MEDIO RUGAI MODIFICADO
USO PRETENDIDO:
Este medio es utilizado para identificar las principales espécies de
Enterobactérias, Víbrios y Aeromonas, permitiendo en un solo tubo la lectura,
de las siguientes reacciones: motilidad de la bacteria indicado por la turbiedad
de la lisina en la base, lisina descarboxilasa, fermentación de la glucosa en
profundidad y de la sacarosa en la superfície del medio, producción de gás
sulfídrico (H2S), gás en glucosa, utilização do aminoácido L- triptofano
(desaminação), hidrólise da uréia e no tampão do tubo, um desenvolvimento de
coloração avermelhada que indica a formação de indol.
MUESTRAS:
Se trata de un medio para distinción que no debe ser utilizado para el
aislamiento primario de agentes patogénicos partir de muestras clínicas. Este
medio es utilizado en la distinción de cultivos puros obtenidos en medios de
aislamiento.
INFORMACIONES:
El diagnóstico laboratorial de los bacilos Gram negativos (BGN) fermentadores
de la glucosa se basa principalmente en la identificación de enterobacterias. El
aislamiento de BGN que no reaccionan a la prueba prueba de oxidasa no
ofrece mucha dificultad cuando estamos delante de cepas bioquimicamente
típicas. Este medio de cultivo se destina a la identificación presuntiva de
enterobacterias. Su finalidad principal es la clasificación bioquímica de colonias
que crecen en los medios selectivos para bacterias Gram negativas.
Para una identificación más precisa de los microorganismos, se recomienda la
utilización del Kit para Enterobacterias, una vez que el Medio de Rugai con
Lisina se aporta solamente para diagnóstico presuntivo de los mismos.
El medio es compuesto de:
Parte Superior: Medio de Rugai
Parte Central: Cera de Vascar
Parte Inferior: Medio de Lisina Tapa: indol
COMPOSICIÓN Y PRESENTACIÓN:
Peptona, extracto de carne, hierro, tiosulfato de sodio, Agar.
PRESENTACIÓN:
Paquete con 25 tubos.
ALMACENAMIENTO:
Este producto debe ser almacenado en temperatura de 2 a 8 0C, podiendo ser
transportado en temperatura ambiente por hasta 72 horas.
CUIDADOS Y PRECAUCIONES:
1. Producto para uso diagnóstico “in vitro”;
2. No utilizar productos con el plazo de validez expirado o con el sello de
calidad roto
3. Antes de descartar el material usado autoclavar a 121° por 15 minutos
MATERIALES NECESARIOS NO OFRECIDOS:
Estufa bacteriológica;
Correa bacteriológica.
PROCEDIMIENTO TÉCNICO:
1. Retirar los tubos que serán utilizados del refrigerador y esperar hasta que
las mismas alcancen la temperatura ambiente;
2. Usando aguja bacteriológica flambeada, tocar en la superfície de una
colonia e inocular a través de una picada central que alcance la porción
inferior del medio lisina- motilidad, teniendo cuidado para no torcer la punta
de la aguja. Al tirar la aguja en dirección a la superfície, se debe tener
cuidado para que esta recorra el mismo camino y al alcanzar la superfície
se hace el estriado.
INTERPRETACIÓN:
Desaminación del L-Triptofano: prueba positiva cuando existe desarrollo de
coloración verde botella en el ápice del tubo y la prueba negativa se caracteriza
por la manutención del color original del medio o color amarillenta;
Fermentación de la glucosa: El surgimiento de color amarillo en la porción
inferior del medio, caracteriza prueba positiva, de lo contrario, el medio se
mantiene inalterado; esta prueba debe ser obligatoriamente positiva para todas
las enterobacterias, se debe quedar atento para el facto de que, en los casos
de bacterias que producen H2S o hidrolisan la urea, el color amarillo es
encubierto;
Fermentación de la sacarosa: surgimiento de color amarillento en la
superfície del medio.
Producción de gás a partir de la glucosa: caso la bacteria en estudio
produzca gás a partir de la glucosa, irán ser formadas burbujas en el interior del
medio, en algunos casos el medio se puede llegar a partirse y sufrir
desplazamiento; Producción de gás sulfídrico (H S): la producción de gás
sulfídrico es evidenciada por el surgimiento de coloración negra con intensidad
variable en la porción inferior del medio;
Hidrólisis de la urea: se considera la prueba positiva cuando existe la
formación de una coloración azulada en la porción inferior del medio.
Descarboxilación de la lisina: inicialmente el medio irá quedarse amarillo
indicando que la bacteria es viable, y en el caso de existir la descarboxilación
de la lisina, el medio vuelve al color púrpura original, de lo contrario, para
prueba negativa, las colonias a identificar son sembradas por picada en
profundidad y el medio se mantiene amarillo.
Motilidad: caso el crecimiento bacteriano se quede restricto a la línea de
picada se considera la motilidad negativa, de lo contrario, para la motilidad
positiva hay un crecimiento difuso con turbiedad parcial o completa del medio;
Indol: El surgimiento de un color rojo en la tapa caracteriza la prueba positiva.
Fase Superior
ÁPICE:
Azul: sacarosa negativa LTD negativo
Amarillo: sacarosa positiva LTD negativo verde botella: sacarosa negativa LTD
positivo
Pardo: sacarosa positiva LTD positivo
BASE:
Amarillo: glucosa positiva Base: amarillo: glucosa positiva Azul: urea positiva
Oscuro: H2S positivo
Amarillo con burbujas: glucosa y gás positivos
FASE INFERIOR:
Violeta: lisina descarboxilasa positiva
Amarillo: lisina descarboxilasa negativa
Con turbiedad: motilidad positiva (móvil)
Sin turbiedad: motilidad negativa se observa nítidamente el crecimiento
CONTROL DE CALIDAD:
A cada lote recibido o en frequencia establecida por el usuario. Se recomienda
la utilización de cepas ATCC o derivadas. Ver la tabja abajo.
GARANTÍA DE CALIDAD:
La RenyLab obedece lo establecido en la Ley 8.078/90 - Código de Defensa
del Consumidor. Para que el producto presente su mejor rendimiento, es
necesario:
1. que el usuario conozca y siga rigurosamente el siguiente procedimiento
2. que los equipamientos y demás accesorios necesarios estén en buenas
condiciones de uso, manutención y limpieza. Antes de ser liberado para
venta, cada lote del producto es sometido a pruebas específicas, que son
repetidos periódicamente conforme el calendario establecido por la empresa
hasta la fecha de vencimiento.
Los certificados de análisis de cada lote pueden ser obtenidos en el sítio
[Link]. En caso de dudas o cualquier problema de origen técnica,
entrar en contacto con el SAC - Servicio de Asesoría al Cliente a través del
teléfono (+55 32) 3331-4489 o por el correo sac@[Link]. Cualquier
problema que afecten una buena respuesta del producto, que tengan ocurrido
con pruebas por falla de la RenyLab serán resueltos sin costos al cliente,
conforme lo establecido en ley.
BIBLIOGRAFÍA:
1. ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames
Microbiológicos;
2. Oplustil, C.P., Zoccoli, C.M., Tobouti, N.R., e Sinto, S.I. Procedimentos
Básicos em Microbiologia Clínica, Sarvier, São Paulo, 2000.
3. MERCK. Manual de medios de cultivo. Darmstadt, 1990.
RenyLab Química e Farmacêutica Ltda
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Teléfono (+55 32) 3052-7746 / 3331-4489
Responsable técnico: Renê Vaz de Mello
CRF-MG: 2709
[Link]
Registro en el Ministério de la Salud: 80002670075
Características del cultivo luego de 18-24 horas a 35-37ºC.
Organismo LTD GLI GAS H2S URE LIS MOT IND SAC
E. coli - + + - - + + + +
Shigella - + - - - - - +/- -
Salmonella - + + + - + + - -
Proteus + + - + + + + +/- -
Enterobacter - + + - - - + - +
Citrobacter - + + +/- - - + +/- +/-
Klebsiella - + + - + + - - +
Serratia - + - - - + + - +
Providencia + + +/- - - - + + +/-