UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE QUÍMICA FARMACÉUTICA BIOLÓGICA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PRÁCTICA 8 CRISTALIZACIÓN DE LA ALBÚMINA DE HUEVO
INTEGRANTES
PRACTICA #8 CRISTALIZACIÓN DE LA ALBÚMINA
DE HUEVO
OBJETIVO
El alumno separará por medio de cristalización una proteína, a partir de huevo.
FUNDAMENTO
Las proteínas fibrosas son una clase particular de proteínas estructurales que
proporcionan soporte mecánico a las células u organismos. En el caso típico, las
proteínas fibrosas se ensamblan en grandes cables o hebras. Como ejemplos de
proteínas fibrosas están la α-queratina, el componente principal de cabello y uñas,
y la colágena, el componente proteínico
La composición de aminoácidos es también responsable del comportamiento de las
proteínas en diferentes condiciones de pH. Así al acidificar o alcalinizar una
determinada proteína, ésta puede llegar a su punto isoeléctrico, es decir, alcanzar
una carga neta de cero y por lo tanto precipitar.
La leche es un producto rico en proteínas, tales como las caseínas y globulinas,
además de contener carbohidratos y ácidos grasos. De la leche se puede separar
la caseína por precipitación en su punto isoeléctrico (pH 4.6).
El huevo también es un producto con una buena cantidad de nutrientes, tal como la
ovoalbúmina, la cual se clasifica como fosfoglucoproteína por tener hidratos de
carbono y fósforo. La precipitación de esta proteína con una solución saturada de
(NH4)2SO4 permite aislarla del resto de las proteínas que se encuentran en la clara
del huevo. A baja concentración, las sales incrementan la solubilidad de muchas
proteínas, fenómeno conocido como solubilización por salado. Para solubilizar
proteínas por salado son más eficaces las sales de iones divalentes tales como el
MgCl2 y el (NH4)2SO4 que las sales de iones monovalentes, tales como el NaCl, KCl
y el NH4Cl.
Existen factores que afectan el estado nativo de las proteínas, sin embargo, éstas
pueden someterse a una purificación parcial empleando técnicas bioquímicas
sencillas como la centrifugación, diálisis y cromatografía.
METODOLOGÍA
RESULTADOS
Los resultados obtenidos de la albúmina fueron unos cristales de un tono morado.
El peso final fue de 9.03g.
20g de habas + 100mL de agua
↓
80mL volumen total
↓
50mL se tomaron
La ureasa obtenida se conservó en refrigeración.
DISCUSIÓN
Con el sulfato de amonio se logró solubilizar la albúmina del huevo dejando que ésta
precipitara para poder después separarla por centrifugación. Se suspendía en más
sulfato de amonio para que la mayor cantidad de albumina precipitara y se
obtuvieran mejores resultados.
CONCLUSIÓN
El objetivo de la práctica se cumplió, se logró separar la albúmina de huevo
mediante el método de cristalización de una proteína, así como también se extrajo
la ureasa de la soya. Para este método son necesarias las sales como el sulfato de
amonio para la precipitación salina de las proteínas, o disolventes orgánicos como
etanol y acetona que disminuyen la solubilidad de las proteínas haciendo que
precipiten.
CUESTIONARIO
1. Sugieran métodos de identificación de los cristales obtenidos con base en el
peso molecular.
• Diálisis
• Ultrafiltración
• Ultracentrifugación
• Cromatografía de exclusión molecular
2. ¿Qué es la albúmina?
La albúmina es una proteína que se encuentra en gran proporción en el plasma
sanguíneo, siendo la principal proteína de la sangre y a su vez la más abundante
en el ser humano. Sus principales funciones son las siguientes:
• Mantenimiento de la presión oncótica.
• Transporte de hormonas tiroideas.
• Transporte de hormonas liposolubles.
• Transporte de ácidos grasos libres (no esterificados).
• Transporte de bilirrubina no conjugada.
• Transporte de muchos fármacos y drogas.
• Unión competitiva con iones de calcio.
• Control del pH.
• Funciona como un transportador de la sangre y lo contiene el plasma.
• Regulador de liquidos extracelulares, efecto Donnan.
3. ¿Por qué se utiliza sulfato de amonio al 50%?
Porque presenta gran solubilidad en relación con las proteínas.
BIBLIOGRAFÍA
Horton, H., Moran, A., Gray, K., Perry, M., David, J. (2008). Principios de
Bioquímica. México. 4° edición. Editorial PEARSON EDUCACIÓN. pp.
Porque presenta gran solubilidad en relación con las proteínas.
BIBLIOGRAFÍA
Horton, H., Moran, A., Gray, K., Perry, M., David, J. (2008). Principios de
Bioquímica. México. 4° edición. Editorial PEARSON EDUCACIÓN. pp.