[1]

ADELANTO #2: DISEÑO DE PROTOTIPO DE PRODUCTO COSMÉTICO

Manteca de Cacao Cosmética (Theobroma cacao L.)

Tecnología de Extracción de Compuestos Bioactivos

Ingeniería Química / Procesos Cosméticos

2026
 [2]

1 Reportar las condiciones de las extracciones realizadas en una tabla, incluyendo la siguiente
información: cantidad de materia prima húmeda y seca; temperatura y tiempo de secado; condiciones
de extracción (cantidad y concentración del solvente, tiempo, temperatura y presión, si aplica) y el
peso del extracto obtenido.

Tabla 1. Parámetros experimentales del proceso de extracción

Parámetro Valor
Materia prima inicial 373,2 g
Peso del extracto obtenido 15,2 g
Temperatura de tostado 110 °c
Tiempo de secado 50 min
Solvente utilizado Etanol
Concentración del solvente 96%
Volumen de solvente 365 mL
Temperatura de extracción 80 °c
Presión de extracción

2) Calcular los rendimientos de los extractos (todos los cáculos tienen que estar explicitosy paso por
paso en el reporte)

El concepto básico: El rendimiento nos indica qué porcentaje de tu muestra inicial de cacao lograste
transformar exitosamente en tu producto de interés (el extracto).

La fórmula general es:

Masa extracto
Rendimiento(% )= ∗100 Ecu # 2,1
Masamateria Prima
Paso 1: Identificar las variables

 Masa del extracto: 15,2 g

 Masa de la materia prima: 373,2 g

Paso 2: Reemplazar los valores en la fórmula

15 ,2 g
Rendimiento(% )= ∗10 0
373 ,2 g
Paso 3: Realizar la división Dividimos la cantidad de extracto recuperado entre el total de la muestra
sólida:

Rendimiento=0,040728
Paso 4: Multiplicar por 100 Para convertir ese número decimal en un porcentaje fácil de leer,
simplemente lo multiplicamos por 100:

Rendimiento=4 , 07 %
 [3]

Resultado Final: El rendimiento de tu extracción con etanol al 96% fue de 4,07 %. Esto significa que
por cada 100 gramos de granos de cacao que procesaste, lograste recuperar aproximadamente 4
gramos de extracto bioactivo.

3. Describir algunas pruebas de tamizaje fitoquímico para identificar cualitativamente los tipos
de metabolitos secundarios presentes en los extractos obtenidos

Tabla 1. Evaluación cualitativa y tamizaje fitoquímico de grupos metabólicos en extractos de

cascarilla de cacao.
Grupo Metabolito Procedimiento Detallado Fundamento Químico y Notas Resultado
(Harborne, 1998) Técnicas Esperado

Alcaloides Colocar el extracto en cápsula Prueba de Murexida: La Residuo color

(Teobromina y de porcelana. Añadir 2-3 gotas oxidación de la base purínica púrpura o
cafeína) de HCl conc. y un cristal de genera ácido murexídico, el rosáceo.
KClO3. Evaporar a sequedad. cual se amoniza para formar el
Tratar el residuo con vapores de purpurato de amonio.
NH4OH.
Flavonoides A 2 ml de extracto etanólico, Prueba de Shinoda: Reducción Coloración
(Catequinas y añadir una viruta de Magnesio del núcleo de benzopirona. La roja, rosa o
Epicatequinas) metálico y agregar gota a gota efervescencia es clave para la magenta.
HCl concentrado por las paredes formación de sales de flavilio.
del tubo.
Taninos Mezclar 1 ml de extracto con 2 Prueba de Vainillina-HCl: El Coloración
(Proantocianidinas) ml de solución de vainillina al aldehído reacciona roja brillante.
1% preparada en HCl al 70%. específicamente con el carbono
8 del anillo A de los flavan-3-
oles.
Quinonas Tratar el extracto seco o Reacción de color con álcalis: Viraje a
(Polifenoquinonas) hidrolizado con una solución de Las hidroxi-quinonas formadas colores rojos,
NaOH o KOH al 10%. Agitar por oxidación forman violetas o
para permitir la oxidación aérea. fenóxidos altamente púrpuras.
conjugados.
Lípidos (Ácidos Disolver la grasa extraída en Índice de Acidez: Determina la Alta demanda
linoleico y oleico) alcohol-éter (1:1) y titular con cantidad de ácidos grasos de titulante
KOH alcohólico 0.1 M usando libres. (viraje a rosa).
fenolftaleína.
Pectinas (Ácido Extraer residuo con oxalato de Precipitación: La Formación de
galacturónico) amonio 0.5% (80°C, 1h). Filtrar insolubilización de los un coágulo
y verter el extracto en 3 polímeros de ácido gelatinoso.
volúmenes de etanol 95%. galacturónico en medio
alcohólico genera la red de gel.
Celulosa (Glucanos β Tratar el residuo sólido Reacción de Schulze: El Coloración
1→4) insoluble con el Reactivo de complejo de yodo-zinc se aloja azul-violeta
Schulze (Cloruro de Zinc en las microfibrillas de celulosa intensa.
yodado). purificadas.
Hemicelulosas Calentar el polvo en H 2SO4 1M Hidrólisis Ácida: Ruptura de Manchas color
(Xiloglucanos y (100°C, 8-16h). Neutralizar con enlaces glicosídicos para liberar café o rosa en
arabinoxilanos) Ba(OH)2 y analizar el pentosas (Xilosa/Arabinosa) el
sobrenadante por TLC. detectables con anilina-ftalato. cromatograma
.

Nota. Adaptado de Harborne, J. B. (1998). Phytochemical methods: A guide to modern techniques of plant
analysis (3a ed.). Chapman and Hall; y Okiyama, D. C. G., Navarro, S. L. B., & Rodrigues, C. E. C. (2017).
 [4]

Cocoa shell and its compounds: Applications in the food industry. Trends in Food Science & Technology, 63,
103–112. [Link]

4 describir las técnicas de caracterización fisicoquímica de extractos

Técnicas de Caracterización Fisicoquímica del Extracto

Una vez confirmada la presencia de los metabolitos secundarios mediante el tamizaje cualitativo, es
fundamental realizar una caracterización fisicoquímica para evaluar la viabilidad del extracto en
formulaciones cosméticas y determinar la concentración exacta de sus bioactivos (Skoog et al., 2014).
Las técnicas más relevantes incluyen:

4.1. Determinación de pH El pH es un parámetro crítico, especialmente si el extracto se destinará a

uso tópico o cosmético, ya que debe ser compatible con el pH natural de la piel (aproximadamente 4.5
a 5.5). Se mide introduciendo un potenciómetro (pH-metro) previamente calibrado directamente en
una dilución acuosa del extracto. Un pH inadecuado podría requerir el uso de agentes neutralizantes
durante la formulación final (Aulton & Taylor, 2013).

4.2. Determinación de Sólidos Totales y Densidad Esta prueba física permite conocer la cantidad
real de materia biológicamente activa disuelta por cada mililitro de solvente.

 Densidad: Se determina utilizando un picnómetro a temperatura controlada (usualmente 20

°C).
 Sólidos totales: Se toma un volumen exacto del extracto líquido, se evapora el solvente en
una estufa a baja temperatura para no degradar los compuestos, y se pesa el residuo seco. Esto
es fundamental para estandarizar la dosis del extracto en el producto final (Skoog et al.,
2014).

4.3. Cuantificación de Polifenoles Totales mediante Espectrofotometría UV-Vis Dado que la

capacidad antioxidante del cacao depende de sus compuestos fenólicos, su cuantificación exacta es
indispensable. La técnica más estandarizada es el método de Folin-Ciocalteu. El extracto se hace
reaccionar con el reactivo de Folin y carbonato de sodio, lo que genera un complejo de color azul. La
intensidad de este color se mide en un espectrofotómetro a una longitud de onda de 765 nm. La
absorbancia obtenida se compara con una curva de calibración de ácido gálico, expresando el
resultado como equivalentes de ácido gálico (EAG) por gramo de extracto (Ramos-Escudero et al.,
2021).

4.4. Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC) Para la identificación y cuantificación

específica de los alcaloides principales del cacao (teobromina y cafeína) o de flavonoides específicos
(como la epicatequina), se emplea la técnica HPLC acoplada a un detector UV o de arreglo de diodos
(DAD). El extracto se inyecta en una fase móvil líquida que atraviesa una columna estacionaria a alta
presión. Los compuestos se separan en función de su afinidad química y se cuantifican comparando el
área bajo la curva de sus respectivos cromatogramas con estándares analíticos puros (Skoog et al.,
2014).

5 especificar un método para evaluar la actividad biológica de interés (actividad antibacterial,

actividad antifúngica, actividad antioxidante, actividad antielmíntica, u otra) de los extractos, que
sustente las funciones que estos desempeñarán en el producto a desarrollar.

Evaluación de la Actividad Biológica: Capacidad Antioxidante

 [5]

Para justificar la funcionalidad biológica del extracto de Theobroma cacao L. en la formulación

cosmética, se evaluará su actividad antioxidante mediante el ensayo de captación del radical libre
DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazilo). Esta técnica permite medir la capacidad de los compuestos
fenólicos y flavonoides presentes en el extracto para donar átomos de hidrógeno o electrones,
neutralizando así las especies reactivas de oxígeno (ROS) que causan el estrés oxidativo celular
(Molyneux, 2004).

Justificación funcional en el producto cosmético: La inclusión de un agente con alta capacidad

antioxidante en una matriz cosmética (como una crema o loción) cumple una doble función: protege
los componentes lipídicos de la formulación contra la rancidez oxidativa y, al aplicarse tópicamente,
actúa como un activo antienvejecimiento al proteger la barrera cutánea contra la degradación del
colágeno inducida por la radiación UV y la contaminación ambiental (Ramos-Escudero et al., 2021).

Descripción del Método (Ensayo DPPH):

1. Preparación del reactivo: Se prepara una solución metanólica o etanólica del radical DPPH
(usualmente a una concentración de 0.1 mM). Esta solución presenta una coloración púrpura
intensa y una absorbancia máxima a una longitud de onda de 517 nm.
2. Reacción: En tubos de ensayo protegidos de la luz (con papel aluminio), se mezclan
volúmenes exactos de la solución de DPPH con diferentes concentraciones del extracto
problema.
3. Incubación: La mezcla se deja reaccionar en la oscuridad a temperatura ambiente durante 30
a 60 minutos. Durante este tiempo, si el extracto tiene actividad antioxidante, reducirá el
radical DPPH, provocando un cambio de color visible de púrpura a amarillo pálido.
4. Lectura y Cuantificación: Se mide la absorbancia de las muestras en un espectrofotómetro
UV-Vis a 517 nm.
5. Cálculo de Inhibición: El porcentaje de inhibición o captación del radical libre se calcula
mediante la siguiente ecuación:

% Inhibición=¿

donde:

 Acontrol = absorbancia del control

 Amuestra = absorbancia de la muestra

Donde la Absorbancia del control corresponde a la solución de DPPH sin extracto añadido. A
partir de los porcentajes de inhibición a distintas concentraciones, se calcula el valor IC50
(Concentración Inhibitoria Media), que representa la concentración de extracto necesaria para
reducir el 50% de los radicales libres iniciales; a menor IC50, mayor es el poder antioxidante
del extracto (Molyneux, 2004).

6) especificar el procedimiento y las condiciones de separación o purificación de los bioactivos de

interés

Procedimiento y Condiciones de Separación y Purificación

Dado que la obtención de los compuestos bioactivos se realizó mediante el método de extracción
continua Soxhlet, la biomasa agotada queda retenida en el cartucho del equipo, obteniéndose
directamente en el matraz de destilación un extracto líquido libre de material sólido particulado
(Luque de Castro & Priego-Capote, 2010). Por lo tanto, el tren de separación y purificación para
acondicionar este extracto líquido hacia su uso en una matriz cosmética consta de las siguientes dos
etapas:
 [6]

1. Concentración del Extracto (Evaporación a Presión Reducida) El líquido resultante del Soxhlet
contiene los bioactivos (polifenoles y alcaloides) diluidos en el volumen de etanol al 96 %. Este
solvente debe ser retirado casi en su totalidad, ya que en altas concentraciones resulta irritante para
aplicaciones tópicas. Se emplea un evaporador rotatorio (Rotavapor) bajo estrictas condiciones
operativas para prevenir la degradación térmica de los compuestos antioxidantes:

 Temperatura del baño maría: 40 °C – 45 °C máximo.

 Presión: Vacío moderado (aprox. 150 - 200 mbar) para disminuir el punto de ebullición del
etanol.

 Rotación: 60 - 90 rpm, lo cual incrementa el área superficial de evaporación y evita la

proyección violenta del líquido (Azmir et al., 2013). El proceso de destilación se detiene una
vez se obtiene un extracto crudo concentrado y de consistencia viscosa en el matraz.

2. Purificación y Fraccionamiento (Desengrase por Extracción Líquido-Líquido) El método

Soxhlet es exhaustivo y utiliza calor continuo, por lo que el extracto crudo concentrado arrastrará,
además de los polifenoles, una fracción de lípidos (manteca de cacao residual). Estas grasas pueden
inestabilizar químicamente la emulsión de una crema cosmética. Para aislar los compuestos
bioactivos, se procede con una extracción líquido-líquido (partición). El extracto concentrado se
resuspende en un volumen mínimo de agua destilada y se transfiere a un embudo de decantación. Se
adiciona un solvente apolar, como n-hexano, en proporción 1:1 (v/v) y se agita vigorosamente. Tras el
reposo, por diferencia de densidades y polaridad, se forman dos fases inmiscibles (Seader et al.,
2011):

 Fase superior (Apolar): Retiene los lípidos indeseados disueltos en el hexano.

 Fase inferior (Polar/Acuosa): Contiene los polifenoles, la teobromina y otros bioactivos

purificados. La fase acuosa inferior se drena, se recupera y se somete a liofilización (secado
por congelación a -50 °C bajo alto vacío) para evaporar el agua sin usar calor. El resultado es
un polvo bioactivo concentrado, altamente purificado y estable, óptimo para la formulación
cosmética final (Ramos-Escudero et al., 2021).
 [7]

Referencias

Evans, W. C. (2009). Trease and Evans' pharmacognosy (16a ed.). Saunders/Elsevier.

Harborne, J. B. (1998). Phytochemical methods A guide to modern techniques of plant analysis (3a
ed.). Chapman and Hall.

Okiyama, D. C. G., Navarro, S. L. B., & Rodrigues, C. E. C. (2017). Cocoa shell and its compounds:
Applications in the food industry. Trends in Food Science & Technology, 63, 103–112.
[Link]

Ramos-Escudero, F., Casimiro-Gonzales, S., Fernández-Prior, Á., Cancino Chávez, K., Gómez-
Mendoza, J., De la Fuente-Carmelino, L., & Muñoz, A. M. (2021). Colour, fatty acids, bioactive
compounds, and total antioxidant capacity in commercial cocoa beans (Theobroma cacao L.). LWT –
Food Science and Technology, 147, 111629. [Link]

Aulton, M. E., & Taylor, K. M. G. (2013). Aulton's pharmaceutics: The design and manufacture of
medicines (4a ed.). Churchill Livingstone Elsevier.

Ramos-Escudero, F., Casimiro-Gonzales, S., Fernández-Prior, Á., Cancino Chávez, K., Gómez-
Mendoza, J., De la Fuente-Carmelino, L., & Muñoz, A. M. (2021). Colour, fatty acids, bioactive
compounds, and total antioxidant capacity in commercial cocoa beans (Theobroma cacao L.). LWT –
Food Science and Technology, 147, 111629. [Link]

Skoog, D. A., Holler, F. J., & Crouch, S. R. (2014). Principios de análisis instrumental (7a ed.).
Cengage Learning.

Molyneux, P. (2004). The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating
antioxidant activity. Songklanakarin Journal of Science and Technology, 26(2), 211-219.

Ramos-Escudero, F., Casimiro-Gonzales, S., Fernández-Prior, Á., Cancino Chávez, K., Gómez-
Mendoza, J., De la Fuente-Carmelino, L., & Muñoz, A. M. (2021). Colour, fatty acids, bioactive
compounds, and total antioxidant capacity in commercial cocoa beans (Theobroma cacao L.). LWT –
Food Science and Technology, 147, 111629. [Link]

Azmir, J., Zaidul, I. S. M., Rahman, M. M., Sharif, K. M., Mohamed, A., Sahena, F., ... & Omar, A.
K. M. (2013). Techniques for extraction of bioactive compounds from plant materials: A review.
Journal of Food Engineering, 117(4), 426-436. [Link]

Luque de Castro, M. D., & Priego-Capote, F. (2010). Soxhlet extraction: Past and present panacea.
Journal of Chromatography A, 1217(16), 2383-2389. [Link]

Ramos-Escudero, F., Casimiro-Gonzales, S., Fernández-Prior, Á., Cancino Chávez, K., Gómez-
Mendoza, J., De la Fuente-Carmelino, L., & Muñoz, A. M. (2021). Colour, fatty acids, bioactive
compounds, and total antioxidant capacity in commercial cocoa beans (Theobroma cacao L.). LWT –
Food Science and Technology, 147, 111629. [Link]

Seader, J. D., Henley, E. J., & Roper, D. K. (2011). Separation process principles: Chemical and
biochemical operations (3a ed.). John Wiley & Sons.
[8]