1.

El Laboratorio de Microbiología
Clínica y la Gestión de Riesgos
Biológicos
1. Microorganismos, Clasificación y Epidemiología
La microbiología es la ciencia dedicada al estudio de organismos microscópicos, tanto seres
vivos como entidades no celulares. La microbiología clínica se especializa en los
patógenos y mantiene una estrecha relación con la medicina, la farmacología y la salud
pública.

1.1 Tipos de Microorganismos

Los agentes analizados incluyen:

●​ Bacterias y Arqueas.
●​ Protozoos y Algas.
●​ Hongos.
●​ Virus.
●​ Parásitos animales multicelulares (helmintos).

1.2 Clasificación por Grupos de Riesgo

Los microorganismos se categorizan según el peligro que representan para el individuo y la

comunidad:

Grupo Riesgo Riesgo Características y Ejemplos

de Individual Comunitario
Riesgo

Grupo I Bajo Bajo No causan enfermedades en trabajadores o

animales. Ej: Uso educativo o industrial.

Grupo II Moderado Bajo Patógenos que rara vez causan enfermedades

graves. Existen tratamientos y medidas
preventivas. Ej: Salmonella, Papilomavirus,
Hepatitis C.
 Grupo III Alto Bajo Causan enfermedades serias, pero no se
transmiten por contacto casual. Existen
tratamientos. Ej: M. tuberculosis, VIH, priones.

Grupo Alto Alto Enfermedades muy graves sin tratamiento

IV habitual. Transmisión fácil (directa o indirecta).
Ej: Ébola.

1.3 Conceptos de Epidemiología y Métricas

La epidemiología estudia la distribución, frecuencia y factores que afectan a las

enfermedades en poblaciones. Las enfermedades infecciosas se clasifican según su
prevalencia:

●​ Esporádicas: Ocurren de forma ocasional (ej. varicela).

●​ Endémicas: Presencia habitual en una población (ej. malaria).
●​ Epidémicas: El número de casos supera la incidencia prevista (ej. sarampión).
●​ Pandémicas: Afectan a áreas geográficas muy extensas (ej. Covid-19).

Cálculos epidemiológicos fundamentales:

●​ Prevalencia: (n / N) x 100 (Proporción de enfermos en un periodo y lugar).

●​ Incidencia: (n nuevos / N) x 100 (Proporción de enfermos nuevos en un periodo).
●​ n = número de enfermos; N = población total de estudio.

2. Prevención de Riesgos y Niveles de Bioseguridad

La prevención de riesgos laborales (PRL) en microbiología está regulada por normativas
como la NTP 432 y el RD 664/1997. Es imperativo el uso de Equipos de Protección
Individual (EPI) y el seguimiento de planes de contingencia.

2.1 Niveles de Bioseguridad (BSL)

Nivel Aplicación Características de las Instalaciones

BSL-1 Agentes Grupo I Sin características especiales.

BSL-2 Grupos I y II Señal de peligro biológico, cabinas de bioseguridad, descontaminación de material

de salida, duchas y lavaojos.
 BSL-3 Grupo III (o grandes Acceso controlado, plan de contingencia, salas herméticas, flujo de aire controlado,
cantidades de II) alarmas y trabajo bajo vigilancia.

BSL-4 Grupo IV Aislamiento total del edificio, trajes especiales, cambio de ropa, control estricto de
transporte de material y sistemas especiales de descontaminación.

3. El Laboratorio de Microbiología Clínica

El laboratorio está diseñado para facilitar el cultivo de microorganismos bajo condiciones de
seguridad estricta.

3.1 Secciones Operativas

El trabajo se organiza en áreas específicas:

●​ Toma, recepción y registro de muestras.

●​ Siembra de muestras y preparación de medios de cultivo ("cocina").
●​ Bacteriología: Cultivos, tinciones y diagnóstico rápido.
●​ Micobacterias: Área separada físicamente para prevenir infecciones.
●​ Otras áreas: Micología, virología, serología y estudios de antibióticos.

3.2 Equipamiento Básico

●​ Esterilidad: Autoclave, mecheros Bunsen o de alcohol y cabinas.

●​ Conservación: Frigoríficos, ultracongeladores y contenedores de nitrógeno líquido.
●​ Cultivo: Estufas de incubación y agitadores.
●​ Otro equipamiento: ordenadores, microscopio, centrífugas, baños de agua…
●​ Material e instrumental: placa cultivo, matraces, tubos, pipetas…

3.3 Cabinas y Campanas: Diferencias Funcionales

Es vital distinguir entre los equipos de protección de flujo de aire:

●​ Campana de flujo laminar: El aire filtrado (HEPA/ULPA) se dirige hacia el usuario.

Protege la muestra, pero no al operario. No apta para muestras peligrosas o
citostáticos. No se trabaja con muestras peligrosas, citostáticos…
●​ Cabina de bioseguridad: El aire se recoge y pasa por un segundo filtro antes de
ser expulsado. Protege tanto al operario como a la muestra. Pueden ser de
mampara o selladas con guantes fijos.

Mantenimiento: Deben limpiarse con etanol al 70%. Es crucial no obstruir la

dirección del aire (vertical u horizontal) para evitar contaminaciones cruzadas.
4. Gestión y Eliminación de Residuos
Los residuos microbiológicos representan un peligro para la salud pública y el medio
ambiente. Su gestión exige protocolos de esterilización específicos.

4.1 Pautas de Eliminación

1.​ Esterilización Obligatoria: Todo material que haya estado en contacto con
microorganismos (especialmente cepas resistentes a antibióticos o modificadas
genéticamente) debe esterilizarse.
2.​ Contenedores Específicos:
○​ Contenedor Amarillo: Objetos que han contactado con pacientes o
muestras biológicas (ej. portaobjetos).
○​ Bolsas para Autoclave: Puntas de pipetas, asas de siembra desechables y
tubos. Deben ser aptas para altas temperaturas y llevar indicador de
esterilidad.
3.​ Tratamiento según estado:
○​ Cultivos Sólidos: En bolsas adecuadas directamente al autoclave.
○​ Cultivos Líquidos (Grupos I y II): Pueden eliminarse por el fregadero tras
10 minutos de tratamiento con solución germicida (lejía 1/10).
4.​ Otros Métodos: Incineración o estufas.

4.2 Advertencias de Seguridad

●​ No mezclar diferentes tipos de residuos en la misma bolsa.

●​ El autoclave derrite medios con agar; las puntas de pipetas pueden perforar bolsas,
provocando derrames biológicos peligrosos.

2. Técnicas de Tinción y Observación de

Bacterias en Microbiología Clínica
1. Estructura y Taxonomía de las Bacterias
1.1. Diferenciación Celular: Procariotas vs. Eucariotas

Las bacterias se clasifican como células procariotas. Sus características distintivas frente a
las eucariotas (hongos y parásitos) son fundamentales para su identificación clínica:

Características Procariotas (Bacterias) Eucariotas (Hongos y Parásitos)

 Tamaño aproximado 0,5 - 3 µm > 5 µm

Núcleo Sin membrana (ADN libre) Rodeado de membrana

Ribosomas 70 S 80 S

Membrana plasmática Sin esteroles (excepto micoplasma) Con esteroles

Pared celular Compleja (peptidoglicano) Solo en hongos (quitina)

Orgánulos membranosos Ausentes Presentes (mitocondrias, Golgi, etc.)

Respiración En mesosomas (invaginaciones) En mitocondrias

1.2. Morfología y Agrupaciones Bacterianas

La clasificación morfológica es un pilar de la taxonomía microbiana. Las bacterias se

presentan en diversas formas y patrones de crecimiento:

●​ Bacilos: Forma de bastón o barra. Pueden presentarse en cadenas, empalizadas o

formas de "letras chinas".
●​ Cocos: Forma esférica. Sus agrupaciones incluyen diplococos (pares), tétradas
(cuatro), estreptococos (cadenas) y estafilococos (racimos irregulares).
●​ Vibrios: Forma de coma.
●​ Espirilos: Forma espiral rígida.
●​ Espiroquetas: Forma sigmoidal o serpenteante.
●​ Cocobacilos: Forma intermedia entre coco y bacilo.

1.3. Clasificación Taxonómica

La taxonomía ordena los microorganismos buscando similitudes basadas en:

1.​ Filogenia: Ancestros comunes mediante análisis filogenéticos.

2.​ Metabolismo: Procesos químicos compartidos.
3.​ Medio ambiente: Condiciones de vida (ej. temperaturas extremas).
4.​ Morfología: Forma y estructura.
El nombre científico sigue la nomenclatura binominal en latín o griego: Género + especie
(ej. Vibrio cholerae).

2. Tinciones Cromogénicas
Estas técnicas utilizan cromóforos que se adhieren a estructuras bacterianas para permitir
su observación bajo el microscopio óptico de campo claro.

2.1. Procedimientos Previos: Frotis y Fijación

●​ Frotis: Extensión de la muestra sobre un portaobjetos. La cantidad debe ser

adecuada para evitar el exceso de microorganismos. Las muestras líquidas se
colocan directamente; las sólidas o de cultivo requieren mezcla con una gota de
agua.
●​ Fijación: Asegura que la muestra no se desprenda.
○​ Calor: Paso rápido por llama (mechero Bunsen) o placa calefactora, evitando
quemar la muestra o ennegrecer el portaobjetos.
○​ Metanol: Cubrir con metanol al 95% durante un minuto y secar al aire.

2.2. Tipos de Tinciones Cromogénicas

Tipo Propósito Ejemplos

Simples Visualización general Azul de metileno (1%); Tinción negativa con nigrosina
(contraste), no diferenciación. (tiñe el fondo).

Diferenciales Separa microorganismos Tinción de Gram: Gram+ (morado/azul) y Gram- (rosa).

según sus características Usa cristal violeta y safranina. <br> Tinción de
químicas. Ziehl-Neelsen: Para bacterias ácido-alcohol resistentes
(BAAR), se tiñen de rojo.

Especiales Identificación de estructuras Cápsula: Tinta china o tinción de Hiss. <br> Endosporas:
específicas de ciertas Wirtz-Conklin, Möller o Schaeffer-Fulton. <br> Flagelos:
especies. Tinción de Leifson.

3. Tinciones Fluorescentes
Estas técnicas ofrecen un alto contraste y requieren un microscopio de fluorescencia. Los
fluorocromos son estimulados por luz ultravioleta para emitir colores brillantes sobre un
fondo negro.
3.1. Tinciones Directas con Fluorocromos

●​ Naranja de Acridina: Se une a ácidos nucleicos.

○​ ADN: Fluorescencia verde (indica replicación).
○​ ARN: Fluorescencia naranja-rojiza (indica síntesis de proteínas).
○​ Uso: Detección en hemocultivos y micoplasmas. Tiene capacidad
mutagénica.
●​ Auramina-Rodamina: Específica para bacterias ácido-alcohol resistentes (BAAR),
que aparecen de color amarillento-rojizo. Es más sensible que la de Ziehl-Neelsen.
La Rodamina B es cancerígena.

3.2. Inmunofluorescencia

Utiliza anticuerpos ligados a fluorocromos (conjugados) que se unen con alta especificidad a
antígenos bacterianos.

●​ Ventajas: Permite detectar especies en poca cantidad o de crecimiento lento. Suele

usar fluoresceína (verde) o proteína GFP.
●​ Riesgo: Posibilidad de falsos positivos por reacciones cruzadas (unión de los
conjugados a elementos no deseados).

4. Observación mediante Microscopía

4.1. Microscopio Óptico

Es el instrumento estándar en bacteriología. Utiliza una lente ocular (normalmente 10x) y

lentes objetivos de diferentes aumentos situadas en el revólver.

●​ Componentes críticos: Platina, pinzas (clip), anillos macrométrico y micrométrico

(para enfoque), iluminador y diafragma.
●​ Técnica de enfoque: Se debe acercar el objetivo al máximo sin tocar el
cubreobjetos y luego alejarlo lentamente con el tornillo macrométrico hasta ver la
imagen; finalmente, se ajusta con el micrométrico.
●​ Variantes ópticas:
○​ Campo claro: El más común; requiere tinción.
○​ Campo oscuro: Para células vivas o difíciles de teñir; fondo oscuro.
○​ Contraste de fase: Detalle en células vivas (escala de grises).
○​ Invertido: Para observar movimiento y preparaciones en fresco (gota
pendiente).
4.2. Microscopios de Fluorescencia y Electrónico

●​ De Fluorescencia: Específico para muestras tratadas con fluorocromos y luz

ultravioleta.
●​ Electrónico: Utiliza haces de electrones. Es un equipo complejo y voluminoso que
genera imágenes en blanco y negro de microorganismos completos. Es el único con
capacidad de aumento suficiente para visualizar virus.

3. Guía Técnica: Cultivo, Aislamiento y

Recuento de Bacterias en Microbiología
Clínica
1. Clasificación y Tipología de los Medios de Cultivo
Un medio de cultivo es una solución o sustrato que provee los nutrientes necesarios para
que los microorganismos crezcan y se multipliquen de forma artificial. Su clasificación se
divide en tres ejes principales:

1.1 Según su Consistencia

●​ Líquidos: Preparados en matraces o tubos de ensayo; no contienen agentes

solidificantes.
●​ Sólidos: Utilizan placas de Petri o tubos. Se logran añadiendo agentes gelificantes
como agar (15g/l) o gelatina.
●​ Semisólidos: Poseen una concentración menor de agar. Son fundamentales para
observar la movilidad bacteriana y se preparan generalmente en tubos de ensayo.

1.2 Según su Origen

 ●​ Sintéticos o Definidos: Tienen una composición química exacta y conocida. Se
utilizan primordialmente para estudios metabólicos.
●​ Naturales o No Definidos: Elaborados a partir de sustancias complejas de origen
animal o vegetal (sangre, leche, suero), cuya composición química exacta se
desconoce.

1.3 Según su Composición y Utilización

La siguiente tabla detalla la funcionalidad específica de los medios según su diseño:

Tipo de Medio Descripción y Uso

Simples o Generales Requerimientos nutricionales básicos para el crecimiento bacteriano común.

Enriquecidos Medios simples con aditivos (sangre, vitaminas, glucosa) para bacterias
nutricionalmente exigentes.

Selectivos Contienen agentes nocivos (bilis, antibióticos) que inhiben ciertos grupos y permiten
el crecimiento de otros.

Diferenciales Permiten visualizar cambios macroscópicos (color) por la interacción del

metabolismo bacteriano con componentes del medio.

De Enriquecimiento Favorecen la multiplicación de un microorganismo de interés en muestras pobres,

sin impedir el crecimiento de otros.

Mínimos Contienen la cantidad mínima indispensable de nutrientes para la supervivencia.

De Transporte Diseñados para mantener la viabilidad y concentración celular durante el traslado de

la muestra.

2. Protocolo de Preparación y Control de Calidad

La preparación de medios puede realizarse a partir de componentes individuales o
preparados comerciales deshidratados.
2.1 Procedimiento de Elaboración

1.​ Pesaje: Determinar la cantidad exacta de componentes según el volumen deseado.

2.​ Mezcla: Resuspender en agua destilada. En medios sólidos, asegurar la proporción
de agar.
3.​ Fusión: Si contiene agar, calentar (baño maría o agitador magnético) hasta que la
mezcla sea homogénea.
4.​ Esterilización: Se realiza en autoclave. Los recipientes deben estar rotulados y los
tapones de rosca deben mantenerse flojos para evitar roturas por presión.
5.​ Enfriamiento: Tras el autoclave, mantener el medio entre 50º-60ºC antes de
distribuirlo.

2.2 Distribución y Almacenamiento

●​ Placas de Petri: Verter unos 15-20 mL por placa. Eliminar burbujas con la llama de
un mechero Bunsen.
●​ Tubos inclinados: Llenar hasta un tercio del volumen y dejar solidificar en posición
inclinada.
●​ Conservación: Almacenar en frigorífico entre 2-8ºC. Las placas deben guardarse
invertidas y dentro de bolsas de plástico para evitar la desecación.

2.3 Control de Calidad

Es imperativo verificar la esterilidad antes del uso mediante indicadores de control que
cambian de color tras un proceso de esterilización correcto.

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3. Inoculación e Incubación
La inoculación (o siembra) es la introducción voluntaria de microorganismos en un medio
adecuado.

3.1 Técnicas de Inoculación

●​ Normas de Seguridad: Trabajar siempre cerca de la llama del mechero Bunsen o

en cabinas de bioseguridad. Es obligatorio el uso de mascarilla y está prohibido
hablar durante el proceso para evitar contaminaciones.
●​ Medios Líquidos: Se utilizan pipetas, jeringas o asas de siembra. Si se usa hisopo,
este debe presionar contra las paredes del recipiente.
●​ Tubos de Agar Inclinado: Se realiza un movimiento en zigzag desde la base hasta
la parte superior. Para condiciones de anaerobiosis, se utiliza un asa de hilo recto
(punzón) para pinchar el fondo del medio.

3.2 Condiciones de Incubación

Para propiciar el desarrollo bacteriano, se establecen parámetros estándar:

 ●​ Temperatura: Generalmente 37ºC.
●​ Atmósfera: Ambiente húmedo y requerimientos específicos de gases (oxígeno u
otros).
●​ Luz: Ausencia de iluminación.
●​ Equipamiento: Estufas de incubación para sólidos y agitadores térmicos para
líquidos (el movimiento favorece el crecimiento).

4. Aislamiento y Métodos de Recuento

4.1 Técnicas de Aislamiento

El aislamiento busca obtener colonias individuales a partir de una muestra mixta.

●​ Estría Simple: Deslizamiento suave del asa con la muestra sobre la placa.
●​ Estría Múltiple (Agotamiento): Se realizan descargas sucesivas en zigzag, girando
la placa y tocando la estría anterior para diluir la muestra progresivamente.
●​ Técnica de Cuatro Cuadrantes: Variante de la estría múltiple donde se divide la
placa en sectores, diluyendo la muestra en cada uno sin esterilizar el asa entre
cuadrantes.
●​ Extensión en Superficie: Se deposita un volumen con pipeta y se extiende con un
asa de Digralsky previamente esterilizada con alcohol y llama.

4.2 Métodos de Recuento

Permiten determinar la concentración de microorganismos en una muestra:

1.​ Conteo en Placa: Recuento de Unidades Formadoras de Colonias (UFC).

2.​ Cámara de Neubauer: Método microscópico para estimar el número de células en
un volumen definido. No es válido para bacterias, pero sí para levaduras y
protozoos.
○​ Fórmula: \text{Concentración (cel/ml)} = \frac{\text{nº de células} \times
10,000}{\text{nº de cuadros contabilizados}} (ajustar por el factor de dilución
si aplica).
3.​ Medida de Turbidez: Método indirecto mediante espectrofotometría, midiendo la
absorbancia a 600 nm.
4.​ Citometría de Flujo: Permite el recuento y la diferenciación celular automatizada
basada en características físicas y químicas.

4. Identificación Bacteriana y Pruebas de

Sensibilidad Antibiótica
1. Pruebas Bioquímicas de Identificación
Estas pruebas se fundamentan en detectar la presencia de moléculas específicas o en
observar reacciones metabólicas características de cada especie bacteriana.

1.1 Pruebas Inmediatas

Permiten una clasificación preliminar instantánea:

●​ Prueba de la Catalasa: Hidrólisis del peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua y

oxígeno.
○​ Resultados: Positiva (burbujas) en Micrococcaceae; negativa en
Streptococcus y Enterococcus.
○​ Protocolo: Se usa H2O2 al 3% generalmente, 15% para anaerobios y 30%
para Neisseria. No debe realizarse en medios con sangre.
●​ Prueba de la Oxidasa: Detecta el citocromo oxidasa, principalmente en bacterias
Gram negativas.
○​ Reactivo: Reactivo de Kovacs (dihidroclorhidrato de
tetrametil-p-fenilendiamina al 1%).
○​ Resultados: Color azul-violeta (positivo, ej. Neisseria gonorrhoeae) o
ausencia de color (negativo, ej. Escherichia coli). El resultado debe leerse
entre 5 y 10 segundos.

1.2 Pruebas Rápidas (Menos de 6 horas)

●​ Hidrólisis del hipurato: Transforma hipurato de sodio en glicina y ácido benzoico.

La glicina reacciona con ninhidrina para cambiar de color. Identifica S. agalactiae, C.
jejuni, G. vaginalis y L. monocytogenes.
●​ Beta-galactosidasa + ONPG: Evalúa la hidrólisis de la lactosa. El sustrato ONPG
produce una coloración amarillenta. Útil para enterobacterias como E. coli.
●​ Aminopeptidasa + PYR: Detecta enzimas en S. pyogenes y Enterococcus. El
reactivo de revelado genera coloración roja.
●​ Leucina aminopeptidasa (LAP): Distingue Leuconostoc y Aerococcus (negativos)
de otros cocos Gram positivos (positivos).
●​ Ureasa: Hidrólisis de la urea en amoníaco y CO 2. Característica de Proteus,
Helicobacter pylori y Brucella.
●​ Indol: Degradación del triptófano. Al añadir reactivo de Kovac/Ehrlich se genera un
anillo rojo. Identifica E. coli.

1.3 Pruebas de Sensibilidad Específica

Se basan en la inhibición del crecimiento mediante sustancias concretas:

●​ Optoquina y sales biliares: Inhiben a Streptococcus pneumoniae.

●​ Bacitracina: Inhibe estreptococos beta-hemolíticos como S. pyogenes.

2. Pruebas Serológicas y Moleculares

2.1 Métodos Serológicos
Utilizan la especificidad de los anticuerpos para detectar antígenos bacterianos:

●​ Aglutinación: Pruebas rápidas donde la unión antígeno-anticuerpo produce un

grumo visible.
●​ Inmunofluorescencia: Marcaje de antígenos con anticuerpos ligados a
fluorocromos.
●​ ELISA: Realizado en placas de microtitulación para detectar toxinas (ej. Clostridium
difficile) o antígenos de forma cuantitativa mediante lectores automatizados.
●​ Flujo Lateral: Formato similar a los test de antígenos de Covid-19, donde aparecen
líneas reactivas.

2.2 Métodos Moleculares

Representan el nivel más alto de exactitud al enfocarse en técnicas genotípicas. Incluyen:

●​ Reacción en cadena de la polimerasa (PCR).

●​ Secuenciación genómica.
●​ Análisis genético.

3. Sistemas Multiprueba y Automatización

3.1 Sistemas Multiprueba Manuales

Consisten en soportes con celdillas que contienen sustratos liofilizados.

●​ Lógica de Codificación: Cada prueba bioquímica utiliza tres celdillas. Según los
resultados positivos o negativos, se asigna un valor numérico para generar un
código de identificación.

Resultado de la celdilla Valor asignado

Al menos una celdilla negativa 0

La primera celdilla es positiva 1

La segunda celdilla es positiva 2

La tercera celdilla es positiva 4

3.2 Sistemas Automatizados

Realizan la inoculación, incubación y lectura de forma mecánica.

●​ Características: Permiten integrar antibióticos en las celdillas para realizar

identificación y antibiograma simultáneamente. Los datos se procesan mediante un
software con alta fiabilidad.
●​ Balance Operativo:
○​ Ventajas: Ahorro significativo de tiempo y trabajo manual.
○​ Desventajas: Elevado coste y baja flexibilidad (limitado a los paneles del
fabricante).

4. Sensibilidad a Antibióticos (Antibiograma)

El antibiograma es la prueba esencial para determinar qué sustancias químicas —sean
bactericidas (matan) o bacteriostáticas (impiden crecimiento)— son efectivas contra una
bacteria específica.

4.1 Técnicas de Antibiograma

Existen cuatro métodos principales, regulados por normativas CLSI y EUCAST:

1.​ Método Disco-Placa: Difusión del antibiótico desde un disco de papel hacia el
medio sólido. La sensibilidad se mide por el diámetro del halo de inhibición (en mm).
No determina la CMI.
2.​ Epsilon-test (E-test): Utiliza tiras con un gradiente de concentración de antibiótico.
La intersección del halo de inhibición con la tira indica directamente la
Concentración Mínima Inhibitoria (CMI).
3.​ Dilución en Medio Sólido: Se preparan placas con distintas concentraciones de
antibióticos. La primera placa donde no hay crecimiento indica la CMI. Es crucial no
añadir el antibiótico al medio excesivamente caliente para evitar su inactivación.
4.​ Dilución en Medio Líquido: Realizado habitualmente en placas de microtitulación
para ahorrar material y permitir lectura automatizada. Al igual que en medio sólido,
busca determinar la CMI.

4.2 Importancia de la CMI

La Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) es el valor de referencia que, comparado con

tablas estandarizadas, permite clasificar a una bacteria como:

●​ Sensible: El antibiótico es eficaz a dosis terapéuticas.

●​ Intermedia: Eficacia limitada o dependiente de la dosis.
●​ Resistente: El antibiótico no es efectivo contra la cepa analizada.

5. Protocolos de Identificación de
Bacterias en Microbiología Clínica
1. Identificación de Cocos
1.1. Cocos Grampositivos

Aunque comparten morfología, su agrupación y respuesta metabólica permiten su

distinción:

●​ Staphylococcus: Se agrupan en racimos y son Catalasa +.

○​ S. aureus: Posee alta virulencia, es Coagulasa + y crece en medios
hipersalinos. Se encuentra comúnmente en la mucosa de las fosas nasales.
○​ S. epidermidis y S. saprophyticus: Forman parte de la microbiota habitual.
●​ Streptococcus: Forman cadenas y son Catalasa -. No crecen en medios
hipersalinos ni en agar sin sangre. Su clasificación principal se basa en el tipo de
hemólisis.
●​ Enterococcus: Se presentan como diplococos y causan infecciones abdominales y
urinarias.
○​ E. faecalis: Positivo para piruvato, negativo para arabinosa.
○​ E. faecium: Negativo para piruvato, positivo para arabinosa.

Clasificación de Streptococos según Hemólisis

Tipo de Características Especies Destacadas y Pruebas

Hemólisis

Alfa-hemolítico Hemólisis parcial (halo S. pneumoniae: Sensible a optoquina y soluble en sales

s verdoso). biliares.

Beta-hemolític Hemólisis completa (halo Grupo A (S. pyogenes): Sensible a bacitracina, PYR +.
os transparente). <br> Grupo B (S. agalactiae): Hipurato + y CAMP +.

No hemolíticos Sin cambios en el agar. S. sanguis, S. mutans.

1.2. Cocos Gramnegativos

Destaca principalmente el género Neisseria y Moraxella.

●​ Neisseria meningitidis: Crece en agar Thayer-Martin, chocolate o sangre a 22ºC.

Es positiva para catalasa, oxidasa, glucosa y maltosa.
●​ Neisseria gonorrhoeae: Requerimientos de cultivo similares a N. meningitidis, pero
es negativa para maltosa.
●​ Moraxella catarrhalis: Causa infecciones respiratorias. Es positiva para catalasa,
oxidasa y ADNasa, pero negativa para la fermentación de azúcares (glucosa,
lactosa, maltosa).
2. Identificación de Bacilos
2.1. Bacilos Grampositivos

●​ Bacillus spp: Único género del grupo capaz de formar esporas (tinción verde
malaquita). B. anthracis (carbunco) es inmóvil y sensible a la penicilina.
●​ Corynebacterium spp: C. diphtheriae produce la toxina de la difteria. En agar
Tinsdale forma colonias negras con halo marrón; es ureasa negativa.
●​ Nocardia spp: Forman filamentos ramificados (micelio). Son catalasa positiva y
oxidasa/movilidad negativa.
●​ Listeria spp: L. monocytogenes causa listeriosis. Es catalasa y bilis-esculina
positiva, muestra movilidad a 22ºC y realiza beta-hemólisis.

2.2. Bacilos Gramnegativos

Se categorizan según su metabolismo y exigencia nutricional:

●​ Enterobacterias: Son oxidasa negativa y fermentan glucosa (color amarillo en

medio Kliger). Incluye patógenos como Salmonella, Shigella y Yersinia, y
oportunistas como E. coli y Klebsiella.
●​ No fermentadores (BGN-NF): Pseudomonas aeruginosa es el exponente principal,
siendo positiva para catalasa, oxidasa y movilidad, y produciendo pigmentos
verdosos o rojizos.
●​ Bacilos exigentes: Requieren condiciones especiales de incubación y medios
específicos.

Género Método de Detección Especial

Haemophilus spp. Factores de crecimiento y anaerobiosis.

Campylobacter Medio selectivo e incubación a 42ºC para C. jejuni.

Helicobacter Test de flujo lateral y medios selectivos.

Legionella Medios BCYE \alpha y BMPA, atmósfera húmeda.

Brucella Hemocultivos y técnicas serológicas.

3. Bacterias Intracelulares y Especializadas
3.1. Rickettsias

Son cocobacilos pleomórficos e intracelulares obligados (se multiplican dentro de la célula

huésped).

●​ Transmisión: Picaduras de garrapatas, pulgas o contacto con agua/alimentos

contaminados.
●​ Grupos: Fiebres manchadas (R. conorii, R. rickettsii) y fiebres tíficas (R. prowazekii,
R. typhi).
●​ Identificación: No se tiñen con Gram; requieren cultivo celular, tinción de Giemsa o
inmunofluorescencia (Nivel 3 de bioseguridad).

3.2. Clamidias

Bacterias intracelulares obligadas con un ciclo vital complejo:

1.​ Cuerpo Elemental (CE): Forma infectiva extracelular (endocitosis).

2.​ Cuerpo Reticulado (CR): Forma de replicación intracelular.
3.​ Lisis: Ruptura de la célula y liberación de nuevos CE.
●​ Especies: C. psittaci (zoonosis aviar), C. trachomatis (ETS) y C. pneumoniae
(respiratoria).

3.3. Micoplasmas

Son las bacterias de menor tamaño y carecen de pared celular. Mycoplasma pneumoniae
es la especie más relevante (causa neumonía) y se identifica habitualmente mediante
métodos serológicos.

4. Micobacterias y Bacterias Anaerobias

4.1. Micobacterias

Se caracterizan por una pared celular gruesa y rica en lípidos, lo que las hace Bacilos
Ácido-Alcohol Resistentes (BAAR).

●​ Resistencia: Soportan desinfectantes y desecación, pero son sensibles al etanol al

70% y al agua oxigenada.
●​ Patologías: M. tuberculosis y M. leprae (ambas causan granulomas).
●​ Identificación: Tinción de Ziehl-Neelsen o Auramina-Rodamina. Crecimiento lento
en medios con CO2 o ácidos grasos.

4.2. Bacterias Anaerobias

Crecen exclusivamente en ausencia de oxígeno. Forman parte de la microbiota pero

pueden ser patógenas en tejidos profundos.
 ●​ Clostridium: Únicos anaerobios formadores de esporas.
○​ C. tetani: Tétanos.
○​ C. perfringens: Gangrena gaseosa.
○​ C. botulinum: Botulismo (su toxina se usa como bótox).
○​ C. difficile: Diarrea y colitis.
●​ Otros géneros: Actinomyces, Bifidobacterium y Bacteroides.

6. Estudios Bacteriológicos en Muestras

Biológicas: Guía de Microbiología
Clínica
1. Análisis de Urocultivos y Coprocultivos
1.1 Urocultivo

El urocultivo es la prueba fundamental para determinar la presencia de microorganismos en

la orina. Su éxito depende de una recolección y procesamiento rigurosos.

●​ Obtención y Volumen: Se realiza mediante micción espontánea, sondaje o punción

suprapúbica. Se requiere un volumen de 5-10 ml, aunque para micobacterias o
parásitos se necesita una cantidad mayor.
●​ Procesamiento Técnico:
○​ Medios: CLED, CLED + agar sangre, MacConkey + agar sangre o medios
cromogénicos.
○​ Siembra: Debe agitarse la muestra previamente. Se utilizan asas calibradas
de 1 o 10 µl (donde una colonia equivale a 1.000 o 100 UFC/mL,
respectivamente).
○​ Incubación: 18-20 horas a 35-37°C.
●​ Interpretación: Se consideran las Unidades Formadoras de Colonias (UFC/ml) y se
realizan antibiogramas. La presencia de restos fecales invalida la muestra, obligando
a repetir la analítica.

1.2 Coprocultivo

Destinado a la detección de patógenos en materia fecal. Es crucial que la muestra se

obtenga antes de iniciar tratamientos antimicrobianos o antidiarreicos.

●​ Requisitos de la Muestra: 1-2 g si es sólida o 5-10 ml si es líquida. No debe estar

contaminada con orina.
●​ Conservación: Si el procesamiento demora más de 2 horas, debe refrigerarse en
medio Cary-Blair (con la advertencia de que puede destruir patógenos sensibles
como Shigella spp.).
●​ Procedimiento de Laboratorio:
 ○​ Medios: Incluyen caldos para portadores (F-selenito), medios sólidos
generales (agar sangre, soja) y medios selectivos (MacConkey, Hecktoen,
Salmonella-Shigella).
○​ Incubación: Aerobiosis durante 24-48 horas a 37°C.

2. Hemocultivos y Muestras Respiratorias

2.1 Hemocultivos

Se utilizan ante sospechas de sepsis, meningitis o neumonía. Se recomienda la extracción

durante el pico febril.

●​ Protocolo de Manejo:
○​ Se emplean dos frascos: uno para cultivo aerobio y otro para anaerobio.
○​ Temperatura: Deben mantenerse a 35-37°C; nunca refrigerar.
●​ Metodologías de Cultivo:

Tipo Descripción

Manuales Convencional, bifásico (más rápido), lisis-filtración, lisis-centrifugación y manométrico.

Automáticos Radiométricos (miden ^{14}CO_2, en desuso), no radiométricos (IR) y de monitorización

continua (detección algorítmica de CO_2).

2.2 Diagnóstico de Muestras Respiratorias

El estudio se divide según la localización anatómica de la sospecha infecciosa:

●​ Exudado Faringoamigdalar: Uso de hisopos de Dacron o alginato cálcico. Se

inoculó en agar sangre, realizando incisiones para visualizar la betahemólisis
característica de Streptococcus pyogenes. Incubación a 35°C con 5% de CO_2.
●​ Otitis: Varía según el tipo (externa usa MacConkey; media requiere agar sangre,
chocolate y MacConkey). Si se sospechan anaerobios, se emplea medio Shaedler.
●​ Cultivo Sinusal: Muestras obtenidas por aspiración nasal. Se incuban 48h a 35°C
con 5% de CO 2.
●​ Tracto Inferior: Incluye esputos y aspirados traqueales. Se utilizan medios agar
sangre, chocolate y MacConkey (o EMB para cultivos cuantitativos).

3. Muestras de Exudados
Los exudados son fluidos acumulados por procesos inflamatorios. Su obtención suele ser
compleja y requiere una limpieza previa de la zona.
 ●​ Piel y Partes Blandas: Se obtienen por aspiración, torunda o biopsia. Se siembran
en agar sangre, chocolate y MacConkey. En casos de baja carga bacteriana, se
recurre a caldos enriquecidos como BHI o tioglicolato.
●​ Exudados Oculares:
○​ Conjuntival/Palpebral: Requiere transporte óptimo para evitar la desecación
debido al escaso volumen.
○​ Aparato Lacrimal: Obtenido por jeringa.
○​ En conjuntivitis hiperaguda se emplean medios específicos para gonococos.
●​ Aparato Genitourinario: Esencial para detectar ETS e infecciones perinatales. Se
utilizan medios como Thayer-Martin, Levine, CNA y caldo Granada (específicamente
para exudados vagino rectales 5 semanas antes del parto).

4. Líquido Cefalorraquídeo (LCR) y Otros Líquidos

Corporales
4.1 Líquido Cefalorraquídeo

Es una muestra crítica que protege el sistema nervioso central. Su procesamiento debe ser
inmediato.

●​ Obtención: Punción lumbar (contraindicada en abscesos cerebrales, donde se

recurre a hemocultivos). Se requieren aproximadamente 10 ml totales.
●​ Análisis Macro: La turbidez es un indicador directo de crecimiento bacteriano.
●​ Procesamiento: Centrifugación de 1 ml a 2.000 G; se siembra el sedimento
resuspendido en agar sangre y chocolate. La incubación puede extenderse hasta 14
días en casos de sospecha de infección por derivaciones (atmósfera anaerobia).

4.2 Otros Fluidos Biológicos

El estudio microbiológico se extiende a diversas matrices adicionales según la patología:

●​ Líquido Amniótico: Diagnóstico de corioamnionitis (incubación de 5 días en

diversos medios).
●​ Leche Materna: Extracción manual para detectar bacterias causantes de mastitis.
●​ Líquido Sinovial: Para infecciones osteoarticulares (incubación de 2 a 7 días).
●​ Líquido Pleural: Requiere al menos 5 ml; incubación en aerobiosis con humedad
controlada (50-70%).
●​ Líquido Peritoneal: Se procesa habitualmente junto con hemocultivos para
diagnosticar infecciones abdominales.
●​ Semen (Espermocultivos): Diagnóstico de infecciones en el aparato reproductor
masculino, considerando la presencia de microbiota habitual genitourinaria. Se
incuba 48h a 35-37°C.
7. Compendio de Micología y
Parasitología Clínica: Características,
Patologías y Diagnóstico
1. Micología Clínica: Hongos y Micosis
Los hongos son organismos que pueden clasificarse principalmente por su método de
reproducción:

●​ Hongos imperfectos: Reproducción asexual mediante esporas con material

genético idéntico al progenitor.
●​ Hongos perfectos: Reproducción sexual que requiere la unión de dos células.

1.1 Tipos de Micosis y Enfermedades Asociadas

La infección por hongos se denomina micosis. Además de las infecciones, los hongos
pueden provocar reacciones alérgicas, desarrollo de tumores e incluso la muerte.

Tipo de Micosis Características Principales Ejemplos de Hongos /

Patologías

Superficiales Afectan la capa queratinizada de la piel o el pelo. Malassezia furfur, Piedraia

Impacto estético (lesiones, cambios de color). hortae, pitiriasis versicolor, tiña
negra.

Oportunistas o Producidas por hongos comensales o ambientales Género Candida, Aspergillus,

Cutáneo-mucosas de baja virulencia en personas inmunodeprimidas Cryptococcus neoformans,
o con dispositivos médicos. Pneumocystis jiroveci.

Subcutáneas Afectan capas profundas (córnea, tejido conectivo, Fusarium spp., Acremonium
músculo). Entran por traumatismos, úlceras o spp., Alternaria spp.,
abscesos. Pueden causar hiperplasia Cladosporium spp.
epiteliomatosa.

Sistémicas Causadas por hongos con dimorfismo térmico Histoplasma capsulatum,

(levaduras a 37°C, hifas a 25°C). Son endémicas y Coccidioides immitis,
afectan a individuos sanos. Blastomyces dermatidis.
 Pseudomicosis Enfermedades bacterianas que simulan micosis Actinomicosis y norcardiosis.
por sintomatología o aspecto de las colonias.

1.2 Procedimientos de Identificación y Estudio

Métodos Dependientes de Cultivo

El cultivo fúngico sigue protocolos similares a los bacterianos, con especificaciones propias:

●​ Medios de cultivo: El más común es el Sabouraud glucosado. Otras variantes

incluyen el agar modificado de Emmons (estimula esporulación), agar patata
glucosado, agar cerebro-corazón y agar base levadura-nitrógeno (YNB) para
auxonogramas de azúcares.
●​ Identificación específica: Se usa el agar ácido cafeico para detectar oxidasa en
Cryptococcus neoformans.
●​ Condiciones de incubación: 37°C durante uno o varios días. Las placas deben
sellarse con material que permita el paso de aire (parafina) y colocarse con la tapa
hacia arriba para evitar la acumulación de esporas.
●​ Antifungigramas: Pruebas de sensibilidad para determinar el tratamiento
adecuado.

Métodos Independientes de Cultivo

Dada la baja sensibilidad y el tiempo requerido por los cultivos, se emplean alternativas más
rápidas:

●​ Detección de antígenos:
○​ Antígeno criptocócico: Mediante aglutinación en látex o ELISA.
○​ Galactomanano: Alta especificidad para aspergilosis (ELISA).
○​ Mananos: Para detección de antígenos o anticuerpos frente a Candida.
○​ \beta-1,3 D-glucano: Marcador general de infección fúngica.
●​ Técnicas avanzadas: PCR para detección de ADN fúngico y espectrometría de
masas MALDI-TOF para identificación rápida mediante sistemas comerciales.

2. Parasitología Clínica: Protozoos y Helmintos

La parasitología estudia organismos que utilizan a un huésped como fuente de nutrientes,
causando lesiones o daños denominados parasitosis.

2.1 Clasificación y Características de los Protozoos

Son organismos eucariotas, unicelulares, móviles y generalmente aerobios. Presentan dos

formas vitales: trofozoíto (fase vegetativa interna) y quiste (fase resistente externa e
infectiva).
 Grupo Características Ejemplos / Enfermedades

Amebas o Movimiento y captura de alimento mediante Naegleria fowleri, Acanthamoeba

rizópodos pseudópodos. Algunas son comensales. (meningoencefalitis).

Flagelados Poseen uno o más flagelos. Habitan en Trichomonas vaginalis, Leishmania,

intestino, sangre o aparato urogenital. Trypanosoma cruzi (Chagas).

Ciliados Poseen cilios y dos núcleos (reproducción Balantidium coli (balantidiasis).

sexual). Alimentación por fagocitosis vía
«citostoma».

Esporozoos Parásitos intracelulares con ciclos sexuales y Toxoplasma gondii, Plasmodium

asexuales. Generan esporas. malariae (malaria), Cyclospora.

Microsporidios Hongos/protozoos intracelulares sin Enterocytozoon spp., Nosema spp.,

mitocondrias. Esporas pequeñas. Afectan a Encephalitozoon.
inmunodeprimidos.

2.2 Características de los Helmintos (Gusanos)

Son animales pluricelulares invertebrados con un cuerpo formado por una envoltura
muscular y una cavidad general (celoma) que contiene órganos sexuales y tracto digestivo
(boca y ano), pero carece de sistemas circulatorio y respiratorio.

●​ Ciclo vital: Reproducción sexual (incluyendo hermafroditismo) \rightarrow

Producción de huevos \rightarrow Eclosión en larvas dentro del huésped \rightarrow
Colonización de órganos.

Grupos de Helmintos

1.​ Nematodos: Cilíndricos con recubrimiento de quitina y dimorfismo sexual.

○​ Ascaris lumbricoides: Diarreas y bronconeumonía.
○​ Enterobius vermicularis: Oxiuro (lombrices), causa picor anal y bruxismo.
○​ Trichinella spiralis: Triquinosis (quistes musculares).
○​ Anisakis spp.: Por ingesta de pescado crudo/mal cocinado; causa vómitos y
úlceras.
○​ Filarioidea: Transmitidas por insectos, colonizan sangre y linfa.
2.​ Platelmintos:
 ○​ Cestodos: Planos y segmentados (escólex, cuello y estróbilo). Sin tubo
digestivo (nutrición por ósmosis). Ejemplo: Taenia saginata (tenias
intestinales).
○​ Trematodos: Forma de hoja, poseen tubo digestivo. Requieren varios
huéspedes. Ejemplo: Schistosoma (esquistosomiasis), Fasciola hepatica.

3. Diagnóstico de Parasitosis
El diagnóstico se basa en la anamnesis (viajes a zonas endémicas) y diversas técnicas de
laboratorio.

3.1 Examen de Heces (ACP)

Es el método principal para parásitos digestivos. Requiere análisis rápido, refrigeración y

uso de conservantes para mantener trofozoítos y huevos.

●​ Identificación visual: Algunos helmintos son visibles a simple vista; otros requieren
microscopía con tinciones como Weber o Kinyoun.
●​ Técnicas de Concentración: Utilizadas cuando la carga parasitaria es baja.
1.​ Sedimentación: Emulsión en formalina y éter etílico; el pellet contiene los
parásitos tras centrifugar.
2.​ Flotación: Emulsión en sustancias de alta densidad (cloruro sódico saturado
o sulfato de magnesio); los parásitos quedan en el sobrenadante.
●​ Otros métodos específicos: Test de Graham, método de Baerman y Harada-Mori.

3.2 Diagnóstico en Sangre y Otros Fluidos

●​ Microscopía: Frotis de sangre y tinciones para parásitos hemáticos como

Leishmania o Toxoplasma.
●​ Técnicas Inmunológicas: Detección de antígenos mediante aglutinación en látex,
inmunocromatografía, test de flujo lateral o inmunofluorescencia en sangre, heces,
orina o pus.
●​ Pruebas Moleculares: Amplificación de ADN por PCR para una identificación
exacta de la especie.

Nota: Se debe tener precaución con los "artefactos" (células epiteliales, esporas, hongos)
que pueden inducir a errores diagnósticos en el examen microscópico.

8. Compendio Técnico de Virología

Clínica: Estructura, Clasificación y
Diagnóstico
1. Naturaleza y Estructura de los Virus
Los virus se definen como parásitos intracelulares obligados. Su tamaño, inferior al de las
bacterias, impide su observación mediante microscopía óptica convencional, requiriendo el
uso de microscopía electrónica para su visualización.

1.1 Componentes Estructurales

Un virus se compone fundamentalmente de dos o tres elementos clave:

●​ Ácido Nucleico: Contiene el genoma viral (ADN o ARN), que puede ser
monocatenario, bicatenario o segmentado. Posee los genes necesarios para
codificar proteínas de replicación.
●​ Cápside: Cubierta proteica compuesta por subunidades denominadas capsómeros.
Su función es proteger el ácido nucleico.
●​ Envoltura (opcional): Algunos virus, como los coronavirus, poseen una membrana
externa similar a la celular que rodea la cápside.

1.2 Morfología Viral

Según la disposición de su cápside, los virus se clasifican en:

1.​ Helicoidales: Un solo tipo de capsómero dispuesto en forma de escalera de caracol,

dejando un espacio hueco central para el ácido nucleico.
2.​ Icosaédricos: Cápside con forma poliédrica o casi esférica.
3.​ Esféricos o con envoltura: Virus donde la cápside está cubierta por una membrana
(ej. Gripe, VIH).

2. Métodos de Infección y Replicación

La infección ocurre a través del contacto directo con la célula huésped. El proceso,
denominado ciclo infectivo, se divide en fases críticas:

1.​ Fijación o adhesión: Unión del virus a la membrana de la célula objetivo.

2.​ Fusión o penetración: Entrada de la cápside mediante endocitosis y liberación del
ácido nucleico.
3.​ Multiplicación: Replicación del genoma y síntesis de proteínas víricas.
4.​ Ensamblaje: Formación de nuevos viriones a partir de los componentes
sintetizados.
5.​ Liberación o brotación: Salida de los virus mediante lisis celular.

Diferenciación de Ciclos

●​ Ciclo Lítico: El proceso de replicación y lisis ocurre de forma consecutiva y rápida.

●​ Ciclo Lisogénico: El genoma vírico se inserta en el núcleo celular, pudiendo
permanecer latente durante años y transmitiéndose a las células hijas mediante
mitosis.

3. Marcos de Clasificación Vírica

Existen dos sistemas principales para la organización taxonómica de los virus:

3.1 Clasificación ICTV (Comité Internacional de Taxonomía de Virus)

Este sistema jerárquico utiliza términos en cursiva y agrupa a los virus en dominios, reinos,
clases, órdenes, familias, géneros y especies. Actualmente reconoce:

●​ 6 dominios.
●​ 2.606 géneros.
●​ Más de 10.000 especies analizadas.
●​ Nota: Este sistema no considera cepas o variantes.

3.2 Clasificación de Baltimore

Organiza los virus en siete grupos basándose en el tipo de ácido nucleico y el método para
generar ARNm.

Grupo Características del Genoma Ejemplos

I ADN bicatenario (transcripción directa). Adenovirus, Herpesvirus, VPH.

II ADN monocatenario (debe generar ADN bicatenario primero). Parvovirus.

III ARN bicatenario. Rotavirus, Reovirus.

IV ARN monocatenario (+) (actúa directamente como ARNm). Coronavirus, Zika, Hepatitis A/C.

V ARN monocatenario (-) (requiere generar ARNm). Ébola, Gripe, Sarampión.

VI ARN monocatenario con retrotranscripción a ADN bicatenario. VIH.

VII ADN bicatenario con retrotranscripción para replicación. Hepatitis B.

4. Identificación y Estudio en el Laboratorio

La eficacia del diagnóstico depende de que la muestra se remita al laboratorio en un plazo
inferior a 48 horas tras la aparición de síntomas.

4.1 Métodos de Estudio Directo e Indirecto

●​ Microscopía: La óptica es limitada a ciertos virus (Herpes simple, CMV), mientras

que la electrónica permite visualización directa pero a un coste elevado.
●​ Inmunofluorescencia: Técnica rutinaria que utiliza anticuerpos marcados para
detectar antígenos específicos.
●​ Cultivo Celular: Dado que son parásitos obligados, requieren líneas celulares
humanas o animales bajo condiciones estrictas de mantenimiento y nutrición.
●​ Inmunología: Técnicas como ELISA o Western Blot (este último separa proteínas
por electroforesis) para detectar anticuerpos en el suero del paciente.
●​ Inmunocromatografía (Flujo Lateral): Detección rápida de antígenos (ej. Test de
Covid-19).
●​ Biología Molecular: Uso de PCR para detectar el genoma viral con alta
sensibilidad.

5. Diagnóstico de Enfermedades Víricas Destacadas

5.1 Virus de la Hepatitis

La hepatitis es la inflamación del hígado, clasificable en varios tipos según el agente vírico:

Tipo Transmisión Métodos de Diagnóstico

A (VHA) Oro-fecal, agua/alimentos. Serología (IgG/IgM), RT-PCR, Flujo lateral.

B (VHB) Contacto con fluidos. Antígeno de superficie HBsAg (marcador precoz), anti-HBs,
HBcAg, HBeAg; PCR en tiempo real para carga viral.

C (VHC) Parenteral/Mucosas. Enzimoinmunoensayos, quimioluminiscencia, PCR para carga viral

y genotipos.

D (VHD) Permucosa/Percutánea. Virus satélite (requiere VHB). Detección de HDAg y anti-VHD.

E (VHE) Oro-fecal. Serología (IgM/IgG anti-VHE), RT-PCR para casos crónicos.

 G (VTT) Postransfusional. Identificado mediante PCR; los pacientes pueden ser portadores
asintomáticos.

5.2 Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH)

El VIH infecta específicamente a los linfocitos T CD4 y posee un periodo de incubación

prolongado antes de desarrollar el SIDA.

●​ Tipos: VIH-1 (global) y VIH-2 (específico de zonas de África).

●​ Diagnóstico: Detección de anticuerpos anti p-24.
●​ Seguimiento: Se utiliza PCR en tiempo real para determinar la carga viral
plasmática y evaluar el éxito del tratamiento antiviral.

5.3 Herpesvirus

Este grupo se caracteriza por su capacidad de latencia y reactivación posterior.

1.​ Herpes simple y Varicela-zoster: Detección en vesículas y líquido cefalorraquídeo

(LCR).
2.​ Citomegalovirus (CMV): Excretado en líquidos biológicos; se emplean cultivos
celulares.
3.​ Herpes humano 6 y 7: Analizados en suero, saliva y orina.
4.​ Herpes humano 8: Asociado a proteínas similares a las tumorales; se estudia en
sangre o biopsias.
5.​ Virus de Epstein-Barr: El diagnóstico depende de la cuantificación de marcadores
específicos para determinar la patología asociada.