BETALACTAMASAS

• Por su estructura primaria:

– Clase A:
• Frecuentes.
• Residuo de serina en sítio activo.
• Mediado por genes cromosómicos.
– Clase B:
• Métalo-Betalactamasas.
– Clase C:
• Frecuentes.
• Residuo de serina en sítio activo.
– Clase D:
• Residuo de serina en sítio activo.
 BETALACTAMASAS
• Clase A y D: Mediados por genes en
plásmides.

• Clase B y C: Mediados por genes

cromosómicos.
Genes portados por bacterias
seleccionadas.
Betalactamasas seleccionadas de las bacterias Gram-

Betalactamasa Ejemplo Sustratos Inh. Clase

IBL
TEM-1, TEM-2 Benzilpenicilinas.
Aminopenicilinas.
SHV-1 Carboxipenicilinas
Ureidopenicilinas +++ A
Amplio Cefalosporinas de
1a. y 2a.

espectro
Familia OXA Anteriores.
Oxacilina,
+ D
cloxacilina,
dicloxacilina.
 BETALACTAMASAS
• Tipo BLAE. Familia TEM-1, TEM-2, SHV-1
(Clase A):
– Una o varias sustituciones en el sítio activo. Mediadas
por plásmides y transposones.
– Actuan sobre todo sobre las penicilinas y algunas
cefalosporinas de 1a. y 2a. Generación.
– Muy suceptibles a los IBL.
– Existen más de 100 enzimas.
– Producidas por Estafilococo aureus, epidermidis,
Enterocococos, Haemophilus, bacterias Gram negativas
y anaeróbios. Son las mas frecuentes.
 BETALACTAMASAS
• Tipo BLAE. Familia OXA (Clase D):
– Una o varias sustituciones en el sítio activo.
– Mediadas por cromosomas y plásmides.
– Actuan sobre todo sobre las penicilinas,
algunas cefalosporinas de 1a. y 2a. Generación
y sobre las penicilinas antiestafilocócicas.
– Muy poco suceptibles a los IBL.
– Producidas por Haemophilus, Anaerobios y
bacterias Gram negativas.
Betalactamasas seleccionadas de las bacterias Gram-
Betalactamasa Ejemplo Sustratos Inh. Clase
IBL
Familia TEM Sustratos de ámplio
espectro más:
Familia SHV Oximino cefalosporinas:
Cefotaxima
++++ A
Cefpodoxima
Ceftazidima
Espectro Ceftriaxona
Monobactamicos
expandido Familia Los mismos que los
anteriores.
GES/IBC,
BES-1, PER-1,2 ++++ A
SFO-1, TLA-1
VEB-1,2
 NUEVAS BETALACTAMASAS

• Tipo BLEE. Familia TEM (Clase A):

– Una o varias sustituciones en el sítio activo.
– La mutación permite la unión a las
oximinocefalosporinas.
– Muy suceptibles a los IBL.
– Existen más de 130 enzimas TEM.
– TEM 10, 12 y 26 son más comunes en norte y
sudamerica.
 NUEVAS BETALACTAMASAS

• Tipo BLEE Familia SHV (Clase A):

– El SHV-1 comparte 68% de sus aminoacidos
con el TEM-1.
– Tienen una o más sustituciones en el sítio
activo.
– Existen más de 50 enzimas SHV.
– SHV 5 y 12 son las más comunes de esta
familia.
 NUEVAS BETALACTAMASAS

• Otras Tipo BLEE (Clase A):

– Menos comunes y encontradas en la P.
Aeruginosa, Acinetobacter multiresistentes y
otras enterobacterias.
– PER-1 en Turquia, Francia e Italia.
– VEB-1 y 2 en el sudeste de Asia.
– GES-1, 2 e IBC-2 en Africa, Francia y Grecia.
Betalactamasas seleccionadas de las bacterias Gram-
Betalactamasa Ejemplo Sustratos Inh. Clase
IBL
Famillia: Sustratos de ámplio
espectro más:
CTX-M Oximino cefalosporinas:
Cefotaxima
Cefpodoxima ++++ A
Espectro Ceftazidima
Ceftriaxona
expandido Monobactamicos
Cefepime
Familia: Los mismos que los + D
anteriores.
OXA
 NUEVAS BETALACTAMASAS

• Tipo BLEE Familia CTX-M (Clase A):

– Más activas contra la cefotaxima que contra la
ceftazidima.
– Tienen una o más sustituciones en el sítio
activo.
– Existen más de 40 enzimas CTX-M.
– CTX-M-14, 3 y 2 son las más comunes de esta
familia.
 NUEVAS BETALACTAMASAS
• Tipo BLEE Familia OXA (Clase D):
– Más de 22 enzimas de esta familia son
conocidas.
– Encontradas en la P. Aeruginosa en Turquia y
Francia.
– La mayoria son relativamente resistentes a los
IBL.
– Algunas son más activas sobre la ceftazidima,
cefotaxima y cefepima.
Betalactamasas seleccionadas de las bacterias Gram-
Betalactamasa Ejemplo Sustratos Inh. Clase
IBL
Famillia: Sustratos de ámplio
espectro más:
ACC-1, Oximino cefalosporinas:
ACT-1, Cefotaxima
CFE-1, Cefpodoxima
CMY, Ceftazidima
Amp-C Ceftriaxona
0 C
DHA-1,2
Monobactámicos
FOX, LAT Cefepime
MIR-1 Cefamicinas: Cefotetan,
cefoxitin y otras.
MOX-1,2
 NUEVAS BETALACTAMASAS
• Tipo AmpC (Clase C):
– Inducibles por betalactámicos y mediados por
genes cromosómicos: Enterobacter, Escherichia
coli, Klebsiella, Salmonella y Citrobacter y
Acinetobacter.
– Mas de 20 son mediados por genes en
plásmides y algunos son también inducibles.
– Caracteristicamente proveen resistencia a las
cefamicinas y oximinobetalactamicos.
Betalactamasas seleccionadas de las bacterias Gram-
Betalactamasa Ejemplo Sustratos Inh. Clase
IBL
Famillia: Sustratos de ámplio
espectro más:
IMP, VIM. Oximino cefalosporinas:
GIM-1 Cefotaxima
Cefpodoxima
SPM-1
Carbape- Ceftazidima
0 B
Ceftriaxona
nemasas Monobactámicos
Cefepime
Cefamicinas: Cefotetan,
cefoxitin y otras.
Carbapenemicos
Betalactamasas seleccionadas de las bacterias Gram-
Betalactamasa Ejemplo Sustratos Inh. Clase
IBL
KPC-1 Igual que el anterior. +++ A
KPC-2
Carbape- KPC3

namasas OXA-23, 24, Igual al anterior + D

25, 26, 27, 40
y 48
 NUEVAS BETALACTAMASAS
• Tipo Carbapenemasas (Clase A, B y D):
– Diverso grupo de enzimas poco comunes.
– Activas contra los carbapenémicos.
– La familia IMP cuenta con 17 variedades.
• Sobre todo en Pseudomonas y acinetobacter.
– La familia Vim posee 10 miembros mas ampliamente
distribuidas que IMP.
– Pertenecen un número frecuente de KPC, pero
inhibidas por IBL.
– Varios componentes de la familia OXA.
Betalactamasas seleccionadas de las bacterias Gram-
Betalactamasa Ejemplo Sustratos Inh. Clase
IBL
Familia TEM Sustratos de amplio
espectro más:
Familia SHV Oximino cefalosporinas:
Espectro Cefotaxima
++++ A
Cefpodoxima
expandido
Ceftazidima
Ceftriaxona
Monobactamicos

Tratamiento:
Cefepima.
Pipercilina-tazobactam.
Efecto de inóculo de 100.000 a 10.000.000.
Betalactamasas seleccionadas de las bacterias Gram-
Betalactamasa Ejemplo Sustratos Inh. Clase
IBL
Famillia: Sustratos de ámplio ++++ A
espectro más:
CTX-M Oximino cefalosporinas:
Cefotaxima
Espectro Cefpodoxima
expandido Ceftazidima
Ceftriaxona
Monobactamicos
Cefepime +
OXA D
Tratamiento:
Cefamicinas.
Carbapenemicos.
Betalactamasas seleccionadas de las bacterias Gram-
Betalactamasa Ejemplo Sustratos Inh. Clase
IBL
Famillia: Sustratos de ámplio
espectro más:
ACC-1, ACT-1,
CFE-1, CMY, Oximino cefalosporinas:
Cefotaxima
DHA-1,2
Cefpodoxima
Amp-C FOX, LAT
Ceftazidima 0 C
MIR-1
Ceftriaxona
MOX-1,2 Monobactámicos
Cefepime
Cefamicinas: Cefotetan,
cefoxitin y otras.

Tratamiento:
Carbapenémicos.
Puede haber resistencia por impermeabilidad.
Betalactamasas seleccionadas de las bacterias Gram-
Betalactamasa Ejemplo Sustratos Inh. Clase
IBL
Sustratos de ámplio
Famillia: espectro más:
IMP, VIM. Oximino cefalosporinas:
Cefotaxima
Carbapene- GIM-1 Cefpodoxima
Ceftazidima
masas SPM-1 Ceftriaxona 0 B
Monobactámicos
Cefepime
Cefamicinas: Cefotetan,
cefoxitin y otras.
Carbapenemicos

Tratamiento:
–IMP – VIM – OXA: Permanecen sensibles al aztreonam.
–Resistencia a quinolonas y aminoglucósidos elevada.
 BETALACTAMASAS
• Bacterias portadoras de BLEE:
– Klebsiella pneumoniae y oxytoca.
– Escherichia coli.
– Citrobacter sp.
– Enterobacter sp.
– Proteus sp.
– Salmonella sp.
– Serratia sp.
– Acinetobacter baumannii.
– Pseudomona aeruginosa
 BETALACTAMASAS
• Que son las betalactamasas?
a) Proteínas que hidrolizan a los
betalactámicos.
b) Enzimas que activan a los
betalactámicos.
c) Proteínas fijadoras de penicilina.
d) Proteínas de los poros de la membrana.
 BETALACTAMASAS
• Cuantas betalactamasas conoce?
a) 10
b) 50
c) 100
d) 200
e) 400
f) Más
 BETALACTAMASAS
• Cuando aparecieron las
betalactamasas?
a) Con la introduccion de la penicilina.
b) Despues de la penicilina.
c) Con el uso de las cefalosporinas.
d) Relacionadas con la alergia a la
penicilina.
e) Antes del descubrimiento de la penicilina.
 BETALACTAMASAS
• Quienes producen betalactamasas?
a) Los cocos Gram positivos.
b) Los cocos Gram negativos.
c) Los bacilos Gram positivos.
d) Los bacilos Gram negativos.
e) Los anaerobios.
f) Los hongos.
 BETALACTAMASAS
• Como se clasifican las
betalactamasas?
a) Por su nombre.
b) Por su estructura primaria.
c) Por el sustrato.
d) Por la respuesta a los inhibidores.
e) Por los genes codificantes.
 Mecanismos de resistencia a los
antibióticos betalactámicos

• Alteraciones en la penetración
• Inactivación enzimática (betalactamasas)
• Modificación de las PBPs
• Tolerancia (CMB es 32 veces mayor que
CMI)
 Importancia de las
betalactamasas

• Estafilococos • Enterobacteriáceas
• Enterococos • P. aeruginosa
• Neisseria spp • [Link]
• Branhamella • [Link]
 BETALACTAMASAS

• Enzimas que hidrolizan

irreversiblemente el enlace amida del
núcleo betalactámico de los antibióticos
betalactámicos, transformándolos en
compuestos inactivos, incapaces de
ejercer su acción antibiótica.
 Betalactamasas
Mecanismo de acción
• E+S E.S E-S E+P

• Parámetros:
– Km (Cte de afinidad del enzima por el sustrato)
– Vmáx (velocidad máxima de hidrólisis)
– Eficiencia de hidrólisis (Vmáx. S / Km+S)
 BETALACTAMASAS
• Características de los microorganismos con
peptidoglicano, con algunas excepciones.
• Descritas más de 400.
• Papel no bien conocido (síntesis de pared
bacteriana, mecanismo de defensa frente a
betalactámicos producidos por bacterias
ambientales y hongos).
• Factor más importante: utilización clínica de
betalactámicos.
 BETALACTAMASAS
Historia
• 1940. Descripción por Abraham y Chain. Extracto
de [Link] era capaz de inactivar soluciones de
penicilina (penicilinasa).
• 1944. Kirby observó que la producción de
penicilinasa se correlacionaba con R a Pen en
aislados de [Link]. Incremento de cepas
productoras.
• Años 60. Introducción de aminopenicilinas y
cefalosporinas. Aparición de cepas R por
producción de betalactamasas.
 BETALACTAMASAS

• Codificación:
– Cromosómicas. Gran número. Características
de género, especie o subespecie
– Extracromosómicas. Posible difusión
intragénica o intergénica. Amplia distribución.
En general distintas a cromosómicas con
excepciones (SHV-1, AmpC)
 BETALACTAMASAS
• Síntesis:
– Inducibles. Codificadas por un gen no
funcional por represión activa que se
derreprime en presencia de inductor
– Constitutivas. No se requiere presencia de
inductor, formándose enzima en cantidades
constantes cuantitativa y cualitativamente
 BETALACTAMASAS
• Localización/excreción:
– Exoenzimas. Se excretan al medio.
Características de la mayorïa de bacterias
Grampositivas.
– Intracelulares: Retenidas en espacio
periplásmico. Su eficacia está en función de la
capacidad de los sustratos para penetrar.
Características de las bacterias Gramnegativas.
 Betalactamasas
Características (4)
• Espectro:
– Penicilinasas
– Cefalosporinasas
– Amplio espectro
 BETALACTAMASAS
• Bacterias Gram negativas:
– Enzimas intracelulares, constitutivas o inducibles
y codificadas por genes cromosómicos o
extracromosómicos. En algunos casos acceden
fácilmente al exterior (Haemophilus, Neisseria,
[Link]). Expresión variable (especie, copias
plásmido o gen).
• Bacterias Gram positivas:
– Exoenzimas inducibles, mediadas normalmente
por genes extracromosómicos, situados en
plásmidos pequeños no autotransferibles.
Actividad generalmente penicilinasa.
 BETALACTAMASAS
Clasificación (1)
• 1968 (Sawai ) y 1970 (Jack y Richmond):
– Basada en el espectro de actividad. 3 grupos: P, C, AE.
• 1973 (Richmond y Sykes):
– Basada en espectro de hidrólisis y capacidad inhibitoria
de algunos compuestos (cloxa, carbe pCMB, NaCl). 5
clases: I (cef), II (penic), III (AE inhib por cloxa), IV
(AE no inhib por cloxa), V (AE no inhib por cloxa y
gran actividad hidrolítica sobre cloxa)
 BETALACTAMASAS
Clasificación (2)
• 1976 (Sykes y Matthew):
– Basada en localización , espectro y pI:
• Cromosómicas (P, C, AE)
• Plasmídicas (h-oxa, nh-oxa, resto)
• 1980 (Ambler) y 1981 (Jaurin):
– Basada en peso molecular, espectro y grado de
homología en secuencia de aácidos:
• clase A. Enzimas serina. Actividad preferente P
• clase B. Metaloenzimas. Actividad preferente C
• clase [Link] cromosómicas de bacterias G-
• clase D. Enzimas serina que hidrolizan oxa.
 BETALACTAMASAS
Clasificación (3)
• 1989 (Bush):
– Basada en las características bioquímicas, físicas,
espectro de hidrólisis y espectro de inhibición.
Establece 4 grupos:
• Grupo 1. Enzimas “serina”. Actividad preferente C. No
inhibidas por clavulánico y sí por aztreonam
• Grupo 2. Enzimas “serina”. Inhibidas por clavulánico, incluye
6 subgrupos
• Grupo 3. Metaloenzimas. No inhibidas por clavulánico
• Grupo 4 . Penicilinasas no inhibidas por clavulánico
 BETALACTAMASAS
Clasificación actual
• 1995 (Bush, Jacoby y Medeiros). Basada en
clasificaciones anteriores y nuevos criterios:
– codificación (P, Cr)
– espectro de hidrólisis
– espectro de inhibición (Clav, Sul, Taz, Az, Clox)
– inhibición por pCMB y EDTA
– peso molecular y clase molecular
– punto isoeléctrico
– secuenciación de nucleótidos