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Evaluación In Vitro de Fármacos Anti-Inflamatorios

Este documento describe un experimento para evaluar la capacidad antiinflamatoria de diferentes compuestos utilizando un modelo in vitro. Los estudiantes preparan soluciones de compuestos a varias concentraciones y evalúan su efecto protector sobre eritrocitos expuestos a una solución hipotónica o altas temperaturas midiendo la hemólisis. El porcentaje de hemólisis indica la estabilización de la membrana por los compuestos.

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Evaluación In Vitro de Fármacos Anti-Inflamatorios

Este documento describe un experimento para evaluar la capacidad antiinflamatoria de diferentes compuestos utilizando un modelo in vitro. Los estudiantes preparan soluciones de compuestos a varias concentraciones y evalúan su efecto protector sobre eritrocitos expuestos a una solución hipotónica o altas temperaturas midiendo la hemólisis. El porcentaje de hemólisis indica la estabilización de la membrana por los compuestos.

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UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE QUÍMICA FARMACÉUTICA BIOLÓGICA

LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA

BITÁCORA NO. 4: MODELO “IN VITRO”

Profesor
M. en C. Margarita Virginia
Saavedra Vélez
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BITÁCORA NO. 4: MODELO “IN VITRO”

DURACIÓN: 3 Horas

FECHA DE REALIZACIÓN: Septiembre 06, 2021

OBJETIVO

El estudiante evalúe la capacidad antiinflamatoria in vitro de un fármaco o


medicamento, empleando la prueba de estabilidad de membrana bajo las variables
de temperatura y concentración iónica del medio acuoso.

OBJETIVOS PARTICULARES:

1. El estudiante preparará diferentes concentraciones de un fármaco o


medicamento antiinflamatorio.
2. El estudiante probará el efecto de cada concentración sobre la membrana de
los eritrocitos bajo diferentes temperaturas y concentración iónica del medio
acuoso.

ACTIVIDADES

Se evaluó la eficacia de diferentes compuestos (antiinflamatorios) para ver que tanto


protegen a los eritrocitos cuando estos son sometidos a una solución hipotónica o
bien son sometidos a temperaturas muy elevadas, son medidos por
espectrofotometría y graficados para su estudio.
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DIAGRAMA
Preparar una solución
madre de 1000 µg/mL del
Fase de Extraer una muestra
sanguínea en un tubo de
Preparar 10 mL de una
solución al 10% de
antiinflamatorio en solución
preparación EDTA. eritrocitos en NaCl 0.9 %.
salina y tomar de esta para
hacer las diluciones
correspondientes.

Evaluación Realizar una mezcla de


Adicionar 1 mL de buffer de Este mismo procedimiento se
antiinflamatoria reacción con 1 mL de las
fosfato pH 7.4 + 1 mL de emplea como control negativo
por hemólisis sustancias a probar a en un tubo con 1 mL de NaCl
solución hipotónica 0.3 %
diferentes concentraciones 0.9%, 0.5 mL de solución de
inducida con (50, 100, 200 y 400 µg/mL)
p/v). Se incuba a 37 °C por glóbulos rojos + 1 mL de buffer
solución con 0.5 mL de la solución al
30 min y se centrifuga a de fosfato pH 7.4 + 1 mL de
hipotónica 2,500 rpm durante 20 min. solución hipotónica (0.3% p/v).
10 % de glóbulos rojos.

Se incuban a 56 °C durante 30
Se lee la absorbancia Se calcula el % de Evaluación min los tubos que contenían 0.5
del sobrenadante a 560 hemólisis como un mL de la solución al 10 % de
nm para medir el indicativo de
antiinflamatoria glóbulos rojos con las diferentes
contenido de estabilización de la
por hemólisis sustancias a las mismas
concentraciones del
hemoglobina. membrana. inducida con calor experimento anterior y luego se
enfrían a temperatura ambiente.

De manera similar al experimento Como estándar Se calcula el % de


Se centrifugan a 2500 anterior, se emplea como control farmacológico se usa hemolisis como un
rpm durante 5 min y se negativo un tubo con 0.5 mL de la
solución de glóbulos rojos + 1 mL de diclofenaco (100 ug/mL) indicativo de
mide la absorbancia del como grupo estabilizador de
solución salina fisiológica que estabilización de la
sobrenadante a 560 nm. corresponde al 100 % de la hemolisis. la membrana. membrana.

OBSERVACIONES

Se utiliza un control negativo (a partir de solución salina fisiológica), eritrocitos en


condiciones normales que posteriormente van a ser colocados en tubos con
solución hipotónica y otros serán expuestos a temperaturas altas, y se evalúan la
protección de los fármacos a diferentes concentraciones.

SUGERENCIAS Y LIMITACIONES

Mi limitación sería al momento de manejar el espectrofotómetro. Y sobre la


obtención de muestra de la sangre.
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CUESTIONARIO

1. Menciona ejemplos de modelos in vitro ocupados en farmacología


• Estimulación de células
• Unión a proteína
• Unión a receptor
2. Menciona ejemplos de modelos in silico utilizados en farmacología
• Acoplamiento molecular entre ligando y receptor
• Estudios de genotoxicidad
• Estudio de las estructuras de sustancias con su actividad farmacológica
3. Elabora un cuadro comparativo con las ventajas y limitaciones de
diferentes modelos in vitro e in silico ocupados en farmacología

In vitro In silico
Se evitan interferencias de la respuesta
No producen grandes gastos y permiten
del organismo,
progresar intelectualmente sobre el
Hay versatilidad en el diseño
fenómeno.
experimental. Permiten simular situaciones reales,
Se ahorra tiempo y costos.
modificando los valores de las variables
Hay posibilidad de automatización, involucradas en un amplio rango de valores.
Ventajas

robotización, miniaturización.
Reducción del tiempo en cuanto a la
Se puede utilizar material biológico realización de los ensayos
humano Podrían remplazar el uso de animales en la
Hay reducción del número de animales experimentación.
Permiten estimar las propiedades
fisicoquímicas, la permeabilidad digestiva y
de la barrera hematoencefálica y de otros
tejidos.
Simplicidad El acceso a los softwares podría resultar
Dificultad de interpretación de los difícil o un poco caro
resultados El personal debe estar bajo capacitación
Dificultad para extrapolar al hombre constante para poder utilizar este método
No sustituyen del todo los ensayos in El acceso a la tecnología se podría ver
Limitaciones

vivo afectado en ciertas regiones


No se pueden detectar efectos
secundarios
Necesidad de validación formal
Todavía no están aceptados legalmente,
ni incorporados en los protocolos
oficiales para el registro de nuevos
fármacos
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BIBLIOGRAFÍA

1. GianiI TS, PaoliI S, PrestaI GA, MaiwormI AI, Santos-FilhoI SD, Fonseca AS,
Bernardo-FilhoI M. (2007) Assessment of effects of a formula used in the
traditional Chinese medicine (Buzhong Yi Qi Wan) on the morphologic and
osmotic fragility of red blood cells. Rev. Bras. Farmacognosia, 17(4): 501-
507.
2. MaiwormI AI, PrestaI GA, Santos-FilhoI SD, PaoliI S, GianiI TS, FonsecaII
AS, Bernardo- FilhoI M. (2007). Osmotic and morphological effects on red
blood cell membrane: action of an aqueous extract of Lantana Camara. Rev.
Bras. Farmacognosia,18(1): 42-46.
3. Sridevi G, Sembulingam K, Muhammed I, Srividya S, Prema S. (2015).
Evaluation of in vitro anti-inflammatory activity of Pergularia daemia. W J
Pharm Res, 4(6): 1100-1108.
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UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE QUÍMICA FARMACÉUTICA BIOLÓGICA

LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA

BITÁCORA NO. 5: ABSORCIÓN, DISTRIBUCIÓN Y


ELIMINACIÓN DE FÁRMACOS. VÍA DE ADMINISTRACIÓN
Y EFECTO FARMACOLÓGICO: ANESTESIA LOCAL Y
GENERAL

Profesor
M. en C. Margarita Virginia
Saavedra Vélez
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BITÁCORA NO. 5: ABSORCIÓN, DISTRIBUCIÓN Y ELIMINACIÓN DE


FÁRMACOS. VÍA DE ADMINISTRACIÓN Y EFECTO FARMACOLÓGICO:
ANESTESIA LOCAL Y GENERAL

DURACIÓN: 3 Horas

FECHA DE REALIZACIÓN: Septiembre 13, 2021

OBJETIVO

El estudiante se familiarizará con el uso de diferentes tipos de anestésicos en seres


humanos y animales de experimentación.

OBJETIVOS PARTICULARES
1. El estudiante aprenderá a inducir anestesia general en ratas utilizando
diferentes anestésicos
2. El estudiante identificará en la rata las diferentes fases de la anestesia
3. El estudiante relacionará la vía de administración con la duración del efecto
farmacológico en seres humanos y en ratas.

ACTIVIDADES

La profesora explicó los efectos de diferentes anestésicos locales, su duración y


porqué ocurrían. Estos serán evaluados en personas y se hará un análisis
estadístico entre hombres y mujeres, así también en ratas.

DIAGRAMA
Una vez transcurridos 10 min, se
Los estudiantes serán los sujetos Para poder evaluar la efectividad pinchará con la punta de un palillo
experimentales y se agruparan de de cada sustancia como de dientes la zona en la que se
Anestesia local acuerdo al sexo (hombres y
mujeres) y al anestésico local a
anestésico local se colocarán las
sustancias sobre el dorso de la
colocaron las sustancias y
determinará si se tiene
emplear (hielo, lidocaína, cloruro mano entre el dedo pulgar y sensibilidad. Se repite la prueba a
de etilo). anular. los 20 y 30min post-
administración.

Se emplearan ratas, la cuales


serán distribuidas de acuerdo al
Anotar las sensaciones de los Se pesa cada rata y se realizan los
sujetos participantes y estimar la
duración del efecto, evaluando
Anestesia sexo (hembras y machos) y al tipo
de anestésico (inhalatorio o
cálculos necesarios para estimar
la cantidad de anestésico general
cuánto tiempo tardan en recuperar general parenteral, ver apéndice X). De tal
manera que los grupos formados
parenteral a administrar en las
la sensibilidad en la zona. ratas seleccionadas.
tengan el mismo número de
individuos.

Para anestesiar a los animales por


vía inhalatoria se colocará a la rata Inmediatamente después de
dentro de un frasco que contenga administrar las sustancias, Asimismo, estimar la duración del
2 mL de cloroformo hasta que observar cuidadosamente el efecto, evaluando cuánto tiempo
alcance la anestesia profunda, comportamiento de las ratas e tarda la recuperación de los
punto en el que se sacará del identificar las diferentes fases de animales de experimentación.
frasco y se colocará de inmediato anestesia.
sobre una franela.
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OBSERVACIONES

No se me dan bien las suturas, el hilo se rompía a cada rato y la aguja al ser recta
a veces no me dejaba realizar los giros necesarios. Esta era mi segunda sutura, la
primera la hice en el laboratorio de morfofisiología, pero fue por medio de una
franela y no con un tejido.

SUGERENCIAS Y LIMITACIONES

No presente ni dudas ni limitaciones

CUESTIONARIO

1. Define el término anestesia

La anestesia es el uso de medicamento para evitar la sensación de dolor u otra


sensación durante una cirugía u otros procedimientos que podrían ser dolorosos
(como los puntos de sutura o la extracción de verrugas).

2. Elabora un diagrama donde se explique la clasificación de los


anestésicos

Anestésicos

Locales Generales
Solo actuan en el sitio de Bloquean todo tipo de
administración sin perdida sensaciones con perdida de
de la conciencia la conciencia

Ésteres Inhalantes

Amidas Intravenosos
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3. Realiza un cuadro con las indicaciones, ventajas y desventajas de diferentes anestésicos según su vía de
administración

Ventajas Desventajas Indicaciones


Anestésicos Funciones corporales: el resto de Ayuno: en la mayoría de las Se realiza en procedimientos
locales las funciones corporales a la zona intervenciones el paciente debe de menores pero dolorosos,
anestesiada funcionan de forma guardar un ayuno absoluto desde generalmente en la piel, como:
correcta y no son alteradas. ocho horas antes de la cirugía.
Insertar un catéter para realizar
Persona despierta: a lo largo del Reacciones alérgicas: algunos un cateterismo o para colocar
procedimiento mediante pacientes pueden experimentar una vía venosa central.
anestesia local la persona se una reacción alérgica a los
encuentra despierta durante todo anestésicos locales Realizar una punción de algún
el proceso. administrados. órgano a través de la piel
(toracocentesis, punción
Recuperación más rápida: el Hematomas o hemorragias: en la lumbar, etc.).
paciente que ha sido anestesiado zona de punción puede producirse
de forma local tiene una un pequeño hematoma o una Hacer una biopsia de algún
recuperación más rápida que si lo pequeña hemorragia. órgano o de alguna lesión a
hubiera sido de forma general. través de la piel.
Lesión del nervio anestesiado: el
Disminución del dolor nervio anestesiado puede verse Extirpar alguna zona de la piel.
postoperatorio: aquellos afectado y sufrir una lesión de
pacientes intervenidos mediante forma temporal o permanente. Realizar algún procedimiento
la anestesia local experimentan dental.
una disminución del dolor Parálisis zona afectada: puede
postoperatorio. existir una pérdida de sensibilidad Proceder a alguna intervención
de la zona anestesiada de forma quirúrgica en los ojos
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Disminución de náuseas: las parcial o total, transitoria o


náuseas y vómitos aparecen con permanente.
menor intensidad y frecuencia
que con la anestesia general. Aplicación: se trata de un método
que aunque es indoloro es
realizado mediante una pequeña
aguja por lo que muchas personas
suelen tener temor de su
aplicación.
Anestésicos Disminuir la excitotoxicidad, Costo de equipo requerido Está indicada tanto para
inhalados incrementar la estabilidad cirugías ambulatorias como
fisiológica y relacionarse con un Inducción lenta para procesos más complejos
buen desenlace neurológico que requieren la hospitalización
Conocimiento del equipo es del paciente y es perfectamente
esencial compatible tanto con pacientes
adultos como pediátricos, ya
Peligros asociados con gas que induce el sueño pero
comprimido permite mantener la respiración
espontánea del paciente.
Contaminación del ambiente y
contacto con personal si no se usa
sistema de recolección

Difícil de transportar para estudios


de campo
Anestésicos Suprime satisfactoriamente la Deben ser empleados por Se administran en algunos
intravenosos respuesta de estrés, anestesiólogos experimentados. pacientes en los que es
disminuyendo el riesgo de La acumulación de propofol puede imposible o inconveniente la
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eventos cardiovasculares retrasar la recuperación administración de anestésicos


adversos, tromboembolismo, anestésica de los pacientes; de la inhalados, o en situaciones en
depresión inmunológica, misma forma, si los niveles las que es impracticable el uso
translocación bacteriana, plasmáticos no son óptimos, el de los sistemas tradicionales de
infecciones, diseminación paciente puede presentar administración de anestésicos o
tumoral, entre otras. Los agentes despertar intraoperatorio. no se dispone de ellos.
inhalatorios no suprimen la La infusión de propofol puede
respuesta llevar al desarrollo de rabdo-
miólisis, acidosis láctica y falla
renal.
Puede disminuir de manera
considerable el volumen
sanguíneo cerebral, lo cual puede
llevar a complicaciones como
sangrado epidural.
Los costes de son
sustancialmente mayores a los AI
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BIBLIOGRAFÍA

1. Gamundi Planas MC. (2002). Farmacia Hospitalaria II. España: Sociedad


Española de Farmacia Hospitalaria.
2. Katzung B; Masters SB, Trevor AJ. (2013). Farmacología Básica y Clínica.
España: Editorial Lange.
3. Bonet R. (2011). Anestésicos locales. Offarm 30 (5): 42 – 47.
4. Brunton LL, Chabner BA, Knollmann BC. (2012) Goodman & Gilman: Las
Bases farmacológicas de la terapéutica 12ª ed. México: McGraw-Hill
Interamericana.
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UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE QUÍMICA FARMACÉUTICA BIOLÓGICA

LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA

BITÁCORA NO. 6: ABSORCIÓN Y EFECTO


FARMACOLÓGICO: ANSIOLÍTICOS

Profesor
M. en C. Margarita Virginia
Saavedra Vélez
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Bitácora No. 6
Laboratorio de Farmacología
BITÁCORA NO. 6: ABSORCIÓN Y EFECTO FARMACOLÓGICO:
ANSIOLÍTICOS

DURACIÓN: 3 Horas

FECHA DE REALIZACIÓN: Septiembre 20, 2021

OBJETIVO

El estudiante relacionará el proceso de absorción con la vía de administración y el


efecto farmacológico en modelos animales de ansiedad.

ACTIVIDADES

La profesora nos habló acerca del efecto farmacológico y el propósito de este tipo
de fármacos, así como también como interactuaba en el organismo humano para
absorberse. Vimos los diferentes modelos animales usados para medir diferentes
variables útiles para medir su eficacia.

DIAGRAMA DE TRABAJO

Ratas
adultas

Vía
Vía Oral
Intraperitoneal
n=12
n=12

Valeriana Diazepam
Valeriana Diazepam
Vía Vía
Vía oral Vía oral
intraperitoneal intraperitoneal

OBSERVACIONES

El modelo más interesante para mi fue el de luz-oscuridad porque podemos


observar el comportamiento curioso de la rata al estarse asomando hacia el otro
lado, así como su lado preventivo al saber que los chillidos de otra rata indican
peligro; otro modelo curioso fue el del enterramiento defensivo y como utilizamos

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Bitácora No. 6
Laboratorio de Farmacología
para nuestra información el comportamiento reflejo de la rata ante un estímulo que
le hace daño.

Opino que sería difícil identificar las conductas del animal al ser mi primera vez
analizándolo, además de cuantificarlo porque suelen haber conductas que no están
tan marcadas en sus movimientos pero que aún así son gran objeto de estudio.

En cuanto al análisis de datos, fue difícil para mí, debido a que no se me dan bien
las matemáticas. Y que la materia de estadística llevo tiempo sin ponerla en acción.
Además no entiendo aún el uso de este tipo de gráficas dentro del estudio de un
fármaco ansiolítico.

SUGERENCIAS Y LIMITACIONES

Mis limitaciones fueron que no he tenido experiencia con un animal como la rata
dentro del laboratorio, no entiendo ni reacciono al momento sobre sus
comportamientos, así que el análisis de estos efectos ansiolíticos se me hizo difícil,
además que esta materia es necesaria llevarla presencia.

Mi sugerencia sería hacer más interactiva la clase, poniendo a los alumnos a contar
las variables en los modelos y armar juntos una gráfica en clase.

CUESTIONARIO

1. ¿Qué diferencia existe entre la ansiedad normal y la patológica?

Ansiedad normal Ansiedad patológica


Episodios poco Episodios repetitivos.
Características frecuentes. Intensidad alta.
generales Intensidad leve o media. Duración prolongada.
Duración limitada.
Situación o estímulo Reacción esperable o Reacción
estresante común. desproporcionada.
Grado de sufrimiento Limitado y transitorio. Alto y duradero.
Grado de interferencia Ausente o ligero Profundo.
en la vida cotidiana

2. Menciona ejemplos de fármacos ansiolíticos y explica brevemente su


mecanismo de acción.

Diazepam

Se considera que su mecanismo de acción consiste en potenciar o facilitar la


acción inhibitoria del neurotransmisor ácido gamma aminobutírico (GABA),

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Bitácora No. 6
Laboratorio de Farmacología
mediador químico de la inhibición tanto en el nivel del botón presináptico
como postsináptico, en todas las regiones del sistema nervioso central.

Alprazolam

Sus efectos se atribuyen a que actúa sobre receptores de membrana


específicos, lo cual aumenta o facilita la acción inhibitoria presináptica y
postsináptica del ácido γ-aminobutírico (GABA), especialmente en la
formación reticular ascendente. Su acción agonista sobre los receptores
benzodiazepínicos, que forman parte del complejo que funciona como
receptor GABA, abre el canal y facilita el paso de los iones cloro a través de
la membrana, acción que ocasiona hiperpolarización postsináptica y
disminución de la excitabilidad neuronal.

Bromazepam

Su mecanismo de acción consiste en su actividad agonista sobre el complejo


receptor postsinático GABA-Benzodiazepínico de tipo "A" [facilita la actividad
neurodepresora del neurotransmisor aminoacídico ácido gamma
aminobutírico (GABA)].

3. Describe al menos 5 plantas con efecto ansiolítico.

Valeriana

Hierba permanente, cuya parte aérea se renueva anualmente. Su parte


subterránea es un rizoma vertical de 1 - 2 cm de grueso, con brotes laterales
más delgados y largos, del que salen numerosas raicillas. Se utiliza como
sedante nervioso, en malestares tales como dolor de cabeza, ansiedad,
insomnio, colon irritable, cólicos gastrointestinales, asma y trastornos
asociados a la menopausia.

Pasiflora

Logra alcanzar los ocho metros de largo y posee muchas bifurcaciones. Sus
hojas tienen forma de palma, fragmentadas en finos óvalos. Ostenta grandes
y llamativas flores aromáticas de cinco pétalos, de un color crema o rojo, con
filamentos de una tonalidad púrpura. Sobre ellos están los estambres y los
estigmas.

Los beneficios de la pasiflora provienen de una serie de sustancias que se


encuentran principalmente en la pulpa, la hoja y la flor, ayuda las crisis de
ansiedad, disminuye los niveles de estrés, produce en el organismo un efecto
de felicidad y cumple una labor antiestrés.

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Bitácora No. 6
Laboratorio de Farmacología
Toronjil

Hierba siempreverde, cuya parte aérea se renueva anualmente, de 15 - 70


cm de alto, de característico olor cítrico. Tallos cuadrangulares vellosos, con
hojas opuestas, de base redondeada o ligeramente acorazonada, aovadas,
rugosas, de borde dentado. Se usa para afecciones nerviosas (depresión,
nerviosismo, palpitaciones, insomnio); dolor de cabeza; molestias
estomacales y respiratorias.

Tila

Árbol de tallo recto con corteza lisa que alcanza alrededor de 18 m de altura.
Sus hojas tienen forma acorazonada, verde oscuras por el haz y verde
azuladas por el envés. Las flores tienen un color amarillento, agrupadas en
racimos. Se usa para bajar los niveles de ansiedad, adelgazar, combatir el
resfriado común y reducir la presión arterial.

Manzanilla

La manzanilla es una planta con florecillas de blancos pétalos, parecidas a


las margaritas, que se utiliza sobre todo con fines medicinales y terapéuticos.
Se emplean las flores y hojas para tratar un gran número de afecciones:
trastornos digestivos (dolor de estómago, indigestión, dispepsia, cólicos,
diarreas), afecciones renales y de la vejiga, dolores menstruales.

4. Elabora un cuadro comparativo con las variables a medir, ventajas y


desventajas de los siguientes modelos de ansiedad: Enterramiento
defensivo, Luz-Oscuridad, Laberinto en brazos elevados.

Ventajas Desventajas Variables a medir


Luz-Oscuridad Otorga al químico Genera un gran Latencia en el
un alto grado de estrés y malestar compartimiento
información sobre en el animal. blanco.
el comportamiento Latencia en el
ansioso y el compartimiento
efecto ansiolítico negro.
del fármaco. Número de
entradas al
compartimiento
blanco.
Número de
entradas al
compartimiento
negro.

5
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Bitácora No. 6
Laboratorio de Farmacología
Número de
asomadas al
compartimiento
blanco.
Tiempo total en el
compartimiento
blanco.
Enterramiento Bastante La rata desarrolla Latencia al
defensivo homogéneo sin memoria enterramiento.
importar la rata. emocional de la Tiempo
Evalúa la prueba, más de acumulativo de
ansiedad dos veces no enterramiento.
generalizada. funciona.
Laberinto en Mide la acrofobia Solo está Latencia al
brazos cruzados y la agorafobia. enfocado a fobias, espacio abierto.
La altura puede no una ansiedad Latencia al
ser variable generalizada. espacio cerrado.
mientras sea de Tiempo de
más de 50 cm. permanencia en el
espacio abierto.
Tiempo de
permanencia en el
espacio cerrado.

BIBLIOGRAFÍA

1. Anónimo. (2020). OCU. Obtenido de Información Salud:


[Link]
tranquilizantes

2. Mariani, L. (2007). Bromazepam. Eutimia.


[Link]
3. Anónimo. (2020). Fármacos ansiolíticos: Que opinamos los usuarios.
[Link]
tranquilizantes
4. Belzung C, Griebel G. (2001). Measuring normal and pathological anxiety-like
behaviour in mice: a review. Behav. Brain Research.125: 141–149.
5. Bourin M, Demouliere PB, Dhonnchadha BN, Hascöet M. (2007). Animal
models of anxiety in mouse. Fund. Clinical Pharmacol. 21(6): 567-74.
6. Cárdenas J, Navarro JF. (2002). Modelos animales de ansiedad
condicionada (II). Psiq Biol. 9(2): 68-76.
7. Flórez Beledo J, Armijo Simón JA, Mediavilla Martínez A. (2013).
Farmacología humana 6ª ed. España: Elsevier Masson SA.

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UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE QUÍMICA FARMACÉUTICA BIOLÓGICA

LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA

BITÁCORA NO. 7: ELIMINACIÓN Y EFECTO


FARMACOLÓGICO: DIURÉTICOS

Profesor
M. en C. Margarita Virginia
Saavedra Vélez
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Laboratorio de Farmacología
BITÁCORA NO. 7: ELIMINACIÓN Y EFECTO FARMACOLÓGICO: DIURÉTICOS

DURACIÓN: 3 Horas

FECHA DE REALIZACIÓN: Septiembre 27, 2021

OBJETIVO

El estudiante determinará a nivel experimental si el efecto de diuréticos naturales


es similar a la de fármacos prototipo.

OBJETIVOS PARTICULARES

1. El estudiante evaluará la capacidad de diversas sustancias para inducir


eliminación de la orina y lo relacionará con su mecanismo de acción.
2. El estudiante determinará cuál de los tratamientos administrados fue más
efectivo para inducir diuresis.

ACTIVIDADES

La profesora explicó el efecto del diurético en el organismo, así como exponer


diversos diagramas para reforzar dicho conocimiento.

DIAGRAMA DE TRABAJO

OBSERVACIONES

Pensaba que los diuréticos se enfocaban solamente a la excreción de orina y el


sistema digestivo, pero en realidad ayudan al cuerpo a eliminar el líquido y la sal

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Laboratorio de Farmacología
sobrante y dicho efecto puede ser aplicado para la presión arterial, insuficiencia
cardíaca y renal y congestión intestinal, entre otras. Así como tienen un amplio
espectro de acción, el uso frecuente de estos fármacos también lidera a un alto
número de enfermedades debido a que este viene a acelerar ciertos pasos de la
excreción de sal.

Diurético a elección: Jamaica

La escogí porque en mi casa se suele tomar mucho, además de que puede


endulzarse con miel, azúcar, agregarle limón o pepino.

Se utilizan 50 gramos de jamaica, litro y medio de agua hirviendo, dos litros de agua
fría y 100 gramos de azúcar. Para su efecto diurético basta con tomas dos tazas.

La vía de administración para la jamaica es de vía oral. Su mecanismo


farmacológico aún no es muy estudiado a pesar de ser altamente utilizado en la
cocina mundial. Sin embargo, se atribuye su acción diurética en la orina a diversos
mecanismos producidos por las antocianinas, ácido clorogénico y quercetina, son
el efecto vasodilatador por estimulación de Óxido Nítrico Sintasa (NOS) derivado
del endotelio vía fosfoinositol 3- quinasa/proteína quinasa B o Pi3K/Akt.

Preparación para una rata de 300 g

2 tazas – 60,000 gr

X – 300 gr

X= 0.01 tazas

Fármaco diurético a elección: Furosemida

Es metabolizada por el hígado, y suele ser de administración por vía oral o por vía
intravenosa. Suele venir en ampolletas de 20 mg y de 250 mg; así como también en
comprimidos de 40 mg. Tiene una vida media de 1.5 horas con una duración de vía
oral entre 6-8 horas, vía intravenosa de 1-2 horas. Y para la diuresis se tarde por
vía oral entre 5-10 minutos y por intravenosa de 30 min-1 hora.

Preparación para una rata de 300 g

Vía oral

40 mg – 60,000 gr

X – 300 gr

X= 0.02 mg

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Bitácora No. 6
Laboratorio de Farmacología
SUGERENCIAS Y LIMITACIONES

Realmente me vi limitada por mi ignorancia a dichos fármacos y que realmente


pueden ejercer una acción de amplio espectro en nuestro organismo.

CUESTIONARIO

1. Explica los mecanismos involucrados en la formación de orina.

2. Define el aclaramiento renal (clearance) y su relación con la eliminación


de fármacos.

Este aclaramiento se define como el volumen de plasma que queda totalmente


libre de dicha sustancia a su paso por el riñón por unidad de tiempo (ml/min). La
mejor estimación del FG requeriría que la sustancia utilizada se filtre libremente,
no se reabsorba ni secrete a nivel del túbulo renal y no presente eliminación
extrarrenal. En el aclaramiento renal hay tres componentes: filtración glomerular,
excreción y reabsorción tubulares. El aclaramiento de una molécula no indica la
cantidad de fármaco eliminado, sino el volumen corporal liberado de esa
molécula por unidad de tiempo. Está determinado por el volumen de distribución
y por sus parámetros de cinética Su relación con la eliminación de fármacos está
en que coinciden en los tres mecanismos para darse.

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3. Elabora una tabla donde describas los diuréticos, su clasificación,
usos, recomendaciones, vías de administración, efectos secundarios y
adversos, contraindicaciones.

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Usos Recomendaciones Vías de Efectos secundarios y Contraindicaciones


administración adversos
Son usados para No se use de rutina como Intravenosa Hipopotasemia Hipersensibilidad frente a
Diuréticos de asa

tratar la hipertensión, tratamiento antihipertensivo. Oral Hipomagnesemia los diuréticos de asa.


el edema causado Su indicación está reservada Hiperglucemia Anuria, coma hepático o
por insuficiencia para aquellos hipertensos Hiperuricemia agotamiento electrolítico
cardíaca congestiva que tienen al mismo tiempo grave.
o insuficiencia renal. insuficiencia renal moderada
a avanzada
Usadas para tratar la Hipertensión arterial: Como Oral Hipercalcemia Hipersensibilidad a
presión arterial alta, monofármaco o asociado a Hipocalcemia hidroclorotiazida (tiazidas
el edema (exceso de otros antihipertensores en general) o a alguno de
líquido en los tejidos) (betabloqueantes, los excipientes.
y otras afecciones. vasodilatadores, Anuria, insuficiencia
antagonistas del calcio, IECA, hepática, insuficiencia renal
reserpina). severa (aclaramiento de
Edemas: Debidos a creatina < 30 ml/min)
Diuréticos tiacídicos

insuficiencia cardíaca, renal y Depleción electrolítica,


hepática leve o moderada; diabetes descompensada,
edemas premenstruales e enfermedad de Addison.
idiopáticos. Embarazo y lactancia
Diabetes insípida renal:
Cuando no esté indicado el
tratamiento con hormona
antidiurética.
Hipercalciuria idiopática:
Como tratamiento preventivo
de concreciones calcáreas
urinarias.
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Medicamentos que Tomar con alimento. Oral Mareos. Deben utilizarse con
Ahorradores de K+

actúan a nivel del En las mañanas. Parenteral Dolores de precaución en pacientes


riñón para aumentar cabeza. pediátricos hipertensos con
la pérdida renal de insuficiencia renal leve
agua y electrolitos, debido al riesgo de
sin promover la hiperpotasemia.
pérdida de potasio.
son fármacos que Insuficiencia renal aguda Rectal. Alteraciones Hipersensibilidad a la
actúan sobre los (IRA). Parenteral. electrolíticas: La droga.
riñones estimulando Necrosis tubular aguda expansión del Anuria.
la excreción de agua (NTA). líquido Nefropatía grave.
y electrolitos al Síndrome de desequilibrio extracelular Insuficiencia cardiaca.
alterar el transporte dialítico (reestablece la puede Hemorragia cerebral.
iónico a lo largo de la osmolaridad del LEC). descompensar
nefrona. Edema cerebral (disminuye la una insuficiencia
Diuréticos osmóticos

presión intracerebral). cardiaca


Glaucoma agudo. Deshidratación
Hipernatremia;
Hipokalemia
(manitol)
Acidosis
metabólica por
perdida de
bicarbonato.
Hipersensibilidad:
exantemas,
dermatitis.

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Usados para el mal Se sugiere el uso de Oral. Pueden inducir la En pacientes con
de montaña, betabloqueantes respecto a aparición de: enfermedad pulmonar
glaucoma y parasimpaticomiméticos en hiponatremia obstructiva crónica,
epilepsia. pacientes de reciente leve, fosfaturia, depresión y acidosis
diagnóstico con GAA leve- hipercalciuria, hiperclorémica, además de
moderado y en riesgo de hipopotasemia, en pacientes con
pérdida visual significativa. hiperuricemia y hipersensibilidad al
acidosis fármaco.
Inhibidores de la anhidrasa carbónica

metabólica
hiperclorémica
parestesia con
entumecimiento y
hormigueo de la
cara y
extremidades,
malestar general,
depresión, fatiga,
ansiedad,
cefalea,
adelgazamiento y
alteraciones
digestivas
(náuseas,
vómitos,
diarreas).

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4. Investiga la actividad diurética de las siguientes sustancias naturales:


jamaica, cerveza, perejil, diente de león, cola de caballo, café y té verde.

Sustancia natural Actividad diurética


Jamaica Evita la retención de líquidos también y
se ha descubierto que tiene la
capacidad de limpiar los riñones

Cerveza Debido a su alto contenido en potasio.

Esto facilita el aumento de la


eliminación de toxinas de todo el cuerpo

Perejil Estimula la función renal y limpia los


riñones.
Diente de león Compensa la pérdida de minerales que
implica una mayor diuresis y mantiene
el equilibro sodio/potasio del
organismo, una ayuda contra la
retención de líquidos o hipertensión
Cola de caballo Elimina las toxinas contra la retención
de líquidos
Café Su consumo hace que se envié más
agua a través de los túbulos renales
aumentando la producción de orina.
Pero, aunque se cree que esto se debe
a la cafeína, estos efectos diuréticos
también se dan cuando tomamos
descafeinado.

Té verde Consiste en incrementar la producción


de orina y por lo tanto el cuerpo pierde
más agua de lo normal. El único
compuesto diurético en el té es la
cafeína

BIBLIOGRAFÍA

1. Aristil Chéry PM. (2010). Manual de farmacología básica y clínica 5ª ed.


México: McGrawHill
2. Brunton LL, Chabner BA, Knollmann BC. (2012) Goodman & Gilman: Las
Bases farmacológicas de la terapéutica 12ª ed. México: McGraw-Hill
Interamericana.
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Bitácora No. 6
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3. Flórez Beledo J, Armijo Simón JA, Mediavilla Martínez A. (2013).
Farmacología humana 6ª ed. España: Elsevier Masson SA.

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Common questions

Con tecnología de IA

La relación entre la vía de administración de anestésicos y la duración de su efecto farmacológico se observa claramente en la diferencia entre anestesia local y general. Por ejemplo, anestésicos locales como la lidocaína, aplicados tópicamente, brindan un efecto rápido pero relativamente corto al bloquear la conducción nerviosa periférica. En contraste, anestésicos generales administrados por vía intravenosa o inhalatoria, como el propofol o el cloroformo, producen una supresión más extensa de la actividad cerebral, llevando a un estado profundo de inconsciencia. Estos enfoques resaltan cómo la vía de administración influencia no solo la velocidad de inicio de los efectos sino también su duración, con administración intravenosa ofreciendo un control más rápido del inicio y duración en comparación con inhalatoria .

La extrapolación precisa de resultados in vitro a escenarios clínicos puede beneficiar el desarrollo de medicamentos al permitir una predicción temprana y más confiable de la eficacia y seguridad de nuevos compuestos. Esto contribuye a la identificación de potenciales efectos adversos antes de los ensayos humanos, lo que puede reducir costos y tiempos de desarrollo. Además, con un control más sólido sobre las variables experimentales, los modelos in vitro ofrecen un análisis cuantitativo de las relaciones dosis-respuesta, optimizando la formulación y dosificación de fármacos basados en pruebas controladas y repetitivas .

El porcentaje de hemólisis se calcula midiendo la absorbancia del sobrenadante a una longitud de onda específica, en este caso 560 nm, lo que proporciona un indicativo de la cantidad de hemoglobina liberada debido a la ruptura de las membranas eritrocíticas. Este porcentaje permite evaluar la eficacia del fármaco en la estabilización de membranas celulares; un menor porcentaje de hemólisis implica una mayor capacidad del compuesto para proteger las células del estrés fisicoquímico .

El diseño experimental que incorpora la variación de temperatura y concentración iónica es fundamental en estudios de farmacología in vitro para simular condiciones que afectan la estabilidad celular y observar cómo los fármacos pueden mediar en esas condiciones adversas. Estas variaciones permiten evaluar la eficacia protectora de los fármacos bajo diferentes niveles de estrés fisicoquímico, lo cual es esencial para determinar la potencial utilidad terapéutica de los medicamentos en condiciones fisiológicas similares, mejorando así la validez externa de los hallazgos .

La validación de modelos in vitro podría mejorar su aceptación en la farmacología experimental al proporcionar evidencia de que dichos modelos son predictivos y fiables para evaluar la actividad farmacológica. La validación comprendida de pruebas rigidizadas y comparativas con métodos in vivo puede clarificar la relación entre condiciones in vitro y efectos clínicos humanos, estableciendo estándares científicos que validen los resultados. Al reducir las incertidumbres y demostrar reproducibilidad, los modelos in vitro validados podrían incrementar la confianza regulatoria y ser incorporados en procesos oficiales de registro farmacéutico, superando límites actuales .

La evaluación de hemólisis inducida con solución hipotónica es crucial en el ensayo de actividad antiinflamatoria in vitro porque permite observar la capacidad de un fármaco para estabilizar la membrana celular de los eritrocitos. Esta prueba simula un ambiente de estrés osmótico donde la estabilidad de la membrana se compromete, representando una situación en la que los antiinflamatorios deben proteger las células para evitar su desintegración. La reducción del porcentaje de hemólisis cuando se evalúan diferentes concentraciones de un fármaco indica su potencial efecto protector y estabilizador de membranas .

El uso de un control negativo es fundamental en los experimentos in vitro para establecer un punto de referencia que permita medir los efectos netos del fármaco en estudio. En los experimentos con eritrocitos, se establece un control negativo utilizando una solución fisiológica isotónica que no induce hemólisis, lo que permite comparar la estabilidad de la membrana en condiciones normales versus condiciones desafiantes o de estrés. Este control es esencial para validar la confiabilidad del ensayo y asegurar que los resultados sean atribuibles a las acciones del fármaco, no a variables externas .

Los modelos in silico ofrecen la ventaja de ahorrar tiempo y costos al facilitar la automatización y miniaturización de ensayos, así como la simulación de situaciones reales mediante la modulación de variables, lo que puede reducir el uso de animales en la experimentación. Sin embargo, sus limitaciones incluyen la necesidad de validación formal, ya que todavía no son totalmente aceptados legalmente. También presentan desafíos de acceso a tecnología y requieren capacitación continua del personal, además de un coste potencialmente alto .

En experimentos de evaluación antiinflamatoria in vitro, medir la absorbancia implica primero incubar la mezcla de reactivos, incluyendo los eritrocitos y el fármaco a diferentes concentraciones, seguido de centrifugación para obtener el sobrenadante. La absorbancia de este sobrenadante se mide a 560 nm para determinar la cantidad de hemoglobina liberada debido a la hemólisis. Este procedimiento es crucial porque proporciona datos cuantitativos sobre la capacidad del fármaco para proteger la membrana celular, con menores valores de absorbancia indicando una mejor actividad estabilizadora del fármaco .

Los eritrocitos juegan un papel clave como modelo in vitro en la evaluación farmacológica debido a su simplicidad y fácil obtención. Ofrecen un excelente sistema para estudiar la interacción de fármacos con la membrana celular, particularmente en pruebas de hemólisis que reflejan la capacidad del fármaco para estabilizar estructuras celulares bajo condiciones de estrés osmótico o térmico. Este modelo facilita la identificación de propiedades antiinflamatorias y estabilizadoras de membranas de nuevos compuestos .

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