PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS DE LOS AMINOACIDOS
Jessica Paola Almanza López
Adriana Flórez Lora
Luis Miguel Payares Durango
Juan Diego Torres Calderón
Informe de la práctica de laboratorio de bioquímica N° 1
Martes 4PM - 6PM
Presentado A:
Qco. ANDY RHENALS AVILEZ
UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE INGENIERIA
PROGRAMA DE INGENIERIA AMBIENTAL
MONTERÍA, 03 15 DE 2021
MARCO TEÓRICO
Un aminoácido es una pequeña molécula orgánica que contiene, al menos, un
grupo amino (-NH2), de naturaleza básica, y un grupo carboxilo (-COOH), de
carácter ácido. Aunque los seres vivos sintetizan para distintos propósitos diversos
tipos de aminoácidos, sin duda los más importantes son los que forman parte de
las proteínas, todos los cuales pertenecen al grupo de los α -aminoácidos.
Los α -aminoácidos se caracterizan por presentar el grupo carboxilo y el grupo
amino unidos al mismo átomo de carbono (que se denomina carbono α).
Además, a este carbono a se une, como tercer sustituyente, un átomo de
hidrógeno y, como cuarto sustituyente, un grupo adicional de tamaño y
características diversas, el cual diferencia a cada aminoácido de los demás. A este
cuarto sustituyente se le denomina cadena lateral del aminoácido y, a menudo, se
le representa de forma simplificada por la letra R.
Como los cuatro sustituyentes del carbono a son distintos y al adoptar una
disposición tetraédrica en torno a él, los α -aminoácidos presentan isomería óptica
(enantiómeros), en forma de imagen de espejo (configuraciones D y L).
Existen más de 60 aminoácidos en las células, pero solo se utilizan 20 α
-aminoácidos en la configuración L, para la construcción de proteínas. Solo las
proteínas de las membranas bacterianas contienen aminoácidos D, aminoácidos
modificados o aminoácidos raros. [1]
Reacción de Ninhidrina: Todas aquellas sustancias que presentan al menos un
grupo amino y uno carboxilo libre, reaccionaran con la ninhidrina. La positividad se
manifiesta por la aparición de un color violáceo o amarillo. Debido a que las
proteínas y los aminoácidos, poseen esta característica, la reacción sirve para
identificarlos. Algunas soluciones de amonio y aminas, dan la coloración
característica, aparentemente debido a una oxidación y reducción intramolecular
de la ninhidrina en presencia de amoníaco. Los aminoácidos porina e
hidroxiprolina, que no poseen grupo amino sino imino (-NH-), dan un color rojo que
pasa rápidamente a amarillo.
Reacción de xantoprotica: Es una reacción que reconoce los aminoácidos que
poseen el grupo bencénico (tirosina, fenilalanina, triptófano). Las proteínas que
tienen en su composición estos aminoácidos también darán la reacción. La
positividad se reconoce por la aparición de un color amarillo o verde debido a la
formación de nitrocompuestos.
Reacción de millón: La reacción es debida a la presencia del grupo
hidroxifenílico (-C6H4OH) en la molécula proteica. Cualquier compuesto fenólico
no sustituido en la posición 3,5, como la tirosina, fenol y timol, dan positiva la
reacción. El mecanismo de la reacción es poco conocido, posiblemente se deba a
la formación del complejo oxido de mercurio y fenol.
Reacción de Sakaguchi: Es una prueba para identificar arginina y se usa para
identificar proteínas ya que casi todas las proteínas poseen ese aminoácido. El
desarrollo de un color rojo marca la reacción positiva y se debe a la presencia del
grupo guanidina, que caracteriza la arginina.
Reacción del Acido Glioxílico del triptófano: Es para identificar el triptófano y
las proteínas que lo contienen. La positividad se reconoce por la aparición de un
anillo color violeta-rojizo.[2]
OBJETIVOS
Observar algunas propiedades físicas de los aminoácidos.
Reconocer la presencia de aminoácidos por la reacción de estos con la
Ninhidrina.
Identificar algunos grupos funcionales presentes en aminoácidos
específicos mediante la formación de productos coloreados.
MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIALES:
Tubos de ensayo
1 pinza para tubos de ensayo.
3 pipetas de 1, 5 y 10 mL
1 gotero.
1 estufa
REACTIVOS:
Sustancia Pictograma de Información relacionada
seguridad
Aminoácido
desconocido N/D
Puede ser nocivo en caso de
Ninhidrina, ácido
ingestión, también provocar
sulfanílico,
irritación cutánea, ocular y
carbonato de
respiratoria. En caso de contacto se
sodio
debe lavar con abundante agua.
Puede provocar
HNO3, H2SO4, quemaduras graves, cuando se entra
C2H2O3 en contacto se debe lavar
inmediatamente.
Puede provocar
quemaduras graves y llegar a ser
corrosivo para los metales. Se debe
manejar adecuadamente y en caso
NaOH de entrar en contacto lavar
inmediatamente
Es toxico en
caso de ingestión, puede provocar
irritación ocular grave y daños en
Nitrito de Sodio
los órganos. Se debe mantener
alejado del calor y no sebe respirar
su gas
PROCEDIMIENTO
Se describe los procedimientos de las reacciones utilizadas para identificar el
aminoácido desconocido que tenemos, al final de cada prueba se procede a
anotar los resultados observados en la muestra.
Reacción de Ninhidrina
En un tubo de
ensayo se le
agrega 1 ml de
la muestra
Se neutraliza el
pH
Agregamos 5
gotas de
ninhidrina
Se pone en
baño maría por
5 minutos
Reacción Xantoproteica:
En un tubo de
ensayo se le
agrega 1 ml de la
muestra
Adicionar 1 ml de
ácido nítrico
Calentar durante
3 minutos
Dejar reposar
Se alcaliniza la
solución con
suficiente NaOH
Reacción Paulys’ Diazo
Se toma la
muestra del
aminoacido en un
tubo de ensayo
Agregar ácido
sulfanidico
Se agrega una
pequeña
cantidad de
nitrito de sodio
Agregar reactivo
de aminoácido
Agregar
carbonato de
sodio
Reacción de Ácido Glioxílico
Se toma la muestra del
aminoacido en un tubo
de ensayo
Agregar ácido
glioxílico
RESULTADO
La siguiente tabla contiene los resultados obtenidos en las pruebas aplicada a la
muestra del aminoácido desconocido, se detalla los cambios físicos que se tuvo
(cambio de color), y lo observado en la sustancia.
PRUEBA COLORACIÓN RESULTADO OBSERVACIÓN
Un cambio de
Ninhidrina Morado Positivo color en toda la
solución
Un cambio de
Xantoproteíca Naranja Positivo color en toda la
solución
No se observa
Pauly’s Diazo Ninguno Negativo
ningún cambio
Se observa un
anillo de color
Ácido
Purpura Positivo purpura en una
Glioxílico
parte de la
solución
ANALISIS DE RESULTADOS
Reacción ninhidrina
Como se indicó en los resultados tenemos que al tomar nuestra muestra de
aminoácidos y realizar la reacción de ninhidrina nos dio positivo esto se debió a
que nuestro aminoácido tiene un pH que se encuentra entre 4 y 8, dando una
coloración que varía de azul a violeta intenso. Este presentaba un grupo amino
libre, dando lugar a la formación de amoniaco y anhídrido carbónico, con
reducción del reactivo (ninhidrina) a hidrindantina esta reacciona a su vez con el
amoniaco y otra molécula de ninhidrina para dar un compuesto de adición doble
que presenta una coloración violeta.
Reacción Xantoproteica
Como se indicó en los resultados tenemos que al tomar nuestra muestra de
aminoácidos y realizar la reacción xantoproteica nos dio positivo esto se debió a
que nuestro aminoácido posee un grupo bencénico y como es característico de
esta prueba dará positivo y una coloración amarilla debido a la formación de
nitrocompuestos derivados de la nitrificación de los grupos bencénicos.
Test de Pauly’s Diazo
Como se indicó en los resultados tenemos que al tomar nuestra muestra de
aminoácidos y realizar el test nos dio negativo esto se debió a que este test se usa
para indicar la presencia de tirosina o histidina en proteínas, como no se obtuvo
una reacción en este test podemos concluir claramente que nuestro aminoácido
no es ninguno de los mencionados anteriormente.
Reacción de ácido glioxílico
Como se indicó en los resultados tenemos que al tomar nuestra muestra de
aminoácidos y realizar la reacción con el ácido glioxílico nos dio positivo esto se
debió a que nuestro aminoácido se trata de triptófano, El anillo indol reacciona con
el ácido glioxálico en presencia de ácido sulfúrico concentrado para formar un
compuesto violeta en la interfase entre la solución del aminoácido y del ácido
sulfúrico.
ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA
1. Escriba la reacción para cada prueba realizada.
Reacción ninhidrina
Reacción Xantroproteica
Reacción del ácido glioxílico
2. De acuerdo con las pruebas realizadas en esta práctica proponga una
clasificación para los aminoácidos.
Para las pruebas realizadas en esta práctica tenemos que :
-Prueba Ninhidrina es para los alpha aminoácidos
-Prueba Xantroproteica es para los aminoácidos que contienen un anillo aromático
-Prueba Pauly’s Diazo es exclusivamente para identificar histidina y tirosina
-Prueba ácido glixílico es exclusivamente para identificar triptófano.
3. Identifique los grupos químicos que caracterizan a los aminoácidos.
Los aminoácidos se caracterizan por la presencia de un grupo carboxilo y un
grupo amino, unidos a un mismo átomo de carbono (C2) que se encuentra en la
posición alfa respecto al carbono (C1) y se diferencian entre sí por el resto de la
cadena lateral R1 que puede ser un radical alquílico, arilo o un grupo heterocíclico.
4. Explique cómo se encuentran estructuralmente los aminoácidos en el plasma
sanguíneo
Los aminoácidos son soluciones con pH neutro, son sobre todo iones dipolares,
que es la forma en que por lo general, están presentes los aminoácidos en el pH
celular. Cada grupo carboxilo (-COOH) dona un protón y se disocia (-COO-),
mientras que cada grupo amino (-NH2) acepta un protón y se convierte en (NH3).
Debido a sus grupos aminos y carboxilos, los aminoácidos en soluciones resisten
los cambios de acidez y alcalinidad, de tal suerte que son amortiguadores
biológicos importantes. o líquido intracelular cuyo pH es de 7.4 y 7.1
respectivamente [3]
5. Cuáles son las explicaciones prácticas de las pruebas realizadas
La identificación de los aminoácidos a través del uso propiedades químicas de
estos compuestos:
Prueba de ninhidrina que consiste de la reacción del grupo amino con este agente
reactivo, donde oxida y libera amonio, después se reduce y condensa con la
ninhidrina para así generar un color purpura al juntarse con otra molécula de
hidrogeno libre. Esta prueba nos sirve para comprobar si se está trabajando con
un alpha aminoácido.
Prueba Xantroproteica, es específica para aminoácidos que contienen un anillo
aromático, este aminoácido debe reaccionar con una solución de HNO3 por medio
de calentamiento para producir la nitración del anillo aromático. Para notar el
resultado la solución debe estar alcalinizada y así se notar las sales de color
amarillo o naranja rojizo
Prueba Pauly’s Diazo
Prueba del ácido glioxílico, cuando da un resultado positivo indica que se trata del
aminoácido triptófano, la prueba consiste en reconocer el anillo indólico presente
en la cadena lateral del alfa aminoácido mediante la reacción que tiene con el
ácido glixílico a un pH ácido compuesto, que forma un anillo de coloración
purpura.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
[1] [Link]
%C3%[Link]
[2][Link]
%20PDF/EXPERIMENTO%202%20IDENT%20AA%[Link]
[3][Link]
[Link]