Determinación del coeficiente volumétrico de transferencia de oxigeno ( KLa )

Danilo Hernández1, Adrián Morales Morales 2, Harold Lozano Olivares 3

1
Estudiantes de Ingeniería de Alimentos, Universidad de Córdoba, Berástegui,
Colombia.

Orientador: PhD. Deivis Lujan Rhenals

RESUMEN

El método dinámico permite la determinación de KLa en diferentes etapas del proceso. La

principal limitación de este método radica en la necesidad de mantener la concentración de
oxígeno disuelto por encima del valor crítico. El siguiente estudio se realizo para determinar
y evaluar el coeficiente volumétrico de transferencia de oxigeno; en un caldo de
fermentación que contenía 15 g /L de peptona, 15 g /L de extracto de levadura y 35 g/L de
glucosa con una de velocidad de 80 rpm de agitación, se pudo obtener las grafica
correspondiente de CL vs VS y el el coeficiente volumétrico de transferencia de oxígeno.

Palabras Claves: Proceso, oxigeno, coeficiente, fermentación.

SUMMARY

The dynamic method it allows KLa's determination in different stages of the process. The
principal limitation of this method takes root in the need to support the concentration of
oxygen disuelto over the critical value. The following study I realize to determine and to
evaluate the volumetric coefficient of transfer of oxygen; in a broth of fermentation that was
containing 15 g/L of peptona, 15 g/L of extract of yeast and 35 g/L of glucose with one of
speed of 80 rpm of agitation, corresponding grafica of CL could obtain vs Vs and the
volumetric coefficient of transfer of oxygen.

Key words: Process, I become oxygenated, coefficient, fermentation.

 1. INTRODUCCIÓN

La medición de la capacidad de transferencia de masa, oxígeno, en un biorreactor aerobio

es de suma importancia, por cuanto dicho valor determinará la productividad del sistema.
La característica general de los problemas de transferencia de masa en un sistema
fermentativo es que el oxígeno pasa desde una fase a otra en la cual se encuentra el
microorganismo.

Las distintas etapas presentes en este fenómeno son:

• Transporte del oxígeno desde la fase gaseosa hacía la interfase gas-líquido.

• Difusión del oxígeno a través de la interfase gas-líquido.

• Transporte del oxígeno a través de la fase líquida hasta las vecindades del
microorganismo.

• Difusión del oxígeno en la interfase líquidosólido (célula).

• Difusión intrapartícula (intracelular).

• Reacción bioquímica intracelular.

Una de las particularidades de la ocurrencia de este fenómeno es que todas estas etapas
se dan en serie. Se ha determinado, por ejemplo, que en microorganismos unicelulares la
etapa limitante la constituye la difusión del oxígeno en la interfase gas-líquido, de modo que
la velocidad neta de transferencia de masa se expresa en términos de un coeficiente de
transferencia referido a la fase líquida, el área de la Interfase y un gradiente de
concentraciones de oxígeno entre la interfase y la fase líquida (1).

El oxígeno disuelto es un nutriente limitante en cultivos con alta demanda de oxígeno, lo

cual puede deberse a la velocidad de crecimiento del microorganismo, a una alta
producción de biomasa o a que las propiedades reológicas de los medios de cultivo
ofrezcan resistencia a la transferencia de masa. Sin embargo, una de las razones
principales por las que la disponibilidad del oxígeno en el medio de cultivo es limitada, está
relacionada con su baja solubilidad en soluciones acuosas de nutrientes. Para superar este
inconveniente y evitar que la transferencia de oxígeno sea el paso controlador para el
crecimiento microbiano, viéndose afectado el cultivo y el bioproceso, se emplean como
alternativas convencionales cambios en la velocidad de agitación o en el flujo de aireación
o en los sistemas de distribución de aire (2).

2. MATERIALES Y METODOLOGÍA

1) Preparación del pre-inoculo:

Se preparó un pre-inoculo un día previo a la realización el experimento con el fin de

evitar la fase de latencia de los microorganismos.

FIGURA 1. FERMENTADOR BATCH SUMERGIDO AEROBIO

2) Inoculación y Fermentación:

 Se inocular el fermentador con 100 mL de pre-inóculo (10% del volumen final).

 Se instalaron los accesorios del fermentador aerobio; (ver figura 1).

 Se suministro gran cantidad de aire 1,5 vvm, y velocidad de 80 rpm.

 Se dejo estabilizar el sistema durante 10 min, se suspendió suministro de aire

hasta lograr el valor inicial cuando sistema no era aireado, se reinició la aireación
hasta alcanzar la concentración en el tiempo cero. (registrando los datos con el
tiempo correspondiente).

3. RESULTADOS y ANÀLISIS
 4. PREGUNTAS

2. Consulte las principales ventajas y desventajas que pueda tener este método
en comparación a los otros que ya usted conoce.

Otros métodos de medición del kLa

Se han propuesto otras técnicas para la medición del coeficiente volumétrico de

transferencia de masa las cuales mejoran ciertos aspectos de los métodos clásicos.
Algunos de ellos se basan en una reacción química como por ejemplo la oxidación de
hidracina propuesta por Onken (1985) o la biooxidación de catecol la cual forma un
semialdehído 2-hidroximucónico y es catalizada por la enzima catecol-2,3- dioxigenasa
(Ortiz-Ochoa, 2005). Hill (2006) elabora un método que utiliza el cambio de pH producto de
un constante burbujeo de dióxido de carbono en un reactor bien mezclado. Si bien este
método se utiliza originalmente para la medición de la transferencia de masa del dióxido de
carbono, se puede correlacionar con la transferencia de oxígeno por medio de la teoría de
capa (Hill, 2006). Otros métodos consisten en la medición de la tasa de crecimiento de un
microorganismo estrictamente aeróbico en condiciones limitadas de oxígeno por un período
de tiempo específico (3)..

También existen técnicas para la determinación del coeficiente de transferencia de masa

basadas en métodos físicos. Carbajal (2004) propone el método del cambio dinámico de
presión, en donde se mide el cambio en la concentración de oxígeno disuelto cuando se
cierra parcialmente la salida del gas de un medio de cultivo para aumentar la presión parcial
de oxígeno. Este método tiene la ventaja sobre el método dinámico tradicional en que en
ningún momento se priva a los microorganismos de oxígeno (Carbajal, 2004). Otra técnica
es conocida como el método dinámico con pulsos azarosos y consiste en la generación de
perturbaciones de corta duración en el aire de entrada al biorreactor, conocidas como
pulsos. Los pulsos pueden ser nitrógeno puro o aire, por lo que la concentración del oxígeno
disuelto varía al ocurrir cada pulso y esto puede ayudar a determinar el kLa (Gauthier,
1991). Pendersen (1994) introduce un nuevo método que consiste en la inyección del
isótopo radioactivo Kr-85 dentro del medio y la posterior medición de la radioactividad en el
gas de salida. Este método, al igual que los que utilizan la concentración de dióxido de
carbono, se vale de la teoría de capa para predecir el kLa del oxígeno a partir del de kriptón
(3).
Comparación de los valores de kLa obtenidos por los diferentes métodos

Como se mencionó previamente, los métodos químicos tienen la limitación de los cambios
en la dinámica del fluido causada por la adición de sustancias adicionales. Entre los
métodos físicos, el método dinámico es por mucho el más comúnmente utilizado en las
últimas décadas para evaluar el kLa debido a su simplicidad y su buena precisión. Tanto
las mediciones de absorción como la de desorción dan valores idénticos del kLa bajo las
mismas condiciones hidrodinámicas (Gomez, 1995); sin embargo, si el tiempo de respuesta
del sensor de oxígeno es de la misma magnitud que el tiempo del proceso de transferencia
de oxígeno (1/kLa), la respuesta dinámica del sensor debe tomarse en cuenta para la
determinación correcta del kLa (3).
Tabla. Comparación de los diferentes métodos de determinación del coeficiente
volumétrico de transferencia de oxigeno
 3. ¿Qué otros factores pueden alterar el valor del KLa en un sistema de fermentación?
Explique.

Factores que afectan los valores de kLa

Efecto de iones disueltos

El coeficiente volumétrico de transferencia de masa aumenta significativamente cuando la

concentración de iones en la disolución se eleva. La adición de electrolitos aumenta la
retención del gas debido a su influencia en disminuir el tamaño de burbuja y al generar un
efecto de no-coalescencia tanto a baja presión como a alta presión (Arjunwadkar, 1998;
Gogate, 2000). Van’t Riet (1979) establece que en las disoluciones iónicas, el kLa es más
dependiente de la potencia por unidad de volumen que en comparación con el agua pura.

Efecto de la viscosidad del líquido

Los valores de kLa disminuyen conforme aumenta la viscosidad del líquido (Arjunwadkar,
1998; García- Ochoa; 1998). Gogate (2000) explica que este fenómeno se presenta debido
a que la distribución del tamaño de las burbujas en esta disolución es tal que predominan
las burbujas muy grandes y las muy pequeñas. Las burbujas grandes tienen una alta
velocidad de ascensión, poco tiempo de retención y un área superficial baja. Por otro lado,
las burbujas muy pequeñas poseen muy poco oxígeno y se agotan rápidamente. Además,
con un aumento en la viscosidad existe un aumento en la capa límite la cual aumenta la
resistencia a la transferencia de masa. Por lo tanto, únicamente los vórtices con suficiente
energía pueden penetrar esta capa y lograr el rompimiento de las burbujas o la transferencia
de solutos gaseosos al líquido.

Efecto de agentes antiespumantes

La presencia de espuma en los bioprocesos es algo muy común y una estrategia para
controlar esta situación es con el uso de un agente antiespumante. Los agentes
antiespumantes de silicón son considerados como ideales entre los disponibles para
sistemas biológicos debido a su naturaleza inerte. Los agentes antiespumantes actúan al
alterar las características de la tensión superficial las cuales también afectan el
comportamiento de coalescencia en la fase gaseosa, y a su vez, afecta el kLa (Gogate,
2000). La coalescencia aumenta y se forman burbujas más grandes, por lo que la
transferencia disminuye (Arjunwadkar, 1998). Otros autores han señalado que estas
sustancias provocan un efecto barrera debido a la capa de surfactante que se forma en la
interfase gas-líquido la cual ofrece una resistencia al movimiento de las moléculas de
oxígeno.

Efecto del espaciado entre agitadores

En los sistemas de fermentación, es muy común la utilización de más de un agitador debido

a que aumenta el tiempo de retención del gas, disminuye el consumo de potencia general,
disminuye el esfuerzo cortante y mejora la suspensión de sólidos así como el mezclado en
general (Gogate, 2000). Cuando existe entonces más de un agitador, Machon (1988)
estudió los efectos de la separación entre los agitadores sobre el kLa y concluyó que estos
valores aumentan conforme se hace un aumento en el espaciado de los agitadores. El valor
incrementado en el kLa se puede atribuir al hecho de que conforme aumenta el espaciado
entre agitadores, la magnitud de la influencia del agitador en el campo de flujo generado
por el otro agitador disminuye y se da una situación que sería similar a tener a dos
agitadores rotando independientemente. Debido a esto aumenta el tiempo de retención de
gas y por lo tanto el valor del coeficiente volumétrico de transferencia de masa (Machon,
1988).

Efecto de la combinación de agitadores

Dado que el agitador es el dispositivo principal de dispersión del gas, este naturalmente
tendrá un profundo efecto en las características de transferencia de masa del sistema.
Arjunwadkar (1998) realizó experimentos con combinaciones distintas de agitadores y
reportó que una combinación de una turbina de disco plano (Rushton) en la posición inferior
y una turbina de aspa inclinada con flujo descendente en la posición superior produce el
mejor desempeño por unidad de potencia consumida. Esto se debe a que la retención del
gas es máxima cuando se utiliza este arreglo. En términos de dispersión, dos turbinas
Rushton son más eficientes que el arreglo descrito previamente pero consumen más
potencia (Arjunwadkar, 1998).

Efecto del consumo de oxígeno por parte de microorganismos

Vashitz (1989) ha reportado que el coeficiente de transferencia de oxígeno aumenta con el

consumo de oxígeno por parte de los microorganismos en un cultivo de Xanthomonas
campestris. Calik (1997; 2004) realizó estudios similares en Pseudomonas dacunhae y
Escherichia coli y describió resultados similares.
Este efecto se presenta debido a que existe una mejora en la transferencia conforme el
oxígeno que entra en disolución es consumido por los microorganismos presentes en el
medio. La variación en la tasa específica de absorción de gas por unidad de fuerza motriz
por unidades de área interfasial debido a la presencia de microorganismos se conoce como
el factor de mejora biológico (3)

[Link]
 [Link]

1. Erazo R., Cárdenas J. (2001) determinación experimental del coeficiente de transferencia

de oxígeno en un biorreactor batch [online] Available at:
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[Accessed 12 Feb. 2019].

2. Buitrago, G. (2019). Evaluación de la transferencia de oxígeno en un biorreactor

convencional con aireador externo. 4th ed. [ebook] Bogotá, Colombia, pp.4-7. Available at:
[Link] [Accessed 19 Nov. 2013].

3. Quirós, J. (2014). Determinación de modelos para la predicción de los coeficientes

volumétricos de transferencia de masa (kLa) oxígeno-medio de cultivo en biorreactores tipo
tanque agitado. 5th ed. [ebook] Costa Rica, pp.12-17. Available
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