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Determinación de Colesterol HDL

Este documento proporciona instrucciones para realizar un ensayo para medir el colesterol HDL (colesterol de alta densidad) en una muestra de suero o plasma. El método implica precipitar las lipoproteínas de baja y muy baja densidad con fosfotungstato en presencia de iones de magnesio, dejando el colesterol HDL en el sobrenadante. Luego se mide la absorbancia del sobrenadante y se calcula la concentración de colesterol HDL en la muestra. También proporciona valores de

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Determinación de Colesterol HDL

Este documento proporciona instrucciones para realizar un ensayo para medir el colesterol HDL (colesterol de alta densidad) en una muestra de suero o plasma. El método implica precipitar las lipoproteínas de baja y muy baja densidad con fosfotungstato en presencia de iones de magnesio, dejando el colesterol HDL en el sobrenadante. Luego se mide la absorbancia del sobrenadante y se calcula la concentración de colesterol HDL en la muestra. También proporciona valores de

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HDLc -P

Colesterol HDL
Reactivo precipitante

Reactivo precipitante de HDL colesterol - Con Factor:


IVD (A) Muestra x 320 = mg/dL HDLc en la muestra

Conservar a 2-8ºC Cálculo LDL-colesterol


Se calcula mediante la fórmula de Friedewald
PRINCIPIO DEL METODO
Las lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL) y baja Triglicéridos
LDL colesterol = Colesterol total - - HDL colesterol
densidad (LDL) del suero o plasma, se precipitan con
5
fosfotungstato en presencia de iones magnesio. Tras su CONTROL DE CALIDAD
centrifugación, el sobrenadante claro conteniendo las Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
lipoproteínas de alta densidad (HDL) se emplea para .
determinar el colesterol HDL1,2. Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar
el instrumento, los reactivos y el calibrador.
SIGNIFICADO CLINICO Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
El colesterol transportado por las lipoproteínas de alta densidad correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las
(HDL) a menudo se denomina “colesterol bueno”, ya que niveles tolerancias.
elevados están relacionados con un menor riesgo cardiovascular.
Un nivel bajo de colesterol HDL es considerado uno de los principales
1,6,7
VALORES DE REFERENCIA3
factores de riesgo cardiovascular . HDL-colesterol:
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los Hombres Mujeres
datos clínicos y de laboratorio. Riesgo menor > 55 mg/dL > 65 mg/dL
Riesgo normal 35-55 mg/dL 45-65 mg/dL
REACTIVOS Riesgo elevado < 35 mg/dL < 45 mg/dL
R Ácido fosfotúngstico 14 mmol/L
Reactivo precipitante Cloruro magnésico 2 mmol/L LDL-colesterol:
Ref. 1001092 Valores elevados a partir de : 160 mg/dL
Opcional Cholesterol
Ref. 1001093 Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
establezca sus propios valores de referencia.
PREPARACION
El reactivo está listo para su uso. CARACTERISTICAS DEL METODO
Rango de medida: Desde el limite de detección de 1,57 mg/dL hasta el
CONSERVACION Y ESTABILIDAD limite de linealidad de 275 mg/dL.
Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de Si la concentración es superior al limite de linealidad, diluir la muestra 1/2
caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la Precisión:
luz y se evita la contaminación durante su uso. Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Media (mg/dL) 75,8 33,9 95,2 182
Indicadores de deterioro de los reactivos: SD 0,89 0,85 2,59 3,04
- Presencia de partículas y turbidez. CV (%) 1,18 2,51 2,72 1,68
Sensibilidad analítica: 1 mg/dL = 0,0015 A.
MATERIAL ADICIONAL Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 505 nm (500-550). sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. comerciales (x).
- Equipamiento habitual de laboratorio. Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
MUESTRAS INTERFERENCIAS
Suero o plasma1. 1
No se han observado interferencias con triglicéridos hasta 4 g/L .
No utilizar muestras hemolizadas. Separar el suero de los Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
4,5
hematies lo antes posible. determinación del Colesterol HDL .
Estabilidad de la muestra: 7 días a 2-8ºC.
NOTAS
PROCEDIMIENTO SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la
Precipitación aplicación de este reactivo en distintos analizadores.
1. Dosificar en tubos de centrífuga:
BIBLIOGRAFIA
R (µL) 100 1. Naito H K. High-density lipoprotein (HDL) cholesterol. Kaplan A et al. Clin Chem
The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1207-1213 and 437.
Muestra (mL) 1,0 2. Grove T H. Effect of reagent pH on Determination of HDL Cholesterol by
2. Mezclar y dejar reposar 10 minutos a temperatura precipitation with Sodium Phosphotungstate-magnesium Clin Chem 1979;
25:560,.
ambiente. 3. US National Cholesterol Education Program of the National Institutesof Health.
3. Centrifugar 20 min a 4000 r.p.m. 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
4. Recoger el sobrenadante y determinar el HDL Colesterol. 5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001.
6. Burtis A. et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. AACC 1999.
Ensayo 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. AACC 1995.
Proceder según lo indicado en las instrucciones de trabajo PRESENTACION
del reactivo de Colesterol.
Ref: 1001095 Cont. 4 x 5 mL
CALCULOS
- Con Calibrador:
( A ) Muestra
x (Conc. Calibrador) = mg/dL HDLc en la muestra
( A ) Calibrador

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