Genética Humana: UNIDAD 1 Clase 2
Instituto de Salud Comunitaria UNAHUR
Carrera: Licenciatura en obstetricia
Cursada: Cuatrimestral (1er y 2do cuatrimestre)
Carga horaria total: 64 h.
Carga horaria semanal: 4 h
Modalidad: Teórico-Práctica
Docentes a cargo:
Dra. Adriana Pietrelli
Dra. Maria Cruz Miraglia
Lic. Jesica Mora
Lic. Magali Valenzano
REPASO CLASE 1
¿Qué temas vimos en la Clase 1?
La célula. Todas las células son
originadas a partir de
El material genético: Donde se ubica y la reproducción de
como se organiza. células preexistentes.
REPASO CLASE 1
Acidos nucleicos: ADN y ARN
Estructuralmente, son
polímeros de
nucleótidos, que
consisten en bases de
purina y pirimidina
ligadas a azúcares
fosforilados.
REPASO CLASE 1
ADN ARN
Estructura: La estructura secundaria de la Estructura: Primaria, una única cadena
molécula de ADN es helicoidal (a derecha), polar, (monocatenaria). Puede tener estructura secundaria y
antiparalela y complementaria. terciaria en algunos casos.
Ubicación: Cromosomas, núcleo, mitocondria. Ubicación: Nucleolo, ribosomas, citoplasma.
REPASO CLASE 1
El Dogma Central de a Biología Molecular
Replicación • El material hereditario almacena la
ADN ADN información e instrucciones para rasgos
ADN y funciones.
• La información genética debe poder
copiarse con fidelidad para
Transcripción autoperpetuarse mediante el proceso de
ADN ARN
replicación.
ARN
• En el proceso de transcripción se
Traducción produce un ARN que sirve de molde
ARN PROTEINA para sintetizar una proteína que
Proteína
finalmente ejecuta su función.
• La traducción es el proceso que
finalmente expresa la información
vinculando el genotipo con el fenotipo.
La capacidad de autorreproducirse es la
característica fundamental de las células vivas
En el proceso se duplica con exactitud
el genoma y luego segregar las copias
con precisión en dos células hijas
genéticamente idénticas.
La replicación es el proceso
por el cual una célula duplica
su ADN antes de dividirse.
Ocurre solamente durante la
fase de síntesis del ciclo
celular en células eucariotas y
previo a la división en células
procariotas.
La célula se
«arresta» y
sale del ciclo
celular
Replicación del ADN
• Utiliza el principio básico de apareamiento siguiendo la ley de Chargaff
(Modelo básico de replicación)
• Es “Semiconservativa”
• El ADN solo puede leerse en sentido 3’ 5’ por lo cual la copia se fabrica
en sentido 5’ 3’
Cada una de las dos cadenas actúa como molde que
dirige el ensamblado de bases complementarias para
formar una doble hélice idéntica a la original.
Hélice original
Hélices luego de un
ciclo de replicación
Es “Semiconservativa”
porque la doble hélice de la
molécula de ADN de la
célula hija contiene una
cadena de la molécula
original y una cadena
sintetizada de nuevo.
Replicación del ADN
• Utiliza el principio básico de apareamiento siguiendo la ley de Chargaff
(Modelo básico de replicación)
• Es “Semiconservativa”
• Durante la síntesis siempre se adicionara un nucleótido a la posición 3’-
OH de la desoxirribosa. Esto significa que el ADN solo puede leerse en
sentido 3’ 5’ por lo cual la copia se fabrica en sentido 5’ 3’.
• Consta de etapas de INICIACION, ELONGACION y TERMINACION.
• La fabricación de la copia se realiza con alta fidelidad y rapidez.
VER VIDEOS COMPLEMENTARIOS 1, 2 y 3
Bases moleculares
de la Replicación
▪ Consta de un origen de replicación. Origen de
replicación
▪ Las moléculas circulares del ADN
bacteriano tiene un único origen de
replicación mientras que los
cromosomas lineales de las células
eucariotas tienen varios orígenes desde
donde se iniciará la replicación
simultáneamente.
▪ Cada burbuja de replicación tendrá 2
horquillas de replicación que irán
desenrollando la hélice de ADN en Nueva Cadena de
ADN sintetizada
direcciones opuestas (bidireccional).
Proceso en procariotas
▪ Cada burbuja de replicación tendrá un cadena parental 5’ 3’ y
una cadena parental 3’ 5’. Por lo tanto las nuevas cadenas de
ADN tendrán orientaciones opuestas a las parentales.
▪ La síntesis siempre es en dirección 5’ 3’. Por eso la “horquilla
de replicación” es asimétrica y tiene una cadena líder que se
sintetiza en forma continua (5´ 3’) y la otra, en forma
discontinua a partir de fragmentos de Okazaki (3’ 5’).
▪ La cadena retrasada necesita “cebadores” de ARN que luego son
removidos y reemplazados por ADN.
▪ Al origen de replicación se une una proteína iniciadora que
desenrolla el ADN. Se produce la apertura de la hélice. La enzima
ADN helicasa rompe los puentes de hidrógenos entre ambas
cadenas complementarias. También actúan proteínas SSB que
estabilizan esta separación e imposibilitan que vuelvan a
aparearse. Por último la ADN girasa relaja la tensión que se va
acumulando por la apertura de la horquilla. INICIACION
CADENA RETRASADA
Fragmentos de Okazaki
o DISCONTINUA
CADENA LIDER o
CONTINUA
▪ Al comienzo de la etapa de ELONGACION, la
primasa (ARN polimerasa) sintetiza un
fragmento corto de nucleótidos de ARN
(primer o cebador) que aporta el grupo 3’-OH
sobre el que se unen luego los nucleótidos de
ADN.
▪ La ADN polimerasa III comienza la síntesis
del ADN en dirección 5’ 3’ al añadir
nucleótidos nuevos al extremo 3’ de la
cadena en formación. La ADN polimerasa I
posee actividad de exonucleasa 5´ 3’ que
permite principalmente remover los primer
de ARN y rellena los espacios. La ADN
polimerasa III también tiene actividad
exonucleasa 3’ 5´ para corrección de
síntesis.
▪ La ADN ligasa se encarga de ligar el último
nucleótido agregado por la ADN polimerasa I
con el primero adicionado por la ADN
polimerasa III.
▪ Dos Horquilla de replicación se encuentran
en una región para TERMINACION del
proceso. Algunas proteínas frenan el
movimiento de las helicasas.
• La fabricación de la copia se realiza con alta fidelidad y rapidez. La tasa de
error global es menos de 1 cada mil millones de nucleótidos.
Errores en la Replicación
Proceso en procariotas
Proceso en eucariotas
La replicación en el ADN eucariota es similar al bacteriano visto recién pero…..
• El tamaño es más grande por lo que requiere muchos orígenes de replicación.
• El cromosoma es lineal.
• ADN está asociado a histonas.
PROCARIOTA EUCARIOTA
Único origen de replicación (Secuencia denominada Ori C). Múltiples orígenes simultáneamente (ricas en secuencias A-T) debido a
menor cantidad puentes de hidrógeno.
Una sola burbuja de replicación. Múltiples burbujas de replicación.
La proteína iniciadora en la DnaA en E. Coli Complejo multiproteico ORC (Origin Recognition Complex) se une a las
secuencias y comienza a abrir la hélice.
Movimiento de la Horquilla BIDIRECCIONAL Movimiento de la Horquilla BIDIRECCIONAL
Tamaño Coordinación de la replicación a través de factor permisivo de la
replicación
ADN polimerasa III y II tienen como función la polimerización de Las enzimas responsables del procesos de replicación tienen funciones
las nuevas otras. Contiene otras 3 ADN polimerasas con similares a las descriptas para la replicación del ADN procariota pero
funciones específicamente de reparación. difieren en cantidad y funciones.
Telómeros
¿Cómo se resuelve la replicación ADN lineal
en los extremos de la molécula lineal? Cadena
Origen Primer
RETRASADA
▪ La telomerasa se encarga de la replicación de los extremos de
los cromosomas, asegurando que el extremo 3´ se pueda
copiar. Cadena
CONTINUA
▪ Los telómeros presentan secuencias repetitivas ricas en G.
Primer
Primer
ADN
circular
Espacio por la
remoción del
primer
▪ La enzima telomerasa es una ribozima compuesta por proteína y ARN.
La secuencia de ARN es complementaria a la región protuberante y
sirve de molde para que la polimerasa de la telomerasa realice la
síntesis de ADN complementaria.
▪ Las células en crecimiento tienen alta actividad de telomerasa
mientras que las células somáticas tienen baja actividad de
telomerasa que van generando el acortamiento de los cromosomas.
▪ La fecha de caducidad de una célula depende de la actividad de la
telomerasa. Vínculo a envejecimiento y cáncer.
El Dogma Central de a Biología Molecular
Replicación • El material hereditario almacena la
ADN ADN información e instrucciones para rasgos
ADN y funciones.
• La información genética debe poder
copiarse con fidelidad para
Transcripción autoperpetuarse mediante el proceso de
ADN ARN
replicación.
ARN
• En el proceso de transcripción se
Traducción produce un ARN que sirve de molde
ARN PROTEINA para sintetizar una proteína que
Proteína
finalmente ejecuta su función.
• La traducción es el proceso que
finalmente expresa la información
vinculando el genotipo con el fenotipo.
Transcripción de ADN a ARN
• Proceso que utiliza como molde una molécula de ADN para sintetizar una
molécula de ARN.
• Es un proceso altamente selectivo. La célula debe determinar cuando
necesitará transcribir ciertos genes de acuerdo al momento de la vida, en
determinados tejidos dependiendo de las necesidades del organismo.
• Los mecanismo que controlan el inicio de la transcripción de un gen son
muy complejos y requiere de determinadas secuencias de ADN y multitud
de factores que las reconozcan.
VER VIDEO COMPLEMENTARIOS 4
Bases moleculares
de la transcipción
▪ Sigue proceso similar a la replicación
donde una hebra de ADN sirve de molde
para que una enzima, ARN polimerasa,
vaya añadiendo nucleótidos
complementarios en la dirección 5’ 3’.
Sin embargo, en la transcripción solo una
de las hebras de ADN servirá como molde.
Proceso en procariotas
▪ Los genes que codifican para proteínas son solo una porción de toda la molécula de ADN y contienen
toda la información necesaria para la síntesis de una proteína o un ARN.
▪ Los genes se encuentran adyacentes
en el genoma y pueden expresarse
como una unidad ¨Operón¨.
▪ Presenta otros segmentos o
secuencias reguladoras.
▪ Presentan plásmidos que contienen
genes para replicación y otras
funciones celulares no esenciales.
Proceso en procariotas
▪ La unidad de transcripción de un gen consta de tres regiones:
1) Promotor (posición -1): Señal de comienzo para que la ARN polimerasa se una a una de las dos hebras.
El promotor presenta dos módulos a 10 y 35 pares de bases hacia 5' (corriente arriba) del sitio de inicio,
que se denominan secuencias consenso (5’UTR)
2) Región codificante continua (Posición +1)
3) Señal de finalización
▪ Las enzimas encargadas de transcribir los
genes deben reconocer señales en el
cromosoma que indican el sitio de inicio y
de fin de la transcripción.
Proceso en procariotas
PASO 1: Iniciación
En bacterias, la ARN polimerasa es un
complejo oligomérico integrado por
distintas subunidades.
La subunidad σ es la que reconoce el lugar
de inicio de la transcripción.
Cuando ésta se integra al complejo, se
forma la holoenzima (enzima funcional) y da
comienzo al proceso.
Proceso en procariotas
PASO 2: Elongación
Luego de que la ARN polimerasa se unió al promotor comenzará a desenrollar las cadenas
de ADN y se iniciará la síntesis de ARN.
En este proceso no es necesario un cebador o primer para que la enzima actúe como la
ADN-polimerasa. Además, la ARN polimerasa no tiene actividad exonucleasa ya que no
debe perpetuarse entre células.
Se generan tramos de hélices híbridas
entre ARN sintetizado y ADN molde.
La ARN polimerasa continúa el proceso
hasta encontrar una secuencia de
terminación.
La separación de las cadenas La misma ARN Pol actúa como
abarca un trecho de unos 18 “desenrollasa” y también restablece la
pares de bases.
doble hélice después de la transcripción.
Proceso en procariotas
PASO 3: Terminación
Una vez que la ARN polimerasa ha copiado la secuencia de terminación, se “desprende” del
ADN finalizando la transcripción.
Poco antes del sitio final de
transcripción existen secuencias
repetidas en orientación inversa. De
este modo, la cadena sintetizada
puede autoaparearse y formar una
horquilla que retrasa o detiene el
avance de la ARN polimerasa.
Además, en este proceso actúan otros factores como el Rho (ρ) que promueven la liberación
de la cadena de ARNm sintetizada.
Proceso en eucariotas: Diferencias
1. Las células procariotas tienen una única RNA polimerasa formada por varias
subunidades mientras que en las células eucariotas existen múltiples RNA
polimerasas en función del ARN transcrito. Cada una de estas enzimas va a sintetizar
un tipo específico de ARN.
2. Existen diferencias en el proceso de transcripción.
PASO 1: Iniciación Requiere de factores de transcripción generales (TFIIA, TFIIB, etc.)
que son proteínas que se unen a la secuencia consenso (CAJA
TATA) en la posición -25 del promotor, identificando el inicio de la
transcripción.
Subunidad TBP de TFIID promueve unión de RNA polimerasa II al
promotor.
Otros factores formaran el complejo de iniciación de la
transcripción.
También presentará potenciadores o ¨Enhancers¨.
PASO 2: Elongación
Se fosforila una porción de la RNA polimerasa por factores FTIIH cambiando su conformación y
permitiendo que deje de unirse fuertemente al promotor y continúe la transcripción del gen.
La fosforilación hace la RNA polimerasa se separe del complejo de iniciación que queda unido al
promotor donde se podrá iniciar la transcripción de un nuevo mensajero.
PASO 3: Terminación
No existe una señal de finalización.
La RNA polimerasa continua la transcripción del gen en secuencias no codificantes 3’ que luego
serán procesados por otra enzimas (cola poli A).
3. La organización de la unidad transcripcional es diferente entre procariotas y
eucariotas.
Estructura de la unidad de transcripción de un gen
consta de las siguientes regiones:
1) Región Reguladora
2) Región Estructural:
Región codificante:
INTRONES: Secuencias de ADN
que no codifican para ninguna
proteína.
EXONES: Secuencias Codificantes.
4. Otra diferencia se presenta en que los RNAm transcritos de la célula eucariota van a
sufrir una seria de modificaciones ¨Proceso de maduración¨ que dejará al ARN
preparado para ser exportado al citoplasma donde podrá realizar su función.
Modificaciones post-transcripcionales
En eucariotas, el ARNm precursor
(copia exacta de la secuencia de
ADN) sufre modificaciones antes de
convertirse en un ARNm maduro. EUCARIOTA PROCARIOTA
1)Adición del cap: se añade un
nucleótido modificado en el
extremos 5'
2)Poliadenilación: adición de una
cola de adeninas en el extremo 3'
Splicing: proceso de maduración mediante el cual se eliminan
los intrones.
● Partículas ribonucleoproteicas nucleares (snRNP) se
unen al transcrito primario y reconocen a los
intrones que comienzan con 5’GU y terminan con AG
3’.
● Realiza el corte y el empalme.
● Se forma un complejo llamado Spliceosoma: RNPnp
(ribonucleoproteínas) + preRNAm
● Una región de RNPnp reconoce las secuencias
conservadas por complementariedad de bases y
produce un corte y posterior unión de los extremos
de los exones adyacentes.
Regulación Génica
4. Otra diferencia está dada por la localización de los procesos de transcripción y
traducción. Esta separación espacio-temporal es crucial para el control de la expresión
génica en los organismos superiores.
TRANSCRIPCIÓN
TRADUCCIÓN
Escribe un gen
Traduce el ARNm en una MADURACIÓN
transcribiendolo de su
secuencia de péptidos que Edición y modificación de
idioma original (ADN) en
van a formar una proteína. A las proteínas producidas
ARNm.
partir del código genético y para que sean
Objetivo: sacar la por medio del ARNt. funcionales.
información del núcleo Objetivo: producir una
sobre como sintetizar una proteína.
proteína.