x 104
0 2 54.2 0.2 0 0 0 0.0185
1 20 52 2 6.65 3.3250 0.3008 0.0192
2 135 51 13.5 15.00 1.1111 0.9000 0.0196
3 320 50.2 32 11.95 0.3734 2.6778 0.0199
4 374 41 37.4 2.90 0.0775 12.8966 0.0244
5 378 32 37.8 0.30 0.0079 126.0000 0.0313
6 380 27 38 0.15 0.0039 253.3333 0.0370
7 381 21 38.1 0.05 0.0013 762.0000 0.0476
8 381 17 38.1

  

    
  
      
   

 Por lo tanto:
  
1/  max= -531.156
-3
 μ max =-1.883x10
  
Ks/  max= 24557.89

 Hallando Ks

Ks = 24557.89(-1.883x10-3)

Ks =-46.2425
6. Se mide el número de esporas viables de una nueva cepa de Bacillus subtilis en función del
tiempo a varias temperaturas

tiempo NUMERO DE

(min) T=85°C Ln(N) 85°C T=90°C Ln(N) 90°C T=110°C Ln(N) 110°C T=120°C Ln(N) 120°C
0 2.40*109 21599 2.40 x109 21.599 2.40 x109 21.599 2.40 x109  21.599
0.5 2.39 x109 21.594 2.38 x109 21.59 1.08 x109 20,800 2.05 x109  16.835
1 2.37 x109 21.586 2.30 x109 21.556 4.80 x109 19.989 1.75 x109  12.072
15 0 2.29 x109 21.552 2.20 x109 19.209 1.30 x109  7.17
2 2.33 x109 21.569 2.21 x109 21.516 9.85 x109 18.406 0
3 2.32 x109 21.569 2.17 x109 21.488 2.01 x109 16.816 0
4 2.28 x109 21.547 2.12 x109 21.475 4.41 x109 15.299 0
6 2.20 x109 21.512 1.95 x109 21.391 1.62 x109 11.995 0
8 2.19 x109 21.057 1.87 x109 21.349 6.88 x109 8,836 0
9 2.16 x109 21.493 1.79 x109 21.305 0 0

a. Calcular la energía de activación para la muerte térmica de las esporas de B. subtilis

25
20
ln N 85°C
15
ln N 90°C
10
ln N 110°C
5 ln N120°C
0
0 2 4 6 8 10

  
   
    +70,956
     
   (
 )
    


 
b. Cuál es la constante de muerte específica a 100°C

 
   


    
 
    
    
  
elnkd = e-1,482
  -1
c. Calcular el tiempo necesario para matar el 99% de las esporas de una muestra a 100°C

    


  (  )


   
       -1
()  
    
7. Determine la ecuación que relaciona Yp/s con .

    
  
Donde:

     

 
   
Entonces las Y p/s será:
  


8. Un fermentador de 10 litros de medio es inoculado con 500 mL de inóculo de 4,1 g/L. Se sabe
que si se deja crecer la cepa, al cabo de 6 horas la biomasa en el fermentador será de 6 g/L.
Determinar el tiempo de duplicación y el tiempo que deberá permanecer la cepa en el
fermentador para alcanzar la misma concentración del inóculo.

 Procederemos a convertir 500 ml a litros

 
 

  
 
 Hallando la tasa especifica decrecimiento(  )

  (

)

  ((  )


 ) 
   
La tasa de crecimiento determinada en fase exponencial, donde ningún elemento nutritivo es
limitante, nos dará la tasa de crecimiento máxima:


 Por tanto :


  

   
   
9. La concentración celular en un matraz agitado es 0,5 g/L. Se sabe que el sustrato limitante es
la glucosa, cuya concentración inicial es de 10 g/L. Si al final del cultivo (5 hrs.) se tiene que la
bacteria ha llegado a una concentración de 10 g/L. Estimar al porcentaje de carbono en esta
cepa.
  

  (

 -1

 luego:

()
     
-5      

10. Un cultivo por lotes se realizó a 15 ºC en un fermentador con 10 litros de caldo, inoculado
con 300 mL de cultivo de 5,5 g/L. Cuando ha transcurrido la mitad del tiempo de cultivo, la
temperatura aumenta a 35 ºC, manteniéndose hasta el final del cultivo. Se sabe que el tiempo
de duplicación de esta cepa es, a 20 ºC, de 32 minutos, y a 30 ºC de 24 minutos. Calcular el
tiempo total de fermentación si se sabe que el rendimiento de la fuente de carbono es 0,5,
siendo agregado 8 g/L de ella.

11. Extraiga un resumen acerca de la purificación de enzimas

En general, el primer paso consiste en la obtención de un homogenato, que implica la


destrucción de la célula y el pasaje de las enzimas a solución o suspensión. Esto puede
llevarse a cabo por:

 Homogenización mecánica
 Homogeneización sónica
 Desintegración térmica

Luego continua la etapa de purificación donde los métodos a elegir dependen de la fuente
biológica y de la concentración de la enzima, y se basan en las distintas propiedades
fisicoquímicas de las proteínas
12. Reporte un resumen acerca de la utilización de amilasas en la industria alimentaria

Producida Función en Industria Alimentaria


industria azucarera para llevar a cabo la
B. amyloliquefaciens y hidrólisis del almidón residual de caña de
B. licheniformis. azúcar y en la industria cervecera como
α-amilasa aditivo para la producción de etanol
obtención de hidrolizados de almidón con
 Aspergillus oryzae alto contenido de maltosa y como aditivo en
panadería
cataliza la hidrólisis de almidón para obtener
β-amilasa Bacillus cereus. maltosa

En la industria cervecera para la obtención de


Amiloglucosidasa  Aspergillus niger  cerveza ligera.

13. Reporte Ud. Una relación de empresas en el Perú que explotan células microbianas y sus
respectivos metabolitos.

 LABORATORIOS NEC .  : LACTOPROB E ( 8 Lactobacillus + 7 Enzimas Digestivas


Naturales), LACTOPROB E ( 8 Lactobacillus + 7 Enzimas Digestivas Naturales)
 MIRENA EMPRESARIAL  :Bacillus thuringiensis, Bacillus subtilis, Bacillus cereus
  AMERICA ALIMENTOS   :Bacillus coagulans, Bacillus licheniformis, Bacillus megaterium,
Bacillus subtilis
 FLEISCHMAN : levaduras frescas y secas para pan
 CALSAPERUS.A.C  : sacharomyce cerevisae
 ENMEX  :Alfa amilasa, Alfa amilasa bacteriana
  AMERICA ALIMENTOS  :Amilasa (Alfa-Amilasa) FUENTE Aspergillus oryzae, Amilasa
Bacteriana FUENTE Bacillus subtilis, Diastasa (Beta-Amilasa) FUENTE Aspergillus oryzae,
L-Glutamina Alfa Cetoglutarato

14. De acuerdo a lo mencionado por Quintero y Scriban defina Biotecnologìa

 También menciona que según Bu´lock circunscribe la biotecnología al uso de agentes


biológicos simples y componentes celulares, excluyendo las aplicaciones de organismos
complejos.
 La federación europea de biotecnología la definió como el uso integrado de la bioquímica, la
microbiología y la ingeniería para lograr las aplicaciones tecnológicas de las capacidades de
microrganismos
 Originalmente se circunscribía en el area de microbiología industrial y tecnología enzimática
sin embargo hoy se ha definido como la utilización de moléculas obtenidas biológicamente,
estructuras células y organismos para llevar a cabo procesos específicos.

15. De acuerdo a lo visto en clase mencione la diferencia del fundamento de uso de


turbidiostato y quimiostato.

Turbiostato Quimiostato

La máxima estabilidad se consigue cuando la La máxima velocidad se consigue a altas


concentración celular cambia solo ligeramente velocidades de dilución
al cambiar la velocidad de dilución esto es a
bajas velocidades de dilución
La velocidad de flujo es regulada por un La velocidad del flujo se mantiene en un valor
dispositivo óptico que mide la observancia del determinado y la velocidad de crecimiento del
cultivo, la velocidad de crecimiento se ajusta a cultivo queda ajustada a esta velocidad del flujo
la velocidad de flujo.

16. Reporte un diagrama de flujo para obtener papilla y bebida de cereales por hidrólisis del
almidón

DIAGRAMA DE FLUJO DE LA PAPILLA DE QUINUA


17. De manera concreta reporte el destino de los componentes de un cultivo tanto para las
células y sus metabolitos

18. Mencione los productos de la licuefacción y la sacarificación

19. Mencione las ventajas de usar enzimas pecticas en la industria alimentaria


20. En la producción de acido glutamico industrialmente, mencione los componentes del medio
de cultivo complejo.

El ácido glutámico es el aminoácido de mayor consumo a nivel mundial; la sal


sódica del ácido glutámico, el glutamato monosódico (GMS) se usa como
aditivo alimentario.

El ácido L-glutámico se produce por fermentación; para obtener la sal, e l ácido


se neutraliza con conversión azúcar-ácido glutámico de 42.3%, en tanto la
conversión de ácido glutámico a glutamato monosódico (GMS) es de 92%.

La produccion del ácido L-glutámico se realiza principalmente por


fermentacion. Se conocen numerosos microorganismos capaces de producirlo a
partir de diferentes fuentes de carbono, entre los mas importantes se
encuentran:

 Corynebacterium glutamicum (melasas)


 Brevibateriun flavun (acetato)
 Brevibacteriun divaricatum (glucosa + acetato de amonio)
 Arthrobacter paraffineus (n-alcanos)

En todos los casos se alcansasn concentraciones de 100 gr/l o


[Link] y fisiologicamente estas celulas sonmuy parecidas a c.
glutamicun, gram positivas, no esporulan y no tinen motilidad. Todos los
productores de acido glutamico requieren de biotina, carecen o tinen poca
actividad de enzima alfa glutarato deshidrogenasa y una actividad de
glutamato deshidrogenasa. La ruta bisentetica para la obtencion del acido
glutamico es conocida apartir de glucosa como fuente de carbon utilizando la
rutan embden-meyerhof-parnas y el ciclo pentosa fosfato se canliza al ciclo de
acidos tricarboxilicos. Las cepas comerciales son mutantes en el ciclo
tricarboxilico, con un bloqueo en la alfacetoglutarato deswhidrogenasa, la cual
permite acumulacion de acido glutamico. La estequiometria de la realcion en
base a glucosa es de un mol a de aminoacido por un mol de glucosa.

La produccion y excrecion del exceso del acido glutamico depende de la


permeablilidad de la celula, por ello las cepas de uso comercial son bacterias
seleccionadas a traves de los siguiente smecanismos:

 Deficiencia de biotina
 Deficiencia de acido oleico en auxotrofos de acido oleico
 A traves dela adicion de acidos grasos saturados
 A traves de la adicion de la enicilina
 Defeciencia de glicerol en auxotrofos de glicerol
BIBLIOGRAFÍA
Scriban,
Quintero,

ENTREGA: 11:53 17/12/13


TIEMPO DE RESOLUCIÓN: 6 horas efectivas
DEVOLUCIÓN DEL EXAMEN RESUELTO: 14:53 18/12/13

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