UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIA QUIMICAS

Tema:
Actividad enzimática
Asignatura:
Biología celular
Docente:
Q.F Dolores Erazo López Mgs.
Semestre:
Primero
Ciclo:
I
Grupo:
12
Año:
2021-2022

Integrantes:
1. Meyling Arlett Torres Torres
2. Kenya Belén Sisa Chasi
3. Emily Camila Ramírez Ambuludi
4. Jolly Zulay Rodriguez Goya
5. Andrés Josué Nuñez Orrala
 UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA

FECHA: Guayaquil, TEMA: Actividad enzimática VE VERSION #1

18 de agosto del 2021
Objetivo general:
Conocer los diferentes los procesos de catálisis que ocurren en los seres vivos, además reconocer las
propiedades y funciones que tienen las enzimas catalizadoras.
Objetivos específicos:
1. Comprender que la estructura y propiedades de las proteínas son determinantes para la función catalítica.
2. Estudiar y analizar las características de las enzimas y observar la actividad de la catalasa en una práctica
de laboratorio.
MARCO TEÓRICO

Actividad enzimática
1. ¿Qué son las enzimas?
Denominamos enzimas al conjunto de proteínas encargadas de
catalizar (disparar, acelerar, modificar, enlentecer e incluso detener)
diversas reacciones químicas, siempre que sean termodinámicamente
posibles. Esto quiere decir que son sustancias reguladoras en el cuerpo
de los seres vivos, por lo general disminuyendo la energía inicial
requerida para poner en marcha la reacción.
En esta estructura tridimensional se forman cavidades, llamadas “sitio
activo”, las cuales muestran afinidad por las moléculas específicas
(sustratos) que se convertirán en productos. La combinación de grupos funcionales químicos presentes en estas
cavidades genera un conjunto de interacciones covalentes y no covalentes entre la proteína y el sustrato, que
hacen que la conversión de éste en un producto se vea favorecida. Como cualquier catalizador, al finalizar la
transformación del sustrato y liberarse el producto del sitio activo, la enzima regresa a su estado original y puede
involucrarse en un nuevo ciclo de catálisis.
Las enzimas son indispensables para la vida y catalizan alrededor de 4000 reacciones químicas conocidas,
siempre que sean estables las condiciones de pH, temperatura o concentración química, ya que las enzimas, al
ser proteínas, pueden también desnaturalizarse y perder su efectividad.
La mayoría de las enzimas se componen de proteínas globulares de tamaño muy variable: desde monómeros de
62 aminoácidos, hasta enormes cadenas de alrededor de 2500. Sin embargo, apenas unos pocos de ellos son los
involucrados directamente en la catálisis de la reacción, conocidos como centro activo.
La secuencia en que se ensamblen todos estos aminoácidos determina la estructura tridimensional de la enzima,
lo cual dictamina también su funcionamiento específico. A veces esta estructura también posee sitios para atraer
cofactores, es decir, otras sustancias cuya intervención es necesaria para producir el efecto buscado.
Son altamente específicas, es decir, no reaccionan con cualquier cosa ni intervienen en cualquier reacción. Tienen
un cometido bioquímico muy puntual y preciso, que llevan a cabo con un porcentaje bajísimo de errores.

2. Clasificación de la enzimas
Las enzimas se clasifican en base a la reacción específica que catalizan, de la siguiente manera:

 Oxidorreductasas. Catalizan reacciones de óxido-reducción, o sea, transferencia de electrones o de átomos

de hidrógeno de un sustrato a otro. Ejemplo de ellas son las enzimas deshidrogenasa y c oxidasa.
 Transferasas. Catalizan la transferencia de un grupo químico específico diferente del hidrógeno, de un
sustrato a otro. Un ejemplo de ello es la enzima glucoquinasa.
 Hidrolasas. Se ocupan de las reacciones de hidrólisis (ruptura de moléculas orgánicas mediante moléculas de
agua). Por ejemplo, la lactasa.
 Liasas. Enzimas que catalizan la ruptura o la soldadura de los sustratos. Por ejemplo, el acetato descarboxilasa.
 Isomerasas. Catalizan la interconversión de isómeros, es decir, convierten una molécula en su variante
geométrica tridimensional.
 Ligasas. Estas enzimas hacen la catálisis de reacciones específicas de unión de sustratos, mediante la hidrólisis
simultánea de nucleótidos de trifosfato (tales como el ATP o el GTP). Por ejemplo, la
enzima privato carboxilasa.

3. Funciones de las enzimas

Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que tienen un gran variedad de funciones dentro de la célula:

 Degradan azúcares.
 Sinterizan grasas y aminoácidos.
 Copian exactamente la misma información genética cuando se da la replicación del ADN.
 Participan en el reconocimiento y transmisión de señales del exterior.
 Se encargan de degradar subproductos tóxicos para la célula, entre muchas otras funciones vitales.
Literalmente el ser vivo depende su identidad y estado fisiológico de la colección de enzimas que tiene en su
organismo, pues estas trabajan con una precisión exacta y a la velocidad de un rayo. Es así que como sabemos la
naturaleza siempre ha estado en constante cambio y en ese proceso desarrollo lo que hoy conocemos como una
gama diversificada de enzimas para mantener el complejo fenómeno de la vida.
¿Cómo funcionan las enzimas?
Las enzimas son aceleradoras de reacciones químicas dentro de las células de tal manera que se las considera
catalizadores biológicos. En la célula deben ocurrir rápidamente un sin número de transformaciones químicas,
una de las más veloces enzimas es la anhidrasa carbónica que cataliza la reacción de dióxido de carbono con
agua para formar ácido carbónico (H2CO3). Aquí es importante, ya que regula el pH de la sangre, fundamental
para la supervivencia de las células.
Para conocer la eficiencia de una enzima se compara qué tan velozmente va una reacción catalizada vs en
ausencia de la enzima, podemos apreciar la eficiencia de las enzimas como aceleradoras de reacciones.
La enzima más eficiente que se sabe de su existencia hasta la actualidad y que es capaz de catalizar a la
descarboxilación de un sustrato se llama OMP descarboxilasa. Esta reacción se acelera 1017 veces y están
esencial puesto que forma parte de la cadena de producción del núcleotido uridina monofosfato, uno de los 4
componentes del ácido ribonucleico (RNA).
¿Cómo hacen este trabajo las enzimas? Para que una enzima actué de forma adecuada que incluye interactuar con
el sustrato, depende de su estructura tridimensional definida, ya que son proteínas y polímeros de aminoácidos.
Cada vez que un grupo de científicos determina la estructura tridimensional de una proteína, ésta se deposita en
una página web llamada “Banco de Datos de Proteínas”. De este sitio seleccionamos una galería de enzimas que
se muestra en la siguiente figura, resaltando lo sofisticado y bello de algunos de los plegamientos conocidos a la
fecha. Todas estas maravillosas vistas de las proteínas se las debemos a los avances en biología estructural, que
es una ciencia relativamente joven.

Los mecanismos enzimáticos que aceleran una reacción son muy diversos. Dos de los más simples e intuitivos
son el de “aproximación” y “orientación”. Como en toda reacción química, los reactantes deben colisionar entre
sí con suficiente energía y con la orientación adecuada para que los enlaces entre las moléculas se rompan o se
formen.
De tal modo que las enzimas tienen cavidades que pueden acomodar a
los sustratos para que reaccionen entre sí. Éstas conforman el “sitio
activo” de la enzima. En este sitio se encuentran residuos de aminoácidos
específicos que permiten la interacción con los sustratos y que facilitan
el rompimiento y la formación de nuevos enlaces. Algunas enzimas
incluyen metales en su estructura (por ejemplo, iones de hierro, cobre y
zinc, entre otros) que pueden participar en el proceso catalítico.
Otra característica muy importante de las enzimas es su especificidad, es decir, qué tan bien pueden reconocer a
un sustrato –y solo a ese sustrato–, en presencia de otras moléculas. Esta capacidad de discriminar entre cientos
de moléculas diferentes es otra de las razones por las que la estructura tridimensional de las enzimas es clave en
su funcionalidad.
Puesto que las enzimas son proteínas diseñadas por la evolución para funcionar en condiciones muy acotadas
dentro de las células (i.e., 30-37°C, presión atmosférica o medio acuoso), cuando se quieren utilizar en otras
condiciones de reacción (temperaturas altas, medios con solventes orgánicos o con agitación mecánica) tienden
a perder su estructura y, por lo tanto, su actividad

4. ¿Cómo aprovechar las enzimas?

Las enzimas no solo funcionan en el interior de las células, sino que pueden ser extraídas de los organismos de
los seres vivos, y utilizarlos de diferentes manera con fines científicos que van desde la preparación de alimentos
y bebidas, hasta la síntesis de farmacéuticos o relacionados a la industria química.
La biotecnología llego al mundo gracias a las enzimas al ser prácticas de ser sacadas de la célula, pues están en
el ambiente de forma cotidiana. Por ejemplo, cada vez que lavamos la ropa utilizamos enzimas, ya que éstas son
uno de los ingredientes de los detergentes granulados y líquidos que se venden actualmente en todo el mundo.
Otro caso son las pruebas rápidas de embarazo que están basadas en un “ensayo de inmunoabsorción ligado a
enzima” el cual utiliza una enzima llamada peroxidasa, acoplada a un anticuerpo, que permite amplificar la señal
cuando el anticuerpo se une a su molécula blanco.
Hasta el día de hoy se siguen estudiando a las enzimas, pues
generalmente se introduce el ADN en un microorganismo que crece
rápido y produce grandes cantidades de la proteína de interés, donde
uno de los candidatos perfectos para esto son las bacterias por medio
de la técnica denomina proteína recombinante. Un gran ejemplo de
esta tecnología recombinante es la insulina, una hormona de
naturaleza proteica que se utiliza en el tratamiento de la diabetes,
pues no podemos dejar de mencionar que desde 1922 se sabe que la
insulina obtenida del páncreas de perros puede administrarse a los
humanos para controlar esta enfermedad.
5. Inmovilización de enzimas
Actualmente la industria requiere gran cantidad de enzimas con único fin de obtener productos con mejores
características y menor costo. Por esto se ha implementado procedimientos que aumenten la estabilidad de las
enzimas y permitan su reutilización. Esto ha sido un tema de estudio desde hace casi 50 años siendo de interés
tanto científico como económico.

La inmovilización combina la actividad elevada y específica de las biomoléculas activas, como las enzimas o
anticuerpos, con la estabilidad química y mecánica del soporte. Consiste en mantener la biomolécula unida o
atrapada en un soporte físico, conservando su actividad catalítica y permitiendo el flujo de sustratos y productos.
Las enzimas pueden ser inmovilizadas en sustratos naturales y/o sintéticos por medios químicos (uniéndolas al
sustrato mediante enlaces covalentes) o físicos (fuerzas electrostáticas o membranas), y pueden además ser
encapsuladas mecánicamente la adición de agentes que formen una película protectora alrededor de la enzima
inmovilizada, permitiendo el paso de reactivos y productos de pequeño tamaño, pero no de proteínas.

Las enzimas inmovilizadas presentan varias ventajas sobre su contraparte en solución. Permiten un uso continuo,
reutilización y control de las concentraciones de proteína empleada. Asimismo, es viable mejorar la estabilidad
y actividad de la enzima en función del pH y la temperatura, además, al ser inmovilizadas quedan protegidas
ante enzimas proteolíticas, aumentando así la eficiencia del sistema. Sin embargo, la inmovilización también
puede presentar ciertas desventajas, por ejemplo, la actividad de la enzima puede verse afectada por el
proceso de inmovilización, además, la velocidad de reacción puede estar limitada por la velocidad de difusión
de sustratos y productos hacia dentro y fuera del sistema.

Clasificación de métodos de inmovilización

Métodos de Inmovilización Irreversibles

Implica el enlace del biocatalizador a un soporte de manera permanente, por lo cual el biocatalizador no puede
ser liberado sin destruir o modificar su actividad biológica o el soporte. Los procedimientos más comunes de
inmovilización irreversible son el enlace covalente, enlace cruzado, atrapamiento y micro encapsulado.

a) Formación de enlaces covalentes

La inmovilización de proteínas por métodos basados en la formación de enlaces covalentes están entre los más usados.
La ventaja de estos métodos estriba en la naturaleza estable de los enlaces formados entre las enzimas y el soporte. De igual
manera, las enzimas en este método no son liberadas en la solución en uso. Sin embargo, para lograr altos niveles de
enlace, los residuos de aminoácidos esenciales para la actividad catalítica no deben involucrar un enlace covalent e
con el soporte aunque esto puede resultar difícil de lograr en algunos casos. Los métodos covalentes de inmovilización son
empleados cuando existe un requerimiento estricto de ausencia de enzimas en el producto.

Los métodos de acoplamiento en general pueden dividirse en 2 clases:

1) Activación de la matriz o soporte por adición de una función reactiva en un polímero

2) Modificación del polímero para producir un grupo activado.

Los procesos de activación son comúnmente diseñados para generar grupos electrofílicos en el soporte, el cual durante el
acoplamiento reaccionan con los fuertes nucleófilos en las proteínas. Los principios básicos que controlan el
acoplamiento covalente con matrices son análogos con las usadas en la modificación química de proteínas. Las
reacciones más usadas involucran las siguientes cadenas de amino ácidos: lisina (grupo amino), cisteína (grupo tiol),
y ácidos aspártico y glutámico (grupo carboxilo).
En este método se enlaza covalentemente la enzima con un soporte insoluble natural o sintético. El enlace se da entre algún
grupo funcional reactivo de la enzima y el soporte previamente activado, generalmente recubierto con grupos funcionales
orgánicos en la superficie (Figura 1). El seguimiento de la inmovilización se realiza cuantificando la concentración de
proteína libre (generalmente por el método de Bradford), y de la proteína unida covalentemente al soporte. Las
desventajas de este método radican en el sitio del enlace, ya que puede modificarse el sitio activo o pueden ocurrir
impedimentos estéricos que reduzcan la actividad. Sin embargo, esto es poco probable y puede verse reducido al
dirigir el enlace a sitios específicos y/o con una orientación molecular definida. Además, la unión por enlace covalente
confiere a la enzima una inmovilización más estable a cambios de pH y temperatura en el medio.

b) Formación de enlaces cruzados

Con esta técnica los soportes no son necesarios, ya que la inmovilización se da por un enlace directo entre enzimas, que
puede ser mediado o no por un agente de unión. Generalmente se añade el agente de bajo peso molecular a la enzima en
solución, uniendo covalentemente los grupos funcionales de las enzimas para formar agregados (Figura 2). Este método
tiene como ventaja su sencillez, sin embargo, es susceptible a cambios pequeños de pH y temperatura en las condiciones
de operación.

c) Atrapamiento
El método de atrapamiento está basado en la oclusión de las enzimas dentro de una red polimérica que permite al sustrato
y a los productos pasar a través de ellos y retener las enzimas. Este método difiere de los métodos de acoplamiento
covalente descritos anteriormente, ya que las enzimas no están enlazadas a la matriz o soporte. Existen diversos métodos
de atrapamiento de enzimas como el de gel o atrapamiento por fibras, microencapsulado y por inclusión. El uso práctico
de estos métodos es limitado debido a la baja transferencia de masa a través de las membranas o geles.
Métodos de Inmovilización Reversible

En el método las enzimas inmovilizadas pueden ser desprendidas del soporte bajo condiciones no extremas.
El uso de métodos reversibles para la inmovilización de enzimas es altamente atractivo, principalmente por
razones económicas debido a que el soporte puede regenerarse y recargarse con enzimas nuevas cuando la
actividad enzimática decae. Existen distintos método de inmovilización reversible, que a continuación se
describen:

Por adsorción
El método de adsorción emplea soportes orgánicos o inorgánicos que presentan un adsorbente activo (monocapas-tiol auto
ensambladas, oro, entre otros) en los cuales, las enzimas son atraídas y retenidas por medio de interacciones
iónicas o fuerzas débiles (puentes de hidrógeno, fuerzas de Van der Waals, interacciones hidrofóbicas) (Figura 5).
Este método consiste en poner en contacto la enzima en solución acuosa con un soporte adsorbente por un lapso de
tiempo dado (2-48 h), para después lavar el soporte y eliminar la enzima que no fue inmovilizada. Presenta la ventaja de
mantener intacta la actividad de la enzima, ya que la unión es débil y no afecta su conformación, sin embargo, esta
característica hace que al mismo tiempo la unión sea reversible y sensible a cambios de pH y temperatura.

6. Enzimas hepáticas del hígado

El hígado cumple funciones muy importantes una de ellas es el almacenamiento de energía proveniente de los
alimentos, producción de proteínas y ayudar a eliminar toxinas el hígado también. También fabrica la bilis, un
líquido que ayuda a hacer la digestión.
Las enzimas hepáticas son precursores bioquímicos que ayudan a los procesos de degradación y síntesis de los
alimentos. Los análisis son un grupo de pruebas que se utilizan para evaluar lesiones, infecciones e inflamación
del hígado.
Para obtener un diagnóstico preciso que solicitan, normalmente dos tipos de parámetros:
Por un lado, los niveles de tres enzimas hepáticas (AST, ALT y GGT) y, por otro lado, otras determinaciones que
de un modo indirecto reflejan el funcionamiento hepático (la bilirrubina, la fosfatasa, alcalina, la albúmina o el
tiempo de coagulación de la sangre).
Utilización de estas pruebas racionalmente nos permiten:
1) Detectar la presencia de enfermedad hepática.
2) Distinguir entre los diferentes tipos tipos de lesión (predominio hepatocelular o colestásica).
3) Calibrar la extensión de la injuria y por ende el pronóstico.
4) Evaluar la respuesta terapéutica.

Transaminasas
Son enzimas transferasas que ayudan a catalizar la reacción del transferencia de grupo amino (-NH2) de un
aminoácido de un α-cetoglutarato. En el organismo normal de un ser humano las enzimas ayudan a transformar
todo tipo de sustancia interna. Se puede decir también que el grupo de las transaminasas son las más importantes,
la que nos pueden indicar a través de un análisis de sangre que algo pasa en el organismo.
Distribución
Estás enzimas se encuentran en el tejido de muchos órganos como en el hígado.
 Isoenzimas
 La transaminasa Glutamico pirúvico (GPT) o Alanima Aminotransferasa (ALT)
 La Transaminasa Glutamicooxalacética (GOT) o Asportato Aminotransferasa(AST)

7. Catalasa
Es una enzima antioxidante presente en la mayor parte de los organismos aerobios y también en tejidos animales
como vegetales, su funcionalidad es descomponer el peróxido de hidrógeno (H2O2) producido por el
metabolismo celular en agua (H2O) y oxígeno (O2).
2𝐻2𝑂2 → 2𝐻2𝑂 + 𝑂2
Algunas catalasas poseen subunidades pequeñas y otras monumentales.
En medio de éstos 2 tipos de catalasas hay diferencias estructurales relevantes.
Las catalasas pequeñas son menos resistentes a la desnaturalización,
incorporan NADPH, poseen hemo b y se inhiben e inactivan por sustrato. Sin
embargo, las catalasas gigantes poseen un dominio extra en el C-terminal que
es parecido a la flavodoxina, resultan muy resistentes a la desnaturalización,
poseen hemo d, muestran enlaces covalentes inusuales cercanos al lugar activo
y son resistentes a concentraciones molares de H2O2.
Además de la catalasa trabajan otras enzimas como las peroxidasas y las peroxirredoxinas que degradan el
peróxido de hidrógeno (H2O2) usando otros sustratos para oxidar. (Bioquímica & Celular, 2002)

La función de la catalasa
Las especies de oxígeno reactivas como el radical superóxido, el radical hidroxilo y el peróxido de hidrógeno
(H2O2) están compuestos a lo largo de la reducción del dioxígeno en agua. Estas especies tienen la posibilidad
de perjudicar las proteínas, los lípidos y los ácidos nucleicos, por lo cual se necesitan sistemas antioxidantes
eficientes, entre los que se integran ciertas enzimas.
El peróxido de hidrógeno se forma por la dismutación del radical superóxido y además en la actitud de varias
oxidasas. Hay algunas enzimas capaces de degradar el peróxido de hidrógeno:
Las catalasas, las peroxidasas y las peroxirredoxinas.
Las peroxidasas eliminan el H2O2 usándolo para oxidar otros sustratos. A diferencia de las demás enzimas, que
necesitan de un sustrato limitado, las catalasas dismutan el peróxido de hidrógeno.
Se han reconocido 3 conjuntos de catalasas:
1) Las catalasas monofuncionales, que tienen dentro hemo y permanecen presentes tanto en los organismos
procariotos como en los eucariotos.
2) Las Mn-catalasas, que son enzimas hexaméricas que no poseen hemo, poseen Mn en el lugar activo y solamente
permanecen presentes en ciertos organismos procariotos anaerobios.
3) Las catalasas-peroxidasas, que tienen actividad de catalasa y de peroxidasa, contienen hemo y sólo están
presentes en las bacterias y los hongos
El mecanismo de reacción
En la actitud de la catalasa pasa la transferencia de 2 electrones entre 2 moléculas de peróxido de hidrógeno en
la cual una funciona como donador y otra como aceptor de electrones.
El mecanismo de actitud se lleva a cabo en 2 pasos.
 El compuesto I se caracteriza por tener un conjunto ferroxilo con FeIV y un extremista catiónico de porfirina.
En esta actitud se genera una molécula de agua.
Compuesto I (Por+•-FeIV-O) + H2O2 → Enz (Por-FeIII) + H2O + O2
 En el segundo paso de la actitud, el compuesto I es limitado por otra molécula de peróxido regresando la
catalasa a su estado inicial y produciendo agua y dioxígeno.
Compuesto I (Por+•-FeIV-O) + CH3CH2OH → Enz (Por-FeIII) + CH3CHO + H2O
Aplicaciones de la catalasa
Se lo puede aplicar de la siguiente manera:

 La presencia de la catalasa en tejidos animales permite la utilización del agua oxigenada como desinfectante.
 Cuando se utiliza sobre una herida, la catalasa actuará descomponiendo el peróxido de hidrógeno en el tejido
correspondiente. De esta manera, el oxígeno desprendido provocará un número elevado de bacterias
patógenas mueran ya que son anaeróbicas, y por lo tanto no pueden vivir con la elevada cantidad de oxígeno
desprendido.
 De forma similar ocurre en las plantas, donde es una de las respuestas defensivas enzimáticas más habituales.
 Existen suplementos que contienen catalasa y que se venden como productos capaces de reducir las canas.
Una marca de suplemento dietético de catalasa que está enfocada hacia la reducción de la canicie es
Canablock Age Splendor Naturlider, que además de catalasa contiene zinc. (Andión & Alejandro, 2016)
Características estructurales
La catalasa (peróxido de hidrógeno: peróxido de hidrógeno
oxidorreductasa) es una de las enzimas más exuberantes en la calidad y
se encuentra generosamente distribuida en el ente amable, luego su
influencia varía en condena del tejido; ésta resulta más exagerada en el
ovario y los bazos, más baja en el tejido conectivo y los epitelios, y
prácticamente nula en el tejido ansioso. A ras celular se localiza en las
mitocondrias y los peroxisomas, a salvo en los leucocitos, adonde se
encuentra en el citosol.2 Esta enzima es una metaloproteína tetramérica,
cuyo gravamen molecular se encuentra en el escalafón de 210-280 Kd.
Consta de 4 subunidades equivalentes que se mantienen emparejadas por interacciones no covalentes. Cada
subunidad contiene un grupo prostético de protoporfirina Ix y el contenido protohémico y el de hierro representan
un 1,1 % y 0,09% respectivamente del peso molecular total de la enzima.3 En algunas peajes la Cat contiene
moléculas de nicotinamín adenín dinucleótido fosfatado en su suerte reducida (Nadph) ceñidas estrechamente a
la enzima; así se ha repasado que la Cat humana y la de res están ligadas a 4 moléculas de Nadph, 1 en cada
subunidad y que no existe interacción directa entre el equipo hemo y el Nadph.4 En la figura aparece la delegación
de una subunidad de la enzima. El Nadph unido a la enzima no está involucrado en su actividad catalítica o
peroxidativa. Esta molécula puede operar en la ofuscación y reversión parcial de la inactivación de la Cat por su
legítimo sustrato tóxico y estabiliza a la enzima por poseer un impacto alostérico sobre su conformación. Además,
la Cat constituye un reservorio de Nadph, lo cual juega un importante papel durante el estrés oxidativo (Dra. Ela
M. Céspedes Miranda, 1996)
Función Enzimática
La catalasa forma parte del sistema antioxidante que participa de forma activa en la destrucción del H2O2 el cual
se produce en el proceso de metabolismo celular. Se caracteriza principalmente por la buena capacidad de
reacción, pero una falta de afinidad por el sustrato. La catalasa tiene dos funciones:
 Catalítica
 peroxidativa
Representadas por la ecuación:
H2O2 + H2R ----------2H2O + R
La reacción general entraña la reducción del sustrato tomando los átomos de hidrógeno aportados por el donador,
y los productos finales serían el sustrato reducido y el donador oxidado.
En la función catalítica, el donador es otra molécula de peróxido de hidrogeno, dicha función solo la realiza en
su forma tetraédrica.
H2O2 + H2O2 -----2H2O + +O2
En la reacción peroxidativa la enzima puede tomar como donadores de hidrógeno al metanol, etanol, ácido
fórmico, fenol y formaldehído. Esta función se realiza generalmente en los monómeros, dímeros y tetrámeros
La actividad de la CAT puede ser inhibida por el cianuro, la azida, el sulfuro, la hidroxilamina, el paracetamol,
la bleomicina, la adriamicina, la benzidina y el paraquat (Dra. Ela M. Céspedes Miranda, 1996)
Importancia biomédica de la catalasa
La catalasa ha sido grandemente amanerada en relación con su
participación en populosos cambios patológicos de gran importancia en
las indagaciones biomédicas, y está involucrada acierto en la creación
como en las consecuencias de dichos juicios. En diferentes tipos de
estructuras y modelos de los animales y seres humanos de isquemia-
reperfusión se ha comprobado la ayuda de las Especies reactivas
derivadas del oxígeno en la elaboración de los defectos que aparecen
durante este juicio, así como la variación de las enzimas antioxidantes, entre las que se encuentra la catalasa, y
se ha mirado que estas variaciones no se comportan de igual apariencia en todos los linos. En exámenes
satisfechos en bazo, la reperfusión que siguió al deterioro isquémico provocó una frustración de proteínas de la
matriz de los peroxisomas, con drástico peligro de las representaciones de éstos y abajadero representativo de la
tarea de Cat. La depauperación de la ocupación durante la isquemia se debe a la fila de un complejo inactivo,
mientras tanto que durante la reperfusión hay inactivación, proteólisis o disminución de la caducidad de la enzima.
Cuando existe alguna lesión hemorrágica en la mucosa intestinal, generalmente es ocasionada por radicales de
oxígeno y activación de la fosfolipasa A. La catalasa y el superóxido dismutasa (SOD) son los encargados de
prevenir los diferentes tipos de daños que son causados por la reperfusión intestinal, siempre y cuando el
tratamiento se aplique durante la isquemia, pero antes de reperfusión. Se ha encontrado también una relación
causal entre la generación de radicales libres y el daño isquémico de la retina y se comprobó la protección que
brindan las SOD y la CAT, las que se recomiendan como posible tratamiento.
En relación con las afecciones tumorales se ha encontrado en pacientes con tumores del tracto gastrointestinal un
aumento de la actividad de CAT en los estadios iniciales del proceso. Esta actividad disminuía y llegaba a ser
mínima en estadios de metástasis diseminada y caquexia. (Dra. Ela M. Céspedes Miranda, 1996)
Interacciones
Cabe mencionar que es viable la unión de diferentes cofactores a la enzima. Entre dichos cofactores pudimos
encontrar los grupos hemo, moléculas de Mn2+, moléculas de NADP+ y hierro.
Además, cabe señalar que una proteína que tiene Mn3+ en el estado de reposo, además forma parte de la misma
familia que la catalasa, llamándose pseudocatalasa. Referente a colaboraciones con otras moléculas, se demostró
que la catalasa interactúa con los genes ABL, en concreto con el gen ABL2, que codifica para una proteína
tirosina-quinasa.
Interacciona también con diferentes proteínas del organismo como son XDH, GSR, SOD1, SOD2, SOD3, AKT1,
FOXO3, HAO1, PEX5, HAO2. (Tasset, 2018)

Reactivos de laboratorio
1. Agua oxigenada (H2O2)
2. Hígado de pollo (Tejido animal)

Materiales de laboratorio:
1. Gradilla
2. Pinza
3. Tubos de ensayo
4. Gradilla
5. Probeta de 50 ml
6. Pinzas de disección
7. Navaja o bisturí
8. Mechero o lámpara de alcohol
Equipos de laboratorio:
No aplica

Actividades por desarrollar/ técnica operatoria o procedimiento

Experimento A
Demostración del funcionamiento de la catalasa; en el cual se trabajó con hígado de pollo, puesto que
muchos organismos pueden descomponer el peróxido de hidrógeno por la acción de las enzimas que
actúan como catalizadores, sustancias que aceleran las reacciones químicas sin ser destruidas o
alteradas durante el proceso. El H2O2 es tóxico para la mayoría de los organismos vivos. Muchos de
ellos son capaces de destruir el H2O2 mediante la acción de enzimas antes de que pueda realizar
mucho daño.
En determinación de la catalasa la presencia de peroxisomas que reaccionan al someterlos al peróxido
de hidrogeno (agua oxigenada), el cual es altamente reactivo y tóxico para las células del hígado, por
lo que la función de los peroxisomas es proteger a las células del hígado del agua oxigenada. Las
moléculas de agua oxigenada se rompen de manera rápida por la enzima catalasa, (mismas que están
contenidas en los peroxisomas) convirtiendo al agua oxigenada en compuestos no tóxicos como lo
son el oxígeno que es desprendido durante la efervescencia y el agua. La reacción que se lleva a cabo
es: H2O2 H2O + O2. En contexto, el hígado cocido tiene un aspecto un poco rosa-grisáceo y con un
tamaño reducido al que tenía en primera instancia. También esta se encontró por un momento en un
rango de temperatura mayor -recordemos que las enzimas son proteínas y son termolábiles.
Procedimiento del experimento A:
1. Cortar y colocar en un tubo de muestra dos pedazos pequeños del hígado de pollo.
2. Añadir 5 mililitros de agua oxigenada.
3. Se observará un intenso burbujeo debido al desprendimiento de oxígeno.
Experimento B
DESNATURALIZACIÓN DE LA CATALASA

Mediante esta experiencia, vamos a ver una propiedad fundamental de proteínas, que es la
desnaturalización.
Ya que la catalasa químicamente es una proteína, podemos desnaturalizarla al someterla a altas
temperaturas. Al perder la estructura terciaria, perderá también la función y como consecuencia su
función catalítica, por lo que no podrá descomponer el agua oxigenada y no se observará ningún tipo
de reacción cuando hagamos la experiencia anterior con muestras de tejidos hervidos.

Procedimiento del experimento B:

1. Colocar en un tubo de ensayo varios trocitos de hígado.
2. Añadir agua para hervir la muestra. Hervir durante unos minutos.
3. Después de este tiempo, retirar el agua sobrante.
4. Añadir el agua oxigenada.
5. Observar el resultado.
Resultados obtenidos (Observaciones, cálculos, datos, ecuaciones, tablas, gráficos, figuras,
fotos y otros que así se consideren)
Análisis del experimento A

Figura 1. El inicio de la práctica donde se

está colocado los pedazos de hígado para ver
como reacción con el agua oxigenada.
 Figura 2. El primer experimento, fue la del hígado de
pollo con agua oxigenada, donde teníamos como
objetivo, que los pedazos de hígado que le introdujimos,
se elevaran, todo esto por el sitio activo del sustrato y la
catalasa. También debemos tener en cuenta que los
pedazos del hígado se podían atascaran, trayendo como
consecuencia que no subieran.

Figura 3. Se verifico que en él hígado se

está dando una reacción enzimática por la
proteína catalasa, observando cómo se
liberaba una gran cantidad de burbujeo y se
decoloraba el hígado, esto como producto
de la reacción entre el sitio activo del
sustrato y la catalasa la cual se encarga de
descomponer el peróxido de hidrogeno en
agua y oxígeno.

Análisis del experimento B

Figura 4. Se recortan los pedazos de hígado

y se los introduce en el tubo de ensayo.

Figura 5. Con la ayuda de una pinza

sostenemos el tubo de ensayo con el hígado y
lo colocamos cerca del mechero de alcohol
haciendo movimientos inclinados de
izquierda a derecha.
 Figura 6. En el tubo de ensayo con el hígado
ya cocido debido a la altura temperatura que
fue sometida la muestra, donde añadiremos
agua oxigenada para observar que reacción se
produce.

Figura 7. El resultados como podemos ver

en el tubo de ensayo no hubo mucho burbujeo
en comparación con el experimento A, pues
no sucede una reacción significativa ya que
la catalasa al ser una enzima se desnaturaliza
con el calor.

Conclusiones
1- En esta práctica hemos concluido que las enzimas son moléculas de naturaleza proteica y
estructural que catalizan reacciones como siempre que sean posible, la actividad catalítica de las
enzimas depende de que mantengan su plegamiento es decir su estructura. Por otra parte, la
catalasa cumple un importante papel en el organismo la función de esta es descomponer el
peróxido de hidrógeno (una sustancia muy deletérea) y se genera durante el metabolismo celular
en agua y oxígeno la enzima catalasa quien evita la acumulación de dicho peróxido de hidrógeno
debido a que este no es favorable para las células.
2- De igual manera podemos comprender acerca de las diferentes propiedades y estructuras de la
función catalítica pues estas se presentan en 3 conjuntos lo que permiten ayudar a la oxidación y
monofuncionamento de la catalasa.
3- Dentro de la práctica también se entendió el funcionamiento específico de la catalasa y como al
reaccionar con otras sustancias se descomponen y actúan como catalizadores que permiten utilizar
reacciones químicas sin un cambio o destrucción que alteren el proceso de la enzima.
Recomendaciones
 Conseguir un tapón u otro instrumento que nos ayude a mantener el tubo sellado.
 Asegurarse que no se escape el oxígeno.
 Tener mucho cuidado y prudencia al manipular los materiales de laboratorio.

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