PRÁCTICA Nº 5
PARASITOS FLAGELADOS Y CILIADOS DE CAVIDADES
Introducción:
En el hombre podemos encontrar flagelados patógenos como Giardia lamblia,
Trichomonas vaginalis, y en el ganado bovino Tritrichomonas foetus, además de otros que
son comensales; pueden localizarse en el tubo digestivo y órganos genitales. El único
ciliado de importancia médica y veterinaria es Balantidium coli, que se encuentra
parasitando el intestino grueso.
Objetivo general:
El alumno diferenciará morfológicamente los parásitos flagelados y ciliados presentes en
las cavidades corporales y practicará métodos adecuados de diagnóstico.
Objetivos conductuales:
Al finalizar la práctica, el alumno:
1. Describirá las características morfológicas diferenciales de los flagelados y ciliados
cavitarios
parásitos.
2. Describirá las modalidades del movimiento en los diferentes flagelados intestinales.
3. Practicará algunos métodos de diagnóstico para los flagelados.
4. Practicará una técnica de tinción para Trichomonas vaginalis y Giardia lamblia.
Equipo:
Microscopio compuesto.
Material:
Estuche de disección (tijeras, pinzas, bisturí), charolas de disección, algodón,
alfileres, portaobjetos y cubreobjetos N° 1, pipetas Pasteur, bulbos, aplicadores de
madera, cámara letal, puentes de tinción, guantes de látex, cajas de Petri, tubos de
ensaye, jaulas para ratones, bebederos, tubos de acero inoxidable para bebedero,
caja para preparaciones, detergente.
Reactivos y soluciones:
Éter o CO2, aceite de inmersión, solución salina al 0.85%, hipoclorito de sodio al 5%,
solución madre de Giemsa, alcohol etílico al 70%.
Material biológico:
Preparaciones fijas con trofozoítos y quistes de Giardia lamblia, Chilomastix mesnili,
Balantidium coli y trofozoítos de T. vaginalis, ratones parasitados con Giardia muris y
Tritrichomonas muris, cultivo de Giardia lamblia, exudado vaginal o cultivo con T.
vaginalis, cultivo de Balantidium coli o un cultivo de ciliados semejantes a B. coli,
concentrado de quistes de diversos flagelados fijados.
DESECHO DE MATERIAL INFECCIOSO O POTENCIALMENTE INFECCIOSO:
A todo recipiente o muestra que contenga exudado vaginal o materia fecal, deberá
agregársele una cantidad suficiente de hipoclorito de sodio al 5% para cubrir las
muestras y se dejará actuar durante 3 horas.
Desarrollo:
1ª Sesión:
1. Utilizando guantes de látex, coloque entre porta y cubreobjetos, una gota de exudado
vaginal o cultivo de Trichomonas vaginalis, observe a 40X para identificar los trofozoítos.
2. Técnica de Giemsa para T. vaginalis y T muris:
a) Extienda suavemente una gota del cultivo, exudado vaginal o materia fecal con una
pipeta Pasteur sobre un portaobjetos y deje secar a temperatura ambiente.
b) Fije con metanol durante 1 minuto y deje secar.
c) Tiña con Giemsa diluido en agua de la llave (1: 40), durante 5 minutos.
d) Enjuague con agua de la llave y deje secar.
3. Técnica de Giemsa para G. lamblia:
a) Extienda suavemente una gota del cultivo con una pipeta Pasteur sobre un
portaobjetos y deje secar a temperatura ambiente.
b) Fije con metanol 1 minuto y deje secar.
c) Tiña con Giemsa diluido en agua de la llave (1: 25), durante 1 hora.
d) Enjuague suavemente con agua de la llave y deje secar.
e) Monte con resina sintética y observe hasta la siguiente sesión.
2ª Sesión:
1. Practique la necropsia a un ratón parasitado (según las indicaciones del profesor), tome
una gota de contenido intestinal de ciego y colóquela entre porta y cubreobjetos;
obsérvela al microscopio con objetivos secos y por su movimiento identifique trofozoítos
de Trichomonas muris.
2. Repita el paso anterior, pero ahora haga un raspado de la 1a. porción del epitelio
duodenal con el fin de observar trofozoítos de Giardia muris, que presentan movimiento
como el de “caída de hojas”.
3. Observe a seco débil, entre porta y cubreobjetos, una pequeña muestra del cultivo de
Balantidium coli o de los ciliados proporcionados.
4. Observe los concentrados de los diferentes flagelados.
5. Observa las preparaciones fijas y teñidas de los diferentes flagelados y ciliados.
Informe:
1. Haga esquemas debidamente rotulados en tamaño proporcional de los parásitos
observados y especifique su microhábitat y su huésped.
2. Describa las modalidades de movimientos de los flagelados observados.
3. Evalúe los métodos de diagnóstico utilizados en la práctica.
4. Escriba su discusión y conclusiones.
5. Cite correctamente las referencias bibliográficas relacionadas con el tema.
