BIOPROCESOS
2026-1
PRE-INFORME DEL USO DEL MICROSCOPIO
K. Manjarres, N. Mejía, I. Prieto, S. Riera, I. Sanmartín, V. Villalba
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Facultad de Ingeniería, Universidad del Atlántico, Barranquilla, Colombia.
1. INTRODUCCIÓN • Realizar el conteo de microorganismos mediante la
cámara de Neubauer.
El estudio de los microorganismos presentes en diferentes • Interpretar las características observadas en las
muestras de agua constituye una herramienta fundamental en el muestras.
campo de los bioprocesos, ya que permite comprender su
comportamiento, concentración y posible impacto en sistemas 3. MARCO TEORICO
naturales e industriales. Para ello, el uso del microscopio se
convierte en un recurso indispensable, dado que posibilita la El microscopio óptico es una herramienta fundamental para la
observación de estructuras que no son visibles a simple vista, observación de microorganismos, ya que permite ampliar
mediante un sistema de lentes que amplifica la imagen y mejora imágenes de estructuras que no pueden ser vistas a simple vista.
su resolución en función de parámetros como la longitud de Su funcionamiento se basa en un sistema de lentes compuesto
onda y la apertura numérica. principalmente por el lente objetivo y el lente ocular, los cuales
permiten la formación de una imagen aumentada de la muestra
En esta práctica se emplea el microscopio vertical BA210, el (Olympus Corporation, s.f.). El lente objetivo, ubicado cerca de
cual, gracias a sus diferentes objetivos (4X, 10X, 40X y 100X), la muestra, genera una imagen aumentada inicial, la cual es
permite analizar con distintos niveles de aumento las posteriormente ampliada por el lente ocular, produciendo así la
características de las muestras. Asimismo, se utiliza la cámara imagen final observada. Este sistema permite trabajar con
de Neubauer, un instrumento ampliamente usado para el conteo diferentes niveles de aumento, como 4X, 10X, 40X y 100X,
de células y microorganismos, que facilita la cuantificación donde los aumentos bajos facilitan la localización de la muestra
precisa mediante una cuadrícula estandarizada. y los altos permiten un mayor nivel de detalle en la observación
de los microorganismos.
En este contexto, el desarrollo de la práctica tiene como
propósito principal adquirir habilidades en el manejo adecuado
del microscopio y en la utilización de la cámara de Neubauer
para la observación y conteo de microorganismos presentes en
muestras de agua. De manera complementaria, se busca
identificar las partes del microscopio y comprender su función,
ajustar correctamente el equipo para obtener imágenes claras,
realizar conteos confiables de microorganismos y, finalmente,
interpretar las características observadas en las muestras
analizadas.
2. OBJETIVOS
✓ Objetivo General Figura 1. Microscopio óptico. Recuperado de: Microscopio óptico -
100 FL - Breukhoven - de laboratorio / recto / monocular
• Aprender a utilizar correctamente el microscopio y
la cámara de Neubauer para la observación y conteo Una característica clave del microscopio es su poder de
de microorganismos. resolución, que se define como la capacidad del equipo para
distinguir dos puntos cercanos como entidades separadas. Este
✓ Objetivos específicos depende principalmente de la longitud de onda de la luz
utilizada y de la apertura numérica del sistema óptico, lo que
• Identificar las partes del microscopio y su función. influye directamente en la calidad de la imagen obtenida
• Ajustar y calibrar el equipo para una correcta (Olympus Corporation, s.f.). A mayor poder de resolución, se
visualización. obtiene una imagen más clara y definida, lo cual es esencial para
la correcta identificación de estructuras microscópicas.
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Ficha técnica del agua destilada
Para la cuantificación de microorganismos se utiliza la cámara
de Neubauer, un dispositivo diseñado con una cuadrícula de 1. Identificación
dimensiones conocidas grabada en una lámina de vidrio. Esta
estructura permite trabajar con un volumen específico de Nombre: Agua destilada
muestra, lo que facilita el conteo directo de células bajo el Fórmula química: 𝐻2 𝑂
microscopio. El procedimiento consiste en depositar una Tipo: Sustancia pura (tratada)
pequeña cantidad de muestra sobre la cámara, cubrirla Origen: Obtenida por proceso de destilación (evaporación y
adecuadamente y observar las células distribuidas en la posterior condensación)
cuadrícula.
2. Propiedades físicas
Estado físico: Líquido
Color: Incoloro
Olor: Inodoro
Sabor: Insípido
Punto de ebullición: 100 °C (a 1 atm)
Punto de fusión: 0 °C
Densidad: 0.997 g/cm³ (a 25 °C)
Conductividad eléctrica: Muy baja (≈ 0.5 – 5 µS/cm)
Figura 2. Cámara de Neubauer EC-LAB. Recuperado de:
[Link]
3. Propiedades químicas
El conteo celular se realiza generalmente siguiendo un patrón pH: Aproximadamente neutro (6.5 – 7.0, puede variar por 𝐶𝑂2
definido, como el recorrido en zigzag, con el fin de obtener disuelto)
resultados representativos y evitar errores por duplicidad. Contenido de sales: Prácticamente nulo
Durante el conteo, se consideran únicamente las células que Dureza: Nula
cumplen ciertos criterios dentro de los límites de las Reactividad: Baja; puede absorber gases del ambiente (como
cuadrículas, lo que permite mantener la precisión del método. 𝐶𝑂2 )
Posteriormente, teniendo en cuenta el número de células
contadas, el volumen analizado y los factores de dilución Ficha técnica del agua ambiental
aplicados, se puede calcular la concentración de
microorganismos presente en la muestra original. 1. Identificación
En el contexto de los bioprocesos, el conteo de Nombre: Agua ambiental (agua natural)
microorganismos es de gran importancia, ya que permite Tipo: Mezcla compleja
evaluar el crecimiento microbiano, controlar procesos de Origen: Fuentes naturales (ríos, lagos, aire, lluvia, agua
fermentación y verificar la calidad de diferentes sistemas superficial o subterránea)
biológicos. Estos análisis son esenciales para optimizar
condiciones de operación y garantizar la eficiencia en procesos 2. Propiedades físicas
industriales y ambientales donde intervienen microorganismos
(OpenStax, s.f.). Estado físico: Líquido
Color: Variable (transparente a turbio)
4. MATERIALES Y REACTIVOS Olor: Puede variar según contaminantes
Sabor: Variable
Reactivos: Temperatura: Dependiente del ambiente
Turbidez: Variable
❖ Agua destilada Conductividad eléctrica: Moderada a alta (depende de sales
❖ Muestras de agua disueltas)
Materiales: 3. Propiedades químicas
❖ Microscopio pH: Variable (generalmente entre 6 y 8.5)
❖ Cámara de Neubauer Sales disueltas: Presentes (𝐶𝑎2+ , 𝑀𝑔2+ , 𝑁𝑎 + , 𝐶𝑙 − , 𝑒𝑡𝑐)
❖ Cubreobjetos Dureza: Variable (blanda a dura)
❖ Gotero Materia orgánica: Presente
❖ Pinzas Gases disueltos: 𝑂2 , 𝐶𝑂2 , entre otros
❖ Micropipetas Contaminantes: Puede contener microorganismos, metales
pesados o compuestos orgánicos
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5. METODOLOGÍA permite relacionar el número de células contadas con un
volumen conocido.
La práctica iniciará con la recolección de una muestra de agua
proveniente de un entorno de la universidad, procurando que Inicialmente, se realizará el conteo de microorganismos en
esta no presente residuos sólidos visibles que puedan interferir varios cuadros de la cuadrícula, con el fin de obtener un valor
en la observación. En caso de que la muestra presente una alta representativo. Posteriormente, se calculará el número promedio
concentración de microorganismos, se realizarán diluciones de células contadas.
seriadas con agua destilada, con el fin de obtener una
concentración adecuada que permita un conteo preciso. ∑ 𝑁𝑖
̅=
𝑁 (1)
𝑛
Posteriormente, se procederá a la preparación de la cámara de
Neubauer, la cual será limpiada cuidadosamente junto con el Donde:
cubreobjetos utilizando agua destilada, asegurando la
eliminación de impurezas que puedan afectar la visualización. ̅ = 𝑛ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑝𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜 𝑑𝑒 𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜𝑜𝑟𝑔𝑎𝑛𝑖𝑠𝑚𝑜𝑠
𝑁
Una vez limpia, se depositará un volumen de muestra entre 10 y 𝑁𝑖 = 𝑛ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎𝑠 𝑒𝑛 𝑐𝑎𝑑𝑎 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑜
50 µL utilizando una micropipeta, procurando una distribución 𝑛 = 𝑛ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑜𝑠 𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑧𝑎𝑑𝑜𝑠
uniforme sobre la superficie de la cámara. Seguidamente, se
colocará el cubreobjetos de manera inclinada y controlada, A partir de este valor, se determinará la concentración de
evitando la formación de burbujas de aire. microorganismos en la muestra utilizando la siguiente
expresión:
Para la observación, se verificará inicialmente el estado del
microscopio, asegurando que esté correctamente configurado, ̅ ∗ 𝐹𝐷 ∗ 104
𝐶=𝑁 (2)
con el objetivo de menor aumento, la platina en posición baja y
la iluminación ajustada. Se colocará la cámara de Neubauer en Donde:
la platina y se iniciará la observación utilizando el objetivo de
4X, lo que permitirá ubicar la cuadrícula de la cámara. 𝐶 = 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒 𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜𝑜𝑟𝑔𝑎𝑛𝑖𝑠𝑚𝑜𝑠 (𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠⁄𝑚𝐿)
Posteriormente, se incrementará el aumento a 10X para lograr ̅ = 𝑛ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎𝑠
𝑁
una mejor visualización de los microorganismos presentes en la
muestra. 𝐹𝐷 = 𝑓𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
El conteo de microorganismos se realizará siguiendo un patrón En caso de que la muestra haya sido diluida, el factor de dilución
sistemático en zigzag sobre la cuadrícula de la cámara de se calculará como:
Neubauer, con el objetivo de garantizar una distribución
𝑉𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙
representativa y evitar errores de conteo. Durante este proceso, 𝐹𝐷 = (3)
se considerarán únicamente las células que se encuentren dentro 𝑉𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
de los límites establecidos, excluyendo aquellas que toquen los
bordes definidos para prevenir duplicaciones. Finalmente, la concentración obtenida permitirá estimar la
cantidad de microorganismos presentes en la muestra original,
Finalmente, al concluir la práctica, se apagará el microscopio y lo cual es fundamental para el análisis microbiológico dentro del
se dejará en condiciones adecuadas de almacenamiento, contexto de los bioprocesos.
asegurando que el objetivo de menor aumento quede en
posición, la platina descendida y el equipo limpio, con el fin de 7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
preservar su correcto funcionamiento.
Universidad del Atlántico. (2026). Guía de laboratorio: Uso del
microscopio y cámara de Neubauer. Facultad de Ingeniería,
Programa de Ingeniería Química.
Olympus Corporation. (s.f.). Introduction to microscopy.
Recuperado de [Link]
OpenStax. (s.f.). Microbiology. Rice University. Recuperado de
Figura 3. Diagrama de flujo del uso del microscopio y cámara de [Link]
Neubauer.
6. CALCULOS
Para determinar la concentración de microorganismos presentes
en la muestra, se empleará la cámara de Neubauer, la cual
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TABLA DE RECOLECCIÓN DE DATOS
Objecto utilizado Características
Tipo de muestra Esquema
(4X, 10X, 40X) observadas