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Efecto antiinflamatorio de Moringa en ratones

Este documento evalúa el efecto antiinflamatorio del extracto hidroalcohólico de Moringa oleifera en ratones machos. Se utilizó el método de edema plantar para inducir inflamación, dividiendo 24 ratones en 3 grupos: control, extracto de moringa a 400 mg/kg, y dexametasona a 4 mg/kg. Los resultados mostraron que el extracto de moringa presentó una actividad antiinflamatoria exitosa a la dosis administrada, indicando que puede ser efectivo contra la inflamación aguda. La dexamet
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Efecto antiinflamatorio de Moringa en ratones

Este documento evalúa el efecto antiinflamatorio del extracto hidroalcohólico de Moringa oleifera en ratones machos. Se utilizó el método de edema plantar para inducir inflamación, dividiendo 24 ratones en 3 grupos: control, extracto de moringa a 400 mg/kg, y dexametasona a 4 mg/kg. Los resultados mostraron que el extracto de moringa presentó una actividad antiinflamatoria exitosa a la dosis administrada, indicando que puede ser efectivo contra la inflamación aguda. La dexamet
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Universidad Privada Antenor Orrego Efecto antiinflamatorio de la Moringa Oleifera

Lam. En ratones blancos


Escuela de medicina humana Ciclo 2019 - 20

UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO

ESCUELA DE MEDICINA

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

FARMACOLOGÍA BÁSICA
 

Efecto antiinflamatorio del extracto hidroalcohólico de


moringa oleifera lam. en ratones blancos.

PRESENTADO POR

ALEGRIA MILLONES, NELO


AGUILAR MENDOZA, KARLA
ARIAS CABRERA, CYNTHIA
ATHINEOS SANCHEZ, PATRICIA
BACILIO ANHUAMAN, KARLA
BLANQUES ORE, JEREMY
CABALLERO TUESTA, NICOLE
CACERES MARIÑO, FERNANDO
CONTRERAS CASTILLO, JOSE
DAVILA CHAVEZ, GABRIELA
DÍAZ ESCOBEDO, DANIELA
DRAGO MURATTA, NOELIA

                                                                                             

ASESOR

MG. DAN, ALTAMIRANO SARMIENTO

TRUJILLO – PERÚ

2019

1
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DEDICATORIA

Este proyecto está dedicado a nuestro


estimado docente y asesor Dan
Altamirano Sarmiento que gracias a
su instrucción y disciplina se pudo
culminar este trabajo. También se le
considera a nuestro grupo de estudio,
que gracias a su apoyo y pese a
cualquier obstáculo pudimos cumplir
con la meta que se propuso.

2
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AGRADECIMIENTOS

Este proyecto de investigación, si bien ha requerido de esfuerzo y mucha


dedicación, no hubiese sido posible su finalización sin la cooperación de todas
y cada una de las personas que acompañaron en el recorrido laborioso de este
trabajo y muchas de las cuales han sido un soporte, primero y antes que todo,
dar gracias a Dios, por estar con nosotros en cada paso que damos, por
iluminar nuestras mentes y por habernos puesto como tutor y guía de proyecto
al Dr. Altamirano Sarmiento, Dan, que con su amplia experiencia,
conocimientos y constancia nos orientó al correcto desarrollo y culminación con
éxito del presente trabajo. 

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TABLA DE CONTENIDO

                                                                                                                               
   PÁG.

RESUMEN………………………………………………………………………….….6

ABSTRACT……………………………………………………………………………7

INTRODUCCIÓN………………………………………………………………….….8

CAPÍTULO I: PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

1.1. PLANTEAMIENTO DEL


PROBLEMA…………………………………………………………………....9

1.2. OBJETIVOS DE LA
INVESTIGACIÓN……………………………………………………………...9

1.3. IMPACTO POTENCIAL (JUSTIFICACIÓN)


…………………………………………………………….9

CAPÍTULO II: FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA

2.1. ANTECEDENTES…………..……………………………………………..10

2.2. BASESTEÓRICAS………………………………………………………...11

2.3. HIPÓTESIS…………………………………………………………………14

CAPÍTULO III: MÉTODO

3.1 DISEÑO……………………………………………………………………...15

3.2.
MUESTRA…………………………………………………………………….....15

3.3 INSTRUMENTACIÓN (MATERIALES) ………………………………....15

3.4 PROCEDIMIENTO………………………………………………………….16

CAPÍTULO IV: RESULTADOS Y DISCUSIÓN

4.1. RESULTADOS DE LA INVESTIGACIÓN……………………………….18

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4.2. DISCUSIÓN DE
RESULTADOS…………………………………………………………………..21

CONCLUSIONES Y
RECOMENDACIONES………………………………………………....…………..23

REFERENCIAS………………………………………………………………………24

ANEXOS………………………………………………………………..…………….25

ÍNDICE DE TABLAS Y GRÁFICOS

Tabla 1: …………………..……………………………………………………………..

Tabla 2:.…………………………………………………………………………….....

Tabla 3: ………………………………………………………....…...…………………

Gráfica 1: ……………………….............................................................................

Tabla 4: ………………………………………………………………………………….

Gráfica 2: ……………..……….........................................................................................

Gráfica 3: ……………………………………..……............................................................

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RESUMEN

PALABRAS CLAVES: Moringa Oleifera Lam, efecto antiinflamatorio,


dexametasona, ratones blancos.

Objetivos: Demostrar y evaluar las propiedades antiinflamatorias de moringa


oleifera en ratones machos. Diseño: Experimental. Institución: Universidad
Privada Antenor Orrego, Trujillo-Perú. Material Biológico: Mus musculus del
Instituto Nacional de Salud de Chorrillos y extracto hidroalcohólico de la
Moringa Oleifera Lam.

Para evaluar el efecto antiinflamatorio se empleó el método de edema plantar a


través de la introducción de la pata trasera en agua a 60°C durante 15
segundos, utilizándose 24 ratones machos de 25-35 gramos de peso (de los
cuales tres fallecieron por el método piloto), el resto fueron divididos en tres
grupos de siete ratones (control, extracto de moringa y dexametasona). La
dosis administrada del extracto hidroalcohólico de moringa fue de 400 mg/kg
(por medio de una sonda nasogástrica) mientras que la Dexametasona fue
administrada a dosis de 4mg/kg.

Resultados: Se demostró que el extracto hidroalcohólico de Moringa a la dosis


de 400 mg/kg presentó una actividad anti inflamatoria exitosa, por lo que
comprobamos que sí puede existir una mayor efectividad contra la inflamación
aguda a esta dosis. En el caso de la dexametasona se obtuvo una respuesta
similar a la Moringa, teniendo en cuenta que es un medicamento farmacológico
ya comprobado como antiinflamatorio.

Conclusiones: La administración del extracto hidroalcohólico de la Moringa


Oleifera tiene propiedades antiinflamatorias en animales de experimentación.

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ABSTRACT

KEYWORD: Moringa Oleifera Lam, anti-inflammatory effect,


dexametasona, albino mice.

The purpose of this study was to evaluate the anti-inflammatory properties of


moringa oleifera in male mice.

To evaluate the anti-inflammatory effect, the method of plantar edema was used
through the introduction of the hind leg in water at 60 ° C for 15 seconds, using
24 male mice weighing 25-35 grams (of which three died from the pilot method),
the rest were divided into three groups of seven mice (control, moringa extract
and dexamethasone). The administered dose of moringa hydroalcoholic extract
was 400 mg / kg (through a nasogastric tube) while Dexamethasone was
administered at a dose of 4 mg / kg, comparing its effects

The results showed that Moringa hydroalcoholic extract at a dose of 400 mg /


kg presented a successful anti-inflammatory activity, so we can see that there
can be a greater effectiveness against acute inflammation at this dose. In the
case of Dexamethasone, a response similar to Moringa was obtained, taking
into account that it is a pharmacological drug already proven as an anti-
inflammatory.

Therefore, the anti-inflammatory properties of the hydroalcoholic extract of


Moringa Oleifera applied to male mus musculus (albino mice) showed a
decrease in inflammation.

Finally, it can be inferred that both Moringa and Dexamethasone exert anti-
inflammatory actions due to the results obtained in both working groups.

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INTRODUCCIÓN

La palabra inflamación viene de latín inflammare, que viene a significar


encender fuego. Algunos se refieren a ello como “hinchazón”. Esta vendría a
ser la respuesta del sistema inmunológico a microorganismos extraños como
bacterias y/o virus, como respuesta a la infección o lesión nuestros leucocitos
hacen aparición, y por ende se da la inflamación, según su clasificación
veremos que hay según su duración, que pueden ser agudas o crónicas, según
su localización veremos que hay absceso, úlceras, catarral, y según su carácter
de exudado puede ser seroso, fibrinoso, supurada y hemorrágico. 

Centrándonos en la inflamación aguda veremos que es una respuesta


inmediata a factores de lesión, dando características comunes como rubor,
calor, tumor y disminución de función, sus mediadores pueden ser de tipo
celular que implican a los neutrófilos, las plaquetas, mastocitos y monocitos; y
los mediadores de origen plasmáticos que implican a las proteínas del
complemento y las citocinas que son producidas a nivel hepático y luego
aparecen en la circulación como precursores inactivos y al activarse obtienen
propiedades biológicas. 

Entre los mediadores celulares encontramos algunas aminas como son la


histamina y la serotonina, y en el caso de las primeras encontramos como
principales fuentes a los mastocitos y veremos que su liberación es por
desgranulación como respuesta a diferentes estímulos; entre los metabolitos
del ácido araquidónico encontramos a las prostaglandinas y los leucotrienos.
Las prostaglandinas veremos que son producidas por mastocitos, macrofagos y
células endoteliales; los leucotrienos, también secretados por leucocitos darán
un efecto vascular.

En el presente trabajo evaluamos el efecto antiinflamatorio del extracto


hidroalcohólico de las hojas de moringa oleifera Lam. en mus musculus,
buscamos lograrlo por medio del procedimiento experimental en ratones
machos, queriendo obtener los efectos antiinflamatorios de la moringa oleifera
y compararlos con los efectos de la dexametasona, esto lo haremos por medio
de la ingesta tanto del extracto como del fármaco por parte de los ratones a
través de sondas gástricas para luego demostrarlo por medio de la inducción
de inflamación en la pata de estos y realizando controles para la obtención de
resultados.

Con este proyecto queremos demostrar el potencial de la moringa oleifera


como un antiinflamatorio potente, y con mejor eficacia que un fármaco sintético,
como lo es la dexametasona; al ser de procedencia natural, no tiene efectos
adversos, y es de fácil acceso al público. 

A continuación se explicará con más detalles los objetivos del proyecto, los
fundamentos teóricos, sus efectos medicinales de la planta, hipótesis,
procedimiento, donde se detalla a mayor escala los efectos de la planta,

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discusión de resultados donde se ve la comparación entre la moringa oleifera y
la dexametasona y las conclusiones obtenidas a raíz de lo logrado.

CAPÍTULO I. PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

1.1.   Planteamiento del problema:

¿De qué manera influye el efecto antiinflamatorio del extracto hidroalcohólico


de moringa oleifera Lam? en modelo de inflamación aguda en ratones
blancos? 

1.2.   Objetivos:

1.2.1.  Objetivo General:

 Determinar el efecto antiinflamatorio del extracto hidroalcohólico de


moringa oleifera Lam. en ratones blancos.

1.2.2.  Objetivos específicos:

 Determinar el efecto antiinflamatorio del extracto hidroalcohólico de


moringa oleifera Lam. a dosis de 400 mg/kg mediante el porcentaje de
inhibición.

 Comparar el efecto antiinflamatorio del extracto de moringa oleifera


Lam. a dosis de 400 mg/kg con dexametasona de 4mg/kg 

1.3.   Justificación:

Siendo el uso de plantas medicinales ampliamente aceptado en el Perú por


estar vinculado en nuestra cultura, durante varias décadas, se han tratado
diversas manifestaciones de enfermedades con estas plantas; entre ellas, la
inflamación.

Por lo tanto, el presente trabajo de investigación permitirá demostrar o conocer


si existe efecto antiinflamatorio en el extracto hidroalcohólico de las hojas de
moringa oleifera Lam. en la disminución de los niveles de inflamación en una
población de Mus Musculus.

Este estudio también permitirá confirmar o contradecir los resultados obtenidos


por estudios previamente realizados. En caso de encontrar el efecto
antiinflamatorio en el extracto de moringa oleifera Lam. podremos utilizarlo en
los pacientes que presenten inflamación aguda.

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Siendo una medida para retrasar o evitar los efectos patológicos a largo plazo
de la inflamación en los pacientes a un costo más accesible, con mayor
alcance y menores efectos secundarios que los fármacos utilizados
actualmente. El siguiente trabajo pretende motivar también a que se realicen
futuras investigaciones con estudios de mayor población y mayor nivel de
evidencia.

CAPÍTULO II. FUNDAMENTO TEÓRICO

2.1.  Antecedentes:

   2.1.1    Historia

De la familia Moringaceae, género Moringa, especie oleífera, nombre científico


Moringa oleífera. Es nativo de la India, muy cultivada a través de todo el
mundo, es resistente a la sequía y puede crecer en zonas áridas y costeras,
actualmente se cultiva en regiones tropicales y subtropicales (1).

Moringa oleífera originaria del norte de la india, se encuentra en todo el trópico.


La variedad de nombres tanto en inglés como nativos hace referencia a los
diversos usos asignados al árbol y sus productos. Llamado también como "palo
de tambor" por la forma de sus vainas, principales productos alimenticios en la
India y África (2).

Ha sido empleado por los Antiguos romanos, griegos y egipcios para usos de
medicina tradicional. Durante siglos se lo ha defendido por poseer una fuente
excepcional de proteína altamente digerible, Ca, Fe, Vitamina C y Carotenoides
(3).

Investigadores de la universidad de Putra Malaysia en Selangor Malacia en el


año (2015) demostraron la eficacia de los extractos hidroalcohólicos de las
hojas de Moringa oleífera en la inhibición en el mecanismo de producción de
óxido nítrico en el modelo de inflamación inducida por LPS (lipopolisacarido),
demostrando la actividad antiinflamatoria y siendo una alternativa en el
tratamiento de los procesos inflamatorios (4). 

   2.1.2    Nombre científico

García Roa 2013 Lo menciona como “Moringa oleífera Lam” (5)

   2.1.3    Nombre común

En América Latina y en el mundo son: marango, teberinto paraíso blanco,


acacia, árbol de las perlas, chinto borrego, flor de jacinto, paraíso de España,

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paraíso extranjero, perlas, perlas del Oriente, san jacinto, libertad, árbol de
mostaza, , árbol rábano picante (6). 

   2.1.4    Origen y Distribución

Crece en el trópico y es originaria del noroeste de India, Pakistan, Bangladesh


y Afganistán. En América Latina y Centro América se introdujo y naturalizo en
1920 como un árbol ornamental (7).

   2.1.5    Taxonomía

Basado en el Integrated Taxonomic Information System, la clasificación actual


para Moringa oleífera es la que se presenta a continuación:

Reino: Plantae

    Subreino: Viridiplantae

          Infrareino: Streptophyta

   Superdivisión: Embriophyta

        División: Tracheophyta

                Subdivisión: Spermatophytina

                         Clase: Magnoliopsida

                           Superorden: Rosanae

                                       Orden: Brassicales

                                               Familia: Moringaceae

                                                          Género: Moringa

                                                                           Especie: Moringa oleífera Lam.

2.2. Bases Teóricas:


Entre la medicina alternativa tenemos a la rama herbaria que es utilizada para aliviar
enfermedades, otorgando importancia a los fitofarmacos, ademas de ser apreciado por
su bajo costo y bajos indices de toxicidad, en comparación con otros productos
quí[Link] medicina herbaria se basa en el uso de plantas medicinales para efecto
terapéutico como sustituyente de las medicinas terapé[Link]ún la OMS, los
medicamentos herbarios contienen principios activos que están reconocidos como
inocuo y eficaz.10
En Perú se conservan más de 500 distintas especies de plantas medicinales, algunas
de las cuales las podemos encontrar en los jardines botánicos del Centro Nacional de
Salud Intercultural (CENSI) del Instituto Nacional de Salud, en Lima.12

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La Moringa pertenece a la familia Moringaceae, es nativo del Himalaya y cultivado en
todas las regiones tropicales, subtropicales del mundo. Es un árbol muy cultivado que
puede ser utilizado como alimento humano y animal, por sus varias propiedades
medicinales y antimicrobianas, ademas su aceite es considerado como una fuente de
biocombustible. Es un árbol que mejora el suelo por sus nutrientes, protegiéndolo de la
erosión, la desecación Muchos agricultores conocen que la Moringa oleífera es
resistente a la sequía y prefiere suelos neutros o ligeramente ácidos, es por ello que
gran parte del suelo tropical del mundo es ideal para su siembra.13
En la nutrición las hojas frescas de moringa contienen bastantes minerales y
vitaminas, entre ellos elevados niveles de caroteno (vitamina A), vitaminas B1, B2, B3,
C, E, K, incluso de calcio, hierro, potasio, cobre, magnesio, zinc, también aminoácidos
esenciales y antioxidantes (ácido ascórbico, flavenoides, fenoles, caratenoides). Todo
en el árbol puede ser utilizado tanto en la alimentación humana como para los
[Link] la parte fitoconstituyente de la moringa, tenemos a los alcaloides, que
vienen a ser toxicos; flavanoides, que tiene un rol medicinal, por tener efectos
antioxidantes; terpenos, que tienen un efecto tóxicos y saponoides.
Entre los diferentes estudios clínicos podemos ver ensayos realizados en los últimos 5
años que revelan las propiedades medicinales de la moringa como antioxidante, en las
enfermedades respiratorias, cardiovasculares, gastrointestinales, endocrinas, en el
sistema nervioso central, en el sistema inmunológico y como antibacteriano [Link]
que en los estudios preclínicos podemos observar diversos ensayos in vitro e in vivo,
se investigó el efecto antioxidante de las hojas de Moringa oleifera utilizando varios
sistemas in vitro, como el blanqueamiento con betacaroteno, la captación de radicales,
la quelación de iones ferrosos y la peroxidación de llípidos. Sobre la base de las
propiedades antioxidantes in vitro, se eligió la fracción polifenólica como la fracción
potente y se utilizó para el corte de ADN y las propiedades antioxidantes in vivo. Las
hojas de moringa muestran una protección dependiente de la concentraciónn del daño
oxidativo del ADN inducido por HO y también inhibe la toxicidad. Entre las diversas
enzimas antioxidantes, los niveles de superóxido dismutasa y catalasa se
restablecieron a niveles casi normales en comparación con las ratas intoxicadas. El
análisis por cromatografía líquida de elevada productividad indicó la presencia de
ácidos fenólicos y flavonoides. Por lo tanto, se concluye que la moringa posee un
elevado contenido fenólico y fuertes propiedades antioxidantes, que pueden estar
mediadas por captura directa de los radicales libres y de igual manera por quelación
de [Link] estudios ex vivo e in vitro dieron un marcado aumento en la densidad
óptica y en el índice de estimulación que indica la proliferación de esplenocitos en
ratas tratadas por las hojas de moringa, además se presentó un ligero descenso en el
porcentaje de recuento de linfocitos T, que posteriormente se incrementó, pero de
manera poco [Link] aplicaciones de la moringa tiene diferentes efectos, en
el sistema nervioso central, potencia el sueño, reduciendo la incidencia de
enfermedades cerebrovasculares y calambres nocturnos en adultos mayores; en el
sistema cardiovascular, tiene efecto diurético, antihipertensivo, incrementa la
lipoproteína de alta densidad, disminuyendo el peso corporal, el colesterol sérico, los
fosfolípidos; en el sistema gastrointestinal, estimula el tratamiento de las ulceras
gástricas, mejora la función del hígado, evitando la hepatotoxicidad; en el sistema
genitourinario, es útil para aumentar la función renal y disolver las litiasis; tiene efecto
antifúngico, como por ejemplo en el pie de atleta y en las diversas infecciones
cutáneas por estafilococo áureos; en el sistema osteomioarticular, reduce la
inflamación y reversión de la artritis reumatoidea; en el endocrino, mejora la tolerancia
a la glucosa, disminuyendo los ácidos grasos libres; en el sistema inmunológico, tiene
efecto inmunoestimulante ya que inhibe el linfoma de Burkitt y los papilomas de la piel.
También tiene efecto protector contra el cáncer ovárico.13

2.3. Hipótesis:

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“La utilización del extracto hidroalcohólico de las hojas de la Moringa oleifera
Lam. es capaz de dar un efecto protector ante la inflamación en mus
musculus”.

CAPÍTULO III. MÉTODO

3.1. Diseño:

Experimental.

3.2. Muestra: 

La muestra fueron 24 ratones (mus musculus) machos de 25 a 35 gramos de


peso, que los conseguimos en el Instituto Nacional de Salud del Perú, los
cuales fueron fraccionadas en 3 grupos, para el análisis de efecto
antiinflamatorio; 7 ratones en el grupo control, 7 ratones en el grupo con
moringa y 7 ratones en el grupo con dexametasona. Estos se mantuvieron en
condiciones controladas de temperatura (22 ± 3 °C) y humedad relativa (entre
40-60%), expuestos a ciclos de luz oscuridad de 12/12 horas, con agua y
alimento. De las cuales 3 fallecieron en el método piloto. Cada uno de los
individuos de investigación cumplió con los criterios de inclusión para el
presente trabajo de investigación.

3.3. Instrumentos o Materiales: 

Material botánico

Se trabajó en hojas de la especie moringa oleifera Lam, “Moringa", que se


encuentra apto para el consumo humano. La muestra fue recolectada en la
ciudad de Trujillo-La Libertad, Urb. Santa María 484, se cortaron ramas que
contenían hojas, el fruto y la flor que fueron posteriormente lavadas y secadas
en papel seda para ser llevadas para su taxonomía.

Material biológico

Ratones machos de la cepa mus musculus de 25-35g de peso, estas fueron


sometidas a un proceso de aclimatación por un periodo de 7 días antes de
realizar la prueba, a una temperatura controlada de 20 ± 2 °C, con un ciclo de
luz/oscuridad de 12-12 h y humedad de 30 a 60%. La alimentación consistió en
alimento para roedores y agua.

Materiales de laboratorio

Los materiales de laboratorio incluyeron: mortero y pilón; vasos de precipitación


de 100 mL y 150 mL; baguetas; frascos para muestras biológicas; 3 botellones
de vidrio con capacidad de 20 litros; sondas nasogástricas, jeringas
descartables de 1 mL y de 5 mL.

Equipos: Los equipos empleados incluyeron: molino manual, balanza analítica.

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3.4. PROCEDIMIENTO

Diagrama N°1: Esquema del procedimiento de moringa oleifera Lam.


,j<,vc ,mc <z,m ,<z ,m<z ,m<zx
Recolección,
identificación,
acondicionado y secado
de la planta

Procedimiento de
Planta: 941 gr
molición y trituración
(polvo)
de la planta

Maceración de la
Alcohol de 70: 3180
planta con alcohol
mL
etílico de 70

Filtración del
macerado de
moringa con gaza y 880 mL
luego papel filtro
(X3)

Eliminación del solvente


considerando el punto de 24.45 gr
ebullición del alcohol de 78.37
°C

Dilución de la 24.45 gr / 100 ml =


moringa 244.5

400 mg ----- 1 kg 1 mL ---- 2445 mg


Dosificación de X ---- 10.868
X ----- 0.04 Kg
moringa
14
X = 16 mg X = 0.08 mg
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Integración de las
sondas
nasogástricas a los
ratones

Integración de la moringa a
través de las sondas
nasogástricas a los ratones

Control basal Método de Medición con


de los ratones Arquímedes regla

Espera de 30
minutos

Inducir la Agua a 60 grados


inflamación con por 30 segundos
agua caliente

Cada 30 minutos durante


Control
4 horas

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Diagrama N°2: Esquema de Control

Control Basal Medición con


Método de
de las patas de regla
Arquímedes
los ratones

Inducimos la Agua a 60 grados


inflamación de la entre 10 a 15
pata de los ratones segundos
con agua caliente

Cada 30 minutos durante


Control
4 horas

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Diagramas N°3: Esquema de dexametasona

En 4 mg de dexametasona
Dilución de la (polvo) en 10 mL donde
dexametasona obtuvimos una
concentración de 0.4
mg/mL

Dosificación de la 0.025 kg x 4 mg/Kg / 0.4


dexametasona mg/mL = 0.25 mL

Colocamos la
sonda
nasogástrica a los
ratones

Colocamos a
dosis de
dexametasona

Control Basal de
la pata de los
ratones

Método de
Esperar 30 Medición con regla
Arquímedes
minutos
Metodo de

Inducimos la
inflamación de la Agua a 60 grados
pata de los ratones por 30 segundos
con agua caliente

Cada 30 minutos
Control durante 4 horas

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CAPÍTULO IV: RESULTADOS Y DISCUSIÓN

4.1. RESULTADOS DE LA INVESTIGACIÓN

Grupo control:

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4.2. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

La respuesta inflamatoria (RI) como se sabe está relacionada con el proceso


de la reparación del tejido y es importante para poder destruir o atenuar el
agente lesivo, y a la vez inicia una serie de acontecimientos que nos van a
ayudar en la reconstrucción del tejido; por esta razón se afirma que la
inflamación es fundamentalmente una respuesta de carácter protector, y de no
existir este proceso, las infecciones se propagarían de manera incontrolada, las
heridas no se curarían nunca y los órganos lesionados presentarían lesiones
supurativas de forma permanente. Sin embargo, en ciertas situaciones, como
en reacciones alérgicas y enfermedades crónicas, el proceso inflamatorio
constituye el mecanismo patogénico básico. (23)

La inflamación presenta dos fases bien diferenciadas: aguda y crónica. La


inflamación aguda tiene una evolución relativamente breve; sus características
fundamentales son la exudación de líquido y de proteínas plasmáticas (edema),
y la migración de leucocitos (principalmente neutrófilos). La inflamación crónica
tiene una duración mayor y se caracteriza por la proliferación de vasos
sanguíneos, fibrosis y necrosis tisular. (23)

Es de especial interés para los autores de la presente revisión explicar el


porqué de los cambios secundarios (contiguo a una lesión tisular) que tienen
lugar en la respuesta inflamatoria aguda (RIA), los cuales determinan los
signos de la inflamación.

Se conoce que la respuesta inflamatoria aguda (RIA) comprende una


secuencia de eventos importantes, así como los mecanismos estructurales y
moleculares que están de base a estos procesos; también se conoce que son
los distintos mediadores químicos los que contribuyen a que ocurran dichos
eventos.

La alteración de la permeabilidad constituye la característica principal y de


mayor especificidad de la IA, provoca el exudado profuso hacia el intersticio. La
pérdida de proteínas del plasma reduce la presión osmótica intravascular y el
incremento en el intersticio; secundario a la vasodilatación aumenta la presión
hidrostática intravascular, lo que conduce a una importante salida y
acumulación de líquido en el tejido intersticial, formándose finalmente el
edema. (23)

En condiciones normales el endotelio no permite la salida de proteínas y el


intercambio se produce por pinocitosis. Si se tiene en cuenta que el intercambio
de líquido y la permeabilidad vascular dependen estrictamente de la integridad
del endotelio, entonces vale preguntarse: ¿Cómo pueden ser vulneradas las
bases morfológicas del endotelio durante una RIA? (23)

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El aumento de la permeabilidad vascular se genera por varios mecanismos,
que pueden producirse simultáneamente:

 Formación de aberturas entre las células endoteliales de las vénulas :


mecanismo activado por la histamina, bradicinina, leucotrienos,
sustancia P y otros tipos de mediadores químicos. Esta forma de
filtración solo afecta a las vénulas. El proceso parece estar mediado por
mecanismos intracelulares agonistas, donde está implicada la
fosforilación de proteínas contráctiles de los endoteliocitos, que se
conoce como respuesta inmediata. La bradicinina (otro mediador) es
liberada por la activación del sistema de las cininas; este sistema genera
péptidos vasoactivos a partir de proteínas plasmáticas denominadas
cininógenos y mediante proteasas específicas denominadas calicreínas;
uno de estos péptidos vasoactivos es la bradicinina, potente inductor del
aumento de la permeabilidad vascular, así como del dolor. El sistema de
las cininas es activado por el factor de Hageman (XII de la coagulación),
el cual a su vez es activado por la lesión en la pared vascular y
expresión de cargas negativas (colágeno y membrana basal).   Los
leucotrienos (mediador lipídico) son productos del metabolismo del ácido
araquidónico (AA). El AA es un ácido graso poliinsaturado de 20 átomos
de carbono (ácido 5, 8, 11, 14-eicosatetraenoico), se halla en el interior
de las células esterificado con los fosfolípidos de membrana. Ante
estímulos mecánicos, químicos (factor activador de plaquetas, C5a) y
físicos se activan las fosfolipasas celulares, las que liberan al AA de su
unión con la membrana. Los metabolitos del AA (eicosanoides) son
sintetizados mediante dos clases de enzimas: ciclooxigenasas
(obteniéndose prostaglandina y tromboxanos) y lipooxigenasas
(obteniéndose leucotrienos y lipoxinas).  La prostaglandina G2 (PG2) es
el principal metabolito de la vía de la ciclooxigenasa en los mastocitos;
esta junto con prostaglandinas E 2 (PGE2) y F2α (PGF2α), las que tienen
una distribución más amplia, dan lugar a vasodilatación y potencian la
formación del edema.  En el caso de la sustancia P hay que afirmar que
desempeña un importante papel en el inicio de una RI. Constituye un
neuropéptido (abundante en fibras nerviosas del pulmón y el sistema
gastrointestinal). Es un potente mediador del incremento de la
permeabilidad vascular; además se involucra en la transmisión de
señales dolorosas, regulación de la tensión arterial y estimulación de la
secreción por parte de células inmunitarias y endocrinas. (23)
 Reorganización del citoesqueleto (retracción endotelial):  están
implicados la interleucina-1(IL-1), el factor de necrosis tumoral (TNF) y el
interferón gamma (IFN-y), así como la hipoxia. Se conoce como
respuesta tardía. La IL-1 y el TNF comparten muchas propiedades
biológicas, y son producidos por los macrófagos activados. Su secreción
puede estar estimulada por lesiones físicas, endotoxinas,
inmunocomplejos y toxinas. En cuanto al incremento de la
permeabilidad, estas citocinas inducen la síntesis de moléculas de
adhesión endotelial y de otras citocinas, quimiocinas, factores de
crecimiento, eicosanoides y NO; también la síntesis de enzimas
asociadas a la remodelación de la matriz, y el aumento en la

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trombogenecidad del endotelio; así como estimulan la síntesis y
actividad de enzimas colagenasas. El TNF induce además la agregación
y cebado de los neutrófilos, liberándose enzimas proteolíticas,
contribuyendo a la lesión tisular.(23)
 Aumento de la trancitosis: el transporte de fluidos y proteínas a través de
las propias células endoteliales (y no entre ellas) puede realizarse
mediante canales que se forman a partir de vacuolas y vesículas no
recubiertas interconectadas (denominado orgánulo vesiculovacuolar).
Parece que el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF)
estimula el número y el tamaño de estos canales.
 Lesión endotelial directa, con necrosis y desprendimiento de las células
endoteliales: la necrosis de las células endoteliales provoca su
separación de la pared del vaso, creando de esta forma una apertura en
él. Puede producirse en heridas severas, como quemaduras, o por la
acción tóxica de microbios que afectan directamente el endotelio. Los
PMN que se adhieren a las células endoteliales también pueden
dañarlas. En este caso, la pérdida de líquido continúa hasta que se
forma un trombo o se repara el daño. Se conoce como respuesta
inmediata prolongada. (23)
 Lesión endotelial mediada por leucocitos : los leucocitos adheridos al
endotelio liberan formas tóxicas de oxígeno y de enzimas proteolíticas
que terminan por dañar al endotelio, con el consiguiente aumento de la
permeabilidad. (23)

Teniendo en cuenta de lo que se habló con anterioridad, el efecto inflamatorio


puede ser producido por cualquier tipo de estímulos que provocan la liberación
de sustancias pro inflamatorias produciendo algún tipo de dolor ya sea agudo o
crónico, este efecto puede revertirse cuando se bloquea la síntesis de estas
sustancias por algún tipo de fármaco con propiedades antiinflamatorias. En el
presente análisis se realizó la experimentación para determinar el efecto
antiinflamatorio del extracto hidroalcohólico de Moringa al ser administrado por
una sonda nasogástrica en dosis de 400 mg/kg, comparándose dichos efectos
con el medicamento comercial Dexametasona a dosis de 4mg/kg.

El efecto inflamatorio puede ser producido por cualquier tipo de estímulos que
provocan la liberación de sustancias pro inflamatorias produciendo algún tipo
de dolor ya sea agudo o crónico, este efecto puede revertirse cuando se
bloquea la síntesis de estas sustancias por algún tipo de fármaco con
propiedades antiinflamatorias. En el presente análisis se realizó la
experimentación para determinar el efecto antiinflamatorio del extracto
hidroalcohólico de Moringa al ser administrado por una sonda nasogástrica en
dosis de 400 mg/kg, comparándose dichos efectos con el medicamento
comercial Dexametasona a dosis de 4mg/kg.

Los resultados que se obtuvieron permiten demostrar que el extracto


hidroalcohólico de hojas de Moringa posee un efecto antiinflamatorio que se
debe más que todo a la presencia de antioxidantes como los flavonoides,
fenoles, carotenoides, entre otros; lo que concuerda con estudios e
investigaciones hechas anteriormente donde se evidencia que esta planta
posee grupos fenólicos y flavonoides, que nos ayudan en nuestra investigación

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al momento de demostrar la actividad antiinflamatoria. Como se mencionó con
anterioridad la presencia de estos metabolitos como los fenoles o flavonoides,
se ha demostrado tener efectos contra la inflamación aguda en diversos
órganos del cuerpo. Esto se debe a que estos metabolitos se relacionan con la
inhibición de diversas enzimas implicadas en el metabolismo del ácido
araquidónico como la ciclooxigenasa, lipoxigenasa, fosfato dinucleotido
adenina nicotinamida (NADPH), oxidasa, entre otras, de esta manera pudiendo
disminuir el foco inflamatorio. Cabe recalcar que estos flavonoides o fenoles
participan en otros mecanismos para disminuir la inflamación aguda como:
inhibición de la liberación de histamina, inhibición de la migración celular (los
leucocitos no migran al foco inflamatorio), efecto protector vascular, entre otros
más que forman parte de otros mecanismos.

Analizando los resultados de la prueba del efecto antiinflamatorio podemos


señalar que el extracto hidroalcohólico de Moringa a la dosis de 400 mg/kg
presentó una actividad anti inflamatoria moderada y con ello una disminución
del volumen de edema en las patas de los ratones blancos.

Estudios realizados por Guillermo y Alba Manuela, en un estudio experimental


¨in vivo¨, en ratas, determinaron que el extracto de Moringa a la dosis de 50,
100, 200 mg/kg tuvo un efecto antiinflamatorio dependiente de la dosis, es decir
donde se pudo observar un poco de mayor actividad antiinflamatoria fue en la
dosis de 200 mg/ kg. Esto nos permitió comprobar el efecto antiinflamatorio que
tiene la Moringa en la inflamación aguda, pero en el proyecto presente nosotros
administramos 400 mg/Kg debido a que se quiso comprobar si es que puede
existir una mayor efectividad contra la inflamación aguda. Los resultados ante
lo propuesto fueron exitosos debido a que el volumen del edema en las patas
de los ratones blancos disminuyó hasta aproximarse un poco más a los valores
basales e incluso mucho mejor con respecto al grupo de control donde se
evaluó la respuesta del sistema inmunitario ante una inflamación aguda.

Los resultados obtenidos tanto en el Método de Arquímedes y el método de la


regla fueron comparados con otro fármaco antiinflamatorio que fue la
Dexametasona, que es un medicamento comercial indicado en el tratamiento
de varias patologías debido a sus efectos antiinflamatorios e inmunosupresores
tal como lo señala El Formulario Nacional de Medicamentos Del Perú.

Cuando se usó Dexametasona en dosis de 4mg/kg para el tratamiento de la


inflamación aguda en el edema producido en las patas de los ratones, se
obtuvieron resultados similares a los de la Moringa teniendo en cuenta que este
ya es un medicamento farmacológico comprobado como antiinflamatorio
debido a que es un potente glucocorticoide sintético con acciones semejantes a
la de las hormonas esteroideas y que revierte el proceso de inflamación
ligándose a los receptores esteroideos citoplasmáticos e inhibiendo el ciclo de
la ciclooxigenasa bloqueando la síntesis de sustancias proinflamatorias.

Realizándose investigaciones los últimos años se ha demostrado que la


Moringa tiene un efecto antiinflamatorio, debido a sus propiedades y
metabolitos contra la inflamación aguda, pero lo que no se ha demostrado aún
es cuales pueden ser las dosis exactas para poder alcanzar el mayor efecto

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farmacológico en la inflamación comparándolo con algún otro de medicamento
sintético. Lo que se intenta comprobar y evaluar es que la Moringa pueda
utilizarse como medicamento antiinflamatorio natural y efectivo, evitando el uso
de medicamentos sintéticos que como se sabe tienen mayor predisposición a
provocar reacciones colaterales, secundarias o adversas en la persona en
comparación con la Moringa que es un medicamento natural.

Como la Moringa, pueden existir otras plantas medicinales las cuales pueden
actuar como antiinflamatorio y que actualmente se hacen investigaciones sobre
los conocimientos tradicionales de estas plantas sobre todo la Moringa, y que
son publicados en artículos que nos pueden ayudar en el estudio aún mayor de
esta planta. Así en algún futuro esta planta puede ser utilizada y reconocida
como un medicamento natural y antiinflamatorio.

CONCLUSIONES

 Se logró evidenciar las propiedades antiinflamatorias del extracto


hidroalcohólico de la Moringa Oleifera aplicada a ratones blancos en
modelos de inflamación aguda.
 Se evidenció un efecto antiinflamatorio mayor en concentraciones de
400 mg/kg a diferencia de lo mostrado en la literatura recolectada
(llegaban a 200 mg/kg) del extracto hidroalcohólico de la moringa.
 Se logró mostrar efectos farmacológicos del extracto hidroalcohólico,
dando a conocer que es un buen método de extracción de metabolitos
como los fenoles o flavonoides.
 Se podría inferir que ambos medicamentos de contraste, ejercen
acciones antiinflamatorias por los resultados obtenidos en ambos grupos
de trabajo (grupo con moringa y otro con dexametasona).
 El grupo de trabajo con Dexametasona a una dosis de 4mg/kg logró una
disminución del efecto inflamatorio agudo por inhibición del ciclo de la
ciclooxigenasa bloqueando la síntesis de sustancias proinflamatorias,
siendo observable en la pata del animal de experimentación.
 El grupo de trabajo con el extracto hidroalcohólico de moringa, a dosis
de 400mg/kg, dosis mayor a las encontradas en referencias
bibliográficas, demostró una disminución marcada del efecto inflamatorio
agudo, que fue observado en las patas de los animales de
experimentación. 
 El extracto de moringa causa también la disminución de la síntesis de
sustancias proinflamatorias, y podría usarse como medicina alternativa
de elección ante procesos inflamatorio a agudos.

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