0020766682322c501V9.
NH3L
Ammonia
Información de pedido
Analizadores adecuados para el cobas c pack
ID del
20766682 322 Ammonia 150 tests Roche/Hitachi cobas c 311, cobas c 501/502
sistema 07 6668 2
20751995 190 Ammonia/Ethanol/CO2 Calibrator (2 x 4 mL) Código 688
20752401 190 Ammonia/Ethanol/CO2 Control Normal (5 x 4 mL) Código 100
20753009 190 Ammonia/Ethanol/CO2 Control Abnormal (5 x 4 mL) Código 101
Español tapa gris. Mezclar el casete cuidadosamente evitando la formación de
espuma. Colocar el casete en el analizador.
Información del sistema
Analizadores cobas c 311/501: Conservación y estabilidad
NH3L: ACN 478 NH3L
Analizadores cobas c 502: Sin abrir, a 2‑8 °C: véase la fecha de
NH3L: ACN 8478 caducidad impresa
Uso previsto en la etiqueta del
Test enzimático in vitro para la determinación cuantitativa de amoníaco en cobas c pack.
plasma humano en los sistemas Roche/Hitachi cobas c. En uso y refrigerado en el analizador: 8 semanas
Características1
El amoníaco se genera principalmente en el tracto gastrointestinal por el Obtención y preparación de las muestras
metabolismo de los compuestos nitrogenados. Un exceso de amoníaco Emplear únicamente tubos o recipientes adecuados para recoger y
puede ser tóxico para el sistema nervioso central. La síntesis de la urea en preparar las muestras.
el ciclo de Krebs‑Henseleit constituye un medio de eliminación del Sólo se ha analizado y considerado apto el tipo de muestra aquí indicado.
amoníaco por su metabolización a urea en el hígado. Plasma tratado con EDTA dipotásico, sin hemólisis ni lipemia.
La hiperamonemia en lactantes puede ser consecuencia de deficiencias IMPORTANTE
congénitas de las enzimas del ciclo de la urea o adquirirse como resultado
de enfermedades hepáticas agudas (como el síndrome de Reye) o No emplear plasma preparado con otros anticoagulantes.
crónicas (como la cirrosis). En los adultos, la determinación de No usar suero porque durante la coagulación puede formarse amoníaco.
concentraciones elevadas de amoníaco pueden contribuir al diagnóstico de Recoger la sangre en ayunas de una vena sin estasis. El paciente no debe
la insuficiencia o encefalopatía hepáticas como consecuencia de fumar antes de extraer la muestra. Llenar los tubos completamente y
hepatopatías avanzadas tales como la hepatitis vírica o la cirrosis. conservar permanentemente bien cerrados. Colocar inmediatamente en
Principio del test hielo y centrifugar, preferentemente a 4 °C. Realizar el test dentro de los
20-30 minutos tras la punción venosa.
Método enzimático con glutamato deshidrogenasa.2,3
Evitar la contaminación de las muestras con amoníaco proveniente del
La glutamato-deshidrogenasa (GLDH) cataliza la aminación reductora del humo de cigarrillo, del ajetreo en el laboratorio o en la habitación del
2‑oxoglutarato con NH4+ y NADPH para formar glutamato y NADP+. paciente, de recipientes de vidrio o del agua.
GLDH In vitro, las concentraciones de amoníaco pueden aumentar debido a la
descomposición de componentes del plasma que contienen nitrógeno. Una
NH4+ + 2‑oxoglutarato + NADH L‑glutamato + NADP+ + H2O fuente conocida de formación espontánea de amoníaco es la actividad
La concentración del NADP+
formado es directamente proporcional a la aumentada de la γ‑glutamiltransferasa que origina la descomposición de la
concentración de amoníaco. Se determina midiendo la reducción de la glutamina.3
absorbancia. Los tipos de muestra aquí indicados fueron analizados con tubos de
Reactivos - Soluciones de trabajo recogida de muestras seleccionados, comercializados en el momento de
efectuar el análisis, lo cual significa que no fueron analizados todos los
R1 Tampón BICINa): 330 mmol/L, pH 8.3; GLDH (microbiana): tubos de todos los fabricantes. Los sistemas de recogida de muestras de
≥ 234 µkat/L; 2‑oxoglutarato: 50 mmol/L; detergente; conservante; diversos fabricantes pueden contener diferentes materiales que, en ciertos
casos, pueden llegar a afectar los resultados de los análisis. Si las
estabilizador no reactivo muestras se procesan en tubos primarios (sistemas de recogida de
R3 NADPH: ≥ 1.0 mmol/L; conservante; tampón no reactivo muestras), seguir las instrucciones del fabricante de los tubos.
a) BICIN = N,N‑bis(2‑hidroxietil‑glicina) Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de realizar el
ensayo.
R1 está en la posición A y R3 está en la posición B.
Material suministrado
Medidas de precaución y advertencias
Consultar la sección "Reactivos - Soluciones de trabajo" en cuanto a los
Sólo para el uso diagnóstico in vitro. reactivos suministrados.
Observe las medidas de precaución usuales para la manipulación de
reactivos. Material requerido adicionalmente (no suministrado)
Elimine los residuos según las normas locales vigentes. ▪ Consultar la sección “Información de pedido”
Ficha de datos de seguridad a la disposición del usuario profesional que la
solicite. ▪ Equipo usual de laboratorio
Preparación de los reactivos Realización del test
Desenroscar solamente la tapa R3 de color gris con la herramienta para Para garantizar el funcionamiento óptimo del test, observe las instrucciones
abrir/cerrar (No. del GMMI 04857933‑190). Guardar la tapa a rosca de la presente metódica referentes al analizador empleado. Consulte el
evitando cualquier tipo de contaminación. Guardar el casete de reactivo en manual del operador apropiado para obtener las instrucciones de ensayo
un ambiente libre de humo de tabaco, de limpiadores que contienen específicas del analizador.
amoníaco y de cualquier tipo de gases de escape. El casete debe Roche no se responsabiliza del funcionamiento de las aplicaciones no
guardarse a temperatura ambiente en un lugar en que no pueda caerse sin validadas por la empresa. En su caso, el usuario se hace cargo de su
que esté cubierto. Proteger el casete de cualquier tipo de suciedad. definición.
Proteger el casete abierto de la luz solar (no guardarlo en una ventana). Al
cabo de un almacenamiento de 24 horas, cerrar el frasco R3 con la misma
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NH3L
Ammonia
Aplicación para plasma Control de calidad
Para el control de calidad, emplear los controles indicados en la sección
Definición del test en el analizador cobas c 311 “Información de pedido”.
Tipo de medición 2 puntos Adicionalmente pueden emplearse otros controles apropiados.
finales Adaptar los intervalos y límites de control a los requisitos individuales del
Tiempo de reacción/ Puntos 10 / 25‑57 laboratorio. Los resultados deben hallarse dentro de los límites definidos.
de medición Cada laboratorio debería establecer medidas correctivas a seguir en caso
de que los valores se sitúen fuera de los límites definidos.
Longitud de onda (sub/princ) 700/340 nm Cumplir con las regulaciones gubernamentales y las normas locales de
Dirección de reacción Disminución control de calidad pertinentes.
Unidades µmol/L (µg/dL) Cálculo
Pipeteo de reactivo Diluyente Los analizadores Roche/Hitachi cobas c calculan automáticamente la
concentración de analito de cada muestra.
(H2O)
R1 40 µL 32 µL Factor de conversión: µmol/L x 1.703 = µg/dL
R3 20 µL 20 µL Limitaciones del análisis - interferencias
Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % de los valores iniciales con una
concentración de amoníaco de 50 µmol/L (85 µg/dL).
Muestra Diluyente Ictericia:4 Sin interferencias significativas hasta un índice I de 10 para la
(H2O) bilirrubina conjugada y de 30 para la bilirrubina sin conjugar (concentración
Normal 20 µL – – de la bilirrubina conjugada: aprox. 171 µmol/L o 10 mg/dL; concentración
de la bilirrubina sin conjugar: aproximadamente 513 µmol/L o 30 mg/dL).
Disminuido 10 µL – – Hemólisis:4 Sin interferencias significativas hasta un índice H de 200
Aumentado 20 µL – – (concentración de hemoglobina: aproximadamente 124.2 µmol/L o
200 mg/dL). La contaminación con eritrocitos provoca resultados elevados
Definición del test en los analizadores cobas c 501/502 siendo mayor la concentración de analito en éstos que en el plasma
normal. La magnitud de la interferencia depende del contenido de analito
Tipo de medición 2 puntos en los eritrocitos lisados.
finales Lipemia (nativa):4 Sin interferencias significativas hasta el índice L de 50.
Tiempo de reacción/ Puntos 10 / 36‑70 Existe una mínima correlación entre el índice L (correspondiente a la
de medición turbidez) y la concentración de triglicéridos.
γ‑globulina: la γ‑globulina aumenta significativamente la concentración
Longitud de onda (sub/princ) 700/340 nm aparente de amoníaco a partir de una concentración de 3 g/dL añadida a
Dirección de reacción Disminución una mezcla de plasma humano.
Unidades µmol/L (µg/dL) Fármacos: No se han registrado interferencias con paneles de fármacos de
uso común en concentraciones terapéuticas.5,6
Pipeteo de reactivo Diluyente Excepciones: En concentraciones terapéuticas, la cefoxitina provoca
(H2O) valores de amoníaco artificialmente altos e Intralipid arroja resultados
R1 40 µL 32 µL artificialmente bajos.
En concentraciones fisiológicas, la sulfasalazina y la sulfapiridina
R3 20 µL 20 µL plasmáticas pueden llevar a resultados falsos. En concentraciones
Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra terapéuticas, el Temozolomide puede provocar valores falsamente bajos.
Muestra Diluyente En casos muy raros pueden obtenerse resultados falsos debidos a la
gammapatía, particularmente del tipo IgM (macroglobulinemia de
(H2O) Waldenstroem).7
Normal 20 µL – – Para el diagnóstico, los resultados del test siempre deben interpretarse
Disminuido 10 µL – – teniendo en cuenta la anamnesis del paciente, el análisis clínico así como
los resultados de otros exámenes.
Aumentado 20 µL – – ACCIÓN REQUERIDA
Calibración Programación de lavado especial: Se requieren ciclos de lavado especial
en caso de combinar ciertas pruebas en los sistemas Roche/Hitachi
Calibradores S1: H2O cobas c. La versión más actual de la lista de contaminaciones por arrastre
se encuentra en la metódica NaOHD/SMS/Multiclean/SCCS o la metódica
S2: Calibrador Ammonia/Ethanol/CO2 NaOHD/SMS/SmpCln1+2/SCCS. Para mayor información consulte el
Modo de calibración Lineal manual del operador. Analizador cobas c 502: Todos los pasos de lavado
necesarios para evitar la contaminación por arrastre están disponibles a
Intervalo de calibraciones Calibración a 2 puntos través de cobas link de modo que no se requiere la entrada manual de los
datos.
- después de cambiar el cobas c pack
En caso de que sea necesario, implemente el lavado especial
- calibración automática del blanco cada destinado a evitar la contaminación por arrastre antes de comunicar
3 días los resultados del test.
- si fuera necesario según los Límites e intervalos
procedimientos de control de calidad Intervalo de medición
Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a un 10‑700 µmol/L (17‑1192 µg/dL)
estándar primario. Determinar las muestras con concentraciones superiores a través de la
función de repetición. Con la función de repetición, las muestras se diluyen
1:2. Los resultados de las muestras diluidas usando la función de repetición
del ciclo se multiplican automáticamente por el factor 2.
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Ammonia
Límites inferiores de medición 4 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of
Límite inferior de detección del test Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem
1986;32:470-475.
10 µmol/L (17 µg/dL)
5 Breuer J. Report on the Symposium “Drug effects in Clinical Chemistry
El límite de detección inferior equivale a la menor concentración medible de Methods”. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386.
analito que puede distinguirse de cero. Se calcula como el valor situado a
tres desviaciones estándar por encima del estándar más bajo (estándar 1 + 6 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry:
3 DE, repetibilidad, n = 21). recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug
interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385.
Valores teóricos
7 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry
Plasma con EDTA8 assays: mechanisms, detection and prevention.
Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243.
Mujeres 11‑51 µmol/L (18.7‑86.9 µg/dL)
8 Da Fonseca-Wollheim F. Direkte Plasmaammoniakbestimmung ohne
Hombres 16‑60 µmol/L (27.2‑102 µg/dL) Enteiweissung. Z Klin Chem Klin Biochem 1973;11:426-431.
Cada laboratorio debería comprobar si los intervalos de referencia pueden 9 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure
aplicarse a su grupo de pacientes y, en caso necesario, establecer sus for method transformation. Application of linear regression procedures
propios valores. for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin
Datos específicos de funcionamiento del test Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790.
A continuación, se indican los datos representativos de funcionamiento de En la presente metódica se emplea como separador decimal un punto para
los analizadores. Los resultados de cada laboratorio en particular pueden distinguir la parte entera de la parte fraccionaria de un número decimal. No
diferir de estos valores. se utilizan separadores de millares.
Precisión Símbolos
La precisión se determinó empleando muestras humanas y controles según Roche Diagnostics emplea los siguientes símbolos y signos adicionalmente
un protocolo interno con repetibilidad (n = 21) y precisión intermedia a los indicados en la norma ISO 15223‑1.
(3 alícuotas por serie, 1 serie por día, 21 días). Se han obtenido los
siguientes resultados: Contenido del estuche
Volumen tras reconstitución o mezcla
Repetibilidad Media DE CV
µmol/L (µg/dL) µmol/L (µg/dL) % La barra del margen indica cambios o suplementos significativos.
© 2014, Roche Diagnostics
AEC Control N 60.7 (103) 1.4 (2) 2.3
AEC Control A 202 (344) 2 (3) 0.8
Plasma humano 1 28.6 (48.7) 2.5 (4.3) 8.8
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim
Plasma humano 2 585 (996) 1 (2) 0.2 [Link]
Distribuido en los [Link]. por:
Precisión intermedia Media DE CV Roche Diagnostics, Indianapolis, IN, [Link].
Apoyo técnico al cliente estadounidense 1-800-428-2336
µmol/L (µg/dL) µmol/L (µg/dL) %
AEC Control N 56.9 (97.1) 2.8 (4.8) 4.9
AEC Control A 203 (346) 4 (7) 1.8
AEC Control N dil. 1:2 28.1 (47.7) 2.6 (4.4) 9.4
AEC Calibrator 318 (542) 5 (9) 1.5
Comparación de métodos
Se han comparado los valores de amoníaco en muestras de plasma
humano obtenidos en un analizador Roche/Hitachi cobas c 501 (y) con los
obtenidos con el reactivo Roche/Hitachi correspondiente en un analizador
Roche/Hitachi 917/MODULAR P (x).
Número de muestras (n) = 171
Passing/Bablok9 Regresión lineal
y = 0.996x + 5.11 µmol/L y = 1.007x + 4.06 µmol/L
τ = 0.970 r = 0.999
La concentración de las muestras se situó entre 18.1 y 444 µmol/L
(30.8-756 µg/dL).
Referencias bibliográficas
1 Balistreri WF, Rej R. Liver function. In: Burtis CA, Ashwood ER, eds.
Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry. 4th [Link]: WB
Saunders 1996;539-568.
2 Van Anken HC, Schiphorst ME. A kinetic determination of ammonia in
plasma. Clin Chim Acta 1974;56:151-157.
3 Da Fonseca-Wollheim F. Deamidation of glutamine by increased
plasma γ-glutamyltransferase is a source of rapid ammonia formation in
blood and plasma of rapid ammonia formation in blood and plasma
specimens. Clin Chem 1990;36:1479-1482.
2014-05, V 9.0 Español 3/3
