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Citología y PAAF en Veterinaria

La citología diagnóstica mediante punción aspiración con aguja fina (PAAF) es un método confiable, inocuo y barato para obtener muestras de tejidos de manera poco invasiva. La PAAF implica insertar una aguja en la masa a biopsiar y aspirar material celular para analizarlo microscópicamente. El resultado del análisis depende de la habilidad del profesional para obtener una muestra representativa y de la correcta interpretación de la misma.
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Citología y PAAF en Veterinaria

La citología diagnóstica mediante punción aspiración con aguja fina (PAAF) es un método confiable, inocuo y barato para obtener muestras de tejidos de manera poco invasiva. La PAAF implica insertar una aguja en la masa a biopsiar y aspirar material celular para analizarlo microscópicamente. El resultado del análisis depende de la habilidad del profesional para obtener una muestra representativa y de la correcta interpretación de la misma.
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Que es la Citología diagnostica y el método de Punción aspiración con aguja fina

(PAAF)

Paula Nicoll Andrade Perafan


Pregrado en Bacteriología y Laboratorio Clínico
PaulaNicollAndrade - correo

La citología es la ciencia que se ocupa del estudio de las células de un tejido con
independencia de la arquitectura de la lesión y de la disposición de las células en dicha lesión.
La citología diagnostica no exfoliativa o citología exfoliativa artificial se ocupa del estudio de
células que han sido obtenidas mediante distintos métodos de extracción1.
La citología como una herramienta de diagnóstico en medicina veterinaria, continúa
expandiéndose, es un método confiable para obtener un diagnóstico tisular, lo menos
invasivamente posible, con la citología el clínico se enfrenta a la responsabilidad no solo de
recoger una muestra representativa adecuada, sino también a interpretar las láminas que han
pasado un proceso de tinción. Existen cuatro métodos de toma de muestra en citología;
Punción por aspiración de aguja fina, Impronta, Raspado e Hisopado2.
La punción aspiración con aguja fina es el método más usado en la práctica clínica para
obtener muestras de masas sólidas tanto superficiales como profundas (órganos o lesiones
solidas). El material necesario para su realización es sencillo (una aguja de 22 gauge y una
jeringa de 10, portaobjetos y productos de tinción citológica) y la técnica es rápida (tanto en
lo que respecta a la toma y preparación de la muestra como a la emisión del diagnóstico),
inocua (la morbilidad es insignificante y no suele haber complicaciones) y barata, pudiendo
realizarse sin anestesia ni sedación en pacientes ambulatorios 3, tanto humanos como
animales.
Aunque se encuentran más estudios en seres humanos que en veterinaria, a lo largo de la
historia, principalmente en Colombia, han sido muchos los casos donde se han obtenido
buenos resultados, mediante este método. Las masas subcutáneas se muestrean con PAAF y
aquellas ubicadas en órganos y cavidades se deben muestrear por PAAF guiada por ecografía
o centesis 4.
¿Es fiable el diagnóstico de la citología no exfoliativa mediante PAAF?, depende de la
persona que realiza la toma de la muestra, ya que es un factor esencial en la obtención de
muestras adecuadas, y de la interpretación del resultado. Un error común al extender la
muestra obtenida por PAAF, es depositarla con amplia distancia entre la aguja y la lámina;
esto genera gotas por fuera de la lámina o muchas gotas dispersas en la placa que tienden a
secarse rápidamente y no permiten elaborar el extendido. En condiciones ideales, se debe
producir una sola gota que debe extenderse inmediatamente.
Además, los resultados, confirman lo expresado por varios autores para el diagnóstico
humano o animal, quienes han demostrado que la PAAF posee una alta sensibilidad y
especificidad en el diagnóstico de distintos procesos patológicos en prácticamente todas las
regiones anatómicas5. Por lo tanto, se concluye que la fiabilidad diagnóstica de la citología
mediante PAAF es la probabilidad de que los diagnósticos emitidos sean certeros.
¿Cuál es el protocolo para la toma de muestra por medio de PAAF? Se preparará la zona
donde se realizará la punción. Para recoger muestras subcutáneas, se limpiará la zona de piel
con alcohol. Para recoger muestras por punción de la cavidad abdominal, torácica o articular,
la zona de piel se preparará como un campo quirúrgico.
Para realizar la punción-aspiración con aguja fina, se deberá sujetar firmemente la masa con
los dedos, siempre que sea posible, con el fin de favorecer la penetración de la aguja en la
piel y en el tejido, y el control de la dirección. La aguja, unida a la jeringa, se dirigirá hacia el
centro de la masa y se ejercerá presión negativa (hacer retroceder el émbolo de la jeringa
hasta aproximadamente ¾ partes del volumen de la jeringa).
Se podrán realizar aspiraciones de varias zonas de la masa, evitando en todo momento salirse
de la masa y evitando que el material aspirado se contamine con sangre. Si la masa es grande,
se mantendrá la presión negativa mientras se redirige la aguja a otra zona. En masas pequeñas
es más conveniente suspender la presión negativa mientras se mueve la aguja.
Una vez obtenido el material, se dejará de ejercer presión negativa y se extraerá la aguja y la
jeringa de la masa y de la piel. Posteriormente, se separará la aguja de la jeringa y se llenará
de aire esta última, mediante una aspiración. Se colocará nuevamente la aguja en el cono de
la jeringa y se expelerá el contenido en la parte central de un portaobjetos, la muestra quedará
en forma de gota.
Ahora en cuanto al procesado de muestra ¿Como se hace? El procesado se hace por
extensión: Se realizará la extensión lo más rápidamente posible una vez que se coloca la gota
de muestra en el portaobjetos. En el caso de las muestras obtenidas por raspado o por PAAF,
el material obtenido se extenderá sobre el portaobjetos.
Existen dos técnicas para el procesado de extensión, las cuales son:
Técnica de aplastamiento o squash: Se pondrá el material en forma de gota en uno de los
extremos del porta, luego se apoyará un segundo porta por una de sus caras y en sentido
perpendicular al primero, por ultimo se deslizará con un movimiento rápido el segundo porta
sobre el primero.
La segunda técnica se llama de extensión sanguínea: Se usará cuando la muestra obtenida es
muy fluida, por ejemplo, para extender las gotas de sangre para hacer un frotis. Se utilizarán
dos portas, uno con la gota de muestra en un extremo, y el otro para realizar la extensión). El
porta de arriba se podrá sustituir por un cubre. Se apoyará uno de los bordes cortos del porta
de extensión (o del cubre), sobre el porta con la muestra, formando un ángulo de 30-40º.
Luego se deslizará el porta de extensión hasta contactar con la gota así el material se
extenderá en forma de línea en el borde corto del porta de extensión. Y se termina deslizando
el portaobjetos de extensión, alejándose de la gota, formándose una capa uniforme.
Por último, la Fijación y tinción: la fijación adhiere la muestra al portaobjetos y evita que se
degeneren las células. El método de fijación puede variar según la técnica de tinción. La
muestra se secará al aire y luego se fijará con metanol o con el primer reactivo de las
“técnicas rápidas” comerciales. Si la muestra se remite a un laboratorio externo se fijará y no
se teñirá.
Bibliografía

1. Bamford J. El Diagnóstico citológico en Medicina. Práctica [Internet]. London: 1966.


J & A Churchill Ltd, London: 1-16. [consultado 28 febrero 2021]. Disponible en:
[Link]
2. Cowell, R. Citología diagnóstica y hematología del perro y el gato. St. Louis
Missouri: Elsevier Mosby. EE. UU: 2008.
3. Rollón-Mayordomo E. Martín-de las Mulas J. Introducción a la citología diagnóstica
en medicina veterinaria. Clínica Veterinaria Canymar, Granja de San Ildefonso. Dpto.
de A. y Anatomía Patológica Comparadas. Facultad de Veterinaria Universidad de
Córdoba. Madrid: 2008. [consultado 28 febrero 2021]; (2) Rev canaria de las
Ciencias Veterinarias.
4. Meinkoth JH, Cowell RL. Recolección y preparación de muestras en citología:
aumento del rendimiento diagnóstico. Vet Clin North Am Small Anim Pract . 2002;
32:1187-1207.
5. Barr RJ. Citología cutánea. Rev de la Academia Estadounidense de Dermatología,
1998. Elsevier. 10: 163-180.
6. Axón veterinaria y comunicación. Los protocolos en la “Norma de Gestión de Calidad
para los Centros de Medicina Veterinaria de Animales de compañía. Protocolo de
manejo y remisión de muestras [Internet]. [consultado 28 febrero 2021]; 27-29.
Disponible en:
[Link]
olo_manejo_remision_muestras.pdf

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