01 Introducción

Características de los Virus:

● Tamaño: 10-300 nanómetros.

● Parásitos intracelulares estrictos.
● Especificidad de huésped elevada.

Estructura:

● Genoma: ARN o ADN (cadena simple o doble).

● Cubierta Proteica: Cápside formada por capsómeros.
● Nucleocápside: Conjunto de ácido nucleico y cápside.
● Envoltura Lipídica (en algunos virus): Contiene glicoproteínas.

Tipos de Virus:

● Virus Desnudos: Sin envoltura, mayor resistencia.

● Virión: Virus completo con capacidad infecciosa.

Formas de la Nucleocápside:

● Icosaédricos: Capsómeros forman un icosaedro (apariencia esférica).

● Helicoidales: Capsómeros dispuestos en forma helicoidal o alargada.

Reproducción:

● Reproducción sólo dentro de células huésped.

● Inducción de replicación del ácido nucleico y proteínas.
● Liberación por lisis celular.

Clasificación en Virología Clínica:

● Basada en el tipo de ácido nucleico.

● Clasificación en familias.
02 Virus de ARN

02.1 Familia Orthomyxoviridae

Virus de la influenza o de la gripe
Ribovirus de la familia Orthomyxoviridae.

Transmisión:

● Personas infectadas excretan el virus del día 1 al 4 de síntomas.

● Aerosoles al hablar, toser o estornudar.
● Contaminación de manos y objetos (fómites) con secreciones respiratorias.

Manifestaciones Clínicas:

● Periodo de incubación: 24-72 horas.

● Afectación brusca del estado general.

Síntomas:

● Temperatura elevada (38-41°C).

● Dolores musculares y articulares.
● Cefaleas y malestar.
● Síntomas respiratorios:
● Catarro nasal y faríngeo.
● Tos seca.
● Dolor retroesternal.
● Epistaxis (menos frecuente).

Infecciones secundarias por S. pneumoniae y H. influenzae.

● Afectación ocular, gastrointestinal, mialgias y debilidad de miembros inferiores.

● Duración del cuadro clínico: aproximadamente una semana.
02.2 Familia Paramyxoviridae
Virus parainfluenza
● Pertenece al género Paramixovirus. Puede dar un cuadro catarral a veces con
febrícula y faringitis.
● En lactantes es más frecuente que alcance las vías respiratorias bajas
produciendo laringitis, laringotraqueobronquitis , bronquiolitis o neumonía que
requieren hospitalización, ya que pueden producir fenómenos de obstrucción que
comprometen la vida.

Virus de la parotiditis ; paperas

● Otro paramixovirus, que se transmite a través de las secreciones rinofaríngeas
vehiculadas por contacto o mediante secreciones respiratorias.
● Periodo de incubación largo. Cefalea, anorexia y fiebre moderada. 24 horas
después: "dolor de oídos" cerca del lóbulo de la oreja e inflamación en la región
parotídea con fiebre de hasta 40 grados.
● En un 10% de los casos se afectan las glándulas submaxilares, y aún más
raramente las sublinguales. Puede producirse afectación del SNC o
epididimoorquitis (ésta generalmente en jóvenes postpuberales).

Virus sincitial respiratorio (VSR)

● Pertenece al género Pneumovirus. Es el principal agente causal de infecciones
respiratorias en menores de tres años.
● Se transmite por vía aérea, a través de fómites contaminados de secreciones.
● El período de incubación es de unos cuatro días. Deficiencia respiratoria y fiebre;
menos común: infección severa del tracto respiratorio inferior y otitis media.

Virus del sarampión

Género Morbillivirus. Endémico, altamente transmisible (por respiración) y patógeno.

Viremia bifásica: la extensión primaria se transmite a través de los ganglios linfáticos y la

replicación masiva que precede a la segunda viremia tiene lugar en hígado, bazo y
sistema reticuloendotelial.

Síntomas clínicos: fiebre, faringitis, conjuntivitis, manchas de Koplik en mucosa bucal y

exantema maculopapular centrífugo. Otitis media, neumonía o encefalitis también.
02.3 Familia Togaviridae
Virus de la Rubéola
ARN monocatenario. Vía de entrada: Respiratoria. Rubéola

Síntomas: Malestar general, Fiebre, Exantema y Maculopápulas rosadas (Cara, cuero

cabelludo, zona retroauricular). Potencial teratogénico sobre el feto.

02.4 Familia Flaviviridae

Virus de la Hepatitis C
Transmisión sexual. Hepatitis aguda anictérica y asintomática; evoluciona a la cronicidad,
que tiende a cursar con cirrosis y con carcinoma hepatocelular.

02.5 Familia Reoviridae

Rotavirus
Ribovirus bicatenario. Gastroenteritis. Transmisión fecal-oral. Aparecen diarreas, vómitos,
fiebre y deshidratación.

02.6 Familia Picornaviridae

Virus de la poliomielitis
Vía fecal-oral o por secreciones respiratorias, aguas residuales, fómites o transplacental.
Importancia en la vacunación infantil.

Virus de la Hepatitis A
Vía fecal-oral a través del agua y alimentos contaminados. Náuseas, fiebre y
hepatomegalia. Aparece ictericia en mitad de los casos. Puede complicarse en hepatitis
fulminante.

02.7 Familia Rhabdoviridae

Virus de la Rabia
Por mordedura a partir de la saliva de un animal infectado. Cefaleas, fiebre, irritabilidad
nerviosa, hormigueos, parestesias, delirio y convulsiones.
02.8 Familia Retroviridae
VIH
Vía sexual, parenteral y perinatal. Grupos de riesgo: varones, adictos a las drogas por vía
parenteral, receptores de sangre… Infecta a las células del sistema inmunitario; anulando
su función. Produce un deterioro progresivo del sistema inmune, predisponiendo al
paciente a infecciones oportunistas.

02.9 Familia Coronaviridae

● Genoma: ARN, de mayor tamaño entre los virus ARN conocidos
● Simetría: Helicoidal
● Envoltura vírica; Proteínas presentes:
● Proteína M de membrana
● Proteína E (ensamblaje viral)
● Glicoproteína S en las espículas (spike)
● Desarrollo exclusivo en el citoplasma de células infectadas
● Difíciles de cultivar a partir de productos del enfermo
● Algunas cepas se pueden adaptar en cultivos celulares
● La mayoría no son peligrosos y se pueden tratar eficazmente o no lo necesitan
● Frecuentes en otoño o invierno, pero pueden adquirirse en cualquier época
● Afectan principalmente a animales. Posible transmisión de animales a personas,
causando problemas respiratorios como:
● Síndrome Respiratorio de Oriente Medio (MERS), identificado en 2012
● Síndrome Respiratorio Agudo Severo (SARS), aparecido en 2002
● Modo de contagio: Principalmente por vía respiratoria; a través de gotitas y
núcleos goticulares de Wells (tos, estornudos, hablar)
● Epidemias importantes: SARS-CoV (China 2002) ; MERS-CoV (Arabia Saudí) ;
SARS-CoV-2 (Wuhan).
● Síntomas: secreción y goteo nasal, tos, fatiga, cefalea, fiebre, escalofríos, disnea.
● Gravedad y mortalidad aumentadas en personas mayores, inmunodeprimidos y
pacientes con diabetes, cáncer o EPOC.
● Complicaciones: bronquitis, neumonía, fallo renal, posible mortalidad.
03 Virus de ADN

03.1 Familia Adenoviridae

Son virus ADN bicatenario. La diseminación del virus se produce mediante aerosoles,
contacto íntimo o vía fecal- oral para producir infección faríngea. También se puede
producir la diseminación desde los dedos hasta los ojos. Entre los trastornos más
frecuentes se incluyen infección del tracto respiratorio.

03.2 Familia Herpesviridae

Virus herpes simple tipo 1 y 2
VHS-1 produce faringitis y amigdalitis

VHS-2, productor de herpes genitales.

Virus varicela-zoster; VVZ

● Responsable de la varicela y del herpes zóster. Se contagia por gotas de saliva o
líquido vesicular.
● Produce la varicela: enfermedad aguda y febril con erupción cutánea vesicular.
Produce astenia, mialgias, prurito, pequeñas máculas, pápulas y pustulización y
costras.
● Culebrilla: permanencia latente del virus en ganglios sensitivos; se puede
reactivar y dar el herpes zoster.

Citomegalovirus ; CMV
Se contagia por contacto personal estrecho; presencia en saliva, orinas, semen, leche,
transplantes y transfusiones. Infección asintomática o producir mialgia, faringitis,
adenopatías cervicales, esplenomegalia y exantemas.

Virus de Epstein Barr (VEB)

Por la saliva. Suele ocurrir en la infancia y es asintomática. En adultos produce
mononucleosis infecciosa. Puede permanecer latente y reactivarse en inmunodepresión
y producir síndromes linfoproliferativos. Tiene relación con el linfoma de Burkitt y
Hodgkin. Se elimina en secreciones orofaríngeas.

03.3 Familia Hepadnaviridae

Virus de Hepatitis B
Se transmite por sangre, jeringas y material quirúrgico; así como por vía sexual, materno-
fetal e intrafamiliar. Puede producir hepatitis subaguda o fulminante. Algunos
evolucionan hasta convertirse en portadores crónicos o permanecer con la hepatitis.

03.4 Familia Parvoviridae

Parvovirus B19
● Se transmite por secreciones respiratorias o transfusiones sanguíneas.
● En niños puede producir megaloeritema epidémico; con mejillas abofeteadas y
exantema en extremidades con prurito. En adultos, en cambio, produce artritis.
● Durante el embarazo existe riesgo de eritroblastosis fetal y aborto.
● En pacientes con anemia hemolítica crónica produce crisis aplásica transitoria.
● En enfermos inmunodeprimidos genera anemia crónica grave y letal.

03.5 Familia Papoviridae

Papilomavirus
Causa las verrugas vulgares y plantares; y en el aparato genital causan los condilomas
acuminados o verrugas genitales, considerados entre las principales enfermedades de
transmisión sexual; así mismo se han asociado con lesiones precancerosas y cánceres
genitales. El hombre es su único reservorio. Se transmite a través de abrasiones de la
piel, por contacto sexual y vertical al recién nacido en el canal del parto.
04 Técnicas de estudio

Microscopía Electrónica:
No es estándar en laboratorio clínico.

Se utiliza para la detección e identificación de algunos virus.

Requiere un número suficiente de partículas víricas para su detección.

La adición de anticuerpos específicos facilita la identificación simultánea de virus

mediante inmunomicroscopía electrónica.

Útil para virus entéricos como los rotavirus.

Cultivos Celulares:
Los virus son parásitos intracelulares obligados y crecen sólo en cultivos tisulares o
celulares. Se obtienen células de un órgano mediante separación quirúrgica y
disociación con enzimas. Las células se extienden en una superficie plana y se recubren
con un medio de cultivo. El medio contiene aminoácidos, vitaminas, sales, glucosa, suero
sanguíneo y antibióticos para prevenir la contaminación bacteriana.

Algunos cultivos pueden crecer indefinidamente (líneas celulares permanentes) mientras

que otros solo permanecen vivos por algunos días (cultivos primarios).

Los virus muestran una acción citopática característica en los medios celulares.

Se utilizan diversas técnicas como hemaglutinación, hemadsorción, neutralización e

inmunofluorescencia para la identificación definitiva de los virus.

La mayoría de los virus clínicamente importantes pueden ser aislados en sistemas

celulares como riñón de mono y fibroblastos humanos.
Técnicas Inmunológicas:
a) Inmunofluorescencia Directa:
Utiliza anticuerpos virales específicos conjugados con fluoresceína.

Procedimiento:

● Depositar la muestra sobre un portaobjetos.

● Añadir antisuero con anticuerpos marcados.
● Incubación a 37°C durante 30-60 minutos en cámara húmeda.
● Lavado y observación en microscopía de fluorescencia.

b) Inmunocromatografía:
Pruebas rápidas cualitativas en fase sólida.

Proceso:

● Membrana sensibilizada con anticuerpos específicos en la zona de la prueba.

● La muestra de suero reacciona con anticuerpos marcados que migran por
capilaridad.
● En la zona de la prueba, los anticuerpos fijados retienen el complejo Ag-Ac
marcado, formando una banda coloreada.
● Ejemplos: detección del antígeno de superficie de hepatitis B (AgHBs), rotavirus,
adenovirus, etc.

c) Enzimoinmunoanálisis (ELISA) y Radioinmunoanálisis (RIA):

● Utiliza una marca radiactiva en RIA o una enzima sobre un sustrato en ELISA.
● Puede ser competitivo o directo.
● Detecta la presencia de antígenos o anticuerpos.
● Métodos de detección sensibles y ampliamente utilizados en diagnóstico clínico.
Serología
Objetivo: Proporciona información sobre la respuesta inmune humoral ante infecciones
virales, incluyendo la identificación del virus y su cepa, evaluación del curso de la
infección, y distinción entre infección primaria, reinfección, aguda o crónica.

Anticuerpos:

● IgM: Aumentan durante las primeras semanas de infección y persisten durante

varias semanas o meses antes de ser reemplazados por anticuerpos IgG.
● IgG: Son producidos después de IgM y son predominantes en infecciones
pasadas o recurrentes. Una respuesta anamnésica se produce en caso de un
segundo contacto con el mismo patógeno.

Título de anticuerpos:

● Es la mayor dilución del suero del paciente en la cual aún se detecta el

anticuerpo.
● Se determina extrayendo dos muestras de suero: una durante el periodo agudo y
otra durante la convalecencia.
● Ambas muestras se procesan simultáneamente con el mismo sistema.
● Un aumento de cuatro veces en el título del suero convaleciente respecto al
agudo indica infección reciente.

a) Fijación del complemento

Reacción de suero del paciente con antígeno viral y complemento.

Los anticuerpos fijan el complemento, detectado mediante hemólisis.

b) Prueba de neutralización
Bloquea la acción citopática del virus en células.

Suero del paciente neutraliza al virus si hay anticuerpos específicos.

c) Prueba de inhibición de la hemaglutinación

Inhibe la aglutinación de eritrocitos por el virus.

El suero inmune específico inhibe la capacidad aglutinante del virus.

d) Aglutinación del látex

Aglutinación de partículas de látex recubiertas con antígenos víricos por anticuerpos
específicos.

e) Hemaglutinación pasiva
Emplea hematíes modificados por antígeno para indicar la presencia de anticuerpos.

f) Inmunofluorescencia indirecta
Identifica células infectadas mediante suero del paciente y marcador fluorescente.

g) Pruebas de enzimoinmunoanálisis (ELISA, RIA)

Utiliza antígeno viral en fase sólida y suero del paciente.

Anticuerpos específicos se adhieren al antígeno.

Se detectan con antigammaglobulina marcada radiactiva o enzimáticamente.

h) Western-blot
Electroforesis de antígenos proteicos del virus.

Transferencia a membrana y reacción con suero del paciente.

Revelación mediante antigammaglobulina marcada con enzima.

Técnicas de biología molecular

Las técnicas moleculares para el diagnóstico virológico consisten en la detección ó
análisis de ADN ó ARN [Link] las principales técnicas de biología molecular
empleadas en el diagnóstico virológico, se encuentran: PCR, PCR en tiempo real, PCR
acoplada a enzimoinmunoanálisis, Microarrays o biochips