INTRODUCCIÓN II A LA ANATOMÍA PATOLÓGICA
INTRODUCCIÓN A LA DISCIPLINA ANATOMÍA
PATOLÓGICA
CONCEPTOS BÁSICOS
Docente: Hernán Costa, Médico Especialista en Anatomía Patológica. Master en Oncología
Molecular. Experto en Genética Médica. JTP Simple. Cátedra de Fisiología Humana de la
carrera de Medicina Facultad de Ciencias Médicas.
Universidad Nacional del Litoral
2026
Introducción a la Anatomía Patológica – 2026
Introducción a la Anatomía Patológica.
Antes de comenzar con el estudio de la disciplina Antomía Patológica es necesario
puntualizar y saber algunos conceptos básicos que serán aplicados a lo largo del
cursado tanto del Area Injuria como Defensa.
Primero será necesario comprender que queremos decir cuando hablamos de
“PATOLOGÍA”
PATOLOGIA = PATHOS (dolencia o afección) LOGOS (estudio, tratado)
Por lo tanto, la Patología es el estudio de las enfermedades. Patología es sinómino
de enfermedad.
¿CÓMO SE ESTUDIA LA ENFERMEDAD?
La Anatomía Patológica no es la única disciplina encargada de estudiar la enfermedad.
A lo largo del cursado de 3er año del plan de estudio de la carrera de Medicina, se
encontrarán con otras áreas que abordan al paciente y a su correspondiente
enfermedad de manera diferente, a saber:
- Semiología Médica
Historia Clínica, interrogatorio, Examen físico, maniobras semiológicas.
- Diagnóstico por Imágenes
Radiografías, Tomografía Axial Computada (TAC), Resonancia Magnética
Nuclear (RMN o RMI), Ecografía.
- Laboratorio clínico y toxicológico
Sangre, orina, LCR.
- Laboratorio microbiológico
Cultivos, observaciones directas.
- Laboratorio de Anatomía Patológica
Biopsias, citologías, autopsias, Inmunohistoquímica (IHQ) y estudio de biología
molecular (BM).
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¿QUE ES LA ANATOMÍA PATOLÓGICA?
Es la rama de la medicina que se ocupa del estudio de la enfermedad; de las causas,
desarrollo y consecuencias de las enfermedades; utilizando técnicas morfológicas
(macroscópicas, microscópicas); biomoleculares y genéticas
Es una especialidad de DIAGNÓSTICO. No es una especialidad ASISTENCIAL.
La Anatomía Patológica, se dedica fundamentalmente al estudio de la enfermedad en
sus 4 aspectos fundamentales.
– Etiología: Se refiere a las causas de la enfermedad
– Patogenia o FISIOPATOLOGÍA: Se refiere a los mecanismos dinámicos e
interrelacionados que culminan en una entidad nosológica definida.
Hace referencia a los procesos que llevan a un tejido sano a estar
enfermo
– Cambios funcionales que llevan a cambios morfológicos. Un proceso
fisiopatológico obligadamente cambia la fisiología de la célula, tejido u
órgano afectado. Estos cambios conllevan cambios estructurales.
– Esos cambios funcionales y morfológicos originan manifestaciones
clínicas.
El profesional encargado de la Anatomía Patológica es el MÉDICO PATÓLOGO (o
Anatomopatólogo, Histopatólogo). En la actualidad, también podemos hablar de
“Patólogos moleculares” para aquellos que desarrollan la disciplina utilizando las
técnicas de biología molecular como herramienta de diagnóstico.
Los Patólogos son MÉDICOS, los cuales participan activamente en el proceso Salud-
enfermedad de la población. El correcto diagnóstico de la patología es trascendental,
no sólo debido a que se debe tener la certeza diagnóstica de una dolencia; sino que
también a la hora de establecer un tratamiento o evaluar el pronóstico de alguna
enfermedad que padezca el paciente.
Se trabaja en el laboratorio de patología (distinto del laboratorio de análisis clínicos) y
en conjunto con otras disciplinas diagnósticas, quirúrgicas y clínicas.
La especialidad ha cambiado a lo largo de la historia, desde la simple observación y
evisceración cadavérica (autopsias) hasta los estudios biomoleculares y genéticos
actuales.
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Ya adentrándonos en la Anatomía Patológica, es válido plantear el interrogante acerca
de cómo se estudia la “enfermedad” en dicha disciplina.
El patólogo cuenta con diferentes tipos de muestras para poder realizar los
diagnósticos:
Biopsias
Citología
Autopsias.
Y además se vale de diferentes técnicas para evaluar dichas muestras.
BIOPSIA
( bios=vida; opsis= observación)
Son fragmentos de tejido o piezas quirúrgicas extraídas de un organismo.
Podemos clasificar las biopsias de diferentes formas, pudiendo utilizarse varias
categorías clasificatorias para una misma muestra.
1- Según la proporción de la lesión extirpada:
- Biopsia Incisional: Se denomina incisional cuando se toma sólo un fragmento o
porción de la lesión en estudio. Se toma este tipo de biopsia para obtener material
para el diagnóstico anatomopatológico en los casos en los que, por citar un
ejemplo, la lesión es demasiado grande para ser extirpada en su totalidad o para
tener un diagnóstico inicial de una lesión previo a un procedimiento quirúrgico.
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- Biopsia Escisional: Se denomina escisional cuando se extirpa la lesión en su
totalidad junto a una porción de tejido sano perilesional (margen). Extraer la
lesión en su totalidad es de vital importancia fundamentalmente en cirugías de
tumores malignos.
2- Según el método de obtención:
- Biopsia por punción por Aguja gruesa (PAAG o “tru-cut”) y sistemas de aspirados:
Se ingresa una aguja (18G, 16G o 14G)* y se extrae una porción de la lesión con
seguimiento ecográfico o tomográfico. Se obtienen por éste método biopsias
incisionales. Se pueden realizar improntas o rolidos para análisis citológicos (ver
apartado “citología”). Para la ubicación exacta de las lesiones se utiliza, en algunos
casos, sistemas de localización llamados “de estereotaxia”. La técnica presenta
buena sensibilidad y especificidad. Ej: Diagnóstico inicial de lesiones mamarias.
*G = “Gauge” (unidad de medida del calibre de las agujas). Cuanto mayor es el G, menor es el diámetro interno de la
aguja. Por ej, 25G = 0,5 mm de diámetro.
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- Biopsia por legrado, raspado o curetaje: Se utiliza una cureta para extraer lesiones
o restos de lesiones de órganos huecos. El material se obtiene en quirófano. Ej:
legrados endometriales, legrado de restos deciduo-ovulares en embarazos
detenidos y retenidos.
- Biopsias endoscópicas: A través de un tubo flexible (endoscopio), se coloca una
cámara que permite visualizar órganos huecos. El endoscopio posee también
pinzas de disección para poder obtener muestras de tejidos. A través de esta
técnica pueden obtenerse biopsias incisionales o escisionales. Ej: toma biópsica de
mucosa esofágica, gástrica o duodenal, introduciendo el endoscopio en el aparato
digestivo por la boca.
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- Biopsias quirúrgicas: Obtención de fragmentos de tejido, porciones de órganos,
órganos enteros o bloque de vísceras a través de técnicas quirúrgicas. La
obtención de las mismas es en quirófano. Se pueden obtener biopsias incisionales
o escisionales. Ej: extirpación de colon derecho (hemicolectomía derecha) por
presencia de un tumor maligno.
3- Según el momento del informe anatomopatológico:
- Intraoperatoria (o biopsia “por congelación”): Durante una cirugía, muchas veces
el cirujano debe evaluar la realización o continuación del procedimiento
quirúrgico necesitando de la presencia de un patólogo en quirófano que analice el
material obtenido. De éste análisis dependerá la continuidad de la intervención.
Ej: Evaluación de márgenes de seguridad de una biopsia escisional de tumor
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maligno mamario y Biopsia de “ganglio centinela” (evaluar presencia de
metástasis del tumor mamario en un ganglio linfático cercano a la lesión).
Se denomina “de congelación” debido al uso de un dispositivo especial para
obtener cortes histológicos rápidos denominado “micrótomo de congelación”. El
método consiste en congelar la pieza rápidamente y hacer cortes seriados para
análisis histológico. También se pueden realizar diagnósticos intraoperatorios por
medio de improntas citológicas del material extraído (ver apartado “citología”).
- Biopsia por diferido: La muestra que se obtiene se coloca en frasco de formol para
su fijación y posterior análisis macroscópico, procesamiento histológico, análisis
histológico y eventual análisis con estudios especiales (ver apartados
correspondientes). Estos pasos demoran cierto tiempo, por lo cual el diagnóstico
anatomopatológico se realiza luego de algunos días desde la obtención de la
muestra.
CITOLOGÍA
Observación directa de células, aisladas de su estroma.
La citología es una rama auxiliar de la medicina, relacionada íntimamente a la
anatomía patológica denominada “citotecnología”. El especialista en la materia es el
“citotecnólogo”.
Las muestras para citología se obtienen por diferentes métodos.
1- Citología exfoliativa o “raspado”: Con un cepillo se raspa sobre el tejido a
analizar y luego se extiende el mismo sobre un portaobjeto. La citología
cervico-vaginal con tinción de Papanicolau es el estudio citológico más
común obtenido por ésta técnica.
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2- Punción Aspirativa con Aguja Fina (P.A.A.F) con seguimiento ecográfico o
tomográfico: Se ingresa una aguja fina (25G) y se obtiene material, el cual
es volcado sobre un portaobjeto y luego extendido. El procedimiento se
realiza utilizando equipos de imágenes que permiten visualizar la aguja en el
sitio adecuado previo a la aspiración, con o sin sistemas de esterotaxia. La
técnica puede ser manual o asociada a dispositivos de aspiración. La PAAF es
menos sensible y específica. Ej: P.A.A.F de nódulos tiroideos.
3- Lavado de órgano hueco: A través del endoscopio se coloca una cánula que
eyecta solución fisiológica. La misma recorre y “lava” el órgano hueco. Este
líquido se recupera nuevamente y se analiza el material citológico que se
obtuvo. Ej: Lavado bronquial (BL) y lavado bronquioloalveolar (BAL).
4- Punción evacuadora: Se coloca una aguja y se extrae a través de una jeringa
o se realiza una punción conectada a un sistema de drenaje. Esta técnica no
sólo se utiliza con fines de diagnóstico; sino también con fines terapéuticos.
La extracción de líquido acumulado en cavidades mejora la sintomatología
del paciente. Ej: drenaje de líquido ascítico (paracentesis), evacuación de
quistes tiroideos.
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5- Impronta y rolido: Estas técnicas combinan las modalidades diagnósticas
de citología y biopsia. Este método consiste en obtener un fragmento de
tejido (material para biopsia) y apoyarlo sobre un portaobjeto. El residuo
que queda adherido en el portaobjeto es material de citología. “Improntar”
se refiere a “apoyar y apretar” el material contra un portaobjetos, mientras
que el “rolido” consiste básicamente en “hacer rodar” cilindros tisulares
obtenidos en punciones con aguja gruesa encima de un portaobjeto. Ej:
Impronta de ganglios linfáticos durante la biopsia por congelación de ganglio
centinela en cirugía por cancer de mama; rolido de cilindros de lesión
pulmonar obtenidos por punción aspirativa con aguja gruesa guiada bajo
TAC.
AUTOPSIA o NECROPSIA
Estudio total o parcial de un organismo muerto que se realiza para dilucidar la
patología que padecía el paciente, así como la causa de su muerte. Es distinta de la
autopsia médico-legal que se realiza ante muerte por siniestros o causa de muerte
dudosa. La autopsia clínica, son evisceraciones que realizan los patólogos.
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Se requiere la autorización de familiares directos y de ambos padres si la muerte es de
un niño. Se necesita historia clínica completa y remisión inmediata del cadáver a la
morgue.
Datos fundamentales: fecha y hora del deceso, circunstancias en las que se produjo el
mismo y solicitud de autopsia firmada por el/los médico/os del equipo que la pide.
¿COMO SE REMITE EL MATERIAL AL LABORATORIO DE PATOLOGÍA?
¡Es importante saberlo!
Muchos de los inconvenientes que se presentan son por total y absoluto
desconocimiento de cómo se debe remitir el material al laboratorio de Anatomía
Patológica entorpeciendo el procesado técnico de la muestra y, en última instancia, el
diagnóstico anatomopatológico.
“de una muestra de mala calidad sólo se obtiene un resultado diagnóstico de mala
calidad”
Las biopsias se colocan dentro de un frasco de boca ancha.
Se coloca en el mismo una solución fijadora, la de uso corriente es el formol buffer al
10% (solución de formaldehido). Existen otras soluciones fijadoras para distintos
tejidos en particular; Ej: solución de Bowin o EDTA para fijación de médula ósea.
El formol debe cubrir toda la biopsia y se debe dejar fijar el material un mínimo de 6
hasta 24 hrs., dependiendo del tipo de material que se obtuvo.
El formol penetra los tejidos aproximadamente 1-2 mm/ hora
Éste endurece y empalidece los tejidos, por lo que habitualmente las características
macroscópicas de la muestra difieren cuando están frescas o “crudas” (recién
extraídas) de cuando ya están fijadas en formol.
Las citologías también deben seguir algunas pautas para su envío al laboratorio. El
material que se ha volcado sobre portaobjetos (por ejemplo, un PAP) se preserva
dejándolo secar al aire o en alcohol. En este último caso, puede dejarse los
portaobjetos en frasco con alcohol al 90% o se rocían los mismos con spray para pelo
(con alto contenido de alcohol y poco contenido de laca). Otros materiales que se
vuelcan en frascos (por ejemplo, drenaje de un líquido ascítico), deben remitirse
rápidamente al servicio de patología. De no ser posible, debe conservarse el material
en heladera a menos de 4º por menos de 72 hrs. para que el material no pierda
calidad.
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El envío correcto de la muestra al laboratorio de patología es responsabilidad de los
médicos asistenciales que obtienen la misma. El diagnóstico anatomopatológico
comienza en el momento de extraer la muestra.
Una vez extraída la biopsia, ésta se envía al laboratorio con la boleta de remisión
correspondiente.
La boleta de remisión debe contener nombre y apellido del paciente, edad, DNI, datos
clínicos, material remitido, firma y sello del médico que solicita el estudio; y fecha. El
frasco que contiene el material a analizar debe estar rotulado y debe coincidir con los
de la boleta de remisión. En el laboratorio se designa un nro. de protocolo para dicho
material.
Una vez que la biopsia se halla correctamente fijada en formol, se comienza con el
procesado técnico de la muestra que consiste en la realización de cortes
macroscópicos (según protocolos validados internacionalmente – ver apartado) y
colocación del material en cazuelas (cassettes). Luego se realiza la deshidratación del
material (alcohol, en concentraciones crecientes; Xilol; o utilización de sustitutos de
Xilol; inclusión en parafina, confección taco de parafina o bloque de parafina. Estos
pasos mencionados pueden ser realizados manualmente o en procesadores
automatizados. Una vez obtenido el taco de parafina se realizan cortes en micrótomo
de disección. Se monta el material sobre portaobjetos. Posteriormente se procede a
la desparafinización, rehidratación, coloración con técnica convencional de
hematoxilina/eosina (HE), colocación de bálsamo y cubreobjeto. (Retomar conceptos
estudiados en Histología en años anteriores de la carrera).
Taco o bloque o cassette de parafina.
Del material incluido en parafina se
obtienen cortes para análisis
histológico, para inmunohistoquímica y
se extrae ADN o ARN para estudios
moleculares
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ANÁLISIS DEL MATERIAL DE BIOSPIA:
El análisis de una biopsia (sea la que fuere) requiere una evaluación:
Macroscópica: Descripción de la pieza a través de la simple observación: peso,
medición en los tres ejes (largo, ancho y espesor); color, forma, superficie
externa e interna (en órganos huecos) o superficie de corte (órgano macizo).
Los cortes de macroscopía consisten en seccionar pequeños fragmentos de la
muestra total (en caso de biopsias de órganos enteros) de sitios específicos que
se quieren analizar. Existen protocolos normatizados de macroscopía para cada
órgano del cuerpo, sin embargo también pueden elaborarse protocolos “in-
house” (como parte de un manual de procedimientos de cada institución). El
procesamiento macroscópico de la muestra dependerá a su vez de si se trata
de una pieza quirúrgica extraída por tumores malignos o por otra etiología. Ej:
pieza quirúrgica de hemicolectomía izquierda (resección de colon izquierdo)
por Cancer de colon o por divertículos. Si son muestras de biopsias pequeñas,
todo el material es utilizado para confeccionar el taco de parafina. De ser una
biopsia voluminosa (por ejemplo, una pieza quirúrgica), luego de obtenerse los
cortes de tejido para elaborar el taco de parafina, el material residual se
conserva en frasco de formol y se guarda hasta que se realice el diagnóstico
anatomopatológico definitivo. La conservación del material también permite
realizar nuevos cortes del mismo si la complejidad del caso lo requiere.
Microscópica: A través del uso del microscopio óptico se analiza la histología
de la lesión. Se evalúa tipo de lesión, arquitectura lesional y sus células
constituyentes. Presencia de inflamación, necrosis, el tipo de vascularización,
el conteo mitótico, estado de los márgenes quirúrgicos, embolizaciones
tumorales, etc. También se evalúa patrón de inmunomarcación de la lesión (ver
apartado). En microscopios especiales (de fluorescencia) se podrá evaluar
señales de sondas en estudios de hibridación y patrones de marcación
inmunofluorescente.
DIAGNOSTICO:
Al momento del diagnóstico anatomopatológico pueden ocurrir al menos 3
circunstancias:
- Los hallazgos histológicos corresponden con una patología específica. Estos
hallazgos son inequívocos y coinciden con la clínica e imagenología del paciente,
por lo que el estudio histopatológico (convencional o por IHQ) es suficiente para
realizar un diagnóstico apropiado. Para muchas patologías, fundamentalmente
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las oncológicas, el estudio anatomopatológico es el “Gold Standard” (patrón oro).
Esto significa que en algunos casos la anatomía patológica es la que define la
presencia de una condición con la máxima certeza conocida hasta el momento.
- Los hallazgos histológicos encontrados plantean diagnósticos diferenciales entre
dos o más entidades nosológicas diferentes. Para esta circunstancia en particular
el estudio morfológico por sí sólo no alcanza para un diagnóstico definitivo. En
muchas patologías, el diagnóstico final es una construcción entre diferentes
disciplinas (clínica, laboratorio e imágenes) en donde la anatomía patológica es
sólo una parte de esa construcción.
- En determinadas circunstancias el material remitido se encuentra en mal estado
de conservación, es escaso o bien los hallazgos histológicos son inespecíficos para
alguna patología o no coinciden con lo escrito en la boleta de remisión. En estos
casos solo se realiza una descripción histológica del material recibido.
EL INFORME ANATOMOPATOLOGICO:
Todo informe anatomopatológico debe contener como mínimo:
Encabezado/membrete/Nombre de la institución o profesional que realiza el
informe
Datos del paciente y Nro. de protocolo.
Material remitido
Descripción macroscópica.
Descripción microscópica
Estudio Inmunohistoquímico (si el estudio de la biopsia lo requiere)
Estudio biomolecular (si el estudio de la biopsia lo requiere)
DIAGNÓSTICO.
Notas aclaratorias, comentarios, sugerencias.
Firma, sello del médico patólogo y fecha.
ESTUDIOS ESPECIALES:
Histoquímica: “tinciones especiales”: Las tinciones especiales han tenido su auge en
décadas pasadas. Muchas de ellas están en desuso debido a que las técnicas de
Inmunohistoquímica han ganado un terreno importante. Sin embargo estas
coloraciones aportan datos muy interesantes y ofrecen realizar diagnósticos muy
acertados de manera rápida y a un bajo costo. Algunos ejemplos:
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PAS, Alcian Blue, Muscicarmín: Evalúa presencia de mucinas.
Grocot, Zielh Nielsen: Para evaluar presencia de microorganismos.
Giemsa: Es una excelente tinción para evaluación de tejido Hemolinfoide y para la
observación de la bacteria Helycobacter Pylorii en casos de análisis de biopsias
gástricas con sospecha de Gastritis Crónica.
Diff-Quick, toluidina: Coloraciones rápidas para estudios de biopsia intraoperatoria.
Reticulina, tinciones de plata, Tricrómica y sus variantes: Para evaluar depósitos de
tejido conectivo, fibrosis, esqueleto reticular de algunos órganos.
Rojo congo: Evalúa depósitos de proteína amiloide.
(Retomar conceptos estudiados en Histología en años anteriores de la carrera)
Inmunohistoquímica (IHQ): Es un análisis morfofuncional, cuali/semicuantitativo que
busca analitos específicos (proteinas). La técnica utiliza Anticuerpos
poli/monoclonales. El principio del método se basa en la reacción
“antígeno/anticuerpo”. Las células poseen diferentes moléculas (las de nuestro
interés en este caso son las proteinas) las cuales se quieren buscar específicamente
(antígenos). Los anticuerpos son proteinas sintetizadas por las células plasmáticas en
la inmunidad humoral que reconocen antígenos (proteinas) específicos, esto quiere
decir que cada antígeno es reconocido por un anticuerpo específico. Pero, en el
laboratorio, los anticuerpos pueden obtenerse a través de cultivos celulares llamados
“Hibridomas” (técnica por la cual los argentinos Kholer y Milstein obtuvieron el
premio Nobel en el año 1984). Los “anticuerpos monoclonales” (“MABs” por sus
siglas en ingles “monoclonal antibody”) son moléculas de diseño de alta especificidad
y afinidad que se van a unir con la molécula que se quiere buscar y no a otra. Los
anticuerpos policlonales (glicoproteínas que actúan sobre diferentes epítopes de una
misma proteína) suelen ser menos específicos.
Finalmente, y siguiendo la lógica de reacción antígeno/anticuerpo, las técnicas de IHQ
utilizan anticuerpos monoclonales que se unen a proteínas de interés con alta
afinidad y especificidad.
La técnica de inmunomarcación constituye lo que se denomina un “ensayo in-situ de
bajo rendimiento”. Esto significa que el estudio se realiza sobre el tejido mismo sin
desintegrarlo (in situ), con lo cual nos permite observar la localización de la proteína
que estamos buscando (nuclear, citoplasmática o de membrana); pero qué al mismo
tiempo, sólo se puede buscar uno o dos analitos a la vez (bajo rendimiento) en cada
corte de tejido. Si necesito analizar la presencia de, por ejemplo, 10 proteinas
diferentes, necesito 10 cortes de tejido. La técnica es reproducible (Reproducibilidad
habla de la variación que se observa cuando diferentes operadores miden la misma
parte muchas veces); esto hace referencia a que si se realiza la técnica repetidas veces
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bajo las mismas condiciones sobre la misma muestra, arroja siempre el mismo
resultado.
Los pasos de la técnica, que puede ser manual o automatizada en equipos validados
internacionalmente; se resumen brevemente:
- Se realizan cortes finos del taco en parafina y se colocan en portaobjetos
especiales (positivados)
- Recuperación Antigénica: Es necesario aplicar calor en horno a microondas o
equipo automatizado; en un buffer y en condiciones determinadas. Esto se realiza
para poder romper los enlaces hidroximetileno que el formol ha creado y liberar
de este modo los epítopes, o sea, los sitios específicos de la proteína adonde se va
a unir el anticuerpo monoclonal.
- Aplicación del/de los Anticuerpo/s primario contra la proteína celular de interés
Los anticuerpos monoclonales utilizados tienen validación internacional. (En el
gráfico se corresponde con la molécula de anticuerpo de color azul)
- Aplicación del sistema de detección y revelado: Utilización de Anticuerpo
secundario (en el gráfico, las moléculas de anticuerpo de color marrón) unido a
diferentes moléculas (polímeros, biotina, avidina/estrepatvidina) (en el gráfico el
polímero está representado por la línea verde), las cuales se hallan unidas a su vez
a una enzima llamada “peroxidasa” (en el gráfico, los círculos grises unidos al
polímero). Luego se aplica una molécula que reacciona con la peroxidasa llamada
Diaminobenzidina" (DAB). La DAB es un cromógeno que se utiliza en un buffer que
contiene peróxido de hidrogeno (H2O2: agua oxigenada). La reacción del H2O2
con la peroxidasa unida al polímero oxida la DAB, y esta al oxidarse precipita con
un color marrón. Esto es lo que se observa en el microscopio.
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La IHQ revela características morfológicas sutiles, elementos subcelulares y evalúa
funcionalidad, estirpe celular, receptores de membrana, moléculas de señalización,
etc. (estudio morfo-funcional). Las marcaciones de IHQ pueden ser nucleares, de
membrana celular o citoplasmáticas.
A) Tinción de membrana. B) Tinción nuclear. C) Tinción citoplasmática.
La técnica de IHQ funciona como herramienta:
- Diagnóstica: Cuando un estudio histomorfológico convencional no es suficiente
para establecer un diagnóstico de certeza. Ej: En un tumor maligno pobremente
diferenciado, la IHQ permite establecer el fenotipo celular. La IHQ establece el
diagnóstico de una gran variedad de neoplasias.
- Predictiva y terapéutica: Un ejemplo típico es el análisis de cortes de taco de
parafina de un cáncer de mama. Las proteínas de interés que busco en el tumor
son los receptores Hormonales de estrógeno y progesterona (ER/PR) y proteína
HER2-neu. (en este caso son los antígenos que yo estoy buscando en la muestra
de tumor) Se aplican los anticuerpos monoclonales específicos de alta afinidad
que reaccionarán con receptores y HER2. La presencia o ausencia de marcación
para estos elementos clasifica al cáncer de mama en un tipo particular y permite
evaluar cuál es el tratamiento más apropiado para la paciente.
- Pronóstica: La IHQ puede realizar búsqueda de proteínas que de estar presentes
pueden ser indicadoras de mala evolución. Por ejemplo, la proteína Ki67 (una
proteína indicadora de células en fase de proliferación) si esta presente en un
porcentaje alto en un tumor, suele ser indicador de alta replicación celular y por
consiguiente mala evolución.
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La IHQ si bien es de mucha ayuda está lejos de ser una técnica perfecta. Tiene
normatizaciones técnicas muy rigurosas y requiere de un entrenamiento constante
por parte del patólogo dedicado a realizar diagnóstico por ésta metodología. Los
resultados de IHQ pueden no ser concluyentes.
Micromatiz de tejido: Si bien cada taco de parafina arroja un vidrio para análisis
histológico, existen otros modos de utilización de la histología. Uno de estos es el
Estudio de Micromatriz de tejido (TMA: Tissue microarray).
Esta metodología se encuadra en lo que denominamos “tecnologías de alto
rendimiento”, esto significa que con varias muestras se pueden obtener muchos datos
y realizar muchos análisis en simultáneo.
Esta matriz se construye manualmente o con equipos especiales automatizados que
extraen de un taco de parafina convencional un área de interés. Se secciona dicha
área y se coloca en otra matriz de parafina. El mismo procedimiento se realiza en
diferentes tacos de muestra, confeccionándose de este modo un taco de parafina con
múltiples muestras incluidas en él. Los vidrios para histología se someten a un
analizador de imágenes (No se realiza observación directa en el microscopio) para
categorizar y nomenclar cada una de las muestras incluidas en el array por separado.
Esta tecnología, si bien puede ser utilizada como metodología diagnóstica, se utiliza
mucho más en investigación, para comparar por ej, la misma patología en distintos
pacientes. También se puede utilizar como matriz para análisis moleculares o para
comparación de resultados de Inmunohistoquímica o testeo de Ac. Monoclonales.
Microscopía electrónica: De amplio uso en años anteriores, pero sigue siendo un pilar
fundamental para la patología renal inflamatoria.
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Inmunofluorescencia: Basado en el mismo principio que la inmunohistoquímica, ésta
técnica utiliza una sustancia fluorescente (fluoróforos unidos al anticuerpo). Estos
fluorósforos al ser exitados con la luz de la lámpara de un microscopio de
fluorescencia, emiten una luz a una determinada longitud de onda, la cual tiene como
limitación que esta se apaga con el tiempo. La combinación de filtros que utiliza el
microscopio deberá ser acorde a los fluoróforos utilizados y a lo que se necesite
analizar en la muestra. Es muy útil para el diagnóstico de la patología renal
glomerular y las lesiones ampollares e inflamatorias de la piel.
OTROS ESTUDIOS: LA BIOLOGIA MOLECULAR
Técnicas de biología molecular: En las últimas décadas los análisis moleculares han
tenido un asombroso incremento. Esto se debe a que la biotecnología ha avanzado
muchísimo en el perfeccionamiento de las técnicas de biología molecular y, en última
instancia; esto ha permitido comprender mucho más el funcionamiento tan complejo
de las células tanto en su fisiología normal como en estados patológicos. En el caso
de la biología molecular en humanos, se ha dado un gran salto a partir del momento
en que se pudo secuenciar el genoma humano completo, obteniéndose el primer
borrador en el año 2.001 con un finalización del proyecto en 2.003 (The Human
Genome Project = Proyecto genoma humano). Esta secuenciación del genoma se
realizó con el arduo trabajo que duró aproximadamente diez años. La técnica más
utilizada para la secuenciación del genoma fue la técnica ideada por Frederick Sanger
(Secuenciación de tipo Sanger) entre otras. Sin embargo, el final del proyecto pudo
obtener la secuencia de aproximadamente el 80% del genoma. Había partes
secuenciadas pero no ensambladas y partes altamente repetitivas del genoma que
son difíciles de secuenciar y ensamblar. Fue recién en septiembre de 2023 que el
genoma humano se ha secuenciado de manera completa y ensamblado en cada unas
de sus partes.
El campo de la Biología Molecular se ha extendido en diferentes disciplinas de la
biología y la Medicina no es la excepción. El análisis molecular de una patología es
muy complejo y requiere un abordaje multidisciplinario. Esta realidad nos muestra
que el Médico Patólogo junto con Bioquímicos, Biotecnólogos, Genetistas, y expertos
en Bioinformática son los encargados de realizar diferentes técnicas y evaluación de
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los resultados obtenidos para realizar un diagnóstico. Si bien estos estudios no son de
uso corriente y no son necesarios para todas las enfermedades; es real que día a día
van ganando terreno en el campo de la medicina clínica. Algunas técnicas sólo están
disponibles en centros de investigación, tienen un alto costo y no todos tienen
aplicabilidad clínica. Gran parte de ellos son utilizados actualmente en investigación.
Otros, como por ej FISH (Fluorescent in-situ Hibridization = hibridación in-situ
fluorescente), tienen una gran utilidad diagnóstica. Los estudios de BM permiten
analizar la estructura y función de ADN, ARN y proteínas. La descripción técnica y
metodológica de cada una de ellas escapa a los objetivos de esta clase. Aquí cito
algunos ejemplos:
– FISH (hibridación in-situ fluorescente): Herramienta para análisis
cromosómico. Utilizada para estudio de tumores hemolinfoides,
urológicos, de SNC, para estudio de Ca. De mama HER2-neu con
resultado “equívoco”.
– PCR (reacción en cadena de la polimerasa) convencional, cuantitativa
(qPCR) y digital. Por ejemplo: Estudio de genes como Kras/Nras en
cancer de colon.
– CGH (Comparative genomic hybridization = hibridación genómica
comparativa) y micromatrices de DNA: Se basa en la comparación de un
secuencia genómica normal y conocida contra la de un paciente. Los
estudios de comparación genómica han sido la base para la realización
de “clasificaciones moleculares” de numerosas enfermedades
oncológicas. Sobre estas comparaciones también se han podido diseñar
plataformas de genes con utilidad clínica (Mamma-print y Oncotype-DX
para cancer de Mama).
– Secuenciación genómica (Sanger, secuenciación masiva en paralelo-
NGS). La secuenciación hace referencia al estudio de secuencia de
nucleótidos en la cadena de ADN (A-T-C-G) de un gen, grupo de genes,
de todo el exoma o de todo el genoma completo. Se puede analizar
mutaciones puntuales (alteración de una base de ADN),
inserciones/deleciones de pequeño número de bases (INDELs), si un gen
está duplicado, amplificado o perdido (variación en número de copias),
análisis de microsatélites y carga mutacional tumoral. Los estudios de
secuenciación de genes han dado un gran salto de calidad en los últimos
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Introducción a la Anatomía Patológica – 2026
años. La industria biotecnológica ofrece una gran variedad de
plataformas de estudio.
Actualmente, los estudios biomoleculares con mayor aplicabilidad clínica son
utilizados con mayor frecuencia en el campo de la oncología (en una multitud de
tumores malignos) y en pediatría (estudio de enfermedades congénitas, hereditarias
y enfermedades raras). Sin embargo, también se utilizan ampliamente en neurología
y salud mental (estudio de enfermedades neurodegenerativas, trastornos del
espectro autista, enfermedades que presentan retraso mental, enfermedades
musculares degenerativas). En investigación, el campo de acción es mucho más
amplio todavía. Se utiliza biología molecular para estudio de enfermedades
metabólicas, cardíacas, obesidad, diabetes e hipertensión por citar algunos ejemplos.
La medicina forense también se vale de la biología molecular para la resolución de
casos judiciales.
La muestra de ADN, ARN o proteína que se utiliza para estos estudios se extrae del
taco de parafina confeccionado en el laboratorio de patología o de la sangre del
paciente.
Las técnicas con aplicabilidad clínica arriba mencionadas (entre otras) nos permiten:
- Realizar un diagnóstico molecular: Se buscan presencia o ausencia de diferentes
tipos de alteraciones en el genoma. Algunas alteraciones genéticas son específicas
de una entidad nosológica definida. Por ej: La policitemia Vera (una forma de
tumor de médula ósea) posee una mutación característica en el gen JAK2 (V617F);
o la mutación del gen c-kit es característica del tumor estromal gastrointestinal
(GIST). La muestra puede ser la sangre del paciente o el taco de parafina.
- Evaluar marcadores predictivos: Quizás este sea el uso con mayor aplicabilidad en
la clínica oncológica. Un “marcador predictivo” se refiere a un marcador
molecular que, de estar presente o no; permita predecir si la lesión en estudio va
a responder a un tratamiento dado. Por ej: testeo molecular del gen EGFR
(Epidermal Growth Factor Receptor = Receptor del Factor de Crecimiento
Epidérmico) en adenocarcinoma de pulmón. Si esta mutación está presente, se
utiliza un fármaco llamado “Erlotinib”. Por el contrario, en cáncer de colon, si
existe mutación del gen K-ras, no se utiliza el fármaco “Cetuximab”. La muestra en
estos casos es el taco de parafina del cual se obtiene el ADN de interés.
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Introducción a la Anatomía Patológica – 2026
- Evaluación de marcadores pronóstico: Otro alcance de la biología molecular es
realizar la búsqueda de alteraciones moleculares que de estar presentes pueden
ser indicadores de una buena o mala evolución de una enfermedad. Por ej, en un
tumor linfoide llamado “leucemia linfocítica crónica”, si existe una alteración en el
gen p53, es indicativo que la enfermedad puede tener una mala evolución. La
muestra puede ser la sangre o el taco de parafina.
Con todo lo anteriormente expuesto, la anatomía patológica es una especialidad
fundamental en el flujo de la medicina, enlaza las ciencias básicas con la clínica, la
cirugía y la oncología.
La disciplina permite integrar en su práctica técnicas tan complejas como las de
biología molecular y ofrece un marco teórico y práctico esencial. Desde la práctica,
como se mencionó a lo largo de este texto, la especialidad es fundamentalmente de
diagnóstico. Desde la teoría, la anatomía patológica permite entender y comprender
la enfermedad como entidad biológica, así como en el contexto social, emocional y
físico de cada individuo en particular y en la población general.
¡Bienvenidos al apasionante mundo de la Anatomía Patológica!
Hernán Costa
Médico especialista en Anatomía Patológica - MP: 5235 Reg. Esp: 00205799
Master en Oncología Molecular
Experto en Genética Médica y Genómica.
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