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Tutorial de Análisis Filogenético en MEGA

Este documento proporciona instrucciones en 10 pasos para editar árboles filogenéticos usando el software Mega. Incluye cómo obtener y alinear secuencias, construir el árbol filogenético usando el método de vecino más cercano, y guardar y editar el árbol resultante.

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Citlali Cuevas
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Este documento proporciona instrucciones en 10 pasos para editar árboles filogenéticos usando el software Mega. Incluye cómo obtener y alinear secuencias, construir el árbol filogenético usando el método de vecino más cercano, y guardar y editar el árbol resultante.

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Práctica 3

Tutorial para el Software Mega


Edición de arboles filogenéticos
Citlali Cuevas Flores
Análisis genético
6to semestre-Matutino
1. Tener a la mano la secuencia sobre la que se quiera trabajar

1.1 La secuencia se puede obtener de GenBank en formato FASTA


Las secuencias en formato FASTA se
1.2 guardarán en el Bloc de notas

El archivo se abrirá con el programa MEGA


2. Las secuencias se abrirán en el programa de manera “semiordenada”
Las secuencias se pueden comparar en BLAST para comprobar que se trata de los
3. organismos deseados

Se selecciona el comando de BLAST selected secuence y se enlaza directo a la red


4.1 4.2

4.
Se seleccionan todas
las secuencias para
poder alinearlas

4.3
5.1

5.2
La finalidad de alinear las secuencias es para poder compararlas
5. Cada renglón tiene la información
Se abrirá una ventana…
5.3.

Los números solo


Los valores se pueden cambiar
pueden ser
dependiendo lo que se desee
menores o
iguales a cero

Se van a computar para alinearse


5.4

El programa iniciará el proceso de


alineamiento y tardará dependiendo el
numero y tamaño de las secuencias
5.5

Una vez terminado el alineamiento, las secuencias se ordenarán con respecto a los
aminoácidos y se van marcar las posiciones donde hay cambios
frecuentemente
Cuando las secuencias presentan asteriscos es que son iguales
Sino…. Es que la secuencia presenta mutaciones
Haciendo posible la identificación de SNPS
5.6
Otra manera de identificar las regiones con SNPs es por medio
de la opción Toggle Conserved Sites, si es al 80%, entonces
estas son la únicas en colorearse
Para guardar los cambios y poder seguir trabajando con las secuencias, se
6. tienen que exportar (debido a las facilidades) en formato FASTA
6.1
Se guardará en el sitio
de su preferencia y se
verificará el formato
7.1

Para comenzar la realización del cladograma, se utilizará la opción de


7. Phylogenetic Analysis
Se oprimirá clic en “Yes” 7.2

7.3 Por ultimo se cerrará la ventana donde se ha estado trabajando


8. Cerrando la ventana anterior, el apartado del software quedará de esta forma

8.1
Se dará clic en la opción de Phylogeny y
posteriormente a Construct/Tesr Neighbor-
Joining Tree

8.2 Se oprimirá clic en “Yes”


9. Se abrirá una ventana para dar formato al árbol filogenético

Se seleccionará el modelo de
Bootstrap method

9.1

9.2

Para el que sea un número ideal de


replicas se escogerá 1000
9.3 Se obtendrá un árbol filogenético con la descripción de este
Se borrará el nombre completo de la secuencia, dejando únicamente el de
9.4 la especie o el tipo de gen
El árbol filogenético se podrá editar dependiendo el
9.5 modelo que se desee utilizar

Ejemplo 1: Circular

Ejemplo 2: Rectangular
10.1 En la opción de imagen se mostrarán los formatos

10. El árbol filogenético se guardará en el formato que se desee


10.2 En caso de que se guarde en formato PDF, la imagen se convertirá directamente

III.
¡LISTO!
:D

Common questions

Con tecnología de IA

To ensure clarity in the final phylogenetic tree output, sequence names in MEGA should be modified by deleting the full sequence name and retaining only the species or gene type. This process makes the tree more readable and focused on the essential evolutionary relationships, simplifying interpretation and presentation .

When selecting a model for phylogenetic tree display in MEGA, considerations include the purpose of the visualization and the available data. Choosing between circular and rectangular models may depend on the complexity and clarity needed for presentation. Additionally, the tree should be formatted clearly to emphasize key evolutionary relationships and align with the study's goals. Saving options include various image formats, and specific formats, such as PDF, can be chosen depending on presentation needs .

Saving phylogenetic trees in various formats after creation in MEGA is crucial for accommodating diverse presentation needs and ensuring research dissemination reaches broader audiences. Different formats, such as PDFs for reporting and editable images for publication, allow researchers to tailor the display and information according to specific academic and practical contexts, facilitating clear communication and sharing of findings .

After aligning sequences, constructing a phylogenetic tree in MEGA involves selecting 'Phylogenetic Analysis' and then using options such as 'Phylogeny' and 'Construct/Test Neighbor-Joining Tree'. A formatting window allows selections like the Bootstrap method to finalize the tree. The tree is then edited to include relevant species names and can be visualized in different forms, such as circular or rectangular, and saved in a desired format .

MEGA facilitates comparative genetic analysis by allowing sequences from GenBank, stored as FASTA files, to be opened and aligned. The alignment process highlights differences using markers such as asterisks to denote identical positions or changes indicating mutations. This comparison enables the identification of SNPs and deeper analysis of genetic variations, providing insights into evolutionary and functional relationships among organisms .

The BLAST tool is integrated into MEGA to ensure the sequences in question correspond to the desired organisms. After obtaining sequences in FASTA format and opening them in MEGA, the command 'BLAST selected sequence' is used to directly connect to the database. This allows researchers to verify the sequences against known data, ensuring their accuracy before further analysis .

The 'Toggle Conserved Sites' option in MEGA aids in SNP identification by highlighting regions of sequences that maintain a specified level of conservation, such as 80%. This visualization helps pinpoint areas likely to contain SNPs since variations would disrupt the conserved nature at these sites, making changes more prominent for analysis .

Exporting aligned sequences in FASTA format is necessary for saving changes and ensuring the continuity of genetic work. This format is widely recognized and facilitates further analysis or sharing of the data. When exporting, it is crucial to verify the format and ensure that the sequences are saved accurately in the preferred location, as this affects subsequent ease of access and use .

The purpose of aligning sequences using the MEGA software is to facilitate comparison. When the sequences are aligned, it helps identify similarities and differences among them, particularly by marking positions where changes occur frequently. This process is essential for identifying Single Nucleotide Polymorphisms (SNPs), which are variations that can indicate genetic differences .

The Bootstrap method in phylogenetic analysis is significant for assessing the reliability of the inferred phylogenetic trees. It involves resampling the sequence data and constructing trees repeatedly (e.g., 1000 times) to determine the consistency of the results. This approach provides a measure of confidence, often expressed as a percentage, for each branch of the tree, indicating the support level for that particular phylogenetic grouping .

Práctica 3
Citlali Cuevas Flores 
Análisis genético
6to semestre-Matutino
Tutorial para el Software Mega
Edición de arboles f
Tener a la mano la secuencia sobre la que se quiera trabajar
1.
1.1
La secuencia se puede obtener de GenBank en formato FASTA
Las secuencias en formato FASTA se 
guardarán en el Bloc de notas
1.2
El archivo se abrirá con el programa MEGA
Las secuencias se abrirán en el programa de manera “semiordenada”
2.
Las secuencias se pueden comparar en BLAST para comprobar que se trata de los 
organismos deseados
3.
Se selecciona el comand
Se seleccionan todas 
las secuencias para 
poder alinearlas
4.
4.1
4.2
4.3
La finalidad de alinear las secuencias es para poder compararlas
Cada renglón tiene la información 
5.
5.1
5.2
5.3.
Los valores se pueden cambiar 
dependiendo lo que se desee
Se abrirá una ventana…
Los números solo 
pueden ser 
menores
5.4
El programa iniciará el proceso de 
alineamiento y tardará dependiendo el 
numero y tamaño de las secuencias
5.5
Una vez terminado el alineamiento, las secuencias se ordenarán  con respecto a los 
aminoácidos y se van marcar las posic

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