“Año del buen servicio al ciudadano”
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL
CIENCIAS BIOLOGICAS
INFORME N° 3
“PREPARACIÓN DE MEDIO DE CULTIVO Y
SOLUCIONES”
CURSO :
MICROBIOLOGIA
ALUMNO :
FARFÁN PASAPERA BRANDON YAMIR
SEMESTRE :
2017-I
DOCENTE :
Blgo.-McBlgo. M. Dorothy Torres de León
Piura, 12 de junio del 2017
INTRODUCCIÓN
Un material nutritivo preparado para el crecimiento de microorganismos en
un laboratorio se denomina medio de cultivo. Algunas bacterias pueden
crecer bien en casi cualquier medio de cultivo; otras requieren medios
especiales y otras no pueden crecer en ninguno de los medios inertes
existentes hasta ahora. Los microbios que se introducen en un medio de
cultivo para que comiencen a crecer se denominan inóculo. Los microbios
que crecen y se multiplican en un medio de cultivo se denominan cultivo.
(Tortora, 2007)
En microbiología, se usan dos tipos generales de medios de cultivos: los
químicamente definidos y los complejos. Los medios definidos se preparan
añadiendo cantidades precisas de compuestos orgánicos o inorgánicos
purificados a un volumen en agua destilada. (Madigan, 2004)
A menudo, los medios complejos emplean hidrolizados de caseína (la
proteína de la leche), carne, soja, levaduras u otras sustancias muy
nutritivas (pero sin embargo, no definidas químicamente). Tales
hidrolizados están disponibles comercialmente en forma de polvo y pueden
ser pesados con facilidad y disueltos en agua destilada para preparar un
medio. No obstante, una limitación importante al usar un medio complejo
es que no se puede controlar su composición nutritiva exacta. (Madigan,
2004)
Los objetivos de la práctica fueron conocer la preparación de medios de
cultivos y soluciones.
II. MATERIALES Y MÉTODOS
Para la preparación de caldo nutritivo, se necesitó extracto de carne 0.3 gr,
peptona de carne 0.5 gr, agua 100 ml. En un Erlenmeyer, se colocó 100 ml
de agua destilada, agregar sobre ella los ingredientes en proporciones
adecuadas para 100 ml de medio.
Se disolvió los ingredientes y se dividió la solución en dos partes iguales.
En una de las dos partes se ajustó el ph. Luego se procedió a distribuir en
tubos de ensayo, se colocó un tapón de algodón y se esterilizo en autoclave
por 15 minutos a 121 °C, con 15 lbs de presión.
Para la preparación del agar nutritivo, a la mitad del caldo preparado
anteriormente, se agregó la cantidad necesaria de agar en polvo siendo 0.6
gr. Se llevó a calentar al microondas hasta que se disuelva el agar, luego se
procedió ajustar el PH 7.2 +- 0.1.
Se distribuyó en tubos de ensayo y se colocó tapones de algodón, luego se
llevó a esterilizar por 15 minutos a 121 °C, con 15 lbs de presión. Al
sacarlos de la autoclave, se debió dejar enfriar en un plano inclinado y en
columna.
Para la preparación de medio diferencial TSI, se pesó 3.25 g y el coloco en
un Erlenmeyer, luego se añadió agua destilada 50 ml y se llevó al
microondas para disolverlo, luego se dejó enfriar y se distribuyó en tubos
de ensayo y se colocó tapones de algodón. Luego se llevó a esterilizar por
15 minutos a 121 °C, con 15 lbs de presión
Todos los tubos de ensayo se forraron con papel, para evitar posible
contaminación, luego de estar forrados, se procedió a meterlos a la
autoclave.
Preparación de una solución de NaOH a 1 normal:
Sabemos que la normalidad es igual al número de equivalentes sobre el
volumen de la solución (litros) “N= Neq/ vol” también tenemos que saber
que el número de equivalentes es igual a la masa entre la masa equivalente
“Neq= m/meq” y la masa equivalente es igual a la masa molecular entre el
parámetro “meq= M/parámetro” (M=masa molecular), hallamos la masa
equivalente: meq= M/parámetro
meq=40/1 Neq= m/meq N=Neq/vol
meq=40 Neq=m/40 1=(m/40) / 0.1
Masa=4; entonces para preparar una solución 1N con 100ml de agua se
necesitan 4 gramos de NaOH.
Preparación de una solución de HCl a 1 normal
N= eq-g/ L
Entonces: xg HCl x 1mol/36.5 g x 1eq-g/ 1mol
X HClx 1eq-g/36.5
X(0.0274 eq-g)
N= x(0.0274 eq-g) / 0.1 L
1(0.1)= x(0.0274)
3.65=x Necesito 3.65 g de HCl para una solución de 100 ml a 1
normal.
[Link]
[Link]ÓN
En general, debe suministrarse los siguiente: 1) donadores y aceptores de
hidrógeno: casi 2 g/L; 2) fuente de carbono: casi 1 g/L; 3) fuente de
nitrógeno: casi 1 g/L; 4) minerales: azufre, fósforo, casi 50 mg/L de cada
uno y oligoelementos, 0.1 a 1 mg/L de cada uno, y 5) factores de
crecimiento: aminoácidos, purinas, pirimidinas, casi 50 mg/L de cada uno y
vitaminas, 0.1 a 1 mg/L de cada uno. (Jawetz, 2007)
Las sustancias alimenticias son indispensables para un caldo
nutritivo, la mayoría de estas sustancias ya vienen integradas en un
solo compuesto, facilitando la realización de una caldo nutritivo,
pues solo basta con agregar dicha sustancia, por ejemplo aquella que
se usó para realizar el caldo nutritivo de esta práctica, contenía
peptona, extracto de carne y NaCl en diversas proporciones, las
cuales mediante regla de tres simples, se calculó las proporciones
adecuadas para el volumen que necesitábamos.
[Link]
Se logró conocer la preparación de medio de cultivos y soluciones, tales
como el caldo nutritivo, agar nutritivo y agar sangre.
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Bibliografía
Jawetz, M., & Adelberg. (2007). Microbiología médica. McGraw- Hill interamericana editores.
Madigan, M. T., Martinko, J. M., & Parker, J. (2004). BROCK BIOLOGIA DE LOS
MICROORGANISMOS. PEARSON EDUCACIÓN.
Tortora, G. J., Funke, B. R., & Case, C. L. (2007). Introducción a la microbiología. Buenos Aires:
Médica Panamericana.