DISCUSION DE RESULTADOS.
Los lípidos son un grupo heterogéneo de compuestos orgánicos. Dentro de ellos se
encuentran las grasas, que se dividen en saturadas e insaturadas. Su estructura química
varía y sus propiedades y funciones también dependiendo de los ácidos que contengan,
los lípidos son un grupo muy heterogéneo de compuestos orgánicos, constituidos por
carbono, hidrógeno y oxígeno principalmente, y en ocasiones por azufre, nitrógeno y
fósforo.
El fraccionamiento celular o fraccionamiento subcelular es una técnica de laboratorio, tras
la disgregación, en la que se intenta reagrupar las partículas,
generalmente células u orgánulos celulares, en función de sus propiedades biofísicas.
Mediante el fraccionamiento celular se consigue separar conjuntos homogéneos, por lo
general de orgánulos, a partir de una población heterogénea de células, en nuestro caso
se llevó a cabo el fraccionamiento celular de 3 gramos de hígado de pollo para así poder
separar la grasa o lípidos presentes en esta muestra, para después junto a una muestra de
agua, una de colesterol, y otra de ácido oleico se sometieron a diferentes pruebas para la
identificación de lípidos presentes en cada muestra.
PRUEBA DE LIEBERMANN-BURCHARD.
La prueba de Liebermann-Burchard o anhídrido acético se usa para la detección de
colesterol. La formación de un color verde o azul verdoso después de unos minutos es
positiva.
Lieberman-Burchard es un reactivo utilizado en una prueba colorimétrica para detectar el
colesterol, que le da un color verde intenso. Este color comienza como un color rosado
purpúreo y progresa a un color verde claro y luego a un verde muy oscuro. El color se
debe al grupo hidroxilo (-OH) del colesterol que reacciona con los reactivos y aumenta la
conjugación de la falta de saturación en el anillo condensado adyacente
En nuestra práctica de laboratorio se realizó la prueba de libermann-burchard a diferentes
muestras obteniendo resultados negativos para las muestras de agua y para la muestra
extraída a partir del hígado, ya que estas no presentaron coloración al añadir el reactivo,
para la muestra de ácido oleico se presentó una coloración café que indica que tiene una
baja concentración de colesterol, ya que el ácido oleico es un ácido graso que forma parte
del aceite de oliva, para el patrón de colesterol se obtuvieron resultados positivos ya que
al adicionar el reactivo la muestra tomo un color verde oscuro, lo que indica la presencia
de colesterol en esta muestra.
PRUEBA DE SAPONIFICACION
Se entiende por saponificación la reacción que produce la formación de jabones. La
principal causa es la disociación de las grasas en un medio alcalino, separándose glicerina
y ácidos grasos. Estos últimos se asocian inmediatamente con los álcalis constituyendo las
sales sódicas de los ácidos grasos: el jabón. Esta reacción se denomina
también desdoblamiento hidrolítico y es una reacción exotérmica.
La reacción típica es:
ÁCIDOS GRASOS + SOLUCIÓN ALCALINA = JABÓN + GLICERINA
En esta práctica se realizó la prueba de saponificación a las cuatro muestras trabajadas en
la prueba anterior añadiendo naoh al 15% a cada muestra y después llevándose las
muestras a baño maría por 20 minutos. Pasados estos 20 minutos se observaron los tubos
obteniendo como resultado que la muestra extraída a partir del hígado y la muestra de
ácido oleico presentaron una buena cantidad de jabón en la parte superior de la solución,
esto se debió a la gran cantidad de ácidos grasos presentes en cada una de estas dos
muestras. Para la muestra de patrón de colesterol también se observó jabón, pero fue una
cantidad muy pequeña respecto a las dos muestras anteriores ya que el colesterol
contiene una menor cantidad de ácidos grasos en su estructura, la muestra de agua no
presento jabón ya que el agua es una solución que no contiene ácidos grasos en su
estructura.
PRUEBA DE FOSFATOS
Para la prueba de fosfatos se tomaron las muestras de agua, ácido oleico y la muestra
extraída a partir del hígado de pollo, a estas 3 muestras se les añadió ácido molibdico,
después ácido ascórbico para luego llevarsen a baño maría por 5 minutos, después de
sacarsen los tubos del baño maría se observó que los 3 tubos presentan una solución de
una coloración rosada lo cual nos indica resultados positivos para la prueba de fosfatos
para las tres muestras.