I.

INTRODUCCION

OBJETIVOS:
1. Conocer y manejar adecuadamente las partes del microscopio
2. Aprender a enfocar correctamente en el microscopio
3. Conocer los cuidados del microscopio
4. Aprender a preparar una muestra adecuadamente para la observación al
microscopio
 II. REVISION LITERARIA

II.1 Microscopio
El microscopio es un instrumento que permite observar
objetos no perceptibles al ojo humano. Esto se logra mediante un
sistema óptico compuesto por lentes, que forman y amplifican la imagen
del objeto que se está observando. Este término surge en el siglo XVII y
deriva de las palabras griegas mikrós (pequeño) y skopéoo (observar).
Se distinguen dos tipos de microscopio, basados en el
número de lentes y su posición. Estos son:
 Microscopio simple: conocido comúnmente como lupa. Está constituido
por un solo lente, o un sistema de lentes que actúan como si fuera una
lente simple.
 Microscopio compuesto: se constituye por la combinación de dos o más
sistemas de lentes convergentes: uno, próximo al ojo del observador, el
ocular y el otro próximo al objeto, denominado objetivo.

El microscopio compuesto consta de dos partes, una parte

mecánica que tiene la finalidad de sostener la preparación a examinar y
soportar todo el sistema óptico del microscopio. Y una parte óptica que
considera los dos sistemas de lentes convergentes centrados sobre un
eje óptico común, denominado ocular y objetivo. También esta parte
integra un sistema de iluminación que facilita la observación
microscópica.
II.1.1 Componentes de un microscopio compuesto
 Partes de un Microscopio

 Pie: soporta el resto del microscopio, está constituido por una

estructura metálica pesada.
 Platina: es la estructura que sostiene el preparado que se desea
observar.
 Tubo: en él está instalado el sistema óptico. Actualmente son
corrientes los aparatos binoculares (dos oculares) que facilitan la
visión con los dos ojos y los revólveres porta objetivos, con los cuales
se pueden cambiar los objetivos instantáneamente, sin desenfocar la
preparación. El enfoque
se hace mediante unos tornillos llamados macrométricos y micrométricos,
que permiten desplazamientos verticales groseros y finos, respectivamente.
 Objetivos: Se insertan en el revólver del microscopio y se distinguen
dos tipos:
 Objetivos en seco: En éstos, el aire se interpone entre la lente
y el preparado. Los objetivos más comúnmente utilizados son de
4, 10, y 40 x.
 Objetivos de inmersión: Se distinguen de los anteriores
porque entre la lente y el preparado se debe interponer un
medio transparente con un índice de refracción (n) superior al
del aire (n = 1), y semejante al del vidrio (n = 1,5). El medio
utilizado es un aceite de inmersión, como por ejemplo el aceite
de cedro. Son aptos para la observación de bacterias, finas
estructuras, etc.
 Ocular: Permite observar la imagen del objeto formada por el
objetivo, actuando como una lupa. Está compuesta por dos lentes: la
inferior o colectora, y la superior, o lente ocular.
 Sistema de iluminación: Situado debajo de la platina, está formado
por:
 Lámpara ó espejo de iluminación.
 Condensador: Posee la función de concentrar sobre el
preparado los rayos luminosos procedentes de la fuente de luz.
 Diafragma: Situado debajo del condensador, sirve para graduar
la cantidad de luz que llega al objeto.
 Filtros de luz: Son placas de vidrios, coloreadas, que dejan
pasar las radiaciones de longitud de onda deseadas,
absorbiendo las restantes.

Manejo del microscopio óptico

1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo
y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogió
correctamente en el uso anterior, ya debería estar en esas
condiciones.
2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las
pinzas metálicas.
3. Comenzar la observación con el objetivo de 4x (ya está en
posición) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparación
es de bacterias.
4. Para realizar el enfoque:

a) Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación,

empleando el tornillo macrométrico. Esto debe hacerse
mirando directamente y no a través del ocular, ya que
se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la
preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos.
b) Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando
lentamente el objetivo de la preparación con el
macrométrico y, cuando se observe algo nítida la
muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque
fino.
5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi
enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el
micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de
objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver
a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operación desde
el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de
la preparación y por ello es fácil que ocurran dos tipos de
percances: incrustarlo en la preparación si se descuidan las
precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersión
si se observa una preparación que ya se enfocó con el
objetivo de inmersión.
6. Empleo del objetivo de inmersión:

a) Bajar totalmente la platina.

b) Subir totalmente el condensador para ver claramente el
círculo de luz que nos indica la zona que se va a
visualizar y donde habrá que echar el aceite.
c) Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión
dejándolo a medio camino entre éste y el de x40.
d) Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre
el círculo de luz.
 e) Terminar de girar suavemente el revólver hasta la
posición del objetivo de inmersión.
f) Mirando directamente al objetivo, subir la platina
lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite.
En ese momento se nota como si la gota ascendiera y
se adosara a la lente.
g) Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La
distancia de trabajo entre el objetivo de inmersión y la
preparación es mínima, aun menor que con el de 40x
por lo que el riesgo de accidente es muy grande.
h) Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la
preparación, ya no se puede volver a usar el objetivo
40x sobre esa zona, pues se mancharía de aceite. Por
tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la
platina y repetir la operación desde el paso 3.
i) Una vez finalizada la observación de la preparación se
baja la platina y se coloca el objetivo de menor
aumento girando el revólver. En este momento ya se
puede retirar la preparación de la platina. Nunca se
debe retirar con el objetivo de inmersión en posición de
observación.
j) Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado
empleando un papel especial para óptica. Comprobar
también que el objetivo 40x está perfectamente limpio.

Cuidado del microscopio

El microscopio es un valioso instrumento. Para que pueda servir eficazmente
año tras año, es necesario que se le dispense el cuidado adecuado. Por este
motivo, recuerde las siguientes indicaciones:
 Evite mover el microscopio cuando la lámpara esté encendida, ya que
el filamento de la lámpara incandescente es extremadamente sensible.
 Para desplazarlo a distancia, emplee los correspondientes tornillos de
fijación.
 No toque las lentes de oculares y objetivos con los dedos, para evitar
mancharlos con su grasa natural.
 No cambie de lugar su microscopio, ni las lentes.
  Luego de usar el microscopio, límpielo con un paño de lino, libre de
polvo, o con algodón hidrófilo. Verifique que no hayan quedado
preparados sobre la platina.
 Déjelo con el objetivo de menor aumento, la platina lo más próxima
posible a él, y protegido con la cubierta correspondiente.

II.2 Preparaciones Microscópicas

Una preparación microscópica es el primer paso a realizar para
el estudio de muestras de tipo biológico. Es un examen que nos proporciona
datos, como la presencia de microorganismos, su morfología, movilidad y
características estructurales.
Debemos tomar en cuenta que a través del microscopio sólo se
pueden observar objetos que dejen pasar los rayos de luz, por esta razón los
preparados deben de ser lo más delgado y transparente posible, en el caso
que se realice un preparado grueso sólo nos permite observar una mancha
negra.
Para realizar preparaciones microscópicas, los portaobjetos y
cubreobjetos deben limpiarse antes de usarse; un buen método es
guardarlos en alcohol, y antes de utilizarles, secarlos con un paño limpio y
libre de grasa.
Métodos empleados para las preparaciones
microscópicas
|
MX

Preparados Coloración

En Fresco En Seco Simple Diferencial

Obs. Partes  Diferenciar

de la Célula Células

 Diferenciar
partes
Célulares