¿QUÉ ES EL ADN?
El ADN es la macromolécula base de la herencia. Es un ácido nucleico que
contiene la información de las características hereditarias de cada ser vivo y las
secuencias para la creación de aminoácidos que generarán las proteínas vitales
para el funcionamiento de los organismos.
El ADN o DNA (por sus siglas en inglés) son siglas para ácido desoxirribonucleico
y tiene como función principal el almacenamiento de toda la información necesaria
para la expresión de determinadas características, en segmentos denominados
genes o empaquetada en cromosomas.
El ADN debe cumplir con dos funciones fundamentales que son la replicación y la
expresión.
REPLICACIÓN
La replicación del ADN ocurre antes de que la célula se divida y consiste en la
obtención de copias idénticas de la información celular fundamental para su
transferencia de una generación a otra, constituyendo así la base de la herencia
genética.
La replicación del ADN es semiconservativa. Cada cadena de la doble hélice
funciona como molde para la síntesis de una nueva cadena complementaria.
El ADN enrollado (cromosoma) se desenreda por la enzima topoisonerasa para
que luego, la enzima helicasa actúe rompiendo los enlaces de hidrógeno de las
bases nitrogenadas (Adenina, Guanina, Citosina y Timina) para separar las 2
hebras.
Cada hebra tiene una direccionalidad y cada extremo se denominan 5' y 3' (cinco
prima y tres prima), siendo que es solo posible agregar nucleótidos en el extremo
3', o sea, la dirección del alargamiento siempre será desde 5' hacia 3'.
Enzimas llamadas ADN polimerasas producen el ADN nuevo, estas requieren de
un molde y de un cebador (iniciador),
Teniendo esto en cuenta, los nucleótidos que se emparejarán con la información
de una hebra serán agregados por el ADN polimerasa en la dirección 5' a 3',
donde las bases hidrogenadas Adenina siempre se unen con las Timina, las
Timina siempre con las Adenina, las Guanina siempre con las Citosina y las
Citosinas siempre con las Guanina.
La replicación requiere de otras enzimas además de ADN polimerasa, como
la ADN primasa, la ADN helicasa, la ADN ligasa y la topoisomerasa.
ADN polimerasa
Una de las moléculas claves en la replicación del ADN es la enzima ADN
polimerasa. Las ADN polimerasas son responsables de la síntesis de ADN:
añaden nucleótidos uno por uno a la cadena creciente de ADN, e incorporan solo
aquellos que sean complementarios al molde.
Estas son algunas características clave de las ADN polimerasas:
Siempre necesitan un molde.
Solo pueden agregar nucleótidos al extremo 3' de la cadena de ADN.
No pueden comenzar una cadena de ADN desde cero, sino que requieren
de una cadena preexistente o segmento corto de nucleótidos llamado cebador.
Pueden corregir, o revisar su trabajo, eliminando la gran mayoría de
nucleótidos "equivocados" que se agregan accidentalmente a la cadena.
La adición de nucleótidos requiere energía. Esta energía proviene de los
nucleótidos mismos, que tienen tres fosfatos unidos a ellos (muy similar a la
molécula portadora de energía ATP). Cuando se rompe el enlace entre los
fosfatos, la energía liberada se utiliza para formar un enlace entre el nucleótido
entrante y la cadena creciente.
En procariontes como E. coli, participan principalmente dos ADN polimerasas en la
replicación del ADN: ADN pol III (la principal fabricante de ADN) y ADN pol I, que
desempeña un crucial papel auxiliar que analizaremos más adelante.
Las ADN polimerasas solo pueden agregar nucleótidos en el extremo 3' de una
cadena de ADN existente, ya que utilizan el grupo -OH libre en el extremo 3' como
un "gancho" y añaden un nucleótido a este grupo en la reacción de polimerización.
Entonces, ¿cómo es que la ADN polimerasa añade el primer nucleótido en una
horquilla de replicación nueva?
Por sí sola, ¡no puede! El problema se soluciona con la ayuda de una enzima
llamada primasa. La primasa hace un cebador de ARN, un corto segmento de
ácido nucleico complementario al molde, que proporciona un extremo 3' con el que
la ADN polimerasa puede trabajar. Un cebador típico es de cinco a diez
nucleótidos de largo. El cebador ceba la ADN polimerasa, es decir, le proporciona
lo que necesita para funcionar.
Una vez que el cebador de ARN está en su sitio, la ADN polimerasa lo "extiende",
añadiendo nucleótidos uno a uno para hacer una cadena nueva de ADN
complementaria a la cadena molde.
La ilustración muestra la horquilla de replicación. La helicasa desenrolla la hélice y
las proteínas de unión a cadenas sencillas impiden que se vuelva a formar. La
topoisomerasa impide que el ADN se enrolle demasiado por delante de la horquilla
de replicación. La ADN primasa forma un cebador de ARN y la ADN polimerasa
extiende la cadena de ADN a partir del cebador de ARN. La síntesis de ADN solo
ocurre en dirección 5' a 3'. En la cadena líder, la síntesis de ADN ocurre
continuamente. En la cadena rezagada, la síntesis de ADN reinicia muchas veces
conforme se desenrolla la hélice, lo que produce muchos fragmentos pequeños
llamados "fragmentos de Okazaki". La ADN ligasa une los fragmentos de Okazaki
en una sola molécula de ADN.
La helicasa abre el ADN en la horquilla de replicación.
Las proteínas de unión a cadenas sencillas cubren el ADN alrededor de
la horquilla de replicación para evitar que el ADN se vuelva a enrollar.
La topoisomerasa trabaja por delante de la horquilla de replicación para
evitar el superenrollamiento.
La primasa sintetiza cebadores de ARN complementarios a la cadena de
ADN.
La ADN polimerasa III extiende los cebadores, agregando sobre el
extremo 3', para hacer la mayor parte del ADN nuevo.
Los cebadores de ARN se eliminan y la ADN polimerasa I los sustituyen
por ADN.
La ADN ligasa sella las brechas entre fragmentos de ADN.
La replicación del ADN en eucariontes
Los fundamentos de la replicación del ADN son similares entre bacterias y
eucariontes, como los seres humanos, pero también hay algunas diferencias:
Los eucariontes tienen varios cromosomas lineales, cada uno con múltiples
orígenes de replicación. ¡Los seres humanos pueden tener
hasta 100100100 000000000 orígenes de replicación^55start superscript, 5, end
superscript!
La mayoría de las enzimas de E. coli tienen contrapartes en la replicación
eucarionte del ADN, pero una única enzima de E. coli puede ser representada por
varias enzimas en eucariontes. Por ejemplo, hay cinco ADN polimerasas humanas
con papeles importantes en la replicación^55start superscript, 5, end superscript.
La mayorías de los cromosomas eucariontes son lineales. Debido a la
forma en que se hace la cadena rezagada, en cada ronda de replicación se pierde
un poco de ADN en los extremos de los cromosomas lineales (los telómeros) en
cada ronda de replicación.