Universidad Rafael Landívar
Facultad de Ingeniería Laura Rebeca Iguardia Villalobos
Ingeniería Química Industrial Carné 1053813
Laboratorio de Bioquímica Sección 4
Inga. Carmen García 31 de Mayo del 2016
Práctica No. 1 (Parte B)
“Reconocimientos de Glúcidos”
INDICE
ABSTRACT..........................................................................................................................................................2
RESULTADOS.....................................................................................................................................................2
DISCUSIÓN DE RESULTADOS.......................................................................................................................3
CONCLUSIONES................................................................................................................................................5
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS..................................................................................................................5
BIBLIOGRÁFICAS...........................................................................................................................................5
APÉNDICE...........................................................................................................................................................5
DATOS ORIGINALES.....................................................................................................................................5
MUESTRA DE CÁLCULO..............................................................................................................................6
ANÁLISIS DE ERROR....................................................................................................................................6
ABSTRACT
En la primera práctica de laboratorio, "Reconocimiento de Glúcidos", que se llevó a cabo el día
martes 31 de Mayo del presente año, se realizó un procedimiento para la identificación de azúcares.
Los glúcidos, mayormente conocidos como carbohidratos, son uno de los componentes orgánicos
más abundantes en la naturaleza. Están formados por carbono, oxígeno e hidrógeno. Según su
estructura química se clasifican en monosacáridos (glucosa, fructosa y galactosa), disacáridos
(sacarosa, lactosa y maltosa) y polisacáridos (almidón, glucógeno). Los monosacáridos y los
disacáridos tienen propiedades edulcorantes (sabor dulce) y poseen poder reductor, a excepción de
la sacarosa. Los polisacáridos carecen de sabor dulce y de poder reductor. Los glúcidos se
encuentran mayormente en frutas y leche; sin embargo sus polímeros, como el almidón, se
encuentran en cereales, tubérculos y legumbres.
Para la determinación de azúcares reductores se realizó la prueba Fehling, la cual consistió en la
reducción del ión Cu2+ de color azul a Cu+ de color rojo mediante el grupo carbonilo del azúcar, el cual
se oxida a grupo carboxilo. En la identificación del almidón se llevó a cabo una reacción con lugol, la
cual se dio a partir de la formación de cadenas de poliyoduro a partir de la reacción entre el almidón y
el yodo presente en el reactivo de lugol, dando así una solución violeta. Para la hidrólisis de azúcares
no reductores, a la muestra de sacarosa se le agregó ácido clorhídrico y se calentó, se dejó enfriar y
se realizó la prueba de Fehling.
El objetivo general de la práctica fue realizar pruebas de identificación de los diferentes glúcidos
utilizados en la práctica. Los objetivos específicos consistieron en determinar los glúcidos reductores
mediante las pruebas de Fehling, identificar los polisacáridos mediante la reacción de lugol, e
hidrolizar el enlace de un disacárido para realizar la prueba de Fehling.
RESULTADOS
Tabla 1. Prueba de Fehling
Prueba de Fehling
Glúcido Prueba Color Resultado
Glucosa Positiva Ladrillo Reductor
Maltosa Positiva Ladrillo Reductor
Lactosa Positiva Ladrillo Reductor
Almidón Negativa Turquesa No reductor
Sacarosa Negativa Turquesa No reductor
Sacarosa Hidrolizada Positiva Ladrillo Reductor
Tabla 2. Reacción de Lugol
Almidón
Temperatura Color
Frío / Ambiente Azul
Caliente Amarilla
Tabla 3. Observaciones
Observaciones
Procedimiento Observación
Agregar glucosa en un tubo de ensayo, añadir Líquido incoloro. Al agregar reactivo A, solución
reactivo de Fehling A y reactivo de Fehling B a incolora. Al agregar el reactivo B, solución
cada tubo. turquesa.
Calentar en mechero. Al calentar, solución cambió color ladrillo.
Agregar maltosa en un tubo de ensayo, añadir Líquido incoloro. Al agregar reactivo A, solución
reactivo de Fehling A y reactivo de Fehling B a incolora. Al agregar el reactivo B, solución
cada tubo. turquesa.
Calentar en mechero. Al calentar, solución cambió a color ladrillo.
Agregar lactosa en un tubo de ensayo, añadir Líquido incoloro. Al agregar reactivo A, solución
reactivo de Fehling A y reactivo de Fehling B a incolora. Al agregar el reactivo B, solución
cada tubo. turquesa.
Calentar en mechero. Al calentar, solución cambió a color ladrillo.
Agregar almidón en un tubo de ensayo, añadir Líquido incoloro. Al agregar reactivo A, solución
reactivo de Fehling A y reactivo de Fehling B a incolora. Al agregar el reactivo B, solución
cada tubo. turquesa.
Calentar en mechero. Al calentar, solución no cambió de color.
Agregar sacarosa en un tubo de ensayo, añadir Líquido incoloro. Al agregar reactivo A, solución
reactivo de Fehling A y reactivo de Fehling B a incolora. Al agregar el reactivo B, solución
cada tubo. turquesa.
Calentar en mechero. Al calentar, solución no cambió de color.
Agregar almidón en un tubo de ensayo y lugol. Solución de alimidón transparente opaca. Cambió
Calentar durante unos minutos. a color azul marino al agregar el lugo.
Dejar enfriar. Al calentar, solución cambió a color amarillo.
Repetir varias veces el calentamiento y Al enfriar, solución retornó al color azul marino.
enfriamiento.
Agregar sacarosa a un tubo de ensayo y HCl. Solución incolora.
Agregar reactivo de Fehling A y reactivo de Al agregar reactivo A solución incolora, al agregar
Fehling B. solución B cambió a color turqueza.
Calentar. Al calentar, solución cambió a verde, luego
amarillo y finalmente color ladrillo.
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Los glúcidos, mayormente conocidos como carbohidratos, son uno de los componentes orgánicos
más abundantes en la naturaleza. Están formados por carbono, oxígeno e hidrógeno. Los glúcidos,
mayormente conocidos como carbohidratos, son uno de los componentes orgánicos más abundantes
en la naturaleza. Están formados por carbono, oxígeno e hidrógeno. En esta práctica se plantearon
tres objetivos para la identificación de diferentes glúcidos, los cuales consistieron en determinar
azúcares reductores mediante la prueba de Fehling, la identificación de polisacáridos mediante la
reacción de lugol, y la hidrólisis de azúcares no reductores.
El primer objetivo consistió en determinar los azúcares reductores, por lo que se realizó la prueba de
Fehling con cinco diferentes azúcares. La primer muestra en analizar fue la glucosa, colocando 3 mL
de ésta en un tubo de ensayo y agregando el reactivo de Fehling A y el reactivo de Fehling B. La
solución incolora de glucosa cambió a una solución color turquesa brillante al agregar los reactivos. El
reactivo A de Fehling consistía en una solución de sulfato de cobre (II) y el reactivo B de Fehling era
una solución alcailna de tartrato sódico, 2,3 dihidroxibutanodioato. Se calentó la solución con la ayuda
de la llama del mechero y a partir de esto se formó un precipitado color ladrillo, cambiando el color de
la solución y dando un resultado positivo. El ion Cu2+ (azul) fue reducido a Cu+ (rojo) en el medio
alcalino, indicando la presencia de un azúcar reductor. La capacidad reductora de un azúcar se debe
al grupo carbonilo, el cual es oxidado a un grupo carboxilo con agentes oxidantes suaves. El tartrato
sódico potásico se utiliza como estabilizador al formar un complejo con el Cu 2+ en medio fuertemente
básico, es por eso que se agrega esta solución. Se realizó el mismo procedimiento con la maltosa y
lactosa, obteniendo también precipitados color rojo ladrillo. Los resultados positivos indican que estos
azúcares también son reductores. Un azúcar es reductor cuando su carbono anomérico es capaz de
oxidarse, es decir que sus sustituyentes (OH y H) podrán oxidarse; esto quiere decir que al oxidarse,
podrá entonces reducir a otro compuesto. Al realizar la prueba con la sacarosa se obtuvo un
resultado distinto a las anteriores, ya que ésta al ser calentada no cambión su color. Esto se debe a
que la sacarosa es un disacárido formado por la glucosa y la fructuosa. Cada uno de estos
monosacáridos son reductores, sin embargo para formar la sacarosa sus carbonos anoméricos
forman un enlace glicosídico, lo que los inhabilita para ser agentes reductores en la reacción. Al
realizar la prueba de Fehling con el almidón el resultado también fue negativo. A pesar de que este
azúcar si posee carbonos anoméricos, estos se encuentran en menor proporción comparados con los
monosacáridos que lo constituyen y solamente los de los extremos de larga cadena que lo componen
tiene la capacidad para oxidarse. Estos pueden dar un falso negativo, indicando que el glúcido es
reductor cuando realmente no lo es. Sin embargo los resultados en la prueba realizada en el
laboratorio fueron satisfactorios, comprobando que el almidón no es un azúcar reductor.
El segundo objetivo consistió en la identificación de polisacáridos mediante la reacción de lugol. Para
esto se agregaron 3 mL de almidón en un tubo de ensayo y se le agregó una gota de lugol, dando
como resultado una solución color azul marino. El lugol es una disolución de yodo molecular y yoduro
de potasio en agua destilada. Cuando el almidón reaccionó con el yodo presente en el reactivo de
lugol, se formaron cadenas de poliyoduro dando como resultado un característico a la solución. La
amilosa, uno de los componentes del almidón con enlaces α (1-4), formó hélices en donde se juntaron
las moléculas de yodo, dándole así una coloración azul oscuro a la solución. La amilopectina, otro de
los componentes, es de estructura ramificada con enlaces α (1-4) (1-6), y formó hélices más cortas
donde las moléculas de yodo no se juntaron, por lo que la solución se tornó de color amarilla. El
complejo que se forma es sensible a la temperatura, ya que solamente al calentarlo se podía
observar la coloración amarilla y al enfriarlo nuevamente volvía la coloración azul. Esto se debe a que
en las espiras del almidón se produce una modificación y el yodo es liberado. Al mezclar el almidón
con el yodo no ocurre una reacción química sino una reacción física, donde se forma un compuesto
de inclusión que altera las propiedades físicas de la molécula, indicando así los cambios de color en
la solución. El lugol solamente reaccionara con polisacáridos debido a la estructura de estos,
formando un complejo de adsorción. El resultado de la prueba de lugol con el almidón fue positiva; a
diferencia de la glucosa, maltosa, lactosa y sacarosa, donde se obtuvieron resultados negativos.
El tercer objetivo consistió en hidrolizar la sacarosa para posteriormente realizar la prueba de Fehling.
Para esto se agregaron 3 mL de sacarosa en un tubo de ensayo y se le agregaron unas gotas de
ácido clorhídrico. La sacarosa está formada por glucosa y fructuosa, monosacáridos reductores. El
propósito de la hidrolización era separar estos dos componentes para posteriormente realizar la
prueba de Fehling. Estos componentes son separados mediante la acción ácida o enzimática, es
decir que con una solución de agua, azúcar y un ácido fuerte. Se le agregaron los reactivos A y B de
Fehling y se calentó. Durante el calentamiento la solución comenzó a tornarse color verde, luego un
tono amarillo y finalmente se formó un precipitado color ladrillo. A diferencia de la primer prueba con
la sacarosa, este resultado positivo se debió a que en la solución hidrolizada se había separado la
glucosa, azúcar reductor.
CONCLUSIONES
1. A partir de la prueba de Fehling se determinó que la glucosa, la maltosa y la galactosa son
azúcares reductores.
2. A partir de la reacción del lugol con el almidón se pudo comprobar que éste es un polisacárido
donde ocurre un cambio físico en la molécula y no una reacción química.
3. La prueba de Fehling da positiva al hidrolizar la sacarosa debido a que se separó la glucosa y la
fructuosa.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BIBLIOGRÁFICAS
Allinger, Norman L. Química Orgánica. [1983] Edición en español. Editorial Reverté, S.A.
Barcenola, España.
García Martos, Pedro. Microbiología Clínica Aplicada. [1997] Tercera Edición. Ediciones Díaz de
Santos, S.A. Madrid, España.
McMurry, John. Química Orgánica [2012] Octava Edición. Cengage Learning Editores, S.A.
México D.F., México.
Melo Ruíz, Virginia. Bioquímica de los Procesos Metabólicos. [2007] Segunda Edición. Editorial
Reverté, S.A. Barcelona, España.
Montiel, Ligia. Organización, Función Y Ecología en Los Seres Vivos. Conceptos Básicos. [1995]
Editorial EUNED. Costa Rica.
Peña Díaz, Antonio. Bioquímica. [2004] Segunda Edición. Editorial Limusa, S.A. Balderas, México
D.F. México.
Rodriguez C., Evelyn. Bacteriología General: Principios Y Prácticas de Laboratorio. [2005]
Editorial Universidad de Costa Rica. Costa Rica.
Voet, Donald. Bioquímica. [2006] Tercera Edición. Editorial Médica Panamericana. Buenos Aires,
Argentina.
APÉNDICE
DATOS ORIGINALES
Tabla 6. Datos Medidos
Datos Medidos
Dato Medido Valor
Glúcosa 3 mL ± 0.05 mL
Maltosa 3 mL ± 0.05 mL
Lactosa 3 mL ± 0.05 mL
Almidón 3 mL ± 0.05 mL
Sacarosa 3 mL ± 0.05 mL
DATOS CALCULADOS
No aplica.
MUESTRA DE CÁLCULO
No aplica.
ANÁLISIS DE ERROR
No aplica.