LDL Colesterol

C monofase AA
Para la determinación de LDL colesterol en suero o plasma

SIGNIFICACION CLINICA en el rótulo. Cerrar el vial y dejar 5 minutos. Luego disolver el conte-
Las lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que nido del vial por agitación suave evitando la formación de espuma.
contienen cantidades variables de colesterol, triglicéridos,
fosfolípidos y proteínas. Estas partículas solubilizan y trans- PRECAUCIONES
portan el colesterol en el torrente sanguíneo. - Los Reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
La proporción relativa de proteína y lípido determina la - No pipetear con la boca.
densidad de estas lipoproteínas y provee las bases sobre - El Calibrador ha sido examinado para HBsAg, HCV y anticuer-
las cuales establecer una clasificación. Estas clases son: po contra HIV 1/2, encontrándose no Reactivo. No obstante
quilomicrones, lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL debe procesarse como si se tratara de material infectivo.
- Very Low Density Lipoproteins), lipoproteínas de baja den- - Utilizar los Reactivos guardando las precauciones habitua-
sidad (LDL - Low Density Lipoproteins) y lipoproteínas de les de trabajo en el laboratorio de química clínica.
alta densidad (HDL - High Density Lipoproteins). Numerosos - Todos los Reactivos y las muestras deben descartarse de
estudios clínicos han demostrado que las diferentes clases acuerdo a la normativa local vigente.
de lipoproteínas tienen distintos y variados efectos en el
riesgo de enfermedad coronaria. Estos estudios señalan al ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
LDL colesterol como el factor clave en la patogénesis de la ALMACENAMIENTO
ateroesclerosis y la enfermedad cardíaca coronaria (ECC), Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC)
mientras que el HDL colesterol es considerado como factor hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
protectivo. Puede ocurrir un aumento en el LDL colesterol, Una vez abierto los Reactivos son estables durante 4 sema-
aún con concentraciones normales de colesterol, asociado nas en refrigerador (2-10oC).
a un incremento en el riesgo de ECC. Calibrador: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha
de vencimiento indicada en la caja. Una vez reconstituido
FUNDAMENTOS DEL METODO es estable 2 semanas en refrigerador (2-10 oC). Puede
El presente método es un ensayo homogéneo sin precipita- fraccionarse en alícuotas debiendo ser conservado a -80oC.
ción, en dos pasos. En el primero, se agrega un tensioactivo
(Reactivo A) que solubiliza las partículas lipoproteicas no- MUESTRA
LDL. El colesterol liberado es consumido por la colesterol es- Suero o plasma
terasa y la colesterol oxidasa en una reacción sin desarrollo a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
de color. Un segundo tensioactivo (Reactivo B) solubiliza las b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma
partículas de LDL formándose, por la presencia de enzimas y usar EDTA o heparina como anticoagulantes.
un Reactivo cromogénico, un color proporcional a la cantidad c) Sustancias interferentes conocidas: no se encuentran
de LDL colesterol presente en la muestra. interferencias por ácido ascórbico hasta 50 mg/dl, hemoglo-
bina hasta 500 mg/dl, bilirrubina hasta 20 mg/dl y γ-globulina
REACTIVOS PROVISTOS hasta 50 g/l. En caso de muestras con concentraciones
A. Reactivo A: solución conteniendo colesterol esterasa superiores de interferentes, deberán diluirse con solución
1000 U/l, colesterol oxidasa 1200 U/l, peroxidasa 1250 U/l, fisiológica antes de proceder a su ensayo, multiplicando el
ascorbato oxidasa 3000 U/l, 4-aminoantipirina 1 g/l y tensio- resultado obtenido por la dilución efectuada.
activo 7 g/l en buffer MES 50 mM. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
B. Reactivo B: solución conteniendo N,N-bis-(4-sulfobutil)- drogas en el presente método.
m-toluidina disódica (DSBmT) 0,4 g/l y tensioactivo 10 g/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
en buffer MES 50 mM. centrifugar y separar el suero del coágulo dentro de las 3
Calibrador: suero humano liofilizado conteniendo lipopro- horas posteriores a la extracción. De no procesar las mues-
teínas de diversos tipos incluyendo LDL. La concentración tras inmediatamente, las mismas pueden ser conservadas
es variable lote a lote (ver título en el rótulo). durante 5 días en refrigerador (2-10oC).

INSTRUCCIONES PARA SU USO MATERIAL REQUERIDO (no provisto)

Reactivos A y B: listos para usar. - Material volumétrico para medir los volúmenes indicados.
Calibrador: reconstituir con el volumen de agua destilada indicado - Analizador automático.

861260524 / 01 p. 1/9
 Método LDL Colesterol Referencia
PROCEDIMIENTO
monofase AA
(analizadores automáticos)
A continuación se detalla un procedimiento general Nº de muestras 54 54
para LDL Colesterol monofase AA en un analizador promedio (mg/dl) 122,5 125,1
automático. Cuando se implemente la técnica para desvío standard (mg/dl) 30,7 30,9
un analizador en particular seguir las instrucciones de coeficiente de correlación: 0,96
trabajo del mismo.
Muestra o Calibrador 3 ul Método LDL Colesterol Método
monofase AA directo
Reactivo A 300 ul
Nº de muestras 92 92
Incubación durante 5 minutos a 37oC. Lectura de absor- promedio (mg/dl) 120,0 122,8
bancia a 660/546 nm (Blanco de Muestra). desvío standard (mg/dl) 30,5 31,6
Reactivo B 100 ul coeficiente de correlación: 0,97
Incubación durante 5 minutos a 37oC. Lectura del resul-
b) Precisión: procesando simultáneamente 20 muestras en
tado a 660/546 nm (concentración de LDL-colesterol).
el mismo día se obtuvo la siguiente variación intraensayo:
Nivel D.S. C.V.
CALIBRACION 98,1 mg/dl ± 0,72 mg/dl 0,73 %
El Calibrador debe procesarse junto con las muestras y en la 146,5 mg/dl ± 0,96 mg/dl 0,66 %
misma forma que éstas. Las concentraciones del Calibrador 209,8 mg/dl ± 1,31 mg/dl 0,62 %
se encuentran alrededor de los niveles de decisión médica
y son variables lote a lote (ver título en el rótulo). Ingresar c) Límite de detección: 0,278 mg/dl.
el valor de concentración del calibrador cada vez que se
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
cambie de lote.
Para las instrucciones de programación consulte el manual
del usuario del analizador en uso.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
LDL colesterol (mmol/l) = LDL colesterol (mg/dl) x 0,02586
PRESENTACION
- 80 ml (1 x 60 ml + 1 x 20 ml), con Calibrador (Cód. 1220220)
METODO DE CONTROL DE CALIDAD
- 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), con Calibrador (Cód. 1009283)
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
- 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), con Calibrador (Cód. 1009348)
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
- 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), con Calibrador (Cód. 1008103)*
de LDL colesterol, con cada determinación.
- 160 ml (2 x 60 ml + 2 x 20 ml), con Calibrador (Cód. 1009627)
- 160 ml (2 x 60 ml + 2 x 20 ml), con Calibrador (Cód. 1009935)
VALORES DE REFERENCIA
El panel de expertos del National Cholesterol Education
BIBLIOGRAFIA
Program (NCEP) provee los siguientes valores de LDL
- Crouse, J.R. et al. - J- Lipid Res. 26: 566, 1985.
colesterol en relación al riesgo de contraer enfermedad
- Barr, D.P.; Russ, E.M.; Eder, H.A. - Am. J. Med. 11:480,
cardíaca coronaria (ECC): 1951.
- Riesgo bajo o nulo (sujetos normales): valores de LDL - William, P. Robinson, D.; Baily, A. - Lancet 1:72, 1979.
colesterol menores de 129 mg/dl. - Kannel, W.B.; et al. - Am. Intern. Med. 90/1:85, 1979.
- Riesgo moderado a elevado (individuos con probabilidad - Bachorik, P.S.; et al. - Clin. Chem. 41/10, 1995.
de contraer ECC): valores entre 130 y 189 mg/dl. - Grundy, S.M. et al. - JAMA 269/23:3015, 1993.
- Riesgo muy elevado (individuos sospechosos de padecer - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
ECC): valores de LDL colesterol ≥ 190 mg/dl. AACC Press, 4th ed., 2001.
No obstante, es recomendable que cada laboratorio esta- - Tietz, N.W. - W.B. Saunders Co., Philadelphia, p.256, 1986.
blezca sus propios valores de referencia. - Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
JAMA 285/19:2486 (2001).
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
No deben emplearse anticoagulantes que contengan citrato.

PERFORMANCE
a) Exactitud: la exactitud del método descripto se verificó
por comparación con los valores obtenidos por el método
de referencia de ultracentrifugación y análisis del colesterol
y con el método directo de inmunoseparación de LDL.
Los resultados de la comparación fueron los siguientes:
*
Marcado CE pendiente 861260524 / 01 p. 2/9
 LDL Colesterol
C monofase AA
Para a determinação de LDL-colesterol em soro ou plasma

SIGNIFICADO CLÍNICO 5 minutos. Após dissolver o conteúdo do frasco agitando

As lipoproteínas plasmáticas são partículas arredondas que suavemente sem formar espuma.
contém quantidades variáveis de colesterol, triglicerídeos,
fosfolípidos e proteínas. Estas partículas solubilizam e PRECAUÇÕES
transportam o colesterol no corrente sanguínea. - Os reagentes são para uso diagnóstico "in vitro".
A proporção relativa de proteína e lípidos determina a den- - Não pipetar com a boca.
sidade destas lipoproteínas e fornecem as bases sobre as - O Calibrador foi examinado para HBsAg, vírus HCV e
quais pode-se estabelecer uma classificação. A mesma pode anticorpos contra HIV 1/2, encontrando-o não reativo. No
ser: quilomicrones, lipoproteínas de muito baixa densidade entanto, deve-se processar como se tratando de material
(VLDL - Very Low Density Lipoproteins), lipoproteínas de baixa infectante.
densidade (LDL - Low Density Lipoproteins) e lipoproteínas de - Utilizar os reagentes observando as precauções habituais
alta densidade (HDL - High Density Lipoproteins). Diferentes de trabalho no laboratório de análises clínicas.
estudos clínicos demonstraram que as variadas classes de - Todos os reagentes e as amostras devem ser descartados
lipoproteínas tem diferentes e variados efeitos no risco de conforme à regulação local vigente.
doenças coronárias. Estes estudos indicam que o LDL coles-
terol é a chave na patogenia da ateroesclerose e da doença ESTABILIDADE E INSTRUÇÕES DE
cardíaca coronária, enquanto o HDL colesterol é considerado ARMAZENAMENTO
fator protetor. Podem-se obter níveis altos de LDL colesterol, Os Reagentes Fornecidos são estáveis sob refrigeração
embora os níveis de colesterol sejam normais, o que se associa (2-10oC) até a data de vencimento indicada na embalagem.
num aumento no risco de doença cardíaca coronária. Não congelar.
Após abrirem, os reagentes são estáveis por 4 semanas sob
FUNDAMENTOS DO MÉTODO refrigeração (2-10oC).
O método se baseia num ensaio homogêneo em dois pas- Calibrador: estável sob refrigeração (2-10oC) até a data
sos, sem precipitação. No primeiro passo se acrescenta de vencimento indicada na embalagem. Após reconstituir,
um tensioativo (Reagente A) que solubiliza as partículas é estável por 2 semanas sob refrigeração (2-10oC). Pode-se
lipoproteicas não-LDL. O colesterol liberado é consumido fracionar em porções, devendo-as conservar a -80oC.
pela colesterol esterase e a colesterol oxidase numa reação
sem desenvolvimento de cor. Outro tensioativo (Reagente AMOSTRA
B) solubiliza as partículas de LDL formando, na presença de Soro ou plasma
enzimas e um reagente cromogênico, uma cor proporcional a) Coleta: obter a amostra da maneira habitual.
à quantidade de LDL colesterol presente na amostra. b) Aditivos: se a amostra a utilizar for plasma, utilizar EDTA
ou heparina como anticoagulante.
REAGENTES FORNECIDOS c) Substâncias interferentes conhecidas: não interferem
A. Reagente A: solução contendo colesterol esterase 1000 U/l, ácido ascórbico até 50 mg/dl, hemoglobina até 500 mg/dl,
colesterol oxidase 1200 U/l, peroxidase 1250 U/l, ascorbato bilirrubina até 20 mg/dl nem γ-globulina até 50 g/l. Se as
oxidase 3000 U/l, 4-aminoantipirina 1 g/l e tensioativo 7 g/l amostras tivessem concentrações maiores às nomeadas,
em tampão MES 50 mM. devem-se diluir com solução fisiológica antes de ensaiar.
B. Reagente B: solução contendo N,N-bis-(4-sulfobutil)-m- Multiplicar o resultado pela diluição efetuada.
toluidina dissódica (DSBmT) 0,4 g/l e tensioativo 10 g/l em Referência bibliográfica de Young para efeitos de drogas
tampão MES 50 mM. neste método.
Calibrador: soro humano liofilizado contendo lipoproteínas d) Estabilidade e instruções de armazenamento: centri-
de diferentes tipos incluindo LDL, com concentração variável fugar e separar o soro do coágulo dentro das 3 horas após
lote por lote (vide título no rótulo). a coleta. Se as amostras não se processam logo, devem-se
conservar durante 5 dias sob refrigeração (2-10oC).
INSTRUÇ  ÕES DE USO
Reagentes A e B: prontos para uso. MATERIAL NECESSÁRIO (não fornecido)
Calibrador: reconstituir com o volume de água destilada - Material volumétrico para medir os volumes indicados.
indicado no rótulo. Fechar o frasco e deixar repousar durante - Analisador automático.

861260524 / 01 p. 3/9
 Método LDL Colesterol Referência
PROCEDIMENTO
monofase AA
(analisador automático)
O seguinte é um procedimento geral para LDL Colesterol Nº de amostras 54 54
monofase AA num analisador automático. Quando seja média (mg/dl) 122,5 125,1
utilizada a técnica em um analisador determinado, deve- desvio padrão (mg/dl) 30,7 30,9
se seguir as instruções de trabalho do mesmo. coeficiente de correlação: 0,96
Amostra ou Calibrador 3 ul
Método LDL Colesterol Método
Reagente A 300 ul monofase AA direito
Incubação durante 5 minutos a 37oC. Leitura de absor- Nº de amostras 92 92
bância a 660/546 nm (Branco de Amostra). média (mg/dl) 120,0 122,8
Reagente B 100 ul desvio padrão (mg/dl) 30,5 31,6
Incubação durante 5 minutos a 37 C. Leitura do resultado
o coeficiente de correlação: 0,97
a 660/546 nm (concentração de LDL-colesterol).
b) Precisão: processando simultaneamente 20 amostras
no mesmo dia, obteve-se a seguinte variação intra-ensaio.
CALIBRAÇÃO Nível D.P. C.V.
O Calibrador deve-se processar junto com as amostras e da 98,1 mg/dl ± 0,72 mg/dl 0,73 %
mesma maneira que estas. As concentrações do Calibrador 146,5 mg/dl ± 0,96 mg/dl 0,66 %
encontram-se ao redor dos níveis de decisão médica e 209,8 mg/dl ± 1,31 mg/dl 0,62 %
são variáveis lote por lote (vide título no rótulo). Deve-se
ingressar o valor de concentração do calibrador quando c) Limite de detecção: 0,278 mg/dl.
mudar o lote.
PARÂMETROS PARA ANALISADORES AUTOMÁTICOS
CÁLCULO DOS RESULTADOS Para as instruções de programação deve-se consultar o
LDL colesterol (mmol/l) = LDL colesterol (mg/dl) x 0,02586 manual de uso do analisador.

MÉTODO DE CONTROLE DE QUALIDADE APRESENTAÇÃO

Processar 2 níveis de um material de controle de qualidade - 80 ml (1 x 60 ml + 1 x 20 ml), com Calibrador (Cód. 1220220)
(Standatrol S-E 2 niveles) com concentrações conhecidas - 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), com Calibrador (Cód. 1009283)
de LDL colesterol, com cada determinação. - 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), com Calibrador (Cód. 1009348)
- 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), com Calibrador (Cód. 1008103)*
VALORES DE REFERÊNCIA - 160 ml (2 x 60 ml + 2 x 20 ml), com Calibrador (Cód. 1009627)
O painel de expertos do National Cholesterol Education - 160 ml (2 x 60 ml + 2 x 20 ml), com Calibrador (Cód. 1009935)
Program (NCEP) fornece os seguintes valores de LDL co-
lesterol na relação ao risco de contrair doenças cardíacas REFERÊNCIAS
coronárias (DCC): - Crouse, J.R. et al. - J- Lipid Res. 26: 566, 1985.
- Risco baixo ou nulo (indivíduos normais): valores de LDL - Barr, D.P.; Russ, E.M.; Eder, H.A. - Am. J. Med. 11:480,
colesterol < 129 mg/dl. 1951.
- Risco moderado a elevado (indivíduos com probabilidade - William, P. Robinson, D.; Baily, A. - Lancet 1:72, 1979.
de contrair DCC): valores de LDL colesterol entre 130 e - Kannel, W.B.; et al. - Am. Intern. Med. 90/1:85, 1979.
189 mg/dl. - Bachorik, P.S.; et al. - Clin. Chem. 41/10, 1995.
- Risco muito elevado (indivíduos suspeitos de ter DCC): - Grundy, S.M. et al. - JAMA 269/23:3015, 1993.
valores de LDL colesterol ≥ 190 mg/dl. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
É recomendável que cada laboratório estabeleça seus pró- AACC Press, 4th ed., 2001.
prios valores de referência. - Tietz, N.W. - W.B. Saunders Co., Philadelphia, p.256, 1986.
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO JAMA 285/19:2486 (2001).
Vide Substâncias interferentes conhecidas em AMOSTRA.
Não devem empregar-se anticoagulantes contendo citrato.

DESEMPENHO
a) Exatidão: a exatidão do método descrito foi conferido
comparando os valores obtidos pelo método de referência
de ultracentrifugação e análise do colesterol com aqueles
do método direito de imunoseparação de LDL.

* Marcação CE pendente 861260524 / 01 p. 4/9

 LDL Colesterol
C monofase AA
For LDL cholesterol determination in serum or plasma

SUMMARY - Do not pipette by mouth.

Plasma lipoproteins are spherical particles containing vary- - The calibrator has been tested for HBsAg, HCV and antibody
ing amounts of cholesterol, triglycerides, phospholipids and against HIV 1/2 being found non-reactive. Nonetheless, it
proteins. These particles solubilize and transport cholesterol should be handled as capable of transmitting infections.
into the bloodstream. - Use the reagents according to the working procedures for
The relative proportion of protein and lipid determines the clinical laboratories.
density of these lipoproteins and provides the basis to - The reagents and samples should be discarded according
establish a classification. These classes are chylomicrons, to the local regulations in force.
very low-density lipoproteins (VLDL), low-density lipoproteins
(LDL) and high-density lipoproteins (HDL). Numerous clinical STABILITY AND STORAGE INSTRUCTIONS
studies have shown that the different lipoproteins classes Provided Reagents: are stable in refrigerator (2-10oC) until
have very distinct and varied effects on coronary heart dis- the expiration date shown on the box. Do not freeze. Once
ease risk. Such studies point out the LDL cholesterol as the the reagents are opened, they are stable for 4 weeks in
key factor for the atherosclerosis pathogenesis and coronary refrigerator (2-10oC).
heart disease (CHD), while HDL cholesterol is considered as Calibrator: stable in refrigerator (2-10oC) until the expira-
a protective factor. An increase in LDL cholesterol may occur, tion date shown on the box. Once reconstituted it is stable
even with normal cholesterol concentrations, associated to for 2 weeks in refrigerator (2-10oC). It may be aliquoted
an increase in the CHD risk. stored at -80oC.

PRINCIPLE SAMPLE
The method consists in a two-step homogeneous assay Serum or plasma
without precipitation. In the first step, a surfactant is added a) Collection: obtain the serum in the usual way.
(Reagent A) solubilizing non-LDL lipoprotein particles. The b) Additives: in case plasma is used as sample, use EDTA
released cholesterol is consumed by cholesterol esterase and or heparin as anticoagulant.
cholesterol oxidase in a reaction without color development. c) Known interfering substances: no interferences are
A second surfactant (Reagent B) solubilizes LDL particles observed by ascorbic acid up to 50 mg/dl, hemoglobin up
forming a color proportional to the LDL cholesterol quantity to 500 mg/dl, bilirubin up to 20 mg/dl and γ-globulin up to
present in sample, even in normal cholesterol concentrations. 50 g/l. For samples with higher concentrations of interfering
substances, dilute with saline solution before testing, multiply-
PROVIDED REAGENTS ing the obtained result by the performed dilution.
A. Reagent A: solution containing 1000 U/l cholesterol esterase, See Young, D.S. in References for effect of drugs on the
1200 U/l cholesterol oxidase, 1250 U/l peroxidase, 3000 U/l present method.
abscorbate oxidase, 1 g/l 4-aminoantipyrine and 7 g/l surfactant d) Stability and storage instructions: centrifuge and sepa-
in 50 mM MES buffer. rate serum from clot within 3 hours after collection. In case
B. Reagent B: solution containing 0.4 g/l N,N-bis-(4-sul- the test could not be performed immediately, the sample can
phobutyl)-m-disodium toluidine (DSBmT) and 10 g/l surfac- be kept for 5 days in refrigerator (2-10oC).
tant in 50 mM MES buffer.
Calibrator: lyophilized human serum containing different REQUIRED MATERIAL (non-provided)
types of lipoproteins, including LDL. The concentration - Volumetric material for measuring the stated volumes.
changes from batch to batch (see titer on label). - Autoanalyzer.
INSTRUCTIONS FOR USE
Reagent A and B: ready to use.
PROCEDURE
Calibrator: reconstitute with distilled water volume indicated on
(autoanalyzers)
the label. Cap the vial and let stand it for 5 minutes. Then dis-
A general procedure for LDL Colesterol monofase AA in
solve the vial content by gentle shaking avoiding foam formation.
an autoanalyzer is detailed below. When implementing
the technique for a particular autoanalyzer, follow its
WARNINGS
working instructions.
- Reagents are for “in vitro” diagnostic use.

861260524 / 01 p. 5/9
 Sample or Calibrator 3 ul Method LDL Colesterol Reference
monofase AA
Reagent A 300 ul
Incubate for 5 minutes at 37oC. Read the absorbance at Nº of samples 92 92
660/546 nm (Sample Blank). average 120.0 mg/dl 122.8 mg/dl
standard deviation 30.5 mg/dl 31.6 mg/dl
Reagent B 100 ul
correlation coefficient: 0.97
Incubate for 5 minutes at 37oC. Read the result at 660/546 nm
(LDL-cholesterol concentration). b) Precision: simultaneously processing 20 samples on the
same day, the following intra-assay variation was obtained:
Level S.D. C.V.
CALIBRATION
98.1 mg/dl ± 0.72 mg/dl 0.73 %
Process the Calibrator in the same way as the samples.
146.5 mg/dl ± 0.96 mg/dl 0.66 %
The Calibrator concentrations are near medical decision
209.8 mg/dl ± 1.31 mg/dl 0.62%
levels and change from batch to batch (see titer on label).
Set the calibrator’s concentration value every time the batch c) Detection limit: 0.278 mg/dl.
is changed.
PARAMETERS FOR AUTOANALYZERS
CALCULATIONS For programming instructions check the user manual of the
LDL Cholesterol (mmol/l) = LDL Cholesterol (mg/dl) x 0.02586 autoanalyzer in use.

QUALITY CONTROL METHOD WIENER LAB. PROVIDES

Each time the test is performed, analyze two levels of a qual- - 80 ml (1 x 60 ml + 1 x 20 ml), with Calibrator (Cat. Nº 1220220)
ity control material (Standatrol S-E 2 niveles) with known - 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), with Calibrator (Cat. Nº 1009283)
LDL cholesterol concentration. - 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), with Calibrator (Cat. Nº 1009348)
- 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), with Calibrator (Cat. Nº 1008103)*
REFERENCE VALUES - 160 ml (2 x 60 ml + 2 x 20 ml), with Calibrator (Cat. Nº 1009627)
The expert panel from the National Cholesterol Education - 160 ml (2 x 60 ml + 2 x 20 ml), with Calibrator (Cat. Nº 1009935)
Program (NCEP) provides the following LDL Cholesterol
values related to the risk of acquiring coronary heart disease REFERENCES
(CHD): - Crouse, J.R. [Link]. - J. Lipid Res. 26:566, 1985.
- Barr, D.P.; Russ, E.M.; Eder, H.A. - Am. J. Med. 11:480,
- Low or no risk (normal individuals): LDL Cholesterol values
1951.
below 129 mg/dl.
- William, P.; Robinson, D.; Baily, A. - Lancet 1:72, 1979.
- Moderate or high risk (individuals with probability of acquir-
- Kannel, W.B.; [Link]. - Am. Intern. Med. 90/1:85, 1979.
ing CHD): values between 130 and 189 mg/dl.
- Bachorik, P.S. [Link]. - Clin. Chem. 41/10, 1995.
- Very High risk (individuals suspected from suffering from
- Grundy, S.M. [Link]. - JAMA 269/23:3015, 1993.
CHD): LDL Cholesterol values ≥ 190 mg/dl.
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
However, each laboratory should establish its own refer- AACC Press, 4th ed., 2001.
ences values. - Tietz, N.W. - W.B. Saunders Co., Philadelphia, p.256, 1986.
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
PROCEDURE LIMITATIONS JAMA 285/19:2486 (2001).
See Known interfering substances under SAMPLE.
Anticoagulants containing citrate should not be employed.

PERFORMANCE
a) Accuracy: the method’s accuracy was verified by com-
parison with the values obtained by the ultracentrifugation
and cholesterol analysis reference method and with the LDL
immuno-separation direct method. The comparison results
were the following:
Method LDL Colesterol Reference
monofase AA
Nº of samples 54 54
average 122.5 mg/dl 125.1 mg/dl
standard deviation 30.7 mg/dl 30.9 mg/dl
correlation coefficient: 0.96

* CE mark pending 861260524 / 01 p. 6/9

 LDL Colesterol
C monofase AA
Kolorymetryczna metoda bezstrąceniowa do oznaczania
Nr kat. 1220220 Nr kat. 1009627
Nr kat. 1009283 Nr kat. 1009935 cholesterolu LDL w surowicy krwi lub osoczu
Nr kat. 1009348 Nr kat. 1008103

WSTĘP wskazaną na etykiecie. Zamknąć fiolkę i odstawić na ok. 5

Lipoproteiny osocza to kuliste cząsteczki zawierające różne minut. Następnie rozpuścić zawartość fiolki przez delikatne
ilości cholesterolu, trójglicerydów, fosfolipidów i białek. wstrząśnięcie unikając spienienia.
Fosfolipidy, wolny cholesterol i białka tworzą zewnętrzną
powierzchnię cząsteczki lipoprotein, natomiast wewnętrzny OSTRZEŻENIA
rdzeń składa się głównie z estryfikowanego cholesterolu z - Odczynniki diagnostyczne do zastosowania "in vitro".
trójglicerydami. Cząsteczki te rozpuszczają i transportują - Nie brać pipety do ust.
cholesterol do strumienia krwi. Odpowiedni stosunek białek - Kalibrator przebadano w kierunku HBsAg, HCV oraz
i tłuszczów odpowiedzialny jest za gęstość lipoprotein i jest przeciwciał przeciw HIV 1/2 i otrzymano wynik ujemny.
podstawą do ich klasyfikacji na: chylomikrony, lipoproteiny Jakkolwiek należy go traktować jako materiał potencjalnie
o bardzo niskiej gęstości (very-low-density lipoproteins zakaźny.
VLDL), o niskiej gęstości (low-density lipoproteins LDL) - Stosować odczynniki zgodnie z procedurami dla laborato-
oraz o wysokiej gęstości (high-density lipoproteins HDL). riów klinicznych.
Wiele klinicznych badań wykazało, że różne klasy lipoprotein - Odczynniki i materiał badany odrzucać zgodnie z lokalnymi
mają znaczący i zróżnicowany wpływ na ryzyko choroby przepisami.
niedokrwiennej serca.
Cholesterol HDL uważany jest za czynnik ochronny. Wzrost TRWAŁOŚĆ I WARUNKI PRZECHOWYWANIA
cholesterolu LDL może pojawić się nawet przy prawidłowych Dostarczane odczynniki: są trwałe w lodówce (2-10oC) do
poziomach cholesterolu całkowitego i mieć znaczący wpływ końca daty ważności umieszczonej na opakowaniu.
na wzrost ryzyka choroby niedokrwiennej serca. Nie zamrażać. Po otwarciu odczynniki są trwałe przez 4
tygodnie w lodówce (2-10oC).
ZASADA DZIAŁANIA Kalibrator: trwały w lodówce (2-10oC) do końca daty ważności
Metoda składa się z układu dwóch etapów homogennej umieszczonej na opakowaniu. Po rozpuszczeniu jest trwały
reakcji bez strącenia. W pierwszym etapie, dodawany jest przez 2 tygodnie w lodówce (2-10oC). Kalibrator może być
surfaktant celem rozpuszczenia cząsteczek lipoprotein nie- podzielony na równe części i przechowywany w temp. -80oC.
LDL (Odczynnik A). Uwolniony cholesterol jest zużywany
przez esterazę cholesterolu i oksydazę cholesterolu w reakcji MATERIAŁ BADANY
bezbarwnej. Drugi surfaktant (Odczynnik B) rozpuszcza Surowica krwi lub osocze
cząsteczki LDL tworząc barwę o natężeniu proporcjonal- a) Pobranie: pobrać surowicę w klasyczny sposób.
nym do ilości cholesterolu LDL obecnego w próbce nawet o b) Substancje dodatkowe: dla osocza użyć EDTA lub
prawidłowym poziomie całkowitego cholesterolu. heparyny jako antykoagulantu.
c) Znane interakcje: żadne interakcje nie są obserwowane
DOSTARCZANE ODCZYNNIKI dla kwasu askorbinowego do 50 mg/dl, z hemoglobiną do
A. Odczynnik A: roztwór zawierający 1000 U/l esterazy 500 mg/dl, bilirubiną do 20 mg/dl oraz γ-globuliną do 50 g/l.
cholesterolu, 1200 U/l oksydazy cholesterolu, 1250 U/l pe- Dla próbek o wyższym stężeniu substancji wchodzących w
roksydazy, 3000 U/l oksydazy kwasu askorbinowego, 1 g/l interakcje należy rozcieńczyć materiał solą fizjologiczną pr-
4-aminoantipiryny oraz 7 g/l surfaktantu w 50 mM buforze zed badaniem, mnożąc otrzymane wyniki przez współczynnik
MES. rozcieńczenia. Zobacz źródło: Young, D.S. w sprawie wpływu
B. Odczynnik B: roztwór zawierający 0,4 g/l DSBmT (N,N- leków w tej metodzie.
bis-(4-sulphobutyl)-m-disodium toluidine) i 10 g/l surfaktantu d) Trwałość i instrukcja przechowywania: odwirować i
w 50 mM buforze MES. oddzielić surowicę od skrzepu w ciągu 3 godzin od pobrania.
Kalibrator: liofilizowana ludzka surowica zawierająca różne W przepadku braku możliwości przeprowadzenia badania
klasy lipoprotein, włącznie z LDL. Stężenia zależne od serii natychmiast, materiał może być przechowywany do 5 dni
(patrz wartości na etykiecie). w lodówce (2-10oC).

INSTRUKCJA UŻYCIA WYMAGANE MATERIAŁY I SPRZĘT (niedostarczane)

Odczynnik A oraz B: gotowy do użycia. - Sprzęt do pomiaru objętości.
Kalibrator: rozpuścić z wodą destylowaną objętością - Analizator automatyczny.

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 PROCEDURA
Metoda LDL Colesterol Wzorzec
monofase AA
(analizatory automatyczne)
Poniżej przedstawiono ogólne zasady dla procedury Ilość próbek 54 54
badania dla LDL Colesterol monofase AA w analizato- średnia 122,5 mg/dl 125,1 mg/dl
rach automatycznych. Jakkolwiek należy zapoznać się S.D. 30,7 mg/dl 30,9 mg/dl
z instrukcją obsługi dla przeprowadzenia badania w współczynnik korelacji: 0,96
danym urządzeniu.
Materiał badany lub Kalibrator 3 ul
Metoda LDL Colesterol Wzorzec
monofase AA
Odczynnik A 300 ul Ilość próbek 92 92
Inkubować przez 5 minut w temp. 37 oC. Odczytać średnia 120,0 mg/dl 122,8 mg/dl
absorbancję przy 660/546 nm (Ślepa próba materiału S.D. 30,5 mg/dl 31,6 mg/dl
badanego). współczynnik korelacji: 0,97
Odczynnik B 100 ul b) Precyzja: równocześnie wykonano badanie 20 próbek w
Inkubować przez 5 minut w temp. 37oC. Odczytać wynik tym samym dniu, otrzymano następujące wartości odchyleń:
przy 660/546 nm (stężeniu cholesterolu LDL). Poziom S.D. C.V.
98,1 mg/dl ± 0,72 mg/dl 0,73 %
146,5 mg/dl ± 0,96 mg/dl 0,66 %
KALIBRACJA
209,8 mg/dl ± 1,31 mg/dl 0,62%
Przygotować Kalibrator w ten sam sposób jak materiał ba-
dany. Stężenia kalibratora są bliskie poziomom granicznym i c) Granica wykrywalności: 0,278 mg/dl.
zmieniają się w zależności od serii (patrz wartość na etykiecie).
Ustawić wartość stężenia kalibratora przy każdej zmianie serii. PARAMETRY DLA ANALIZATORÓW AUTOMATYCZNYCH
Celem programowania zapoznać się z instrukcją obsługi
OBLICZENIA używanego analizatora automatycznego.
Cholesterol LDL (mmol/l) = Cholesterol LDL (mg/dl) x 0,02586
WIENER LAB. DOSTARCZA
METODA KONTROLI JAKOŚCI - 80 ml (1 x 60 ml + 1 x 20 ml), z Kalibratorem (Nr kat. 1220220)
W trakcie przeprowadzania badania, za każdym razem, - 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), z Kalibratorem (Nr kat. 1009283)
należy przeprowadzać analizę jakości na dwóch poziomach - 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), z Kalibratorem (Nr kat. 1009348)
(Standatrol S-E 2 niveles) ze znanym poziomem stężenia - 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), z Kalibratorem (Nr kat. 1008103)
cholesterolu LDL. - 160 ml (2 x 60 ml + 2 x 20 ml), z Kalibratorem (Nr kat. 1009627)
- 160 ml (2 x 60 ml + 2 x 20 ml), z Kalibratorem (Nr kat. 1009935)
WARTOŚCI REFERENCYJNE
Zespół ekspertów National Cholesterol Education Program ŹRÓDŁA
(NCEP) zaleca następujące wartości w związku z ryzykiem - Crouse, J.R. et al. - J- Lipid Res. 26: 566, 1985.
choroby niedokrwiennej serca (ChNS): - Barr, D.P.; Russ, E.M.; Eder, H.A. - Am. J. Med. 11:480,
- Niskie lub brak ryzyka (u osób zdrowych): wartości choles- 1951.
terolu LDL poniżej 129 mg/dl. - William, P. Robinson, D.; Baily, A. - Lancet 1:72, 1979.
- Średnie lub wysokie ryzyko (u osób z prawdopodobnym - Kannel, W.B.; et al. - Am. Intern. Med. 90/1:85, 1979.
ryzykiem ChNS): wartości pomiędzy 130 i 189 mg/dl. - Bachorik, P.S.; et al. - Clin. Chem. 41/10, 1995.
- Bardzo wysokie ryzyko (u osób z podejrzeniem ChNS): - Grundy, S.M. et al. - JAMA 269/23:3015, 1993.
wartości cholesterolu LDL powyżej ≥ 190 mg/dl. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Jakkolwiek zaleca się dla każdego laboratorium ustalenie AACC Press, 4th ed., 2001.
własnych wartości referencyjnych. - Tietz, N.W. - W.B. Saunders Co., Philadelphia, p.256, 1986.
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
OGRANICZENIA PROCEDURY JAMA 285/19:2486 (2001).
Zobacz znane interakcje w rozdziale MATERIAŁ BADANY.
Nie stosować antykoagulantów zawierających cytrynian.

CHARAKTERYSTYKA TESTU
a) Dokładność: dokładność badano przez porównanie
z wartościami otrzymanymi referencyjną metodą ultraod-
wirowaniu i późniejszego badania cholesterolu a metodą
bezpośredniej immunoseparacji LDL. Poniżej zamieszczono
wyniki porównania:

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SÍMBOLOS // SÍMBOLOS // SYMBOLS // OZNACZENIA
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnóstico de Wiener lab. // Os seguintes símbolos
são utilizados nos kits de reagentes para diagnóstico da Wiener lab. // The following symbols are used in the packaging for
Wiener lab. diagnostic reagents kits. // Następujące symbole są zastosowane na opakowaniach zestawów odczynników
diagnostycznych.
Este producto cumple con los requerimientos previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios para el diagnóstico

C "in vitro"// Este produto preenche os requisitos da Diretiva Europeia 98/79 CE para dispositivos médicos de diagnóstico "in vitro"//
This product fulfills the requirements of the European Directive 98/79 EC for "in vitro" diagnostic medical devices// Ten produkt spełnia
wymagania Dyrektywy Europejskiej 98/79 EC dla wyrobów medycznych używanych do diagnozy "in vitro"
P Representante autorizado en la Comunidad Europea// Representante autorizado na Comunidade Europeia// Authorized representative
in the European Community// Autoryzowany przedstawiciel we Wspólnocie Europejskiej
V Uso diagnóstico "in vitro"// Uso médico-diagnóstico "in vitro"// "In vitro" diagnostic medical device// Wyrób do diagnostyki "in vitro"
Contenido suficiente para <n> ensayos// Conteúdo suficiente para <n> testes// Contains sufficient for <n> tests// Zawartość wystar-
X czająca dla <n> badań

Fecha de caducidad// Data de validade// Use by// Użyć przed

H
Límite de temperatura (conservar a)// Limite de temperatura (conservar a)// Temperature limitation (store at)// Ograniczenie dopusz-
l czalnych temperatur

 No congelar// Não congelar// Do not freeze// Nie zamrażać

Riesgo biológico// Risco biológico// Biological risks// Ryzyko biologiczne

F
Volumen después de la reconstitución// Volume após a reconstituição// Volume after reconstitution// Objętość po rozpuszczeniu

Cont. Contenido// Conteúdo// Contents// Zawartość

g Número de lote// Número de lote// Batch code// numer serii

M Elaborado por:// Elaborado por:// Manufactured by:// Wytwórca

Nocivo// Nocivo// Harmful// Substancja szkodliwa

Corrosivo / Cáustico // Corrosivo / Caústico // Corrosive / Caustic// Substancja żrące

Irritante// Irritante// Irritant// Substancja drażniąca

i Consultar instrucciones de uso// Consultar as instruções de uso// Consult instructions for use// Przed użyciem zapoznać się z instrukcją

Calibr. Calibrador// Calibrador// Calibrator// Kalibrator

b Control// Controle// Control// Próba kontrolna

b Control Positivo// Controle Positivo// Positive Control// Próba kontrolna dodatnia

c Control Negativo// Controle Negativo// Negative Control// Próba kontrolna ujemna

h Número de catálogo// Número de catálogo// Catalog number// Numer katalogowy

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Wiener lab.
Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina
[Link]
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 3135/99 2000 Rosario - Argentina
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