API 20E
Analytical Profile Index
API 20 E
Panel de BioMerieux, Inc para la
identificación y diferenciación de especies de
la familia Enterobacteriaceae
• Las tirillas plásticas contienen 20
minicámaras con medios deshidratados
(químicamente definidos)
• Cada pocillo se rehidrata con una
suspensión bacteriana.
El número de perfil con 7 dígitos se determina
• Después de la incubación los resultados
mostrarán: mediante la secuencia de resultados + y los
resultados de la prueba se buscan en una base
1. Cambio de color por las diferencias de de datos APIWEB que provee el fabricante a la
pH que se accede mediante una clave
2. Productos a ser identificados con la
adición de reactivos
Se toma una colonia bien aislada de cada
microorganismo y se resuspende
homogéneamente en 5 mL de solución salina (1%
de NaCl) o 5 mL de agua estéril.
La suspensión bacteriana se coloca en
cada pocillo
Unos pocillos se llenan hasta la cúpula,
otros no
Los pocillos CIT , VP, GEL se llenan con
la suspensión de bacterias hasta la
cúpula.
Llenar con parafina líquida las
cúpulas de los pocillos ADH, LDC,
ODC, URE, H2S para obtener
anaerobiosis.
Colocar agua en los alvéolos de la cámara
para proveer de una atmósfera húmeda
durante la incubación
Colocar la tira en su propia cámara húmeda
durante la incubación
Incubar a 37 °C durante 18-24 h.
A
Para la lectura se tienen en cuenta los siguientes criterios:
•Si la glucosa da negativo y los tests positivos son 2 o menos de 2, no hay que añadir reactivos.
•Cuando ésto ocurre se hacen otros tipos de API como el API 20NE, API OF, el API M o el API 10S para ver determinados metabolismos especiales.
•Si la glucosa es positiva y/o 3 o más tests son positivos se revelan los test que requieren reactivos:
TDA Triptofano desaminasa
Añadir una gota de FeCl3 10 %.
Positivo = color marrón oscuro.
VP Voges Proskauer
Añadir una gota del reactivo 1 (KOH al 40%) y una
gota del reactivo 2 (C2 H5 OH). Positivo = color
rosa fuerte o rojo en 5-10 minutos.
INDOL
Añadir una gota de reactivo de Kovacs (1) o de
Dimetilamino-cinamaldehido (2). Dependiendo del
reactivo utilizado pueden darse las posibilidades
siguientes:
(1)Positivo = aparece un anillo rosa-rojo
(2)Positivo =color de rosa a morado en todo el pocillo
OXIDASA
Añadir una gota del reactivo (tetrafenilendiamina)
recién preparado. Positivo = color azul que
aparece inmediatamente
RESULTADOS
Del conjunto de reacciones y resultados se obtiene un perfil numérico de 7 cifras.
Los pocillos están separados en grupos de tres: en total tenemos 7 grupos de tres tubos o tripletes
(el test número 21 corresponde al test de la oxidasa).
A cada pocillo se le da el valor 0, 1, 2 o 4.
o Si la reacción es negativa se pone 0.
o Si la reacción es positiva se pone: 1 si es el primer pocillo de un triplete, 2 si es el segundo, 4 si es el tercero.
o Se suman los valores de cada triplete y se obtiene un código de 7 cifras.
o Con este código se busca en la tabla de identificación la especie de que se trata.
Ejercicio
•Interpretar y anotar los resultados positivos o negativos
de cada una de las 21 pruebas
•Codificar los 7 tripletes
•Obtener el perfil numérico de 7 cifras e introducirlo en el
área correspondiente para su envio al servidor
•Convertir ese perfil numérico en el nombre de la especie
o género a la que pertenece utilizando un extracto de la
basa de datos
[Link]
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