Universidad de Buenos Aires - Facultad de Medicina
Departamento de Histología, Embriología, Biología Molecular y Genética
Unidad Académica de Histología
UNIDAD TEMÁTICA H5:
TEJIDO CARTILAGINOSO. TEJIDO ÓSEO.
OBJETIVOS GENERALES Y ESPECÍFICOS
▪ Describir y reconocer las características histológicas del tejido conectivo especializado
cartilaginoso , óseo, sanguíneo y hemopoyético.
▪ Tejido Cartilaginoso: identificar y describir organización histológica de los diferentes tipos de
cartílagos (células, MEC, pericondrio). Establecer diagnósticos diferenciales y fundamentar la
observación con diferentes técnicas especiales.
▪ Tejido Óseo: describir y reconocer las características histológicas del tejido óseo (tipos
celulares, características de la MEC, periostio, endostio). Clasificar los diferentes tipos de tejido
óseo (esponjoso y compacto) fundamentar diagnostico diferencial. Describir características del
proceso de osificación (Intramembranosa y Endocondral). Describir y reconocer las diferentes
zonas del proceso de osificación endocondral y los componentes tisulares que se observan en
dicho proceso.
▪ Tejido Sanguíneo: Explicar el concepto de extendido celular y diferenciarlo de un corte
histológico. Mencionar y describir componentes tisulares (elementos figurados y plasma).
▪ Tejido Hemopoyético: reconocer la medula ósea como órgano. Mencionar y describir su
organización histológica y función.
PREPARADOS PARA TRABAJAR EN MICROSCOPIO
1) Tráquea - HyE: Cartílago hialino.
Reconocer el pericondrio con su capa fibrosa (TCCDNM) y condrógena (células madres
condroprogenitoras y condroblastos (flecha amarilla). Observar la tinción basófila de la MEC
cartilaginosa y compararla con la MEC del pericondrio. Reconocer en base a su morfología,
localización y tinción un condroblasto (flecha amarilla) y un condrocito (flecha verde).
Identificar condroplasto o laguna como artificio de técnica (flecha blanca).
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1) Hueso descalcificado, H&E: Corte transversal de Diáfisis.
Describir las características del procesamiento de la muestra, fundamento y utilidad compararando
con la técnica de desgaste para observación del tejido óseo (preparado Fijo).
▪ Hueso compacto. (flechas amarillas) Reconocer periostio (células de revestimiento óseo,
osteoblastos), osteonas (conductos de Havers- flecha roja, osteocitos en lagunas
osteocitarias) y endostio (flecha negra).
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▪ Hueso esponjoso: próximo al canal medular pueden observarse trabéculas óseas
revestidas de endostio con osteocitos inmersos en lagunas osteocitarias. La
histoarquitectura del hueso esponjoso puede observarse en los cortes de epífisis donde
abunda el hueso esponjoso revestido por fina capa de compacto.
En estos cortes las trabéculas óseas delimitan las cavidades óseas donde se aloja el tejido
hemopoyético (médula ósea).
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Descalcificación: proceso por el cual se eliminan completamente las sales de calcio del tejido luego de
haber sido fijado en liquido de Bouin. Hay varios tipos de descalcificación, las más utilizadas son las
químicas. La Descalcificación con solución acuosa de ácido nítrico utiliza ácido nítrico y agua destilada.
El bloque de tejido óseo de 5mm se sumerge en sucesivos baños de ácido nitrico durante varios días
consecutivos. Este proceso elimina las sales de hidroxiapatita de la MEC conservando el componente
orgánico esto tornara al bloque de tejido blando y flexible. Se procede luego al lavado con agua destilada
durante 24 horas. Una vez descalcificado el tejido se trata según los pasos de la técnica de rutina.
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2) Osificación endocondral - hueso descalcificado, H&E.
▪ Proceso de osificación endocondral. Diferenciar epífisis, metáfisis y diáfisis. Reconocer el
pericondrio que rodea al cartílago hialino (excepto en la zona articular) y el periostio que
rodea a la zona de trabéculas óseas. Reconocer los distintos estadios de osificación en base
a la morfología y componentes tisulares de cada zona:
a. Cartílago Hialino en Reposo: Describir características histológicas del tejido
cartilaginoso hialino. Reconocer características histológicas del pericondrio, condrocitos
en condroplastos (artificio de técnica) rodeados por una matriz extracelular basófila
(matriz cartilaginosa). Diferenciar matriz territorial e interterritorial. Tipos de
crecimiento del cartílago. Grupos Isógenos.
b. Cartílago Seriado o en Proliferación: condrocitos dispuestos en grupos isógenos axiles.
c. Cartílago Hipertrofiado: condrocitos hipertrofiados dispuestos en grupos isógenos
axiles.
d. Cartílago calcificado: matriz extracelular intensamente basófila.
e. Trabécula Directriz: matriz cartilaginosa (basófila) rodeada o no por osteoblastos.
f. Trabécula Primaria: matriz cartilaginosa calcificada (basófila) rodeada por sustancia
osteoide (acidófila) y osteoblastos de disposición periférica.
g. Trabécula Secundaria: matriz cartilaginosa calcificada rodeada por matriz osteoide con
osteocitos inmersos en lagunas y osteoblastos periféricos.
h. Trabécula Terciaria: se observan osteocitos inmersos en matriz extracelular osteoide
intensamente acidófila rodeados por osteoblastos.
En la periferia de algunas trabéculas pueden observarse osteoclastos. Células multinucleadas,
grandes con citoplasma intensamente acidófilo. Los núcleos pueden polarizarse hacia un extremo
celular y observarse en el extremo opuesto el borde estriado o plegado. Estas células participan en
el proceso de resorción ósea.
Reconocer el tejido hematopoyético entre las trabéculas.
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PREPARADOS FIJOS
Tejido Cartilaginoso Fibroso
Observar la disposición de los condrocitos (flechas rojas) en hileras entremezcladas con haces
paralelos de fibras de colágeno y fibrocitos. Notar la ausencia de pericondrio.
3) Pabellón auricular - Resorcina-Fuscina:
Cartílago Elástico. Reconocer pericondrio. Reconocer en la matriz extracelular el área territorial e
interterritorial en base a la densidad de fibras elásticas. Identificar zonas de localización de
condroblastos y condrocitos, grupos isógenos axil (asterisco amarillo) y coronario (asterisco negro).
Reconocer el área territorial (flecha negra) e interterritorial (flecha celeste) en base a la densidad de
fibras elasticas. Establecer diagnósticos diferenciales con otros tipos de cartílagos.
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4) Epiglotis – HyE:
Cartílago Elástico. Reconocer las características de la MEC del cartílago elástico con HYE acidófila por
el predominio de fibras elásticas y la disposición de las células. En la periferia del tejido puede
observarse el revestimiento de pericondrio.
5) Tráquea – Toluidina
Cartílago Hialino - Metacromasia: relacionar fundamento de la metacromasia con los cambios
observados en la MEC del cartílago hialino rico en GAGs (polianiones) cuando interactúa con
colorante básico metacromático (azul de toluidina). Establecer diagnostico diferencial con la tinción
de Hematoxilina (colorante básico no metacromático).
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6) Hueso seco- Desgaste:
Observar arquitectura del Tejido óseo. Establecer diferencias con el preparado de hueso
descalcificado.
▪ Hueso compacto. Observar el periostio (flecha verde). Identificar las osteonas: laminillas
concéntricas, lagunas osteocitarias con canalículos óseos entre las laminillas, conductos y
sistemas de Havers (flechas rojas), línea de cemento, conductos de Volkmann (flechas
amarillas). Identificar los sistemas circunferenciales interno y externo y sistemas
intersticiales.
▪ Hueso esponjoso. Observar las trabéculas formadas por laminillas y osteocitos (sin
osteonas ni conductos de Havers) que circundan cavidades medulares.
En esta técnica no hay presencia de sustancia orgánica. Se realiza macerando el hueso en agua y
luego en bencina. Una vez blanco y seco, se corta una lámina con una sierra y la misma se pule con
piedra de afilar o pómez con agua para evitar mayor daño tisular. Al terminar el pulido se sumerge
en alcohol absoluto y después en benzol. Luego se lo deja secar, se monta sobre el portaobjetos
con bálsamo de Canadá y se coloca el cubreobjetos.
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7) Cabecita fetal – HyE
Osificación intramembranosa: observar focos de osificación intramembranosa con células
mesenquimáticas y matriz extracelular en cabecita fetal.
APARTADO TEÓRICO
Técnica de Frotis/ Extendido de Sangre con Coloración de May-Grünwald-Giemsa
Obtención: Se extrae sangre por punción. Se deposita una gota de sangre sobre un portaobjetos.
Con otro portaobjeto posicionado a 45° se toma contacto con la gota de sangre y se arrastra hacia
el otro extremo.
Fijación: método físico – calor. Se flamea el portaobjetos sobre un mechero.
Coloración: con May-Grünwald y Giemsa.
Combina dos soluciones colorantes: May-Grünwald y Giemsa. Cada una de ellas posee colorantes
ácidos y básicos.
▪ Solución de May-Grünwald: eosina y azul de metileno ambos disueltos en metanol
▪ Solución de Giemsa: eosina, azul de metileno y una serie de productos de la oxidación de este
último tales como azur A, azur B, violeta de metilo y azul de metilo.
Primero se cubre el extendido con la solución de May-Grünwald permitiendo que el metanol actúe
como fijador químico. Luego se agrega igual volumen de agua destilada, permitiendo que la solución
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coloree. Se descarta el líquido y se cubre con la solución de Giemsa. Se lava con agua corriente y se
deja secar al aire.
Actividad de Autoevaluación y Discusión
1) Realice un cuadro de clasificación de los tipos de tejidos conectivo no especializado.
2) Referente a Técnicas Especiales
a) Los Tricrómicos de Mallory y Masson se utilizan para mostrar evidencia de fibras colágenas
en la MEC del tejido conectivo.
b) La técnica de SUDAN es una impregnación argéntica específica para teñir elementos
lipídicos.
c) Las técnicas Resorcina-Fucisna y Orceina se utilizan para identificar fibras reticulares.
d) La impregnación argéntica es una técnica específica para fibras elásticas.
3) Relacione los siguientes términos
Osteona Basofilia
Cartilago Seriado Cartílago Fibroso
Fibras Colagenas Fibras de Sharpey
Fibras Reticulares PAS
Nido Rojo Disposición ortogonal
Plasmocito Sistema de Havers
TCCD Modelado Laminar Normoblastos
Periostio Mallory
Metacromasia Cartilago hialino