Agua peptona
Uso Fundamento
Medio utilizado como diluyente y Medio de enriquecimiento no selectivo, en el cual
para el enriquecimiento bacteriano la peptona proporciona nutrientes necesarios para
a partir de alimentos y otros el desarrollo microbiano y el cloruro de sodio
materiales de importancia mantiene el balance osmótico. Permite recuperar
sanitaria. células de enterobacterias dañadas por procesos
fisicoquímicos a los que ha sido sometido el
alimento. Además, puede ser utilizado como
Ingredientes diluyente de muestras en reemplazo de solución
fisiológica y como medio base para la
fermentación de hidratos de carbono. En este
último caso se debe adicionar el indicador de
PEPTONA DE CARNE 10.0 Andrade y el hidrato de carbono en cuestión en
concentración final al 1%.
CLORURO DE SODIO 5.0
pH FINAL: 7.2 ± 0.2
Interpretación
El crecimiento microbiano se observa
por turbidez.
Agar Standard
Plate Count
Uso Fundamento
Este medio no contiene suplementos selectivos y es
Medio para la enumeración relativamente rico en nutrientes, lo que lo hace
aeróbica en placas por el método ideal para la enumeración de organismos viables,
de inoculación superficial según ya sea siguiendo un método de placa de vertido, o
las normas ISO y IFU N.º 6. un método de placa de superficie.
Se utiliza para la enumeración
de bacterias en agua, aguas
residuales, alimentos y productos Ingredientes
lácteos en un entorno de
laboratorio. Plate Count Agar no Composición (g/l):
está diseñado para su uso en el
diagnóstico de enfermedades u Peptona de caseína 5,0
otras condiciones en humanos. Extracto de levadura 2,5
Dextrosa 1,0
Agar. 15,0
pH: 7.0 ± 0.2 at 25°C
Interpretación
Cuente las colonias en todas las
placas que contengan 30 - 300
colonias. Calcular el recuento de
bacterias por mililitro de muestra
multiplicando el número medio de
colonias por placa por el
recíproco de la dilución utilizada.
Reportar el contar como UFC/mL
Caldo Lauril
Sulfato
Uso Fundamento
Medio recomendado por A.P.H.A. Medio rico en nutrientes que permite un rápido
para detección y recuento de desarrollo de los microorganismos
coliformes en aguas, aguas fermentadores de la lactosa, aún de las
residuales y alimentos. bacterias fermentadoras lentos. La triptosa es
la fuente de nitrógeno, vitaminas, minerales y
aminoácidos, la lactosa es el hidrato de carbono
Ingredientes fermentable, las sales de fosfato proveen un
sistema buffer, y el cloruro de sodio mantiene el
balance osmótico Es un medio selectivo ya que
el lauril sulfato de sodio inhibe el desarrollo de
(en gramos por litro)
la flora acompañante. Por la fermentación de la
Triptosa 20.0
lactosa, se produce ácido y gas, éste último se
Lactosa 5.0
evidencia al utilizar las campanas Durham
Cloruro De Sodio 5.0
Lauril Sulfato de Sodio 0.1
Fosfato dipotásico 2.75
Fosfato monopotásico2.75
ph final: 6.8 ± 0.2 Interpretación
Se consideran resultado positivo el crecimiento
bacteriano y la producción de gas
Agar Chromocult
Uso Fundamento
Agar selectivo para la El agar para coliformes Chromocult® es un
identificación simultánea de medio de cultivo cromógeno diferencial
Coliformes Totales y E. coli en para el análisis microbiológico de muestras
muestras de agua y alimentos. de agua. En un plazo de 24 horas este medio
permite la detección, la diferenciación y la
Ingredientes enumeración simultáneas de E. coli y
bacterias coliformes del agua potable. El
recuento de coliformes se basa en la
capacidad de la ß-D-galactosidasa, una
Peptonas 3.0 gr enzima que es característica de las bacterias
Cloruro sódico 5.0 gr coliformes, para escindir el sustrato
Dihidrogenofosfato dipotásico 2.2 gr Salmon-GAL. La reacción produce colonias
Higrogenofosfato dipotásico 2.7 gr
de coliformes de color rojo asalmonado
Piruvato Sódico 1.0 gr
Triptófano 1.0 gr
Agar-agar 10.0 gr
Tergitol 70 15 gr
Sorbita 1.0 gr
Interpretación
Mezcla de cromógenos 0.4 gr
pH final 7.0 +/- 0.2 Cuando hay E. coli presente se escinden los dos
sustratos, lo que da lugar a colonias que adquieren
un color entre azul oscuro y violeta en oposición al
rojo asalmonado de otras colonias de bacterias
coliformes. Las bacterias no coliformes aparecen
como colonias incoloras o, con baja frecuencia, de
color turquesa.
Citrobacter freundii ATCC Escherichia coli ATCC
8090 11775
Agar Bacillus
Cereus- Mossel
Uso Peptona de caseina
10,000
Ingredientes Ingredientes
Manitol 10,000
Medio sólido selectivo para la Cloruro sódico 10,000
prospección de Bacillus cereus en Extracto de carne1,000
muestras de alimentos según Rojo fenol 0,025
Mossel y las normas ISO. Agar 15,000
Polimixina B sulfato
100.000UI
Yema de huevo 100 m
Fundamento
Bacillus cereus ha sido implicado en toxoinfecciones alimentarias, particularmente asociado al
consumo de arroz contaminado, y también en algunos procesos infecciosos en seres humanos y
animales. El medio de cultivo, contiene los nutrientes necesarios para el apropiado desarrollo
bacteriano. Es diferencial debido a la presencia de manitol. Bacterias fermentadoras de manitol,
acidifican el medio produciendo el viraje del indicador de pH rojo de fenol del rojo al amarillo,
mientras las bacterias que no lo fermentan, producen colonias del color del medio. La adición de
emulsión de yema de huevo, mejora el aislamiento y la esporulación de esta bacteria, además favorece
y facilita la visualización de las colonias de Bacillus cereus ya que se produce un halo de precipitación
de la lecitina hidrolizada alrededor de las mismas. Puede lograrse el aislamiento selectivo de Bacillus
cereus, inhibiendo el desarrollo de la flora acompañante presente en la muestra, por el agregado del
suplemento para Bacillus cereus con el que se obtiene una concentración final de 100 U de Polimixina
B por ml de medio
El diagnóstico primario y presuntivo de Bacillus cereus,
se basa en la morfología y color de la colonia, en la
Interpretación
precipitación de la lecitina hidrolizada y en la no
fermentación de manitol. Bacillus cereus presenta
colonias de tamaño aproximado de 5 mm, rojas, rugosas y
secas, con halo de precipitación de la yema de huevo
sobre fondo rosa-púrpura.
Selenito Cistina
Caldo
Uso Fundamento
Medio utilizado para el enriquecimiento
En el medio de cultivo, la peptona aporta los
selectivo de Salmonella spp. a partir de
nutrientes necesarios para el desarrollo
heces, alimentos y otros materiales de
importancia sanitaria. bacteriano. La lactosa es el hidrato de
carbono fermentable, el selenito de sodio
inhibe flora Gram positiva y la mayoría de
Ingredientes la flora entérica excepto Salmonella spp.
durante las primeras 8-12 horas de
incubación. La L-cistina es el agente
reductor y la FDA propuso que se agregue a
Peptona 5.0
la formulación del Selenito Caldo porque
Lactosa 4.0
Fosfato de 10.0 reduce la toxicidad del selenito de sodio
Selenito de sodio4.0 llevando así a una mayor recuperación de
l-cistina 0.01 especies de Salmonella.
ph final: 7.0 ± 0.2
Interpretación
El crecimiento microbiano se observa por turbidez.
Control e
Inocuidad
Industrial
Presentado por
Yury Cetina
Nathalia Durán
Jazmin García
Agar Bismuto-
Sulfito
Uso Fundamento
n
El Verde brillante y el bismuto-sulfito inhiben
Agar selectivo para considerablemente la flora bacteriana
aislamiento y diferenciación acompañante. El sulfato ferroso (III) es un
de Salmonella typhi y otras indicador de la producción de sulfuro de
Salmonellas a partir de hidrógeno generada por colonias de Salmonella
material clínico, alimentos y H2S-positiva. Generalmente, esta reacción
agua provoca un precipitado marrón o negro en el
medio y una colonia con brillo metálico negro o
verde.
Ingredientes
Interpretación
Extracto de carne
peptona de carne
peptona de caseína
D(+) glucosa Salmonella typhi: Colonias de centro negro y
hidrogenofosfato borde claro rodeadas por zonas negras
disódico parduzcas
sulfato ferroso (III) Salmonella spp: Las colonias de color negro
Verde brillante o gris verdoso pueden presentar brillo, con
indicador bismuto- o sin oscurecimiento del medio que las rodea
sulfito
Agar-agar Bacterias coliformes, Proteus y otras:
Colonias pequeñas, entre verdes y
marrones, a veces mucosas
Agar SPS
Fundamento
El Agar SPS es una modificación del clásico medio de
Wilson y Blair para la detección de clostridios. La
Uso
actual formulación supera a la de Mossel y a la
posterior de Angelotti y colaboradores, al conseguir
una mayor selectividad para Cl. perfringens, gracias a
la adición de sulfadiacina y polimixina. Por otra parte,
Medio sólido para la el sustrato nutritivo, constituido por la triptona y el
detección de Clostridium extracto de levadura se complementa con el polisorbato
perfringens, en y permite la recuperación de las células más delicadas.
alimentos. Las condiciones de anaerobiosis se mejoran mucho con
la presencia del tioglicolato, que permite el uso del
medio en placas, prescindiendo de los tubos de Miller-
Prichett, utilizados por Mossel y Wilson-Blai
Ingredientes
•
•
Sulfito sódico
Sulfato de poliximina B
Interpretación
• Sulfadiazina sódica
• Peptona de caseína Formacion de colonias negras
• Extracto de levadura
• Citrato férrico
• Agar
Caldo Casoy
Uso
Es un medio de uso
general que permite el
crecimiento
amplia
de
variedad
una
de
Fundamento
microorganismos, tanto
de microorganismos La tripteína y la peptona de soya aportan
exigentes como no nutrientes ricos en péptidos,
exigentes, que incluyen aminoácidos libres, bases púricas y
bacterias aerobias y pirimídicas, minerales y vitaminas. La
anaerobias. peptona de soya contiene alta cantidad
de hidratos de carbono que estimulan el
crecimiento de una amplia variedad de
microorganismos. El cloruro de sodio
mantiene el balance osmótico. El fosfato
dipotásico otorga capacidad buffer y la
glucosa es la fuente de energía.
Ingredientes
ss
Tripteína
Interpretación
Peptona de soya
Cloruro de sodio
Fosfato dipotásico
El crecimiento microbiano se
Glucosa
observa por la presencia de
Agua purificada.
turbidez.
Agar SS
Uso
Medio de cultivo selectivo y
diferencial utilizado para el
aislamiento de Salmonella spp. y
Fundamento
de algunas especies de Shigella
spp. a partir de heces, alimentos y
otros materiales en los cuales se
sospeche su presencia
Se le considera un medio moderadamente
selectivo según el nivel de inhibición de los
microorganismos gram positivos y
Enterobacteriaceae diferentes de
Salmonella y Shigella, que inhibe por
contenido de sales biliares, verde brillante
y citratos. En BD Salmonella Shigella
Agar, la diferenciación de los organismos
entéricos se logra mediante la
incorporación de lactosa en el medio
Ingredientes Interpretación
Pluripeptona
Extracto de carne Microorganismos fermentadores de lactosa:
Lactosa colonias rosadas o rojizas.
Mezcla de sales biliares
Microorganismos no fermentadores de lactosa:
Citrato de sodio
colonias del color del medio, incoloras.
Tiosulfato de sodio
Citrato férrico Microorganismos productores de SH2: colonias
Verde brillante con centro negro.
Rojo neutro
Agar
Agar Hecktoen
Uso
Fundamento
Medio de cultivo
selectivo y diferencial
utilizado para el En el medio de cultivo la proteasa peptona y el extracto de
aislamiento de levadura aportan los nutrientes para el desarrollo
Salmonella spp. y microbiano. La lactosa, sacarosa y salicina son los hidratos
Shigella spp. a partir de de carbono fermentables. Las sales biliares inhiben el
heces y alimentos . desarrollo de la flora Gram positiva, de algunos coliformes
y de la mayoría de las cepas de Pseudomonas spp. El azul
de bromotimol y la fucsina ácida son los indicadores de la
fermentación de hidratos de carbono, mientras que el
citrato de hierro actúa como indicador de la formación de
SH2 a partir del tiosulfato debido a que se forma sulfuro
de hierro, compuesto de color negro
Ingredientes
Proteasa peptona
Extracto de levadura
Sales biliares
Lactosa, sacarosa
Interpretación
Salicina
Cloruro de sodio Se debe determinar la fermentación de lactosa y la
Tiosulfato de sodio producción de SH2.
Citrato de hierro y
Microorganismos fermentadores de lactosa:
Amonio
colonias amarillas o anaranjadas.
Azul de bromotimol
Fucsina ácida Microorganismos no fermentadores de lactosa:
Agar colonias del color del medio, verde-azuladas.
Microorganismos productores de SH2: colonias
con centro negro.
Agar Baird
Parker
Uso Fundamento
BD Baird-Parker Agar es un
medio moderadamente Es un medio parcialmente selectivo que
selectivo y de diferenciación utiliza la capacidad de los estafilococos de
para el aislamiento y reducir el telurito a telurio y detectar la
recuento de Staphylococcus lecitinasa a partir de la lecitina del huevo.
aureus en alimentos, El agar Baird-Parker se utiliza
muestras ambientales y ampliamente y se incluye en numerosos
clínicas procedimientos estándar para el análisis de
alimentos, cosméticos o agua de piscinas
con el fin de detectar la presencia de
Ingredientes Staphylococcus aureus. Asimismo, puede
utilizarse para el aislamiento de S. aureus a
partir de muestras clínicas y también se
Bacto Tryptone 10,0 g, Bacto
ss
denomina agar huevo-telurito-glicina-
Beef Extract 5,0, Bacto Yeast piruvato
Extract 1,0, Cloruro de litio
5,0, Glicina 12,0, Piruvato
sódico 10,0, Telurito potásico
0,1, Agar 20,0, Emulsión de
yema de huevo 50,0 mL
Interpretación
Los estafilococos coagulasa positivos (Staphylococcus
aureus) producen colonias brillantes, convexas, de
color gris oscuro a negro, con o sin una zona opaca
alrededor de las colonias. Los estafilococos con
resultado negativo a la coagulasa producen crecimiento
débil o nulo, con colonias de color gris a negro,
habitualmente sin zonas transparentes ni opacas
Caldo Rappaport
Es un medio líquido para el
enriquecimiento selectivo de Salmonella a
partir de carne vacuna y productos
lácteos, heces y agua contaminada.
Medio de cultivo desarrollado originalmente por
Rappaport et al
En 1956 y luego modificado por Vassiliadis et al, en
el cual se disminuyó la concentración de verde de
malaquita.
Es un medio de cultivo nutritivo que contiene un
sistema buffer de fosfatos, alta concentración de
sales de magnesio y sodio y la presencia del
colorante verde de malaquita (oxalato). El
enriquecimiento selectivo de especies de salmonella
se debe a la capacidad de estos microorganismos de
sobrevivir y multiplicarse a presiones osmóticas Peptona de soja, cloruro de
relativamente altas (debido a la elevada magnesio.6H2, cloruro de sodio, fosfato
concentración de cloruro de magnesio en el medio, dipotásico, fosfato monopotásico, verde
a pH relativamente bajos, y porque se suprime el malaquita,
efecto tóxico del verde de malaquita hacia las
pH Final: 5,2 ± 0,2.
salmonelas debido a la presencia de cloruro y
magnesio. La incubación a 41- 42°C favorece la
selectividad hacia las salmonellas.
Interpretación
El crecimiento microbiano se observa por turbidez.
Caldo Listeria
Medio de cultivo nutritivo que, con el agregado de
antimicrobianos, es utilizado para el
enriquecimiento selectivo de Listeria spp.
El medio de cultivo contiene los nutrientes
necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano.
Las sales de fosfato forman un sistema buffer que
evitan cambios bruscos de pH y así se favorece el
desarrollo de Listeria spp. El piruvato de sodio
permite recuperar células dañadas o injuriadas
presentes en la muestra.
Si se agrega acriflavina 0,01 g, ácido nalidíxico 0,04
g y cicloheximida 0,05 g por litro de medio de Tripteína soya caldo, extracto de levadura,
fosfato monopotásico, fosfato disódico
cultivo, se logra el enriquecimiento selectivo de
piruvato de sodio
Listeria spp.
pH Final: 7.3 ± 0.2
Interpretación
El crecimiento microbiano se observa por la turbidez
en el medio de cultivo.
Agar Palcam Listeria
Columbia Agar base, Glucosa, Manitol,
Es un medio líquido para el Esculina, Citrato férrico de amonio,
Cloruro de Litio, Rojo fenol, Clorhidrato
enriquecimiento selectivo de Salmonella a
de acriflavina, Sulfato de Polimixina B,
partir de carne vacuna y productos Ceftazidima, Bacto Agar.
lácteos, heces y agua contaminada.
Es un medio selectivo de diferenciación para el
aislamiento y la detección de Listeria monocytogenes y
otras especies de Listeria a partir de alimentos y
muestras clínicas.
El agar PALCAM se basa en la fórmula de van Netten et
al, quienes desarrollaron este medio selectivo y
diferencial para su uso en el aislamiento y recuento de
las especies de Listeria a partir de muestras
alimentarias. APHA y AFNOR recomiendan utilizar el
medio PALCAM para detectar Listeria monocytogenes
en alimentos, y la International Dairy Federation lo
recomienda como medio en placa adicional para la
detección de las especies de Listeria en la leche y los
productos lácteos. Health Canada también recomienda
el medio PALCAM para la detección de L.
monocytogenes en alimentos y muestras ambientales, así
como lo recomienda OADC para la detección del
organismo en los alimentos. Asimismo, se puede utilizar
para el aislamiento de L. monocytogenes a partir de
muestras clínicas.
Interpretación
Las colonias características de Listeria son de color verde
grisáceo con un halo negro. La confirmación de la presencia
de Listeria se realiza mediante subcultivo en medios
apropiados e identificación bioquímica/serológica.
Caldo Fraser
El Caldo Fraser se utiliza para el enriquecimiento
secundario selectivo y diferencial de Listeria
monocytogenes en la leche y otros productos lácteos,
en productos alimenticios, así como en otras muestras
que puedan contenerla. A pesar de estar más
enfocado a Listeria monocytogenes también puede
utilizarse para el enriquecimiento de otras Listerias
en productos alimentarios.
Desarrollado como una modificación del medio UVM
II, el caldo Fraser es un caldo de enriquecimiento
secundario para el aislamiento de Listeria spp., y es Cloruro de sodio, Hidrofosfato disódico,
Hidrolizado enzimático de caseína,
similar al caldo Palcam en que contiene esculina para
Digestión péptica de tejido animal,
indicar la presencia de un potencial aislado de Listeria.
Extracto de carne, Extracto de levadura,
También contiene cloruro de litio en un intento de Cloruro de litio, Fosfato monopotásico,
suprimir el crecimiento de enterococos en el medio (al Esculina.
igual que Palcam). El caldo Fraser también se puede
usar como medio de enriquecimiento primario
incorporando un suplemento de 1/2 concentración en la
base del caldo.
Interpretación
Los tubos que se ennegrezcan o simplemente se oscurezcan se
considerarán presuntamente positivos y deberán ser sub-cultivados
sobre medios sólidos para el aislamiento y confirmación.
Los tubos sin oscurecimiento se consideran negativos y pueden
desestimarse o continuar incubándose por otras 24 horas adicionales
en caso de duda.
Agar XLD
Xilosa, L Lisina, Lactosa, Sacarosa,
Cloruro de Sodio, Extracto de Levadura,
(agar de xilosa, lisina, desoxicolato) es un medio Rojo Fenol , Desoxicolato de Sodio,
moderadamente selectivo y de diferenciación para el Tiosulfato de Sodio, Citrato Férrico de
aislamiento y la diferenciación de patógenos entéricos Amonio, Agar, Agua destilada.
gram negativos.
(Salmonella y Shigella) a partir de muestras clínicas.
Es adecuado en especial para el
aislamiento de la especie Shigella.
La degradación de los carbohidratos presentes en el medio (xilosa, lactosa y sacarosa) genera la producción de
ácido haciendo virar el indicador (rojo fenol) de rojo a amarillo. En este medio se incorpora la xilosa porque es
prácticamente fermentada por todas las enterobacterias con excepción de los microorganismos pertenecientes
al género Shigella. La lisina se incluye para aumentar la diferenciación de los microorganismos pertenecientes
al género Salmonella, ya que sin la lisina estos microorganismos rápidamente fermentan la xilosa produciendo
la acidificación del medio y no se pueden diferenciar de otras especies no patógenas. Como la cantidad de este
carbohidrato es limitada, una vez que estos microorganismos lo consumen, comienzan a utilizar la lisina lo cual
produce la alcalinización del medio; este hecho se evidencia porque el rojo fenol nuevamente vira a un color
rojo. En el caso de los coliformes lisinas positiva, para prevenir la alcalización del medio por la utilización de la
lisina, se incorpora en el medio un exceso de lactosa y sacarosa. El medio también tiene la capacidad de detectar
la producción de H2S, a través del sistema indicador tiosufalto de sodio y citrato férrico amonio. Cuando el
microorganismo produce H2S se observan colonias con el centro negro. Los microorganismos no patógenos
productores de H2S no descarboxilan la lisina; cuando están presentes estos microorganismos la reacción ácida
producida por la utilización de los carbohidratos previene en ennegrecimiento de las colonias.
Interpretación
Las bacterias fermentadoras de xilosa, lactosa y sacarosa
producen acidificación del medio de cultivo, provocando un
viraje del color desde el rojo al amarillo.
Las bacterias que decarboxilan la L-lisina generan cadaverina
y producen una zona rojo púrpura por efecto de la elevación
del pH.
La producción de H2S se observa como colonias de color negro,
pero solo bajo condiciones alcalinas.