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REVICION….
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(METODO CINETICO )
1. ANTECE Esta prueba supone la medida de creatinina tanto en sangre
como en la orina de 24 horas. Los resultados se utilizan para
DENTES
calcular la cantidad de creatinina que se ha eliminado de la
circulación a su paso por el riñón, y se ha eliminado en la orina.
Este cálculo permite una evaluación global de la cantidad de
sangre que se ha filtrado en 24 horas a nivel renal.
La creatinina es un producto de desecho producido en el
músculo, que se ha filtrado en 24 horas a nivel renal.
2. OBJETIV La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina del
O organismo casi exclusivamente por filtración renal. Su
determinación en suero, así como la depuración de creatinina
endógena constituyen parámetros importantes para el
diagnóstico de diversas afecciones renales.
Realizar la determinación cuantitativa de aclaramiento
endógeno de la creatinina en orina 24 horas
3. ALCANC La determinación de aclaramiento endógeno de creatinina en
E orina de 24 horas
4. RESPOS Bioquímicos, licenciados en laboratorio clínico, y biotecnologos
ABLES del Laboratorio ……………….
5. DEFINICI El aclaramiento de creatinina es una prueba de laboratorio
ONES que se hace con el fin de monitorizar el funcionamiento de
los riñones. Sirve para valorar el grado de insuficiencia renal.
6. ABREVI C cr: Aclaramiento de Creatinina.
ACIONE D.C.E. Depuración de creatinina endógena
S C. CR. Clearence de Creatinina
7. CONDICI Se trabaja en un mesón de superficie plana y lavable con una
ONES temperatura de 25 ºC
AMBIEM
TALES
8. METOD Método cinético para la determinación de creatinina en suero,
O plasma u orina.
9. FUNDAM La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción de
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ENTO Jaffe) produciendo un cromógeno rojo. La velocidad de esta
DEL reacción, bajo condiciones controladas, es una medida de la
METOD concentración de creatinina de la muestra puesto que se
O comporta como una reacción cinética de primer orden para la
creatinina. Por otra parte, se ha demostrado que los
cromógenos no-creatinina que interfieren en la mayor parte de
las técnicas convencionales, reaccionan dentro de los 30
segundos de iniciada la reacción. De manera que entre los 30
segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la reacción, el
incremento de color se debe exclusivamente a la creatinina.
10. DESARR 10.1 MUESTRA REQUERIDA:
OLLO Orina recolectada en el periodo de 24 horas.
DEL 10.2 CONDICIONES DEL PACIENTE:
PROCED Recolección de muestra total de orina en 24 horas
IMIENTO 10.3 REACTIVOS.-
A. Reactivo
A: solución de ácido pícrico 12,7 mmol/l y laurilsulfato de
sodio 8,4 mmol/l. B. Reactivo B: solución de borato 53
mmol/l e hidróxido de sodio 970 mmol/l.
S. Standard*: solución de creatinina 20 mg/
10.4 MATERIALES:
Tubos de hemólisis
Micro pipetas automáticas de 100 µl
Pipetas de 5 ml
Reloj o timer.
Propipetas
Gradilla
Puntas desechables
Algodón
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Probeta de 1000 ml.
10.5 EQUIPOS :
Stat fax
Vortex
Baño María
10.6 ESPECIFICACIONES
No debe estar tomando ningún medicamento
Evitar ejercicio físico reciente
El fotocolorímetro debe estar siempre a 37ºC
El coeficiente de variación no debe ser superior a 6%
(CCI) en condiciones de rutina.
10.7 LIMITACIONES
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. Otras
causas de resultados erróneos son: - Temperatura: si bien la
temperatura de reacción admite una variación entre 22 y 28o C,
una diferencia entre la temperatura de incubación del Standard
respecto de las muestras disminuye la precisión del método. -
Tiempo de lectura: ligeras variaciones en la medición del tiempo
afectan notablemente la exactitud del método. Las lecturas
deberán realizarse exactamente a los 30 segundos luego de
haber mezclado la muestra con el reactivo y a los 5 minutos (4
minutos 30 segundos luego de la primera lectura)
equipo programado para la lectura en dos fases y tiempo
Los detergentes, metales pesados y cianuros son inhibidores
enzimáticos
10.8 DESARROLLO
Llevar los reactivos a temperatura ambiente(23-29ºC )
por 5 min.
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Mezclar unos segundos e incubar por espacio de 5
REACTIVO STANDAR MUESTRA
minutos a 37ºC
BLANCO 1 ml
ESTÁNDAR 1 ml 100 ul Leer en
DESCONOCIDO 1 ml 100 ul
espectrofotómetro a 505nm. Con blanco de reactivo.
Recolectar y preparar la muestra cómo se describió en
“Recolección”, efectuando una dilución 1:50 de la misma
en agua desionizada. Aplicar luego la técnica I.
ÇALCULOS :
ACLARAMIENTO= Ucr. X Vcr X 1.73 =ml/min en 24 horas
Pcr. X 14400 x S
Ucr. =concentración de creatinina en orina 24 horas mg/dl)
Vcr. =Volumen de orina en 24 horas
1.73= factor
Pcr.=concentración de creatinina plasmática mg/dl
S= índice de superficie corporal
10.8.1 LINEALIDAD
Linealidad: la reacción es lineal hasta 90 mg/l de
creatinina. Para valores superiores, diluir la muestra 1:2 ó
1:4 con solución salina y repetir la determinación.
Corregir los cálculos multiplicando por el factor de
dilución
10.8.2 VALIDACION
Verificación de muestra optima
Verificación de reactivos fecha de expiración
Incluir a las corridas sueros control (normal patológico)
en cada corrida analítica midiendo precisión y exactitud
Procesar por duplicado las muestras con resultados fuera
de lo normal.
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10.8.3 INTERFERENCIA
Orina no recolectada en su totalidad de las 24 horas
Muestra contaminada
Ácido ascórbico > a 20 mg/dl
Ácido úrico > a 200mg/l
Triglicéridos > a2500 mg/dl
10.9 RESULTADOS
Longitud de onda 500 nm en espectrofotómetro
490-530 en fotocolorímetro
10.9.1 VALORES DE REFERENCIA
Hombre: 94 - 140 ml/min
Mujer: 72 - 110 ml/min
10.10 SEGURIDAD, BIOSEGURIDAD
Toda muestra debe ser considerada como potencial
mente infecciosa por los tanto se deben utilizar las
medidas de Bioseguridad estándares
Para iniciar con el trabajo utilizar las medidas físicas
como gorro guantes gafas barbijo
Además de las medidas químicas como la desinfección
de mesones y material antes y después del análisis
clínico con hipoclorito de sodio al 1%
10 REGISTR El cuaderno de Química Sanguínea
OS Cuaderno de control de calidad interno.
Los resultados se ingresan al sistema para su reporte e
impresión y liberación.
11 REFEREN Insertos de reactivos glicemia enzimática Wiener
CIAS
12 CONTROL 5 de 5paginas
DE
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PAGINAS
EFECTIVA
S
REDACTADO POR REVISADO POR: APROBADO POR
FECHA DE FECHA DE REVISION FECHA DE APROBACION
REDACCIÓN
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DOCUMENTO REVISION
ORIGINAL COTROLADO NO 1.- Medio magnético
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SISTEMA GESTINO
X DE CALIDAD
Carpeta archivo POE-
sección química
sanguínea
REGISTRO DE CAMBIO
CAMBIO Nº FECHAS DE FECHAS DE REGISTRADO POR
CAMBIO REGISTRO