• Sistema de 21 pruebas bioquímicas para la identificación rápida
de bacterias de la familia Enterobacteriaceae y otros bacilos
Gram negativos poco exigentes.
• Consta de 20 microtubos que contienen los sustratos
deshidratados de las pruebas bioquímicas tradicionales.
• Se inoculan con una suspensión bacteriana que rehidrata los
medios y, después de la incubación (18 a 24 h), debido al
metabolismo bacteriano se observan cambios de color
espontáneos o por la adición de reactivos.
• La lectura de las reacciones se hace de acuerdo con una tabla
de lectura, se obtiene un perfil numérico y la identificación se
realiza buscando el perfil numérico en una base de datos
(catálogo o software).
o Etiquetar en la lengüeta de la cámara
o Preparar suspensión bacteriana al tubo 0,5 de McFarland
y homogeneizar.
o Inocular la galería API20E.
Llenar con la suspensión bacteriana
todos los tubos, no la cúpula de
todos los pocillos (cuidando no
introducir burbujas).
o Llenar la cúpula de los pocillos CIT, VP, GEL
o Llenar con aceite mineral las cúpulas de los pocillos
ADH, LDC, ODC, URE y H2S.
o Colocar la tira en su propia cámara húmeda de incubación.
Para lo cual previamente poner agua destilada o SSI en los
alvéolos de la cámara para proporcionar una atmósfera
húmeda durante la incubación.
o Incubar a 37 ° C durante 24 h.
o Leer resultados (a las 24 h) comparando los colores de
cada pocillo con los de la tabla de lecturas.
o Nota: Un tono verdoso en glucosa (GLU) se considera
positivo ya que es el carbohidrato que utilizan por
excelencia y da muy rápido. Se pone verde porque se
agota la glucosa, empieza a utilizar peptonas y se
alcaliniza el medio.
o Un ejemplo:
o Notar el tono verdoso en las pruebas positivas de
carbohidratos, el tono muy tenue del color rojo en la
prueba VP (Vogues-Proskauer) y el amarillo, también
muy tenue de la prueba ONPG.
Pruebas incluidas en la Galería API 20 E
Tabla de lectura
o Registrar los resultados de los pocillos que no
requieren ser revelados.
o Revelar los pocillos que se describen a continuación:
TDA : Añadir una gota de FeCl3 y comparar el color
obtenido con el indicado en la tabla de lectura
(marrón-rojo +).
VP: Adicionar un gota del reactivo 1: (KOH 40%) y
una gota del reactivo 2: α-naftol (C2H5OH). Dejar
reposar 10 minutos y comparar el color obtenido
con el indicado en la tabla de lectura (rosa-rojo +).
IND: Añadir una gota de reactivo de Kovacs o
Ehrlich (rosa o anillo rojo-rosa +).
o Del conjunto de reacciones y resultados se obtiene un
perfil numérico de 7 cifras (bionúmero)
o Los pocillos están separados en grupos de tres, en total
se tienen 7 grupos de 3 tubos (tripletes).
o A cada pocillo se le asignará un valor 0,1,2 ó 4 de
acuerdo a los siguientes criterios:
Si la reacción es negativa se pone 0.
Si la reacción es positiva: Se pone 1 si es el primer
pocillo de un triplete, 2 si es el segundo y 4 si es el
tercero.
o Se suman los valores de cada triplete. Los 7 números
resultantes, nos dan un perfil numérico de 7 cifras.
o Identificar al microorganismo en base al perfil numérico
obtenido y la base de datos.
o Taxón
Excelente
o Calidad de identificación Muy buena
Buena
No identifica
o % de identidad
o Pruebas complementarias
Recomienda hacer otras pruebas para mejorar y
lograr la correcta identificación del microorganismo
o Rapidez en la manipulación.
o 20 pruebas al mismo tiempo
o Disponibilidad de bases de datos para la identificación.
o Se usa muy poco inóculo
o Poco tiempo de incubación (resultados rápidos)
o Muy poco sustrato (medio de cultivo)
Prueba Resultado Prueba Resultado Prueba Resultado
ONPG + TDA -- SOR +
ADH + (v) INO + RHA +
LDC + VP -- SAC --(v)
ODC + GEL -- MEL +
CIT -- GLU + AMY --
H2S -- MAN + ARA +
URE -- INO -- OX --
BIONÚMERO: 7144552