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Diagnóstico de Malaria: Métodos y Técnicas

Este documento describe varios métodos para el diagnóstico de la malaria, incluyendo el examen microscópico de frotis sanguíneos y gota gruesa, la detección de antígenos parasitarios, y pruebas moleculares. También discute el diagnóstico clínico y epidemiológico de la enfermedad.

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Este documento describe varios métodos para el diagnóstico de la malaria, incluyendo el examen microscópico de frotis sanguíneos y gota gruesa, la detección de antígenos parasitarios, y pruebas moleculares. También discute el diagnóstico clínico y epidemiológico de la enfermedad.

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DIAGNOSTICO

Mediante la observacin de distintas formas del parasito en el examen microscpico de extensiones de sangre perifricas teidas con diversos colorantes siendo el mtodo de referencia. Sin embargo se han impulsado el desarrollo de nuevas tcnicas ms sencillas.

DIAGNOSTICO CLINICO
Es el nico instrumento disponible para decidir el tratamiento del enfermo, especialmente en las poblaciones dispersas cu a accesibilidad a los medios de salud es dif!cil. Se fundamenta principalmente en la anamnesis, el examen cl!nico, el diagnostico epidemiolgico.
Anamnesis

El nico dato "ue nos puede guiar con certitud en el diagnostico cl!nico de la malaria es la periocidad de la fiebre# una fiebre terciaria o cuartana es siempre malaria o antecedentes de fiebre reciente. $dems de otros s!ntomas generales como cefalea, dolor muscular, escalofr!os o transpiracin pueden guiarnos pero no son espec!ficos de malaria.
%or otra parte, las orinas ro&as oscuras indican una hemoglobinuria o una bilirrubinuria manifiesta, "ue corresponde a una evolucin hacia una forma perniciosa en caso de hemoglobinuria a un inicio de una hepatitis viral en caso de bilirrubinuria. %or lo tanto la anamnesis puede aportar otras indicaciones de la gravedad del acceso en caso de sospecha, ella ser examinada con mucho cuidado. ' Examen fsico (a fiebre es el signo cl!nico de referencia. Muchos otros signos son clsicos de malaria "ue nos pueden orientar en el diagnstico pero "ue tambin se encuentran igualmente en otras patolog!as con fiebre en medio tropical. )n examen til podr!a ser la palpacin del ba*o, en las situaciones raras pero bien precisas+ como la confirmacin de una esplenomegalia hiperreactiva palustre en los adultos, ,sospecha de malaria al inicio de la estacin de transmisin en regin de paludismo de ba&a endemicidad-. En la prctica, nuestra decisin cl!nica no ser alterada o guiada por una esplenomegalia "ue solo en el primer caso. (a bs"ueda de signos de gravedad en P. falciparum, es primordial si se establece la sospecha como ser+ palide* manifiesta de las con&untivas, estado de conciencia, meningismo, ictericia franca, hipotensin, polipnea, etc.

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
.l diagnstico de laboratorio, es necesario para /respaldar/ el criterio cl!nico, para ello es importante la calidad de la muestra obtenida la tincin. El mane&o apropiado del diagnstico laboratorial determinara optimi*ar los recursos, hacer una buena seleccin de medicamentos antipaldicos reducir los efectos secundarios. )n buen examen microscpico est su&eto a una buena seleccin mantenimiento0de microscopios, a medios adecuados de traba&o, a la regularidad en el1 abastecimiento de materiales de laboratorio, al dominio de las tcnicas procedimientos del examinador v a la eficiencia en la lectura de las muestras sangu!neas "ue no permitan el cansancio del examinador/ "ue lleve a la lectura de falsos positivos falsos negativos en parasitemias ba&as. EXAMEN PARASITOLGICO Sirve para poner en evidencia el parsito en sangre, se reali*a por examen microscpico de un frotis o extendido de sangre o de una gota gruesa. ' Gota !"esa

El examen de una pel!cula gruesa de sangre debe ser el primer paso en el diagnstico, de laboratorio. Si se ven parsitos, entonces se examina el, frotis fino para confirmar la especie. (a gota gruesa es mas sensible "ue el frotis concentra mucho mas cantidad de sangre, los eritrocitos son destruidos los parsitos deformados. %ermite detectar frotis /falsos negativos/. 2etecta /el nivel de parasitemia/ de entre 13 a 43 parsitos. (a numeracin parasitaria se hace contando el nmero de parsitos por 433 leucocitos se admite "ue la leucocitemia media es de 5333 multiplicando el nmero de parsitos contados por 63, se obtiene una aproximacin del nmero de parsitos. )n mtodo mas rpido consiste en contar en 133 campos microscpicos, el nmero de campos "ue contienen parsitos el resultado se expresa en porcenta&e de campos positivos. El se calcula a partir de 733 parsitos, todos los campos contienen al menos 1 parsito. ' #!otis o Exten$i$o Es el examen de referencia en urgencia. 2ebe reali*arse en lo posible en un acceso trmico, necesita de una coloracin de 8iemsa Ma 08run9ald08iemsa. %ermite /caracteri*ar la especie/ contar la parasitemia expresado en porcenta&e de eritrocitos parasitados. 2etecta parasitemias del orden de 433 parsitos. En el frotis, la utili*acin de un ocular cuadriculado, permite la numeracin de los eritrocitos parasitados por campo. El reporte de la numeracin sobre el nombre total de eritrocitos por campo da el porcenta&e de eritrocitos parasitados, si se admite "ue el nmero normal de eritrocitos sea de : a 7 millones+ Si el individuo es anmico, se tendr "ue rea&ustar los valores entre 6 7 millones de eritrocitos. E% sistema $e &BC'&"antitati(e B"ff) Coat S)stemR* Becton Dic+inson, Se basa en la concentracin por gradiente de densidad de los eritrocitos parasitados mediante la centrifugacin de un capilar impregnado de heparina naran&a de acridina, a la "ue se aade un flotador. Se necesita, por tanto, capilares una centr!fuga especiales, as! como un acoplador de microscopio un sistema de epifluorescencia con lente especial, lo "ue encarece la tcnica sin aportar mucho al frotis la gota gruesa ,sensibilidad ;;0<;= especificidad 7;0<3=-. $ veces es dif!cil el reconocimiento del parsito, /no permite diferenciar las distintas especies/ tiene el inconveniente de traba&ar con sangre fresca ,:3,:1,::-. DETECCIN DE ANTIGENOS PARASITARIOS Son pruebas mu fciles de reali*ar, rpidas, sensibles no precisan microscopio /dipstic>/ o /&abonera/. (os sistemas comerciales son estables a temperatura ambiente, lo "ue permite el transporte al trpico, constitu en una importante a uda en los laboratorios con poca experiencia en la microscop!a. 2e ninguna forma sustitu en al frotis la gota gruesa, a "ue tienen /falsos negativos/ /no son cuantitativos/, as!, pueden pasar por alto casos de malaria, retrasando el diagnstico. $dems, al no distinguir el grado de parasitemia, relacionado con la gravedad, impiden al cl!nico la adopcin de las medidas teraputicas oportunas, con la consiguiente morbilidad mortalidad. ' Detecci-n $e% .RP/0

(a prote!na04 rica en ?istidina,?@%04- se secreta por P. falciparum a Aa sangre, lo "ue permite su deteccin mediante la captura antignica con anticuerpos espec!ficos tcnicas de Anmunocromatograf!a. Bon posterioridad se han desarrollado otros mtodos "ue detectan tanto el ant!geno ?@%0para P. falciparum, como el ant!geno panmalrico "ue se expresa en las fases sangu!neas de R. falciparum P. vivax.' Cienen una sensibilidad de0.<30<4= una especificidad de <50<;=. %ara P. vivax, son inferiores, del D7= <7= respectivamente. Detecci-n $e %a %actato $es1i$!o enasa 'LD., 2a!asita!ia

Se basa en la deteccin de la en*ima parasitaria, comn a las cuatro0especies de Plasmodium. (a especificidad es similar a las tcnicas "ue detectan ?@%04, pero la sensibilidad es un poco inferior ,;;0<3=-, disminu endo esta a medida "ue la parasitemia ba&a ,hasta el 6<= si ha E 73 parsitosFml-. EXAMEN SEROLGICO Ciene como ob&etivo la bs"ueda de anticuerpos anti P. falciparum en el suero de los pacientes tiene una ba&a sensibilidad para el diagnstico de malaria. Se utili*a0en determinados casos en los "ue la microscopia es negativa por la toma de medicacin, en el caso de fiebre de origen desconocido# en los centros de transfusin sangu!nea de *onas no endmicas# en caso de estudios epidemiolgicos ,seroprevalencia-# confirmacin de diagnstico de paludismo visceral evolutivo. (a tcnica habitual es una inmunofluorescencia ,Galciparum0sopt HG bio Merieux-. T3CNICAS MOLEC4LARES Se utili*a una tcnica de %B@ ,@eaccin en Badena de la %olimerasa- mltiple "ue permite la deteccin del 2I$ genomico de las cuatro especies parasitarias. (a amplificacin por %B@ permite incluso la deteccin de 60: parsitosFml ,parasitem!as d 3,3337 a 3,3317=-, as! como la determinacin de infecciones mixtas. $l ser una tcnica cuantitativa, permite controlar la eficacia del tratamiento, prediciendo las resistencias a los antipaldicos. %odr!a ser la tcnica de referencia por su alta sensibilidad especificidad, pero por no estar comerciali*ada /no se adapta al diagnstico de urgencia individuali*ado/. %or el momento, ha "ue reservar la tcnica con fines de investigacin para validar los resultados de la microscopia o de la deteccin antignica.

DIAGNOSTICO EPIDEMIOLOGICO Bonsiste en el conocimiento de la circulacion de la enfermedad en el area endemica poblacion determinada. (a procedencia de probables enfermos de localidades con transmision activa

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