ENZIMAS
CATALIZADORES BIOLÓGICOS
Reacción Química
Es el proceso por el cual una sustancia (o sustancias)
cambia para formar una o más sustancias nuevas; implica la
ruptura y formación de enlaces químicos, lo que origina que
los átomos se reacomoden para formar otras especies
químicas, las cuales tienen propiedades distintas de las del
material original.
Se representa utilizando lo que se denomina una ecuación
química:
A+B C+D
REACTIVOS PRODUCTOS
ENZIMAS
Catalizadores Biológicos:
Disminuyen la Energía de Activación de las reacciones
químicas, lo cual se traduce en una mayor velocidad
de reacción.
SUSTRATO (S): Sustancia química sobre la cual
actúa la enzima para transformarla en producto.
Es lo que en química se lo llama reactivo
PRODUCTO (P): Es el sustrato transformado por la
acción enzimática.
Clasificación de Enzimas
Proteínas GLOBULARES (estructura 3ria o 4ria)
Sitio Activo: Lugar de unión entre la enzima y el sustrato
Sitio Catalítico: Lugar donde ocurre la reacción química
Modelos de Unión E-S
Propiedades de las enzimas
Aceleran las reacciones químicas
Reconocen a una molécula llamada sustrato con alta especificidad
dado que existe una región especifica de reconocimiento y unión
llamada SITIO ACTIVO
Unen al sustrato de manera REVERSIBLE
Altamente eficientes, permiten economizar energía a la célula
Actúan en muy bajas concentraciones
No se alteran luego de la reacción química y por lo tanto son
reutilizables como catalizadores.
No afectan la posición del equilibrio de reacción. El estado final
es el mismo pero se alcanza mucho más rápido
Específicas de sustrato y/o reacción química
Especificidad absoluta de SUSTRATO
Especificidad relativa ó de GRUPO
Cinética Enzimática
FACTORES QUE AFECTAN LA VELOCIDAD DE LAS
REACCIONES ENZIMÁTICAS:
1) Temperatura
2) pH
3) Concentración de Enzima
4) Concentración de Sustrato
5) Presencia de Inhibidores
1) Temperatura
Si se incrementa la temperatura se aceleran las aceleran las
reacciones químicas (aumenta la energía inicial de los reactivos).
La temperatura a la cual la actividad enzimática es máxima se
conoce como temperatura óptima.
Si la T° sigue aumentando a partir de cierto valor las enzimas
comenzarán a deformarse y su actividad enzimática empezará a
disminuir hasta perderse cuando las mismas se hayan
desnaturalizado.
Temperatura Óptima
2) pH
Las enzimas también tienen un rango de pH óptimo en el cual su
actividad es máxima.
Por arriba o debajo de esos valores la actividad enzimática decaerá
por alteraciones de la configuración espacial de las proteínas, hasta
anularse cuando se produzca la desnaturalización.
Los valores de pH óptimo varían en las distintas enzimas de un
mismo organismo; para unas es ácido (pepsina) y para otras alcalino
(lipasas).
3) Concentración de Enzima
A mayor concentración de Enzima, mayor Velocidad de Reacción
4) Concentración de Sustrato
Estudiaremos el comportamiento de dos tipos de
enzimas:
1- MICHAELIANAS: Tienen estructura 3ria.
Se denominan así porque su cinética responde a la
ecuación química propuesta por Michaelis Menten.
Si se grafica su actividad en comportamiento a
medida que se agrega sustrato a una reacción (con
pH, T y [E] constantes) se obtiene una curva
HIPERBÓLICA.
2- ALOSTÉRICAS: Tienen estructura 4ria con más
de un sitio activo y además poseen otro
denominado alostérico o modulador .
Si se grafica su su actividad a medida que se
agrega sustrato a una reacción (con pH, T y [E]
constantes) se obtiene una curva SIGMOIDEA.
Enzimas Michaelianas
Enzimas Michaelianas
PARÁMETROS CINÉTICOS:
Vmáx: Velocidad Máxima (Saturación)
Km: Constante de Michaelis
Parámetros Cinéticos
VELOCIDAD MÁXIMA:
Es el punto a partir del cual por más que aumente la [S] no
modifica la velocidad de la reacción. Todas las enzimas se
hallan SATURADAS. Hasta que una enzima no libere el P no
podrá tomar un nuevo sustrato, por lo tanto la velocidad de la
reacción depende de la rapidez con la que la enzima procesa
al S.
Km:
Es la concentración de sustrato necesaria para que la
velocidad de reacción alcance la mitad de su valor máximo.
Indica el grado de afinidad de la enzima por el sustrato:
A MAYOR Km, MENOR AFINIDAD
5) Inhibidores
IRREVERSIBLES: Se unen de manera irreversible
(covalente) a la enzima inutilizándola de
manera permanente. (Ej. venenos
organofosforados/acetilcolinesterasa)
REVERSIBLES: Se unen reversiblemente (a
través de uniones débiles) a la enzima
disminuyendo la actividad enzimática:
A) INHIBIDORES COMPETITIVOS
B) INHIBIDORES NO COMPETITIVOS
Inhibición Reversible Competitiva
El inhibidor es molecularmente similar al
Sustrato, y se une EN EL SITIO ACTIVO.
Vm: no se modifica (A altas [S] se alcanza la
misma Vm ya que el S desplaza al inhibidor)
Km: aumenta (se observa una aparente
disminución de la afinidad de la enzima por
el sustrato)
Inhibición Reversible NO Competitiva
El Inhibidor y el sustrato no tienen
semejanza química, por lo que se une en un
sitio DIFERENTE al sitio activo.
Vm: Disminuye (La inhibición no se
revierte a altas [S] dado que no existe
competencia)
Km: no se modifica
Enzimas Alostéricas
Poseen estructura CUATERNARIA
Poseen más de un SITIO ACTIVO (donde se une el
SUSTRATO) y uno o más SITIOS ALOSTÉRICOS
(donde se unen los MODULADORES de su
actividad).
MODULADORES o EFECTORES ALOSTÉRICOS: Se
unen en el sitio alostérico modificando la
conformación espacial de la enzima y con ella su
actividad.
POSITIVOS: aumentan la afinidad de la enzima por el
sustrato
NEGATIVOS: disminuyen la afinidad de la enzima por el
sustrato
Efecto cooperativo
Las enzimas alostéricas poseen más de un sitio activo.
A medida que estos van siendo ocupados, se producen
cambios conformacionales en la estructura globular
de la proteína que ¨expone¨ al resto de los sitios
activos facilitando la unión con el siguiente sustrato.
Entonces, a medida que se van
uniendo los sustratos a los sitios
activos, la afinidad de la enzima-
sustrato aumenta. Esto se conoce
con el nombre de Efecto
Cooperativo y es responsable de
la forma sigmoidea que presentan
las curvas de cinética de estas
enzimas.
Reacciones químicas encadenadas de tal manera que el
producto de una es sustrato de la siguiente.
Las enzimas alostéricas se encuentran ubicadas en puntos
clave para la regulación de las vías metabólicas, como parte
de una estrategia para mantener la homeostasis en la célula y
poder derivar los sustratos a distintas vías metabólicas según
sean necesarios.
Inhibición por producto final
(Feedback Negativo)
Inhibición por producto final
(Feedback Negativo)
El último producto de una vía metabólica es un
modulador alostérico negativo de la enzima
alostérica.
Activación por Precursor
Activación por Precursor
Uno de los primeros sustratos de la vía
metabólica funciona como modulador
alostérico positivo de la enzima alostérica.
Regulación de la actividad enzimática
Modulación Alostérica: Mecanismos de Feed-Back Negativo y
Activación por Precursor.
Modificaciones covalentes: Por medio de la unión COVALENTE de
ciertos grupos (por ejemplo el grupo fosfato) se puede activar o
desactivar una enzima.
Regulación por zimógeno ó Proteólisis: La enzima se sintetiza en
una forma inactiva llamada zimógeno. En los zimógenos, a la
estructura primaria de la proteína le “sobra” una porción. Cuando
el zimógeno debe actuar, hay enzimas que “cortan” esa porción
sobrante de la cadena polipeptídica permitiendo que la misma
adopte la forma tridimensional necesaria para reconocer al
sustrato, así el zimógeno se transforma en una enzima activa.
Regulación o control genético: La “inducción” o la “represión”
aceleran o inhiben la síntesis de ARN en el núcleo, regulando es la
cantidad de enzimas que se sintetizarán en la célula (a diferencia
de los mecanismos anteriormente mencionados donde se regula la
actividad de las enzimas que ya están presentes en la célula).
Zimógenos
Son precursores inactivos de las enzimas
Se activan por pérdida de un péptido
Ej. Proteasas pancreáticas