PRCTICA NO.
1
ESTUDIO DEL COMPORTAMIENTO DE LAS SOLUCIONES
AMORTIGUADORAS.
OBJETIVO:
Conocer a travs de la prctica la importancia de las
soluciones amortiguadoras en el sistema biolgico.
GENERALIDADES:
Solucin amortiguadora es aquella que se opone a los
cambios de pH cuando se agrega cido o lcali. Tales
soluciones se usan en muchos experimentos bioqumicos en
los cuales se necesita controlar exactamente el pH.
Hay muchos ejemplos de la importancia que tienen en
biologa las soluciones amortiguadoras: la capacidad para
impedir los cambios bruscos de pH es una propiedad
importante de los organismos biolgicos intactos dado que los
lquidos citoplasmticos contienen protenas disueltas,
sustratos orgnicos y sales inorgnicas, que resisten los
cambios excesivos de pH.
El plasma sanguneo es una solucin amortiguadora muy
efectiva, diseada casi idealmente para conservar los valores
de pH en 7.2- 7.3, con variacin de 0.2 unidades. Los valores
situados fuera de estos lmites no son compatibles con la vida.
Se puede tener una apreciacin ms completa del poder
amortiguador de las clulas vivas si se recuerda que muchos
de los metabolitos que constantemente est produciendo y
utilizando la clula, son cidos dbiles Brnsted.
Adems, todas las enzimas que catalizan las reacciones en las
cuales participan estos electrlitos presentan su mxima
accin cataltica en valores de pH definidos.
FUNDAMENTO:
Algunos cidos, como el HCl, se disocian completamente,
mientras que otros, como el cido actico se disocian
parcialmente. La ecuacin qumica general de la disociacin
de un cido puede escribirse como:
+
HA H + H . (1)
En la que A es el anin del cido HA. La constante de
disociacin para estos cidos se deriva a partir de la ley de
accin de masas, y viene determinada por:
H
+
A
K= Ka= + . (2)
Henderson y Hasselbalch han aplicado la ley de accin de
masas a la ionizacin de cidos dbiles y han obtenido una
expresin muy til que se conoce como ecuacin de
Henderson Hasselbalch. Ordenando los trminos de 2, se
tiene:
H
A
+ = . (3)
(HA )
Ki
Tomando logaritmos,
H
+
Log A . (4)
Y multiplicamos por -1,
H
+
-log A . (5)
H
Si log + = pH y log Ka se define como pKa y log A /
(HA), se sustituye por log A / (HA), se obtendr:
A
pH . (6)
pKa+ log
Una solucin amortiguadora ha de contener un cido (HA),
que neutralice a las bases aadidas, y una base ( A ), que
neutralice a los cidos aadidos. (Ya hemos visto que HA es un
+
cido porque acta como dador de H ). Las propiedades de
los sistemas amortiguadores se determinan aadiendo
pequeas cantidades de un cido o de una base y midiendo el
pH despus de cada adicin. La grafica que relaciona el pH y
la cantidad de cido o de base aadida es una curva de
titulacin.
La mxima capacidad amortiguadora de un par cido base
H
conjugada de este tipo se producir cuando la + = A y se
tiene que:
A
= 1 y log. De 1= 0
Por lo tanto en este punto pH= pKa y es el momento de
mxima capacidad de amortiguadora, segn ecuacin 6. Este
punto corresponde a la parte de la curva de titulacin a lo
largo de la cual el cambio de pH es menor. Los sistemas
amortiguadores ms efectivos son combinaciones de cidos
dbiles y sus sales. Los primeros estn muy pocos disociados,
con los que se aseguran una gran reserva de HA. Las sales de
los cidos dbiles se disocian completamente, proporcionando
+
una gran reserva de A . El H que se aade se combinar
con el A formando HA, y el OH aadido se combinar
+ +
con el H para formar HO. A medida que se extraen H , se
reponen por disociacin del HA.
Los sistemas amortiguadores inorgnicos ms importantes de
los lquidos corporales son los bicarbonatos y los fosfatos.
Los aminocidos, pptido y protenas, debido a sus grupos
laterales de cidos dbiles, forman una clase importante de
amortiguadores orgnicos en el citoplasma y en el plasma
extracelular.
La mxima capacidad tamponadora de un sistema cido
base conjugado se obtiene cuando pH= pK. En la grfica este
punto corresponde a la parte de la curva con la mnima
pendiente (cambios pequeos de pH con grandes cantidades
de OH aadidas.
MATERIAL:
1 vaso de precipitado de 50, 100 y 250 ml.
2 buretas de 25 ml.
2 pipetas volumtricas de 25 ml.
1 soporte universal
1 pinza para bureta
1 pizeta
REACTIVOS:
HCl 1M
NaOH 1M
HCl 0.1M
NaOH 0.1M
KHHPO 0.05M
NaHPO 0.05M
Alanina 0.1M
Agua desionizada
EQUIPO:
Potencimetro
TCNICA:
AMORTIGUADOR INORGNICO:
PREPARACIN DE LA SOLUCIN BUFFER DE FOSFATOS EN SU
MXIMA CAPACIDAD AMORTIGUADORA.
1. Se mezcla 25 ml de NaHPO 0.05M y 25 ml NaHPO
0.05M en un vaso de precipitado de 100 ml
COMPORTAMIENTO DE LA SOLUCIN BUFFER DE FOSFATOS.
1. Medir el pH a la solucin anterior.
2. Adicionarle 2 ml de HCl 1M en porciones de 0.2 ml y en
cada adicin medir y anotar el pH.
3. Colocar en un vaso de precipitado de 100 ml, 50 ml de
esta misma solucin amortiguadora y repetir los pasos 2
y 3 pero ahora adicionando NaOH 1M y registrando las
lecturas de pH.
AMORTIGUADOR ORGNICO:
COMPORTAMIENTO DE LA SOLUCIN BUFFER DE ALANINA.
1. Colocar en un vaso de precipitado 50 ml de alanina 0.1M
y medirle el pH.
2. A esta solucin agregarle 1 ml de HCl 0.1M en porciones
de 0.2 ml despus de cada adicin medir el pH.
3. Agregar el HCl en porciones de 4 y 5 ml para hacer un
total de 26 ml.
4. El ultimo ml (de 25 a 26) ir agregndolo de 0.2 en 0.2 ml
y en cada adicin de cido se deber ir midiendo el pH.
5. Colocar en otro vaso de precipitado 50 ml de esta misma
solucin amortiguadora y repetir el mismo procedimiento
pero ahora agregando NaOH 0.1M.
6. Observar el comportamiento de un testigo sustituyendo
las soluciones amortiguadoras por agua destilada.
RESULTADOS:
RESULTADOS OBTENIDOS DEL EQUIPO (SOLUCION BUFFER DE ALANINA):
ml. de NaOH pH
agregados
0.0 5.58
0.2 7.45
0.4 7.86
0.6 8.08
0.8 8.25
1.0 8.36
6.0 9.40
10.0 9.76
15.0 10.12
20.0 10.46
21.0 10.53
25.0 10.90
25.2 10.92
25.4 10.94
25.6 10.94
25.8 10.96
26.0 10.96
RESULTADOS DEL COMPORTAMIENTO DE LAS SOLUCIONES
AMORTIGUADORAS (EXPERIMENTAL GRUPAL):
SOLUCIN AMORTIGUADORA DE FOSFATO
ML DE HCl pH ML DE NaOH pH
AGREGADOS AGREGADOS
EQUIPO NMERO 1 EQUIPO NMERO 2
0 4.81 0.0 7.08
0.2 4.71 0.2 7.09
0.4 4.60 0.4 7.12
0.6 4.44 0.6 7.12
0.8 4.35 0.8 7.14
1.0 4.22 1.0 7.16
1.2 4.10 1.2 7.17
1.4 4.06 1.4 7.18
1.6 3.98 1.6 7.21
1.8 3.92 1.8 7.22
2.0 3.86 2.0 7.25
Como se puede observar grficamente el
amortiguador Fosfato es mejor Buffer ya que
resiste mayores volmenes de cido o base antes
de observarse una variacin notable en el pH,
entonces, el agua decimos que es mal Buffer
porque el agua no tiene el segundo equilibrio que
implica la sal, que es necesario para hacerla
resistir los cambios en pH.
SOLUCIN AMORTIGUADORA DE ALANINA
ML DE HCl pH pH ML DE pH pH
AGREGADOS NaOH
AGREGADO
S
EQUIPO No. EQUIPO No. EQUIPO No. EQUIPO No.
3 7 4 8
0.0 6.18 6.04 0.0 6.48 5.58
0.2 5.77 5.67 0.2 7.71 7.45
0.4 5 4.93 0.4 8.28 7.86
0.6 4.71 4.75 0.6 8.56 8.08
0.8 4.62 4.54 0.8 8.61 8.25
1.0 4.43 4.26 1.0 8.72 8.36
6.0 3.57 3.41 6.0 9.60 9.40
10.0 3.28 3.25 10.0 9.96 9.76
15.0 3.10 3.03 15.0 10.27 10.12
20.0 2.97 2.93 20.0 10.61 10.46
21.0 2.87 2.85 21.0 10.68 10.53
25.0 2.84 2.81 25.0 10.99 10.90
25.2 2.83 2.81 25.2 11.01 10.92
25.4 2.83 2.81 25.4 11.04 10.94
25.6 2.83 2.81 25.6 11.06 10.94
25.8 2.83 2.81 25.8 11.09 10.96
26.0 2.83 2.81 26.0 11.11 10.96
TESTIGO DE AGUA DESTILADA
ML DE HCl pH ML DE NaOH pH
AGREGADOS AGREGADOS
EQUIPO NMERO 5 EQUIPO NMERO 6
0.0 10.03 0.0 7.87
0.2 9.88 0.2 11.17
0.4 9.11 0.4 11.38
0.6 7.96 0.6 11.54
0.8 5.83 0.8 11.91
1.0 4.96 1.0 12.04
1.2 3.96 1.2 12.16
1.4 3.64 1.4 12.23
1.6 3.34 1.6 12.31
ESQUEMAS:
OBSERVACIONES:
Una vez calibrada la solucin amortiguadora la cual tiene la
capacidad de oponerse a cambios de pH cuando se le adiciono
iones hidrogeno o hidroxilo, a cuando se diluye es decir
durante la adicin de ciertas cantidades de cidos fuertes o
bases fuertes, pasamos al adicionamiento de una base que en
este caso fue el (NaOH), a la solucin amortiguadora donde
efectivamente se observa la oposicin que presento la
solucin amortiguadora preparada a los cambio de pH, ya que
los cambios de pH presentados tardaban en manifestarse de
manera que la solucin amortiguadora formada por alanina a
la cual al agregarle una base fuerte, inmediatamente
reacciona con los iones hidrxido y de esta manera el pH
cambiara una unidad arriba al pH obtenido inicialmente de la
solucin amortiguadora, por lo que a este fenmeno se le
conoce como capacidad amortiguadora, la cual es el nmero
de moles de OH- H+ que se requiere para producir un cambio
de una unidad de pH.
CONCLUSIONES:
Se concluye que efectivamente se lograron llevar acabo los
objetivos esperados, es decir logramos aplicar todos nuestros
conocimientos sobre las soluciones amortiguadoras las cuales
son compuestas por cidos dbiles o bases dbiles en donde
una de sus sales correspondientes, constituyen las llamadas
soluciones amortiguadoras o tampn y estas son de gran
importancia ya que poseen la propiedad de resistir las
variaciones de pH, en donde de igual forma se da un
fenmeno conocido como capacidad amortiguadora que se
conoce como el nmero de moles de OH- o H+ que se
requieren para producir un cambio de una unidad de pH a
comparacin de una solucin no amortiguadora, la cual no
posee esta oposicin a cambios de pH. Tambin podemos
afirmar que la capacidad reguladora se define como el
nmero de moles de base fuerte necesarios para dar lugar a
un aumento de una unidad de pH en 1 litro de una solucin
reguladora. Esta cantidad se puede calcular si se conoce la
composicin de la solucin. En general es deseable que una
solucin tampn posea una capacidad de regulacin elevada,
y un modo obvio de conseguirlo es utilizando concentraciones
mayores de los reactivos que lo constituyen.
CUESTIONARIO:
1 Qu es una solucin amortiguadora?
Las soluciones compuestas por cidos dbiles o bases dbiles
y una de sus sales correspondientes, constituyen las llamadas
soluciones amortiguadoras o reguladoras (tambin
designadas como soluciones tampn). Estas son de gran
importancia en qumica porque poseen la propiedad de resistir
las variaciones de pH que provocaran sea la dilucin, sea la
adicin de ciertas cantidades de cidos fuertes o de bases
fuertes.
2 Cul es el sistema amortiguador ms importante en el
plasma de los mamferos?
El sistema tampn dihidrgenofosfato/hidrgenofosfato.
3 Qu es el pH?
El pH, abreviatura de Potencial Hidrgeno, es un parmetro
muy usado en qumica para medir el grado de acidez o
alcalinidad de las sustancias. Los valores menores que 7
indican el rango de acidez y los mayores que 7 el de
alcalinidad o basicidad. El valor 7 se considera neutro.
Matemticamente el pH es el logaritmo negativo de la
concentracin molar de los iones hidrogeno o protones (H +) o
iones hidronio (H3O)
4 Cmo funciona un potencimetro?
El potencimetro es un sensor utilizado en el mtodo
electroqumico para medir el pH de una disolucin. La
determinacin de pH consiste en medir el potencial que se
desarrolla a travs de una fina membrana de vidrio que
separa dos soluciones con diferente concentracin de
protones. En consecuencia, se conoce muy bien la sensibilidad
y la selectividad de las membranas de vidrio delante el pH.
BBLIOGRAFIA:
[Link]
bases-ph-2/
[Link]
[Link]
Principios de Bioqumica, 4ta Edicin - H. Robert Horton: ED.
PEARSON (2008)