Luminol
Luminol.
Luminol es un derivado del cido ftlico. Se trata de un slido verdoso poco soluble. Su
mayor importancia reside en la reaccin de quimioluminiscencia que da con perxidos en
presencia de complejos de hierro como catalizadores.
Modelo animado de la mlecula de luminol. La simulacin fue realizada utilizando
QuteMol.
ndice
1 Datos fisicoqumicos
2 Sntesis
3 Reacciones
4 Referencias
5 Enlaces externos
Datos fisicoqumicos
Frmula:C8H7N3O2
Masa molecular: 177,7 g/mol
Punto de fusin: 317 C
N CAS: 521-31-3
Sntesis
El luminol es accesible en dos etapas a partir del cido 3-nitro-ftlico e hidracina. El grupo
nitro del producto de esta reaccin, es reducida despus a grupo amino mediante el ditionito
de sodio, preparado a partir de bisulfito sdico.
Reacciones
Reaccin del luminol con la hemoglobina
El luminol se utiliza en qumica forense para detectar trazas de sangre ya que sta cataliza
la oxidacin con perxido de hidrgeno bajo emisin de luz. Esta reaccin se lleva a cabo
con una solucin de luminol diluida en perxido de hidrgeno. De esta manera se dice que
el luminol ha sido "activado" ya que de por s no se obtiene luminiscencia al contacto con
la sangre, si ste no es diluido en el agua oxigenada y aportando un medio bsico a travs
de un hidrxido.1
Las disoluciones de luminol son sensibles a la luz y a los cationes metlicos, son estables
en perodos de 8-12 horas, y son trmicamente inestables.
Es capaz de detectar cerca de 1 L de sangre en 1 L de disolucin.
El mismo efecto catalizador lo tienen tambin diversos otros complejos de hierro como los
hexacianoferratos [Fe(CN)6]3- y [Fe(CN)6]4-. Con stos se utiliza el luminol en la
fabricacin de luces fras qumicas.
En las reacciones de bioluminiscencia, como se observa en las lucirnagas y diversos
organismos marinos, el papel del luminol lo juegan las luciferinas.
Antecedentes
En 1889, en Francia, se realiz una de las primeras investigaciones registradas en qumica
forense. La misma fue encabezada por Alexandre Lacassagne, quien logr reconocer el
cadver de una persona desaparecida efectuando la identificacin mediante el anlisis de
una hebra de cabello.
La historia relata que el pelo hallado era de color negro, mientras que el fallecido tena el
cabello de color castao. Este hecho llam profundamente la atencin del mdico francs,
quien lav de forma reiterada la hebra hasta comprobar que definitivamente era de color
castao; del mismo modo, compar detenidamente el grosor del cabello encontrado en el
cadver con el procedente del cepillo de la persona desaparecida, confirmando que eran
idnticos.7
Lacassagne es considerado un pionero en el campo de la qumica forense, profundizando
incluso en los factores ambientales que condicionan la psiquis del criminal, para resolver
casos complejos.8 Con tcnicas que l mismo desarroll pudo identificar el cadver en
estado de descomposicin de un oficial de justicia francs.
Asimismo, dise anlisis para determinar el movimiento de insectos en un cadver, y de
esa manera establecer cundo se haba iniciado el proceso de descomposicin. La
utilizacin de restos de sangre en la misma piel de la persona fallecida, le permiti a
Lacassagne conocer la forma en que el cadver haba sido movilizado.9
Iniciando un rgido protocolo, este cientfico motiv a sus estudiantes para que asistieran a
ms de ochenta autopsias al ao en uno de los laboratorios ms avanzados de la poca, el
cual contaba con microscopios y espectroscopios. En ese lugar, se comenz a experimentar
con reactivos qumicos que permitieron identificar trazas de sangre, semen y materia fecal.
Algunos de los estudiantes que participaron de las investigaciones de Lacassagne se
convirtieron posteriormente en eminentes forenses, como fue el caso de Edmond Locard
quien fund el Laboratorio de Criminalstica de Lyon, y fue un prercusor de la
criminalstica moderna.10
Procedimientos
Integridad de las muestras
El qumico forense lleva a cabo su trabajo analtico en un laboratorio estril, disminuyendo
el riesgo de contaminacin del material colectado. Para prevenir la alteracin indebida, se
debe mantener un registro de la cadena de custodia de cada muestra, constituyendo un
documento que permanece con las evidencias todo el tiempo.
Esta clase de informe contiene las firmas e identificaciones de las personas involucradas en
el transporte, almacenamiento y anlisis de las evidencias, tornando ms difcil la alteracin
intencional, e incrementa la confiabilidad de los resultados del trabajo del qumico forense
para su posterior utilizacin en un proceso legal, de naturaleza judicial. Asimismo, las
pruebas obtenidas en un posible escenario de delito, deben sellarse correctamente; las
muestras biolgicas como sangre, semen o saliva tienen que conservarse a una temperatura
que oscile entre los 2C y 8C, de modo de evitar su descomposicin.11
Mtodos e instrumentos
Luminol
Reaccin del luminol con la hemoglobina.
Un mtodo utilizado frecuentemente en qumica forense es el que emplea luminol, un
derivado del cido ftlico que reacciona con cationes metlicos, permitiendo detectar trazas
de sangre. El proceso consiste en mezclar este reactivo con una solucin diluida de
perxido de hidrgeno, la cual se esparce cuidadosamente en los sitios donde se piensa que
existen restos de sangre.12
El hierro en forma de catin que se ubica en el grupo hemo de la hemoglobina, reacciona
con el luminol observndose una luminiscencia azul propia de la reaccin que se lleva a
cabo. En este proceso, el producto final es el anin 3-aminoftalato que se encuentra en
estado excitado, y al volver a su estado fundamental (o basal) libera energa en forma de
luz, lo que se conoce como luminiscencia azul. Esta reaccin qumica posee una cintica
muy lenta, de hecho es el hierro presente en el grupo hemo de la hemoglobina quien
cataliza el proceso. 13
Los posibles falsos positivos que pueden dar algunos compuestos al reaccionar con
luminol, son esclarecidos con la observacin minuciosa del color e intensidad en el brillo
que solamente se genera al reaccionar con sangre, adems del precipitado espumoso que se
forma en muestras recientes. 14
Luminiscencia provocada por la reaccin entre el luminol y la hemoglobina de la sangre.
Espectroscopia
Artculo principal: Espectroscopia
Se trata de un anlisis particularmente til que permite al mismo tiempo la separacin,
identificacin y cuantificacin de uno o ms componentes individuales de una sustancia o
mezcla desconocida, mediante el uso de un espectrmetro de masas en conjunto con un
cromatgrafo de gases. El instrumento utilizado en la identificacin especfica de
compuestos es el espectrmetro infrarrojo por transformada de Fourier (FTIR).15
La espectroscopia tambin puede ayudar a identificar los materiales utilizados en algunos
productos como es el caso de los polmeros y aditivos. Las muestras pueden obtenerse por
disolucin, o cortando una rebanada fina empleando un micrtomo de la muestra. Las
superficies pueden ser examinadas usando la espectroscopa de reflectancia total atenuada,
y el mtodo tambin se ha adaptado para el microscopio ptico con microespectroscopa de
infrarrojos. 16
Cromatografa
En qumica forense se utiliza este mtodo con la finalidad de identificar residuos (lquidos
generalmente), de los que pueda obtenerse un registro luego de la coleccin de muestras en
el lugar del siniestro. Es una tcnica ampliamente usada para detectar solventes que hayan
acelerado un proceso de combustin o incendio intencional.
En este tipo de anlisis, es importante tener en cuenta que la qumica forense suele colectar
muestras que por lo general son mezclas. As, luego de un incendio, es probable que los
restos encontrados sean una combinacin de solventes combustibles: nafta o querosene, que
a travs de la cromatografa se pueden obtener en forma fraccionada.17
En el proceso, es necesario aumentar la concentracin de la muestra a analizar a travs de la
adsorcin de los componentes en tiras de carbn activado. Posteriormente, se disuelve el
analito en un solvente que permita utilizar la muestra para el anlisis cromatogrfico.2
Tambin es posible analizar mediante esta tcnica, el tipo de tinta que se us para redactar
una nota hallada en la escena de un crimen. Para ello, la cromatografa es realizada en una
fase fija hidratada (papel), y como fase mvil para la tinta, se suele utilizar etanol.17 De esta
manera pueden obtenerse los componentes del pigmento, conocer su origen y determinar
los detalles de su fabricacin, con miras a esclarecer un caso de extorsin o fraude.
Microscopa
Anlisis microscpico de una hebra de cabello.
Esta tcnica se emplea fundamentalmente para el anlisis de hebras de cabello, telas o
fibras halladas como evidencia durante el estudio de un caso determinado, dado que este
tipo de muestras proveen de importante informacin para aclarar hechos delictivos. La
observacin microscpica de cabello permite visualizar elementos que no se aprecian
macroscpicamente: presencia de metales, arena, grasa, alimentos, as como la observacin
detenida de sus constituyentes. En el caso de las fibras, el anlisis microscpico posibilita la
observacin de restos de tejido o fluidos corporales en las mismas, o simplemente
determinar a quin pertenecen (vctima o victimario).18
Factores que influyen en los estudios de laboratorio
Una de las primeras resoluciones que los investigadores deben tomar en la escena de un
delito, es determinar qu pruebas son de relevancia para el caso, y cules conviene
descartar. Esto se basa en el hecho de que no es viable analizar todo lo que se encuentra en
el sitio, o destinar tiempo a analizar pruebas que carecen de importancia para resolver el
caso judicial. Por otro lado, si las muestras que llegan al laboratorio no son suficientes o
han sido mal colectadas, el qumico forense podr hacerse presente en el lugar del crimen
para extraer ms evidencias susceptibles de ser analizadas. 19
Trabajo con muestras en un laboratorio de Qumica analtica
Las condiciones en las cuales fueron obtenidas las muestras por parte del personal policial y
sanitario, pueden influir en los resultados finales. Otros factores tienen que ver con la
rapidez con que se obtiene el material a examinar: cuando se presume que existi consumo
de drogas, las muestras de sangre y orina deben recogerse lo antes posible. Lo mismo ante
un posible asalto sexual, donde es necesario obtener importante evidencia para poder
determinar la naturaleza del mismo e identificar al agresor. La utilidad de los datos
obtenidos a travs de los estudios analticos, depende de las medidas que se hayan tomado
para asegurar el control de la calidad de las muestras (obtencin, transporte y
conservacin), hasta que son recepcionadas por el laboratorio forense.20
El cuidado de la cadena de custodia resulta fundamental a efectos de garantizar la correcta
remisin del material a analizar por el qumico forense. Para esto, es de especial relevancia
respetar la cadena de fro en el caso de muestras que deban refrigerarse para ser
conservadas y trasladadas al laboratorio. Lo mismo ocurre en lo referente a la conservacin
de muestras a determinada temperatura para evitar la putrefaccin, y la consecuente prdida
de informacin crucial en la investigacin. 21
En lo que concierne frmacos, algunos depresores del sistema nervioso central generan
diversas dificultades para ser analizados debido a que pueden haber sido administrados o
consumidos en dosis muy bajas como para ser detectados. Asimismo, la farmacocintica de
algunos medicamentos vara y pueden demorar en metabolizarse, por lo cual se vea
retrasada la manifestacin de ciertos compuestos en los resultados de laboratorio. Esto
ltimo representa un problema dado que la velocidad de metabolizacin en ciertas drogas
(alcohol incluso), y en determinados individuos, puede generar inconvenientes para
establecer la hora precisa de exposicin o ataque. 22