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Hidrolisis y análisis de aminoácidos

El documento describe un experimento para identificar aminoácidos en una muestra de leche mediante cromatografía en capa fina. Se detectaron 10 aminoácidos en la muestra de leche, incluidos 3 de los 5 aminoácidos de referencia (tirosina, isoleucina y valina). La detección se realizó mediante la reacción de los aminoácidos con ninhidrina, que produce diferentes colores. La distancia recorrida por cada aminoácido depende de factores como su tamaño y densidad.
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Hidrolisis y análisis de aminoácidos

El documento describe un experimento para identificar aminoácidos en una muestra de leche mediante cromatografía en capa fina. Se detectaron 10 aminoácidos en la muestra de leche, incluidos 3 de los 5 aminoácidos de referencia (tirosina, isoleucina y valina). La detección se realizó mediante la reacción de los aminoácidos con ninhidrina, que produce diferentes colores. La distancia recorrida por cada aminoácido depende de factores como su tamaño y densidad.
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4; ¿Cuántos aminoácidos encuentras en la

AMINOACIDOS PRESENTES EN EL muestra?


CROMATOGRAMA
Aminoácido Distancia ¿Presente Rf En la muestra de leche se encontraron 10
recorrida en la aminoácidos.
leche?
Tirosina 20cm Si 0.47 5; ¿Comparando los Rf, qué aminoácidos de los
Isoleucina 30.8cm Si 0.73 testigos encuentras en la muestra?
Valina 26.4cm Si 0.62
De los 5 aminoácidos testigos, se encontraron 3
Acido 18cm No 0.42
en la muestra.
aspártico
Arginina 7.7cm No 0.18

Discusión

( a ) distancia que recorre lamuestra La ninhidrina reacciona con el grupo amino del
aminoácido, el cual puede estar libre o bien unido
desde el punto de aplicación
Rf = por enlaces peptídicos, dando lugar a la formación
( b ) distancia que recorre el disolvente hasta de amoniaco y anhídrido carbónico, y a la
el frente del eluyente ¿ reducción de la ninhidrina a hidrindantina. Esta
última reacciona con el amoniaco y con una
b=42 cm
molécula de ninhidrina para dar un compuesto de
¿ adición doble, originando una coloración que varía
Cuestionario
de azul a púrpura, a excepción de la prolina que
1; ¿En la hidrolisis acida, que aminoácidos se da una coloración amarillenta, pues su grupo
destruyen en forma considerable? amino no está libre ni presenta un enlace
peptídico, sino que esta sustituido. La presencia
En esta hidrolisis se destruyen los aminoácidos
de aldehídos que resultan de la reducción de la
triptófano (Trp), serina (Ser), y treonina (Thr). Para
ninhidrina modifica, bajo ciertas condiciones, el
el caso de la asparagina (Asn) y la glutamina
color formado, lo que sirve para identificar el tipo
(Gln), se convierten en acido glutámico (Glu) y en
de aminoácido.
acido aspártico (Asp) respectivamente. La
hidrolisis acida produce poca racemización de los Hay distintos factores que pueden afectar que
aminoácidos. tanto recorre el aminoácido en el cromatograma,
entre ellos está el tamaño de la partícula, la
2; ¿En una hidrolisis alcalina, qué aminoácidos se
densidad, etc.
destruyen en forma considerable?
Por ejemplo, mientras más denso el aminoácido
La hidrolisis alcalina se realiza en disoluciones
hizo un recorrido menor.
concentradas de hidróxido de sodio, NaOH en
ebullición y provoca que se destruyan los Aminoácido Densidad
aminoácidos serina (Ser), y treonina (Thr), al igual Isoleucina 1,035g/cm3
que en la hidrolisis acida, también la cisteina Valina 1,316g/cm3
(Cys), cistina, producto de la unión de residuos de Tirosina 1,456g/cm3
la cisteína. La hidrolisis alcalina produce la La isoleucina hizo el mayor recorrido y tiene la
racemización de todos los aminoácidos. densidad menor, seguida de la valina y después la
tirosina, la cual hizo un recorrido menor teniendo
3; Poner la reacción entre la ninhidrina y los la densidad mayor.
aminoácidos
En la leche podemos encontrar los siguientes
El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma aminoácidos: Ácido aspártico, Ácido glutámico,
complejos coloreados con la ninhidrina: violeta Alanina, Arginina, Cisteína, Fenilalanina, Glicina,
azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo Hidroxipolina, Histidina, Isoleucina, Leucina,
grupo amino es primario, amarillo para la prolina e Lisina, Metionina, Prolina, Serina, Tirosina,
hidroxiprolina y café para la asparagina que tiene Treonina, Triptófano, Valina.
un grupo amido en la cadena lateral. Esta reacción
también identifica los grupos alfa-amino libres Entre ellos se encuentra la arginina, la cual no
presentes en péptidos y proteínas. captamos en la muestra a pesar de tenerla, esto
indica un posible mal manejo de los materiales,
posible contaminación del cromatograma etc. Esto
afectó el resultado final.
Bibliografía

Mariluna Moreno, S. (2015). Aminoácidos y proteínas. Bioquímica, Tecnología Médica. Universidad Latina de Panamá. Consultado el 5
de noviembre, 2019, desde: [Link]

Jesús V. Jorrín Novo y otros (2006). Separación de aminoácidos por cromatografía en capa fina y detección mediante reacción con
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Julia Flores,Consesa Caballero y Marco Antonio Moreira. (2008). Una interpretación aproximativa del concepto de hidrolisis en
estructuras peptidicas en un curso de bioquímica del IPC en el contexto de la Teoría de los Campos Conceptuales de Vergnaud.
5/11/19, de Universidad Pedagógica Experimental Libertador Sitio web: Dialnet-UnaInterpretacionAproximativaDelConceptoDeHidrolis-
2670642%20(1).pdf

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