Cyt P450
MONOOXIGENASAs DEL
CITOCROMO P450
Los electrones son cedidos por el NADPH
vía Citocromo P450 reductasa
MONOOXIGENASAS
del CITOCROMO P450
Enzimas que catalizan
Cyt P450
reacciones de oxidación: FASE I
MONOOXIGENASAs DEL
CITOCROMO P450
• Grupo de hemoproteínas que contienen hierro
y que exhiben un máximo de absorción de luz
a los 450 nm
Cyt P450
Presentes en animales, plantas, levaduras y bacterias
En mamíferos, algunas enzimas están involucradas en
síntesis de esteroides y no metabolizan XBs
Sin embargo, la gran mayoría oxida a xenobióticos
NOMENCLATURAS
1. Monooxigenasas dep. Cit P450
2. O.F.M. (MFO)
3. Enzimas microsomales
4. Enzimas metabolizantes de drogas
Componentes
del
Cyt P450
Cyt P450
•Citocromo P450
(hemoproteina)
•Cit P450 reductasa
(flavoproteina)
•Citocromo b5
Características
espectrales
- El Cyt P450 (Fe2+) tiene alta afinidad por CO
- El complejo Cyt P450-CO tiene un máximo
de Ab a 450 nm
Cyt P450
- Reducido
(Fe2+) y
unido a CO
absorbe a
450 nm
Propiedades
Fundamentales del
Citocromo P 450
Cyt P450
Reacciones
catalizadas por Cyt P450
Catalizan la mayoría de las oxidaciones de XBs
En las reacciones intervienen:
- O2 molecular
Cyt P450 - NADPH
Y siempre se produce:
•La reducción de un átomo del O2 hasta H2O
•La incorporación de un átomo de O al sustrato
RH + NADPH + H+ + O2 ---
R-OH + NADP+ + H2O
Los sustratos pueden ser muy variados y poco
específicos: endógenos y compuestos XBs.
Esquema de la Reacción
Cyt P450
Tipos de
Reacciones
catalizadas
Cyt P450
Hidroxilación de aromáticos y alifáticos.
Formación de epoxis sobre dobles enlaces
N-hidroxilación de aminas aromáticas
Desalquilación en O-, N-, S-alquilos
Desulfuración oxidativa del paration, malation
Reacciones de reducción en ausencia de O2
Hidroxilación
de hormonas sexuales
El Cyt P450 actúa sobre metabolitos endógenos
Cyt P450
Tipos de hidroxilaciones
Cyt P450
•H alifática
•H. aromática
•N-hidroxilación
•Epoxidaciones
N-Hidroxilación
de aminas
anilina
Cyt P450
2-acetil amino-fluoreno (2-AAF)
Formación
de epoxis en insaturaciones
Cyt P450
Desulfuración
Oxidativa de organo-tiono-
fosofrados
Cyt P450
Malation oxidación malaoxon
Paration oxidación paraoxon
Formación
de radicales quinónicos
Cyt P450
Reacciones de
reducción
Azoreducción
Cyt P450
Reducción de
nitroaromáticos
Deshalogenación
reductora
Actuación del sistema
Cyt P450
Ciclo catalítico
6
1
5 Mecanismo de la
catálisis
por el citocromo P450 2
4
video
3
Formación de metabolitos
reactivos en la catálisis por
CIT P-450
N-hidroxi
Cyt P450 aminas
Radicales
quinónicos
Formación de metabolitos
reactivos de PARACETAMOL
catalizados por CIT P-450
Cyt P450
Las enzimas del Cit
P450 presentan
Cyt P450 muchas isoformas
ISOENZIMAS
CYP P450
Cyt P450
Isoenzimas
Los isoenzimas de Cit P450 son
responsables del metabolismo oxidativo
(fase I) de muchas drogas, esteroides y
Cyt P450 agentes carcinógenos.
Cada isoenzima del Cit P450 es producto de su gen y a
ambos, en general, se les suele denominar como CYP.
Los isoenzimas de CYP son un grupo de enzimas hemo
situadas en la bicapa lipídica del retículo endoplasmico;
muy presentes en los hepatocitos, pero también están
distribuidas en el intestino, el riñón, el pulmón y el
cerebro.
Se han identificado más de treinta isoenzimas humanos
de CYP.
Cyt P450
Isoenzimas
ISOENZIMAS: En base a la similitud de
secuencia aminoacídica (40%), se les ha
agrupado en familias (1 - 2 - 3 - 4*) ej CYP 2
Mediante un Nº se designa su forma
Cyt P450 individual, Ej CYP 2E1
Nomenclatura
•Raíz: CYP
•Familia: CYP 2
•Subfamilia: CYP 2D
•Gen individual: CYP 2D6
Todos los isoenzimas de CYP en la misma familia tienen
por lo menos semejanza estructural del 40%, y esos en
igual subfamilia tienen semejanza estructural por lo
menos del 60%.
Cyt P450
Isoenzimas
Cyt P450
Cyt P450
ABUNDANCIA DE
Isoenzimas CYP en
hígado humano
Cyt P450
Cyt P450 Inducción
enzimática del
CIT P-450
Cyt P450
La Inducción
enzimática
consiste en el aumneto
Cyt P450
de la síntesis de una
enzima por la presencia
de un compuesto
(inductor), que
generalmente es su
sustrato
Inducción enzimática Cyt P450
por XBs
Cyt P450
Ah .- Receptor aril
hidrocarburo hidroxilasa
hsp 90 .- proteina shock por
calor
ARNT .- Transferasa
nuclear aril hidrocarburo
El complejo entra al núcleo,
se une específicamente al
DNA y comienza la
transcripción de genes, del
P450 1A1, en este caso.
Inducción del CYP Cyt P450
por TCDD
Cyt P450
Las dioxinas
inducen la
síntesis de
enzimas
Cit P450
Inducción de varias Cyt P450
Isoenzimas del CYP
Cyt P450
Inducción enzimática,
e interacción de drogas
Fentobarbital induce CYP 2C9
La wafarina es metabolizada por CYP 2C9
Cyt P450 Habrá que aumentar la dosis del anticoagulante
Fentobarbital induce CYP 2C9
Los estrógenos son metabolizados por CYP 2C9
Puede no haber protección anticonceptiva
El etanol induce CYP 2E1
Los comp. Policíclicos son metabolizados por CYP 2E1
Pueden formarse cancerígenos en el pulmón de fumadores
EFECTOS ANTAGÓNICOS Y SINÉRGICOS de
dos o mas XBs
VARIABILIDAD
INTERINDIVIDUAL
FARMACO-XB-GENÉTICA
Cyt P450
Se producen grandes diferencias
interindividuales en el metabolismo de
“drogas/ XBs”
Las diferencias pueden estar determinadas genéticamente
por el nivel basal de expresión de la enzima Cyt P450
“metabolizadores pobres y extensivos”
Los metabolizadores pobres tendrán concentraciones altas
en plasma de la “droga” patrón y bajos niveles de los
metabolitos derivados.
GENOTIPO + Factores ambientales = FENOTIPO
Polimorfismos genéticos - Variabilidad en los
niveles de enzimas
- Diferencias en el
metabolismo
- Diferencias en la
Acción tóxica